Загрузил Анастасия Кузьмина

гнездовая пцр

Реклама
ГНЕЗДОВАЯ
ПЦР
Выполнила: студентка группы Т165
Кузьмина
Анастасия
ГНЕЗДОВАЯ ПЦР – ЭТО …?

Гнездовая полимеразная
цепная реакция вариант ПЦР с
использованием двух пар
праймеров (внешних и
внутренних), одна из
которых способна
амплифицировать
внутренний участок
ампликона, полученного
после первого раунда
амплификации с внешней
парой праймеров.
РАЗНОВИДНОСТИ ПЦР

1. В одном из вариантов проводится
амплификация (15—30 циклов) с внешней
парой праймеров, при этом амплифицируется
основной фрагмент ДНК. Далее часть
содержимого переносится в новую пробирку,
содержащую реакционную смесь, в состав
которой входит пара праймеров, узнающая
последовательности, лежащие внутри
основного ампликона. Второй раунд
амплификации (реамплификации) также
составляет 15-30 циклов.
РАЗНОВИДНОСТИ ПЦР

2. В другом варианте температура отжига
внутренней пары праймеров подбирается с
таким расчетом, чтобы при проведении первого
раунда амплификации они не участвовали в
реакции. Обычно температура отжига
праймеров в этом варианте гнездовой ПЦР
подбирается на 10-15°С ниже, чем для
внешней пары праймеров; программа
амплификации в этом случае состоит из двух
программных блоков.
ПРЕИМУЩЕСТВА ГНЕЗДОВОЙ ПЦР

По сравнению со стандартной полимеразной
цепной реакцией гнездовая ПЦР имеет более
высокую чувствительность и специфичность.
ПРИМЕНЕНИЕ ГНЕЗДОВОЙ ПЦР
В основном гнездовая ПЦР применяется в
сфере медицины для диагностики
заболеваний.
 Гнездовая ПЦР используется для детекции
ДНК в следовых количествах (1-100 копий на
пробу).

МЕТОДИКА ПЦР
Скачать
Случайные карточки
Название еды

8 Карточек Cards

Физические термины

8 Карточек Cards

Создать карточки