Индивидуальное задание по теме 4 «Лекарственные растения и сырье, содержащие простые фенолы. Общая характеристика, понятие о группе БАВ» Задание №1 1. Напишите формулы производных хризацина: глюко-реум- эмодина, реина. Приведите примеры лекарственного растительного сырья. 2. Составьте и обоснуйте инструкцию по заготовке, сушке и хранению корней ревеня. Ответы: 1. Является одним из представителей группы эмодинов — веществ, производных 1,8-дигидроксиантрахинона, которые содержат в своем составе 3 и более гидроксильных групп. Эмодины имеют сходное строение. В зависимости от растительного источника отличаются стереоструктурой и названием: реумэмодин (Rheum palmatum var. tanguticum, Rumex confertus); франгулаэмодин (Frangula alnus, Rhamnus cathartica); франгулин — 6-рамнозид франгулаэмодина (Frangula alnus, Rhamnus cathartica); глюкофрангулин — 6-рамноглюкозид франгулаэмодина (Frangula alnus, Rhamnus cathartica); алоээмодин — 3-оксиметил-хризацин (Aloë arborescens); реин — 3-карбоксихризацин (Cassia acutifolia). 2. Заготовка. Корни ревеня от культивируемых растений выкапывают ранней весной или осенью в возрасте 4-5 лет, в Китае — в возрасте 8-12 лет. К этому времени корни достигают массы 4-9 кг. Уборка корней производится механизированным способом; иногда применяют лопаты. Корни промывают в холодной воде, освобождают от одревесневших и поврежденных частей, режут на куски длиной не более 15 см и толщиной до 3 см и провяливают на воздухе в течение нескольких дней. Кроме корней могут присутствовать корневища. Но их содержание небольшое, поэтому сырье называется «Корни ревеня». Охранные мероприятия. Не разрешается выкапывать корни молодых растений. Сушка. В воздушных или тепловых сушилках при температуре 60 °С. Стандартизация. ГФ, вып. 2, ст. 68. Хранение. В упакованном виде в сухом, хорошо проветриваемом помещении, защищенном от света (под влиянием света сырье темнеет). Срок годности 5 лет. Задание №2 1. Напишите формулы ализарина, хризацина, рубиэритриновой кислоты. Приведите примеры лекарственного сырья и их основных действующих веществ. 2. Составьте и обоснуйте инструкцию по заготовке, сушке и хранению плодов жостера. Ответы: 1. 1) Ализарин и его производные. Обнаружены в растениях семейств Rubiaceae, Scrophulariaceae. Ализарин и его гликозид – кислота рубэритриновая являются основными действующими веществами подземных органов марены красильной. Хризацин и его производные. Обнаружены в растениях семейств Rhamnaceae, Polygonaceae, Asphodelaceae, Fabaceae. Хризофанол (3-метилхризацин) Встречается в коре крушины ольховидной, плодах слабительного, корнях ревеня тангутского и щавеля конского. жостера 2. Заготовка. Плоды собирают в период полной зрелости. Предварительно внимательно осматривают растение, чтобы по ошибке не собрать плоды крушины ольховидной. Для сбора используют крючки и переносные лестницы, чтобы нагибать ветви. Собирают плоды вручную, складывая их в корзины или ведра. Охранные мероприятия. Нельзя обламывать ветви, так как это ведет к уничтожению зарослей. Сушка. Предварительно подвяливают и сушат в печах или сушилках при температуре 50-60 ºС. Сырье раскладывают тонким слоем в 3-4 см на сетках, листах фанеры или противнях. Для равномерной сушки сырье периодически перемешивают. Хорошо высушенные плоды при сжимании в руке должны рассыпаться и не образовывать комка. Стандартизация. ГФ, вып. 2, ст. 37. Хранение. В сухом, хорошо проветриваемом помещении в специальной кладовой для плодов и семян, упаковав в мешки массой 50 кг. Сырье легко повреждается амбарными вредителями. Срок хранения до 4 лет. Задание №3 1. Составьте и обоснуйте инструкцию по заготовке, сушке и хранению коры крушины. 