вопросы к зачету.

ВОПРОСЫ к зачету
по дисциплине «Кинетические и иммуноферментные методы анализа»
для студентов V курса сп.Химия (2014-2015)
1.
Сущность кинетических методов, их место среди других методов анализа.
Классификация кинетических методов. Каталитический и некаталитический
варианты методов. Индикаторная реакция и индикаторное вещество,
требования к ним.
2.
Определение содержания вещества по данным кинетических измерений.
Дифференциальный и интегральный варианты методов анализа. Способ
тангенсов, фиксированного времени и фиксированной концентрации, их
видоизменения.
3.
Методы
измерения
скорости
индикаторной
реакции.
Типы
реакций,
используемых в кинетических методах. Методы наблюдения за изменением
концентрации ИВ во времени. Определение неизвестной концентрации по
длительности индукционного периода. Каталиметрическое титрование.
4.
Каталитический и некаталитический варианты методов. Ферментативные
реакции. Их особенности. Преимущества и недостатки кинетических методов
анализа
в
их
Чувствительность
каталитическом
и
селективность
и
некаталитическом
кинетических
методов,
вариантах.
пути
их
повышения.
5.
Экстракционно-каталитические методы. Сорбционно-каталитический метод.
Кинетическое детектирование в хроматографии. Примеры использования
кинетических методов для определения неорганических и органических
соединений в различных объектах. Сорбционно-каталитический метод в тестварианте. Преимущества тест-систем. Экспрессность методов, их точность,
возможность автоматизации.
6.
Каталитические реакции. Определения понятия катализатора. Кинетические
уравнения и механизм реакций. Общая скорость каталитической реакции.
7.
Гомогенные каталитические реакции. Три основные группы: а) обычные
каталитические реакции, б) реакции Ландольта; в) колебательные реакции.
8.
Гомогенные каталитические реакции. Методы определения. Применение
каталитических реакций. Определение ионов металлов и анионов.
9.
Применение
каталитических
реакций.
Хемилюминесцентные
реакции.
Реакции обмена лигандов и комплексообразования.
10.
Активирование и ингибирование. Уравнение полной скорости каталитической реакции в присутствии модификатора. Определение активаторов и
ингибиторов.
11.
Некаталитические реакции. Быстрые и медленные индикаторные реакции.
Методы определения. Однокомпонентный анализ. Реакции псевдопервого
порядка.
Реакции
второго
порядка.
Определение
индивидуальных
компонентов в смеси. Относительная погрешность определения.
12.
Некаталитические реакции. Определение неорганических веществ. Реакции
комплексообразования.
Реакции
окисления-восстановления.
Сочетание
реакций окисления-восстановления и комплексообразования.
13.
Некаталитические реакции. Определение органических соединений. Реакции
окисления.
14.
Ферменты как биологические катализаторы. Классификация ферментов.
Важнейшие сведения о структуре ферментов. Апоферменты, кофакторы,
коферменты, простетические группы. Источники ферментов, их выделение и
очистка. Субстратная специфичность ферментов.
15.
Фермент-субстратные
комплексы.
Активные
центры.
Кинетические
и
термодинамические закономерности ферментативных реакций. Механизмы
ферментативного катализа. Уравнение Михаэлиса-Ментен.
16.
Эффекторы
ферментов.
ингибирования
Активаторы.
ферментов.
Ингибиторы.
Индикаторные
Различные
ферментативные
типы
реакции.
Сопряженные системы из двух и более реакций.
17.
Методы анализа, основанные на определении конечного количества продуктов
реакции и на измерении начальной скорости реакции. Методы измерения
скорости ферментативной реакции (спектроскопические, электрохимические,
радиохимические, биолюминесцентные, термометрические).
18.
Иммобилизованные ферменты и их применение в химическом анализе.
Физические и химические методы иммобилизации. Биосенсоры. Ферментные
электроды.
Ферментативные
тест-методы.
Чувствительность
и
избирательность определения субстратов ферментов и их эффекторов.
19.
Автоматизация
применения
ферментативных
ферментативных
методов,
методов.
используемые в химическом анализе.
применение
Ферменты,
ПИА.
наиболее
Области
часто
20.
Примеры определения органических и неорганических соединений –
субстратов и эффекторов ферментов – в различных объектах: объектах
окружающей
среды,
биологических
жидкостях
и
биомассах,
фармацевтических препаратах, пищевых продуктах.
21.
Сущность иммунного анализа. Понятия об антигене и антителе. Иммунный
комплекс. Специфичность взаимодействия антител с антигенами. Синтез
иммуногенов.
22.
Иммунный анализ с разделением и без разделения компонентов (гетерогенный
и гомогенный иммуноанализ). Метки в иммунном анализе – изотопные,
ферментные,
флуоресцентные,
парамагнитные.
Радиоиммунологический
анализ.
23.
Иммуноферментный анализ. Ферменты, используемые в иммуноферментном
методе анализа. Общие требования к выбору ферментных методов в ИФА.
Твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA).
24.
Классификация гетерогенных методов ИФА. Гетерогенные методы ИФА
антигенов и антител (типы I и II). Схемы методов.
25.
Метрологические характеристики иммунных методов анализа. Области
применения. Общие представления об использовании биохимических зондов
(блот-гибридизация).
Рекомендуемая литература
Основная
1. Д. Перес-Бендито., М. Сильва Кинетические методы в аналитической химии. М.: Мир.
1991.
2. С. Д. Варфоломеев, К. Г. Гуревич Биокинетика. М.: ФАИР-ПРЕСС. 1999.
3. А. М. Егоров и др. Теория и практика иммуноферментного анализа. М.: Высшая школа.
1991.
Дополнительная
1. К. Б. Яцимирский Кинетические методы анализа. М.: Химия. 1967.
2. Г. Марк., Г. Рехниц Кинетика в аналитической химии. М.: Мир. 1972.
3. Г. Мюллер, М. Отто, Г. Вернер Каталитические методы в анализе следов элементов. М.:
Мир. 1983.
4. М. Диксо, Э. Уэбб Ферменты. М.: Мир, т. т. 1 – 3. 1984.
5. Т. Келети Основы ферментативной кинетики. М.: Мир. 1990.
6. Введение в прикладную энзимологию. / Под ред. И. В. Березина, К. Мартинека. М.:
Мир. 1976.
7. Нго Т., Ленхофф Г. Иммуноферментный анализ. М.: Мир, 1988. – 446с.
Составитель:
к.х.н., доцент Ю.Ю.Петрова