ЛЕКЦИЯ 11 Тема: Диагностика вирусных инфекций и меры борьбы Цель лекции: Ознакомить студентов с методами диагностики вирусных болезней животных. Ключевые слова: вирусология, серология, исследования, методика, гемагглютинин, нейраминидаза, клетка, культура, преципитация, возбудитель, инфекция. План лекции: 1. Вирусные инфекции животных 2. Методы вирусологических исследований 3. Методы серологических исследований 4. Экспресс-диагностика вирусных инфекций 5. Меры борьбы В настоящее время вирусные инфекции составляют преобладающую часть инфекционной патологии животных и человека. Самыми распространенными среди людей остаются острые респираторные (ОРВИ) и другие вирусные инфекции, передаваемые воздушно-капельным путем, возбудители которых относится к абсолютно различным семействам, чаще всего это РНК-содержащие вирусы (вирус гриппа, А, В, С, вирус эпидемического паратита, вирусы парагриппа, кори, риновирусы и др.). Среди людей широко распространены во всем мире такие вирусные инфекционные заболевания, как вирусные гепатиты, особенно гепатит В, передаваемый трансмиссивным и половым путем. Их возбудители – вирусы гепатита А, В, С, D, E, G, TT – относятся к разным таксономическим группам (пикорнавирусов, гепаднавирусов и др.), имеют разные механизмы передачи, но все обладают тропизмом к клетке печени. Одна из самых известных вирусных инфекций среди людей – ВИЧ-инфекция (СПИДом – синдром приобретенного иммунодефицита, который является ее неизбежным исходом). Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) – возбудитель ВИЧ-инфекции – относится к семейству РНК-вирусов Retroviridae, роду лентивирусов. Весьма распространены в настоящее время арбовирусные инфекционные заболевания. Естественные хозяева их возбудителей – мелкие грызуны и их эктопаразиты. Человеку эти вирусы передаются через укусы кровососущих насекомых, т.е. переносчиками являются членистоногие, поэтому и называются все эти вирусы, независимо от их таксономической принадлежности, арбавирусами. Большинство из них – РНК-содержащие, входят в семейства – тога-, флави-, буньявирусов и являются возбудителями энцефалитов и геморрагических лихорадок. Возбудителями тяжелых форм геморрагических лихорадок (лихорадки Эбола, Марбургская лихорадка и др.) являются фило-, аденовирусы. Но трансмиссивный путь заражения при этих инфекционных заболеваниях не является единственным. Вышеназванные инфекции в основном представляют собой эндемичные заболевания, но тяжелые вспышки некоторых из этих заболеваний (крымской геморрагической лихорадки, лихорадки западного Нила) имели место в Ростовской и Волгоградской областях летом 1999 г. Для лабораторной диагностики вирусных инфекций используются различные методы. Вирусологическое исследование (световая микроскопия) позволяет обнаружить характерные вирусные включения, а электронная микроскопия – сами вирионы и по особенностям их строения диагностировать соответствующую инфекцию (например, ротавирусную). Вирусологическое исследование направлено на выделение вируса и его идентификацию. Для выделения вирусов используют заражение лабораторных животных, КЭ или культуры тканей. Первичную идентификацию выделенного вируса до уровня семейства можно провести с помощью: -определения типа нуклеиновой кислоты (проба с бромдезоксиуридоном); - особенностей ее строения (электронная микроскопия); - размера вириона (фильтрование через мембранные фильтры с порами диаметром 50-100нм); - наличия суперкапсидной оболочки (проба с эфиром); - гемагглютининов (РГА); - типа симметрии нуклеокапсида (электронная микроскопия). Вирусологическое исследование – это «золотой стандарт» вирусологии и должно проводиться в специализированной вирусологической лаборатории. Для диагностики вирусных инфекций широкое применение нашли методы иммунодиагностики (серодиагностики и иммуноиндикации). Они реализуются в самых разнообразных реакциях иммунитета: -радиоизотопный иммунный анализ (РИА); - иммуноферментный анализ (ИФА); - реакции иммунофлюоресценции (РИФ); - реакция пассивной гемагглютинации (РПГА); - реакция торможения гемагглютинации (РТГА) и др. Список литературы 1. Ермагамбетова С.