Энзимология

«Энзимология. Кинетика и термодинамика ферментативных реакций»
4-й курс ВБФ («Биохимия»). Лектор – д.х.н., профессор Еремеев Н.Л.
1. Общие вопросы энзимологии. Эффективность и специфичность ферментов.
Классификация ферментов. Структура ферментов: первичная, вторичная, третичная и
четвертичная. Кофакторы и коферменты.
2. Практическая энзимология. Методы выделения и очистки биокатализаторов.
Определение
физико-химических
свойств
ферментов
(молекулярная
масса,
изоэлектрическая точка, рН- и температурный оптимумы действия).
3. Химическая энзимология. Методы модификации поверхности белковой глобулы.
Получение иммобилизованных ферментов. Типы иммобилизации. Применение
иммобилизованных ферментов в биотехнологии.
4.
Медицинская
энзимология.
Энзимопатология,
энзимодиагностика,
энзимотерапия.
5. Введение в химическую кинетику. Предмет и задачи химической кинетики.
Классификация реакций. Основной закон химической кинетики. Порядок реакции и
константа скорости. Методы определения порядка реакции. Кинетические
закономерности протекания обратимых, параллельных и последовательных реакций.
6. Стационарная кинетика ферментативных процессов. Двухстадийная схема
ферментативной реакции. Уравнение Михаэлиса-Ментен и его вывод. Физический смысл
кинетических параметров уравнения Михаэлиса-Ментен – максимальной скорости
реакции, константы каталитической и константы Михаэлиса.
7. Определение кинетических параметров ферментативных реакций из
экспериментальных данных. Линеаризация уравнения Михаэлиса-Ментен (координаты
Лайнуивера-Берка, Иди-Хофсти, Вульфа-Хейнса).
8. Кинетические закономерности взаимодействия обратимых эффекторов с
ферментами. Типы ингибирования и активации. Определение кинетических параметров
ингибирования и активации из экспериментальных данных. Влияние рН среды на
активность ферментов. Определение констант ионизации фермент-субстраткого
комплекса и свободного фермента из экспериментальных данных.
9. Кинетические закономерности взаимодействия необратимых инактиваторов с
ферментами. Режим титрования числа активных центров. Режим псевдо-первого порядка.
Определение концентраций необратимых инактиваторов с использованием ферментов.
Влияние температуры реакционной среды на активность ферментов. Уравнения ВантГоффа и Аррениуса. Температурный оптимум ферментативной реакции.
10. Нестационарная кинетика ферментативных реакций. Интегральная форма
уравнения Михаэлиса-Ментен. Линеаризация интегральной формы уравнения МихаэлисаМентен в координатах Уокера-Шмидта и Березина-Клесова.