Лабораторная работа 24 Определение содержания каротина в корнеплодах моркови Принцип метода: используют фотометрический метод. Он основан на переведении определяемого компонента в растворе в соединение, поглощающее свет, и измерении светопоглощения полученным соединением. Если на кювету с окрашенным раствором направить световой поток, то часть его будет поглощена, а другая пройдет через раствор. Поглощение будет зависеть от количества молекул, встретившихся на пути светового потока. Выбирают тот светофильтр, который пропускал бы лучи, поглощаемые раствором: максимум пропускания светофильтра должен совпадать с максимумом поглощения раствора. Светофильтры на ФЭКе установлены с разной длиной волны в области максимума пропускания. Для измерения их подбирают по принципу дополнительного цвета: при работе с желто-окрашенным соединением — синий, с синим соединением — красный и т.д. Кюветы характеризуются рабочей длиной (расстояние между гранями, которое указывается на стенке, обращенной к проходящему свету): 5, 10, 20, 30, 50 мм. При анализе слабоокрашенных растворов берут кюветы с большей рабочей длиной, сильноокрашенных — с меньшей. Надо, чтобы отсчеты по шкале оптической плотности не превышали 0,8. Цель работы: определить количество каротина в корнеплодах моркови. Ход работы: Навеску моркови (1 г) мелко нарезать и растереть в ступке с песком и 0,3 г СаО (для отнятия воды) до однородной массы. В ступку добавить небольшими порциями растворитель — ацетон и продолжить растирание. Полученный экстракт слить в мерную колбу на 25 мл. По окончании экстракции колбу долить растворителем до метки. Если раствор каротина получился мутный, его фильтруют. В качестве стандарта используют раствор азобензола (он соответствует 0,00235 г каротина на 1 мл раствора). После получения опытного и стандартного растворов приступить к колориметрированию. Для этого в одну кювету наливают опытный раствор, в другую — стандартный раствор и колориметрируют на ФЭКе при синем светофильтре. Расчет производят по формуле: где X — количество каротина в мг на 100 г моркови; К — количество каротина для стандарта (0,00235 г); V — объем раствора в мл (25 мл); Д1 — оптическая плотность для раствора каротина; Д2 — оптическая плотность для стандарта. Определяют суточную потребность человека в моркови, исходя из нормы 5 мг каротина в сутки. Оборудование и материалы: 1) корнеплод моркови; 2) ацетон; 3) раствор азобензола; 4) колбы на 25 мл; 5) фарфоровые ступки с пестиками; 6) фильтры; 7) воронки; 8) фотоэлектроколориметр с кюветами; 9) стеклянные палочки.