Е., Тулемисова Ж.К., Киркимбаева Ж.С., Бияшев Б.К. Ветеринарная вирусология.на 3-х языках (на каз., русс., англ. языках). Учебное пособие. Типография «Айтұмар». 2013. 2. Щербаков П.Н., Тулемисова Ж.К., Ермагамбетова С.Е. Курс лекций по дисциплине Ветеринарная вирусология Алматы, типография «Айтұмар», 2013. -59С. 3. Ермагамбетова С.Е., Бияшев К.Б., Киркимбаева Ж.С., Бияшев Б.К., Орынтаев К.Б., Сарыбаева Д.А. КУРС ЛЕКЦИЙ по дисциплине MV2003 «Ветеринарная микробиология и вирусология»(раздел «Вирусология») Алматы, 2018 7. Ш.Б. Мырзабекова Общая вирусология. Учебник. Алматы. 2008. 8. Барышников, П.И. Ветеринарная вирусология [Текст]: учеб. пособие / П.И. Барышников. - М.: ФОРУМ, 2015. - 96 ЛЕКЦИЯ 12 Тема: Профилактика вирусных инфекций и меры борьбы. Цель лекции: Ознакомить студентов с профилактикой вирусных инфекций и мерой борьбы. Ключевые слова: иммунитет, иммунные сыворотки, вакцина, профилактика, меры борьбы. План лекции: 1. Профилактика вирусных инфекций 2. Меры борьбы с вирусными инфекциями Профилактика — метод индивидуальной или массовой защиты животных от заболеваний путём создания или усиления искусственного иммунитета. Она подразделяется на неспецифическую и специфическую. Неспецифическая профилактика предполагает: -активацию иммунной системы с помощью иммуностимуляторов. Специфическая профилактика — против конкретного заболевания. Она может быть активная и пассивная. Активная специфическая профилактика — создание искусственного активного иммунитета путем введения вакцин. Используется для профилактики: -инфекционных заболеваний до контакта организма с возбудителем. При инфекциях с длительным инкубационным периодом активная иммунизация позволяет предупредить заболевание даже после заражения бешенством. Пассивная специфическая профилактика — создание искусственного пассивного иммунитета путём введения иммунных сывороток, γ-глобулинов или плазмы. Используется для экстренной профилактики инфекционных заболеваний с коротким инкубационным периодом у больных животных. Терапия — метод лечения инфекционных заболеваний путём создания или усиления искусственного иммунитета. Она подразделяется на неспецифическую и специфическую. Неспецифическая иммунотерапия — использование иммунотропных препаратов в комплексной терапии различных инфекционных заболеваний. Специфическая иммунотерапия может рассматриваться как метод лечения заболеваний, основанный на использовании: а) готовых антител: -антитоксических сывороток и γ-глобулинов — для лечения инфекционных заболеваний; -препаратов конъюгатов специфических антител с изотопами, токсинами — для лечения новообразований; Активная иммунопрофилактика предполагает использование вакцин, содержащих антигены вирусов и индуцирующих развитие иммунного ответа в организме вакцинированного животного. Вакцины — иммунобиологические препараты для создания искусственного активного специфического иммунитета с целью профилактики инфекционных заболеваний. ( Требования к вакцинам (критерии эффективности вакцин): Иммуногенность (иммунологическая эффективность, протективность); в 80–95 % случаев вакцины должны создавать напряженный и длительный специфический иммунитет, который эффективно защитит от заболевания, вызываемого «диким» штаммом патогена. Напряженность иммунитета — состояние, при котором организм способен оставаться невосприимчивым к заболеванию. Практически любой иммунитет можно преодолеть массивными дозами возбудителя, особенно чем больше времени прошло с момента последней иммунизации. Длительность иммунитета — время, в течение которого сохраняется невосприимчивость. Безопасность — вакцины не должны быть причиной заболевания или смерти, а вероятность поствакцинальных осложнений должна быть меньше, чем риск заболевания и постинфекционных осложнений; это особенно актуально для живых вакцин. Ареактогенность — вакцины не