2. Назовите и обоснуйте физико-химическими свойствами методы качественного определения антрагликозидов в лекарственном растительном сырье. Ответы: 1. Заготовка. Кору крушины заготавливают ранней весной, в период набухания почек, до начала цветения. В это время кора легко отделяется от древесины. В местах, отведенных лесничеством, крушину срубают топором или срезают ножовкой, оставляя пеньки 10-15 см для порослевого возобновления. На срубленных стволиках и толстых ветвях делают кольцевые надрезы на расстоянии 25-30 см друг от друга, которые соединяют продольным надрезом. Снимают кору в виде желобоватых или трубчатых кусков. Нельзя состругивать кору ножом, так как куски получаются узкими и содержат остатки древесины. Кору очищают от лишайников. Заготовку проводят с растений не моложе 8 лет и высотой не менее 3 м. Охранные мероприятия. Заготовка коры проводится только с разрешения лесничества в специально отведенных местах. Повторная заготовка на том же месте возможна через 10-15 лет. Ведутся работы по введению крушины в культуру. Сушка. Сушат кору крушины на открытом воздухе под навесами или хорошо проветриваемых чердаках. Раскладывают тонким рыхлым слоем, периодически переворачивают, следя за тем, чтобы куски коры не вкладывались друг в друга. При сушке на открытом воздухе на ночь накрывают брезентом или заносят в помещение. Сушка считается законченной, когда кора перестает гнуться и с треском ломается. После сушки из сырья отбирают почерневшие куски и кору с остатками древесины на внутренней стороне. При заготовке неопытными сборщиками возможен сбор коры других сопутствующих растений – жостера, ольхи, рябины, черемухи и различных видов ивы. Кора крушины отличается тем, что при легком соскабливании наружного слоя пробки обнаруживается малиново-красный, так называемый франгулиновый слой, который у примесей – бурый или зеленый. Стандартизация. ГФ, вып. 2, ст. 2 и Изменения к ней. Хранение. В сухом, хорошо проветриваемом помещении, в упакованном виде. Кору прессуют и пакуют в тюки. Срок хранения 5 лет. 2. Физические свойства антраценпроизводных Антрахиноны и их гликозиды — кристаллические вещества желтого, оранжевого или красного цвета, антранолы не окрашены, горького вкуса. Свободные агликоны хорошо растворяются в органических растворителях (этанол, метанол, диэтиловый эфир, хлороформ, бензол и др.) и не растворяются в воде. Гликозиды хорошо растворимы в воде, водно-спиртовых растворах, нерастворимы в органических растворителях (бензол, диэтиловый эфир, хлороформ). Как агликоны, так и гликозиды антраценпроизводных хорошо растворяются в водных растворах щелочей с образованием фенолятов (антрахинолятов), растворимых в воде. Окраска антрахинолятов зависит от степени окисления исходного антраценпроизводного. Окисленные формы дают соли ярко-вишневого цвета, восстановленные — слабо-желтого или бледнорозового. Такое различие имеет большое значение в анализе антраценпроизводных. При нагревании до 200 °С и выше производные антрацена способны возгоняться (сублимироваться) без разрушения основной структуры. При этом происходит разрыв гликозидной связи, окисление восстановленных форм агликонов и их последующая возгонка. Сублимат может конденсироваться на холодной поверхности (стекло) в виде желтых кристаллов. Антраценпроизводные способны флуоресцировать в УФ-свете. Окраска флуоресценции зависит от степени окисленности антраценпроизводных. Окисленные формы флуоресцируют розовым, красным, оранжевым цветом, восстановленные — желтым, голубым, фиолетовым. Химические свойства антраценпроизводных Химические свойства производных антрацена обусловлены наличием основных функциональных групп в структуре молекулы: ядра антрацена (конденсированная система 3 ароматических колец) различной степени окисленности; фенольных гидроксилов; карбоксильных групп; гликозидной связи. 1. Антрагликозиды подвергаются кислотному, щелочному и ферментативному гидролизу до свободных агликонов и cахаров. 2. Присутствие фенольных гидроксилов обусловливает наличие у производных антрацена свойств, характерных для фенолов. При этом реакционная способность фенольных гидроксилов различна и зависит от их положения в молекуле. Окисленные антраценпроизводные (антрахиноны) различно относятся к щелочам. Фенольные гидроксилы в 1 и 8-положениях менее реакционноспособны, за счет образования внутримолекулярной (водородной) связи с атомом кислорода карбонильной (>С=0) группы. Антрахиноны, имеющие гидроксильные группы только в 1 и 8 альфаположениях образуют антрахиноляты только с растворами гидроксидов щелочных металлов (NaOH, КОН) и не взаимодействуют с растворами карбонатов щелочных металлов и аммиака. Антрахиноны, имеющие свободную гидроксильную группу в 3, 6, 7-бета-положениях, образуют антрахиноляты, окрашенные в красный или фиолетовый цвет, с растворами гидроксидов щелочных металлов, аммиака, карбонатов щелочных металлов. 