Л. Евстафьева

«Внедрение инновационных технологий в Центре лабораторной медицины
АО «Республиканский диагностический центр»
Масс-спектрометрия - высокая точность и качество
исследований в микробиологической практике»
Л. Евстафьева
Правильная
идентификация
возбудителя
Определение
чувствительности
к антимикробным
препаратам
Эффективное
лечение
Микробиологическая служба оказывает существенную помощь
лечащему врачу в выборе наилучшей схемы лечения инфекционной патологии
Время от первичного посева до
получения результата
идентификации на автоматических
и полуавтоматических
анализаторах
Время от первичного посева до
получения результата
идентификации
на масс-спектрометре
48-72 часа
24 часа
MALDI-TOF масс-спектрометрия
Масс-спектрометрия
MALDI
(Matrix Assisted
Laser Desorption 'lonization)
TOF MS
(Time of Flight
Mass-Spectrometry)
метод идентификации молекул путем измерения отношения
их массы к заряду в ионизированном состоянии
ионизация вещества с помощью матрицы и лазерного
излучения.
время-пролетная масс-спектрометрия. Масса молекулы
оценивается по времени пролета от источника ионизации
до детектора.
Анализатор VITEK MS приобретен в 2014 г.
В настоящее время,
это единственный в Казахстане
прибор для идентификации
микроорганизмов на внутривидовом
уровне методом спектрального
анализа, используемый в
клинической практике.
Преимущества метода масс-спектрометрии
Высокая производительность
100% специфичность и чувствительность
Высокая скорость анализа
Определение спектра белков напрямую из
бактериальной колонии, взятой с чашки первичного
посева материала
Увеличение базы данных (755 клинически значимых видов
микроорганизмов)
Этап 1: подготовка образца
Смешивание
колонии бактерий
со специальной
матрицей
1
2
3
4
Кристаллизация лизированного
материала с веществомматрицей, переход молекул
лизата в газовую фазу и их
ионизации.
Этап 2: Идентификация
Бактериальная
клетка
Белки
Видовое определение
Протеом
9476.2
4424.2
Vo y a g e r
S p e c
# 1 = > A d v B C ( 3 2 , 0 . 5 , 1
. 0 ) = > N F 0 . 7 [ B P
=
4 4 2 3 . 9 ,
2 1 1 7 ]
100
2117. 3
4861.0
90
80
8823.5
70
5897.8
0
3000
5000
10975.2
10110.8
10493.9
9611.5
9075.2
8903.3
8610.6
7209.8
4026.9
4535.6
3311.8
3491.4
12271.4
8054.3
13000
8383.8
7424.9
6984.6
6533.3
6137.3
3132.3
11000
Масса молекулы
10
Mass (m/ z)
9000
4765.4 4738.6
7000
30
6629.0
40
6786.7
50
6271.2
% I nt ensi t y
60
20
Слайд пом
котором м
анализа (б
газовую ф
молекулы
взаимодей
перенося
заряд. Под
электриче
ионизиров
от источни
детектору
пропорцио
массам.
Программ
прибора о
частиц и п
информац
молекуляр
Масс-спек
спектрами
основании
белков пр
идентифи
Масс-спектрометр
Автоматизированная система идентификации
C
:
\
D
o
k
u
m
e
n
t
e
u
n
d
E
in
s
t
e
lu
n
g
e
n
\
m
.
e
r
h
a
r
d
\
E
ig
e
n
e
D
a
t
e
ie
n
\
A
n
a
g
n
o
s
T
e
c
-
d
c
\
Z
c
h
e
n
a
b
la
g
e
\
D
o
k
u
m
e
n
t
B
a
n
n
e
r
.
t
x
t
>
>
S
p
e
c
[
B
P
=
3
5000
7000
11572
11000
11906
10226
10347
9000
10608
10
9654
9330
7863
7092
8450
20
6837
3581
40
7367
50
5931
5015
60
10939
9994
8744
7980
70
0
3000
is
9453
7075
80
30
w
1648.1
90
8074
Целевой слайд
<
3775
<
100
% I ntensi ty
Шаг 1
Бактерии, плесень, дрожжи,
13000
Mass (m/z)
Шаг 4 Загрузка
Шаг 2
Добавление 1.0 мкл
матричного раствора
Шаг 3 Просушивание: 1-2 мин.
Шаг 5 Создание спектра
( 2 мин на 1 образец)
Результаты исследований
На идентификацию одного микроорганизма требуется около 2 -х минут времени
99,9%
достоверности
результатов
Что дало нам приобретение автоматического анализатора VITEK MS:
Полная автоматизация стандартных биохимических методов
идентификации микроорганизмов
Увеличение скорости исследования
Стандартизация микробиологических исследований
Повышение качества проводимых исследований
Расширение спектра выделяемых патогенов
Сокращение времени на проведение идентификации и сокращение
срока выдачи результата




эффективное лечение пациента
снижение смертности
существенное сокращение сроков госпитализации
экономия бюджетных средств.
Спасибо за внимание!