должны вызывать сильные поствакцинальные реакции. В инструкциях по применению вакцин определяется допустимая степень их реактогенности. Если частота сильных реакций превышает допустимый уровень, оговоренный в инструкции к вакцине (обычно от 0,5 до 4 %), то эта серия изымается из употребления. Наиболее реактогенны убитые вакцины (за счет компонента); наименее реактогенны живые накожные вакцины. Стабильность — сохранение иммуногенных свойств при производстве, транспортировке, хранении и применении вакцины. Ассоциируемость — возможность одновременного применения антигенов нескольких микроорганизмов в составе комбинированных вакцин. Ассоциированные вакцины позволяют одновременно иммунизировать против нескольких инфекций, уменьшить сенсибилизацию прививаемых вакцин, удешевить процедуру иммунизации. Практически все вирусные вакцины ассоциированные. Проблема при создании ассоциированных вакцин — конкуренция антигенов. Ранее существовало мнение о жесткой конкуренции антигенов при их совместном введении и невозможности создания сложных комплексных вакцин. В настоящее время доказано, что при правильном подборе вакцинных штаммов в комплексных вакцинах можно избежать отри- цательного действия их компонентов друг на друга. Кроме того, существуют проблемы физико-химической совместимости и долговременной стабильности ассоциированных вакцин. Стандартизуемость — должны легко дозироваться и отвечать международным стандартам. Практические соображения — относительно низкая цена вакцины, удобство применения. Критерии эффективности вакцин должны соблюдаться всеми производителями. При создании новых вакцин руководствуются гипотетиче- ским понятием «идеальной вакцины». «Идеальная вакцина» должна соответствовать следующим требованиям: высокая иммуногенность: должна индуцировать иммунитет напряженный, длительный (лучше пожизненный); содержание только протективных антигенов. Термин «протективный антиген» применяют по отношению к молекулярным структурам возбудителя, которые при введении в организм способны индуцировать протективный эффект — невосприимчивость организма к заражению. Протективные антигены не всегда бывают иммуногенны, чаще — наоборот; 3) полная безопасность: не способна вызвать заболевание и поствакцинальные осложнения; 4) ареактогенность: отсутствие сильных поствакцинальных реакций; 5) хорошая стандартизуемость и удобство применения: введение раннее, 6) стабильность при хранении; 7) хорошая ассоциируемость: одна инъекция препарата должна индуцировать иммунитет против всех инфекций. С точки зрения молекулярной и клеточной иммунологии вакцина должна удовлетворять следующим требованиям: а) активировать вспомогательные клетки (макрофаги, дендритные клетки, клетки Лангерганса), участвующие в процессинге и представлении антигена, формировать микроокружение и поляризацию, необходимые для протективного ответа, т. е. содержать структуры, распознаваемые АПК; б) содержать протективные эпитопы для Т- и В-лимфоцитов; в) эффективно презентироваться: легко подвергаться процессированию, эпитопы должны взаимодействовать с антигенами ГКГС; г) индуцировать образование регуляторных, эффекторных клеток и клеток иммунологической памяти. Литература: 1. Ермагамбетова С.Е., Тулемисова Ж.К., Киркимбаева Ж.С., Бияшев Б.К. Ветеринарная вирусология.на 3-х языках (на каз., русс., англ. языках). Учебное пособие. Типография «Айтұмар». 2013. 2. Щербаков П.Н., Тулемисова Ж.К., Ермагамбетова С.Е. Курс лекций по дисциплине Ветеринарная вирусология Алматы, типография «Айтұмар», 2013. -59С. 3. Ермагамбетова С.Е., Бияшев К.Б., Киркимбаева Ж.С., Бияшев Б.К., Орынтаев К.Б., Сарыбаева Д.А. КУРС ЛЕКЦИЙ по дисциплине MV2003 «Ветеринарная микробиология и вирусология»(раздел «Вирусология») Алматы, 2018 7. Ш.Б. Мырзабекова Общая вирусология. Учебник. Алматы. 2008. 8. Барышников, П.И. Ветеринарная вирусология [Текст]: учеб. пособие / П.И. Барышников. - М.: ФОРУМ, 2015. - 96 9.www.spbraaci.ru 10.www.schools.keldysh.ru 11. www. Adobe.com/cfusion.