3. Антрахиноны, имеющие в своем составе карбоксильную (СООН) группу (реин), образуют соли с растворами гидроксидов щелочных металлов, аммиака, карбонатов и гидрокарбонатов щелочных металлов. 4. Антраценпроизводные образуют с солями металлов комплексы (лаки), имеющие характерную окраску. Окраска продуктов реакции зависит от положения ОН-групп в молекуле антраценпроизводного и используемого реактива. Например, со спиртовым раствором магния ацетата 1,2-дигидроксипроизводводные образуют лаки, окрашенные в фиолетовый цвет, 1,4дигидроксипроизводные — в пурпуровый цвет, 1,6- и 1,8дигидроксипроизводные – в красно-оранжевый цвет. Методы анализа лекарственного растительного сырья Из сырья антраценпроизводные извлекают водой или спиртом различной концентрации. Для получения свободных агликонов, антрагликозиды в растительном сырье подвергают гидролизу, свободные агликоны извлекают диэтиловым эфиром или хлороформом. Для обнаружения антраценпроизводных в сырье используют качественные реакции и хроматографическое исследование. Качественные реакции Качественные реакции основаны на химических свойствах: 1. Реакция образования антрахинолятов со щелочью. Может быть проведена в трех вариантах: а) на сухом сырье — при нанесении нескольких капель 5-10 % раствора натрия гидроксида на сырье появляется вишнево-красное пятно. Положительный результат наблюдается, если антраценпроизводные присутствуют в окисленной форме. Рекомендована ГФ для подтверждения подлинности коры крушины. б) с водным извлечением (1:10) — при добавлении к водному извлечению из сырья нескольких капель 5-10 % раствора щелочи образуется вишневокрасное окрашивание. в) реакция Борнтрегера. Позволяет обнаружить эмодины в присутствии других производных антрацена. Проба основана на способности антрагликозидов подвергаться щелочному гидролизу с образованием свободных агликонов. Одновременно происходит окисление восстановленных форм. После подкисления гидролизата агликоны извлекают эфиром. При встряхивании эфирного слоя с раствором аммиака эмодины переходят в водный слой, окрашивая его в вишнево-красный цвет. Хризофанол остается в органическом слое, окрашивая его в желтый цвет. Предложена ГФ для подтверждения подлинности коры крушины, листьев сенны, плодов жостера слабительного, корней ревеня, корневищ и корней марены. Содержащиеся в сырье марены производные ализарина окрашивают аммиачный слой в фиолетовый цвет. 2. Реакция микросублимации (микровозгонки). Основана на способности антраценпроизводных возгоняться при 200 °С с последующей конденсацией на холодной поверхности без изменения основной структуры. Может быть проведена в двух вариантах: в пробирке и на предметном стекле. При нанесении на сублимат раствора натрия гидроксида образуется вишнево-красное (производные хризацина) или фиолетовое (производные ализарина) окрашивание. Приводится в ГФ ХI для подтверждения подлинности коры крушины. 3. Реакция образования лаков. Основана на способности антраценпроизводных образовывать со спиртовым раствором магния ацетата окрашенные комплексы. Хроматографическое исследование. Для идентификации антраценпроизводных в лекарственном растительном сырье используют бумажную хроматографию и хроматографию в тонком слое сорбента. Обнаруживают флуоресценции в УФ-свете. производные антрацена по характерной Задание №4 1. Дайте теоретическое обоснование методики количественного определения антрагликозидов в листьях сенны. 2. Назовите препараты из сырья крушины ольховидной и дайте рекомендации по их применению. Ответы: 1. Все методы количественного определения антраценпроизводных в сырье основаны на определении свободных агликонов после кислотного гидролиза. Агликоны экстрагируют в органический растворитель и определяют различными методами. 