Геропротекторные пептиды и их роль в поддержании пула

Санкт-Петербургский институт биорегуляции и геронтологии
ГЕРОПРОТЕКТОРНЫЕ ПЕПТИДЫ И ИХ РОЛЬ
В ПОДДЕРЖАНИИ ПУЛА МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ
СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК
Морозова Е.А.
[email protected]
Санкт-Петербург, 2013
Пролиферация мезенхимальных стволовых клеток
В последнее время все большую актуальность
приобретает изучение стволовых клеток (СК). В частности,
зависимость
пролиферативной
активности
СК
от
микроокружения, факторов роста, сигнальных молекул и
других экзогенных веществ. За последние 10 лет изучение
пролиферативного потенциала СК
стало одним из
основных
направлений
развития
клеточных
биотехнологий.
Несмотря
на
это,
механизмы
индуцированной пролиферации СК до сих пор остаются до
конца не изученными.
Цель работы: исследование влияния трипептидов на
пролиферативную активность мезенхимальных
стволовых клеток человека.
Задачи:
1.Изучение влияния трипептидов H-Glu-Asp-Arg-OH (пинеалон) и HLys-Glu-Asp-OH (везуген) на пролиферативный потенциал МСК
2.Поиск биологически активных конформаций трипептидов H-GluAsp-Arg-OH и H-Lys-Glu-Asp-OH методом компьютерного
моделирования конформационного поиска
3.Оценка влияния трипептидов на пролиферативный потенциал в
зависимости от их структурных характеристик
Методы исследований
Выделение мезенхимальных стволовых клеток
из жировой ткани человека.
Культивирование мезенхимальных стволовых
клеток человека.
Подсчет клеток в камере Горяева.
Моделирование оптимальной конформации
пептидов методом конформационного поиска
(Molecular Operating Environment 2012.10 ).
Выделение и культивирование МСК
Подсчет клеток в камере Горяева
Исследование влияния трипептидов H-Glu-Asp-Arg-OH и H-LysGlu-Asp-OH на пролиферативную активность МСК,
культивируемых в среде М10
количество клеток в 1 мл
Среда М10
90,000
*
80,000
70,000
60,000
50,000
40,000
30,000
*
*
*
*
*
*
20,000
10,000
0
0
контроль
2
4
H-Glu-Asp-Arg-OH
6
8
H-Lys-Glu-Asp-OH
* - p<0,05 по сравнению с контролем.
10
сутки
Совмещение конформаций, принадлежащих оптимальным
энергетическим интервалам
Совмещение 25
конформаций пептида HGlu-Asp-Arg-OH,
принадлежащих
оптимальному
интервалу 4,2-8,8
ккал/моль.
Совмещение 25
конформаций трипептида HLys-Glu-Asp-OH,
принадлежащих
оптимальному интервалу
8,24 – 11,94 ккал/моль.
Биологически активные конформации трипептидов H-GluAsp-Arg-OH и H-Lys-Glu-Asp-OH
Найденная биологически
активная конформация
трипептида H-Glu-Asp-Arg-OH со
значением энергии (6,5±0,53)
ккал/моль
Найденная биологически
активная конформация
трипептида H-Lys-Glu-Asp-OH со
значением энергии (10,09±0,10)
ккал/моль
Заключение:
Трипептид H-Lys-Glu-Asp-OH оказывает стимулирующее
действие на пролиферацию МСК человека, а трипептид H-GluAsp-Arg-OH снижает пролиферативную активность клеток
МСК.
Найденная
методом
конформационного
поиска
биологически активная конформация трипептида H-Glu-AspArg-OH обладает меньшим значением энергии, по сравнению с
пептидом H-Lys-Glu-Asp-OH.
Возможно,
что
пептид
H-Glu-Asp-Arg-OH,
обладая
рассчитанными структурными характеристиками, прочнее
связывается с молекулой ДНК и является более сильным
конкурентом за связывание с ДНК для других факторов
транскрипции, активирующих пролиферацию клеток, по
сравнению с пептидом H-Lys-Glu-Asp-OH.