Цито-Эксперт

Сухенко Е.П., Лисицын Н.Б., Палагин В.А.*
МЕТОДИЧЕСКОЕ РАЗВИТИЕ КОМПЛЕКСА «ЦИТО-ЭКСПЕРТ»:
СЕРИЙНЫЙ КЛЕТОЧНЫЙ АНАЛИЗ
НТУ «Инженерно-технический центр», г. Ижевск
*
Ижевская государственная медицинская академия
Информативность электрофоретического анализа клеток крови с применением
автоматизированного приборного комплекса «Цито-Эксперт» может быть увеличена с
помощью новой аналитической методики серийного анализа. Суть методики – съемка
серии видеофайлов (ВФ) клеточного микроэлектрофореза в течение 5-7 мин. с их
обычной компьютерной обработкой и представление вариативности амплитуды
колебаний клеток в виде графика зависимости относительной амплитуды Аср/Аср.0 от
времени. Здесь Аср- средняя амплитуда колебаний клеток в переменном электрическом
поле (пропорциональная среднему заряду клетки в популяции) для текущего ВФ, Аср.0она же для первого ВФ.
Такой подход позволяет обойти главное препятствие для широкого применения
метода клеточного электрофореза в клинической лабораторной диагностике –
индивидуальные отклонения величины эффективного клеточного заряда, которые часто
затушевывают влияние патологических факторов.
Особо следует подчеркнуть, что эта методика может быть исполнена только в
переменном электрическом поле, и невозможна для приборов на постоянном поле типа
«Цитоферометр», «Пармаквант» (оба – Германия) или «Zetasizer» (Англия).
При выполнении анализа напряжение на электродах рабочей камеры не выключается,
длительность ВФ и пауз между ними задается с помощью новой компьютерной
программы NTUReport. Использование этой программы обеспечивает видеозапись всей
серии ВФ в автоматическом режиме. Итоговый график выдается в формате Excel и
может быть импортирован для других приложений.
В качестве основы для сравнения получена кривая временной вариатив-ности
амплитуды колебаний клеток венозной крови доноров (17 чел.) Среднеквадратичное
отклонение значений для каждой опытной точки в этой группе, как видно на рисунке, не
превышает 5% для вероятности 0,9.
1,6
1,5
1,4
Аср/А0
1,3
1,2
1 Доноры
1,1
2 И-на, 2 дн. (сепсис)
1
3 П-ва, 4 г. (остеомиел.)
4 Р-х, 1,5 г. (остеомиел.)
0,9
5 Л-ва, 2 мес. (сепсис, пост.)
0,8
0,7
00:00
6 Л-ва (сепсис, через 5 дней)
01:00
02:00
03:00
04:00
05:00
06:00
07:00
08:00
09:00
Время, мин::сек
У детей разного возраста с гнойной хирургической инфекцией ход кривых заметно
отличен от хода для доноров. Наибольшие отличия от группы сравнения наблюдаются у
больных с сепсисом, при этом степень отличий пропорциональна тяжести состояния
больного. Кривая 5 получена на пробе крови, взятой у новорожденной девочки с
некротическим энтероколитом после операции по поводу перфорации кишки. Через 5
дней, когда состояние больной заметно ухудшилось, анализ повторен (кривая 6). Через 2
недели после этого ребенок умер.
Изменение электрокинетической активности клеток со временем может быть связано с
десорбцией белков, ферментов и т.д. с клеточной мембраны эритроцитов, с изменениями
морфологии клеток и плотности мембранного заряда. Последовательное изучение
различных
патологий
и
набор
статистических
данных
позволят
установить
количественные критерии для диагностики и мониторинга терапии критических
состояний.