1. Фотоэлектроколориметрический метод Основан на способности окрашенных антрахинолятов поглощать монохроматический свет при длине волны 540 нм. Предложен в 1957 г. Аутергоффом (Германия), модифицирован А.С. Романовой и А.И. Баньковским (НПО «ВИЛАР», 1965 г.). Аутергофф предложил гидролиз и экстракцию агликонов объединить в одну стадию кипячением навески сырья с кислотой ледяной уксусной и последующей экстракцией диэтиловым эфиром. Стадии определения: а) Гидролиз антраценпроизводных и экстракция агликонов из сырья. б) Получение окрашенных солей. Эфирное извлечение обрабатывают в делительной воронке отдельными порциями щелочно-аммиачного раствора (5 % раствор натрия гидроксида, содержащий 2 % раствор аммиака). Антраценпроизводные в виде окрашенных антрахинолятов переходят в водную фазу; обрабатывают до тех пор, пока последняя порция щелочно-аммиачного раствора не будет оставаться бесцветной. в) Окисление восстановленных форм антраценпроизводных. Для перевода всех форм антраценпроизводных в окисленные, часть щелочно-аммиачного раствора антрахинолятов нагревают на водяной бане в течение 15 мин. Восстановленные формы окисляются кислородом воздуха и вступают в реакцию со щелочно-аммиачным раствором, окраска становится интенсивнее. г) Измерение оптической плотности окрашенных антрахинолятов с помощью фотоэлектроколориметра (ФЭК) при длине волны 540 нм (зеленый светофильтр). Содержание антраценпроизводных в сырье (%) рассчитывают по калибровочному графику, построенному по кобальта хлориду (CoCl2 · 6H2O), в пересчете на истизин. Фотоэлектроколориметрический метод рекомендован ГФ для определения содержания антраценпроизводных в сырье крушины, ревеня, марены красильной. 2. Спектрофотометрический метод Этим методом определяют содержание антраценпроизводных в листьях сенны. Имеются особенности из-за структуры действующих веществ: экстракцию сеннозидов проводят водой при нагревании; водное извлечение очищают от смолистых веществ; окисление восстановленных форм проводят с помощью железа окисного хлорида (FeCl3); гидролиз гликозидов антрахинонов проводят 50 % раствором кислоты серной; оптическую плотность окрашенных антрахинолятов измеряют с помощью спектрофотометра при длине волны 523 нм; содержание суммы антраценпроизводных в пересчете на хризофанол вычисляют по калибровочному графику, построенному по кобальта хлориду. 2. 1. Крушины кора, сырье измельченное. Слабительное средство. 2. В составе сборов (сбор желудочный № 3; сборы слабительные № 1, 2; сбор противогеморроидальный). 3. Сироп коры крушины. Слабительное средство. 4. Экстракт крушины жидкий. Слабительное средство. 5. Экстракт крушины сухой, таблетки п.о. по 0,2 г. Слабительное средство. 6. Рамнил, таблетки п.о. по 0,05 г (сухой стандартизованный экстракт). Слабительное средство. 7. Порошок входит в состав комбинированных препаратов «Викаир», «Викрам» и «Викалин». 8. Экстрактивные вещества входят в состав комплексных слабительных препаратов («Депурафлукс», «Мусинум» и др.). Задание №5 1. Составьте и обоснуйте инструкцию по заготовке, сушке и хранению корней щавеля конского. 2. Назовите препараты из листьев алоэ и дайте рекомендации по их применению. Ответы: 1. Заготовка. Корни щавеля конского заготавливают в августе — сентябре, в начале отмирания надземной части, или рано весной, в период отрастания растения, выкапывая лопатами. Сырье промывают в холодной воде, освобождают от одревесневших и поврежденных частей, режут на куски размером до 10 см и провяливают на воздухе в течение нескольких дней. Охранные мероприятия. Заготовке подлежат только крупные растения. Для сохранения зарослей оставляют молодые экземпляры, на одном и том же месте заготовку проводят не чаще, чем через 3-5 лет. Сушка. Сушат на чердаках с хорошей вентиляцией или под навесами, разложив слоем в 3-5 см, периодически переворачивая. Допускается тепловая сушка при температуре 50-60 ºС. Стандартизация. ВФС 42-1077-81. Хранение. В упакованном виде в сухом, хорошо проветриваемом помещении, защищенном от света (под влиянием света сырье темнеет). Срок годности 3 года. 2. Лекарственные средства. Экстракт алоэ жидкий для инъекций, линимент алоэ, сок алоэ, таблетки алоэ, водный экстракт. Свежий сок получают путем выжимания с последующим консервированием спиртом. Применение Из растительных биостимуляторов наиболее изучены, доступны и давно применяются на практике препараты из биостимулированных листьев алоэ. Их используют при заболеваниях глаз - кератитах, иритах, помутнениях стекловидного тела, пигментных ретинитах, миопических хориоретинитах, прогрессирующей близорукости, атрофии зрительного нерва, блефаритах, конъюнктивитах, туберкулезно-аллергических кератитах. Назначают экстракт алоэ жидкий для инъекций по 1 мл под кожу взрослым, детям до 5 лет по 0,20,3 мл, старше 5 лет по 0,5 мл. Курс лечения 15-50 инъекций ежедневно или через день в зависимости от тяжести заболевания и показаний. Повторный курс можно провести через 2-3 мес. При глазных заболеваниях применяют также электрофорез сока алоэ. При язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки экстракт алоэ используют как средство неспецифической стимуляции в виде подкожных инъекций по 1 мл ежедневно или через день (10-30 инъекций), назначают жидкий экстракт алоэ внутрь по чайной ложке 3 раза в день в течение 30-45 дней или таблетки алоэ, покрытые оболочкой, по 1-3 таблетки в день. Курс лечения проводят 1-2 раза в год. Больным очаговым туберкулезом легких, бронхиальной астмой экстракт алоэ назначают под кожу в течение 10-15 дней по 1-2 мл ежедневно, а затем через день (на курс 30-35 инъекций). При вялотекущих с замедленным разрешением острых и хронических пневмониях, при отсутствии лейкоцитоза, сниженном содержании лизоцима и депрессии фагоцитоза применяют инъекции алоэ с целью биостимуляции. Биостимулирующие свойства алоэ используют в онкологии. Алоэ применяют с целью повышения неспецифической сопротивляемости организма при длительном введении антибиотиков, в период реконвалесценции после тяжелых заболеваний, при воспалительных заболеваниях женской половой сферы с вялым течением. При хронических фарингитах, парестезиях глотки алоэ назначают в виде эндобронхиальных инсталляций 1 мл экстракта после предварительной анестезии трахеи и голосовых связок дикаином или новокаином. Алоэ используют в комплексном лечении больных псориазом (инъекции экстракта по 1 мл под кожу ежедневно в течение 21 дня), волчанкой, при туберкулезных язвах кожи и гортани, при трофических язвах кожи, рубцовых изменениях, склеродермии, воспалительных заболеваниях периферической нервной системы. Список литературы 1. Фармакогнозия. Лекарственное сырье растительного и животного происхождения; СпецЛит - Москва, 2010. - 864 c. 2. Карпович В. Н., Шупинская М. Д. Фармакогнозия; Государственное издательство медицинской литературы - Москва, 2005. - 368 c. 3. Кузнецова М. А. Руководство к практическим занятиям по фармакогнозии; Медицина - Москва, 1980. - 296 c. 4. Кузнецова М. А., Рыбачук И. З. Фармакогнозия; Медицина - Москва, 1984. - 400 c. 5. Муравьева Д. А. Фармакогнозия; Медицина - Москва, 1978. - 656 c. 6. Муравьева Д. А. Фармакогнозия; Медицина - Москва, 1991. - 560 c. 7. Муравьева Д. А., Самылина И. А., Яковлев Г. П. Фармакогнозия; Медицина - Москва, 2002. - 656 c. 8. Под редакцией Самылиной И. А. Руководство к практическим занятиям по фармакогнозии. Анализ фасованной продукции; Медицинское информационное агентство - Москва, 2008. - 288 c. 9. Под редакцией Самылиной И. А., Сорокиной А. А. Руководство к практическим занятиям по фармакогнозии; Медицинское информационное агентство - Москва, 2007. - 672 c. 10. Пронченко Г. Е. Путешествие в мир фармакогнозии; ГЭОТАР-Медиа Москва, 2010. - 176 c. 11. Самылина И. А., Аносова О. Г. Фармакогнозия. Атлас. В 3 томах. Том 1; ГЭОТАР-Медиа - Москва, 2010. - 192 c. 12. Самылина И. А., Аносова О. Г. Фармакогнозия. Атлас. В 3 томах. Том 2; ГЭОТАР-Медиа - Москва, 2010. - 384 c. 13. Самылина И. А., Ермакова В. А., Бобкова Н. В., Аносова О. Г. Фармакогнозия. Атлас. В 3 томах. Том 3; ГЭОТАР-Медиа - Москва, 2010. - 488 c. 14. Сокольский И. Н., Самылина И. А., Беспалова Н. В. Фармакогнозия; Медицина - Москва, 2003. - 480 c. 15. Сорокина А. А., Самылина И. А. Фармакогнозия. Понятия и термины; Медицинское информационное агентство - Москва, 2007. - 358 c.
