Опыт применения ГХ-МС методик в ХТЛ г. Новый Уренгой для




Химико-токсикологическое отделение на базе
клинико-диагностической лаборатории ГБУЗ ЯНАО
« Новоуренгойский ПНД» открылось в 1999 году.
Отделение оснащено двумя газовыми
хроматографами Agilent 6890N c масс селективным
детектором модели Agilent 5973N с 2005года и
«МАЭСТРО» ГХ 7820 с 2012года.
Лаборатория обеспечивает проведение химикотоксикологических исследований на наркотические
и сильнодействующие вещества по направлениям
УФСКН, органов внутренних дел, органов дознания
и следствия, ГИБДД, а также по направлению врачей
медицинских учреждений и личным заявлениям
граждан города.

Район обслуживания
включает в себя
г.Новый Уренгой ,
Пуровский район,
Тазовский район,
Красноселькупский
район.


За истекший период количество анализов,
проводимых в химико-токсикологической
лаборатории , выросло в 4 раза. При этом
изменилась структура исследований в связи с
появлением полинаркомании, лекарственной
наркомании, а также появлением различных
курительных смесей и «солей».
Со 2 половины 2012 года на 1 место в структуре
выявленных наркотических и психотропных
веществ стали выходить синтетические
каннабимиметики. Если в 2012году они составляли
37.2 %, героин составлял 36%, дезоморфин 5,7%, то
в 2013-2014 годах процент выявленных
синтетических психотропных средств составил уже
79% от общего количества выявленных веществ.
2011год
2012год
2013год
9мес 2014год
Число исследований всего
2080
2011
2686
1866
На наркотические средства и
психотропные вещества
1686
1613
2213
1592
подтверждено присутствие всего
1176
906
733
509
морфин
292
279
20
6
одеин
270
160
14
езоморфин
92
44
2
3
аннабиноиды
263
167
132
94
274
487
234
Наркотических средств и психотропных
еществ
интетические каннабимиметики
мфетамины
61
117
10
4
арбитураты
19
23
44
43
ензодиазепины
19
14
22
16
58
161
интетические амфетамины
другие лекарственные средства
47
92
66
20
комбинации наркотических и
психотропных веществ
106
84
61
89


Структура синтетических каннабимиметиков также
постоянно изменяется. Практически не встречается
группа нафтоилиндола, на смену « старым»
каннабимиметикам приходят новые группы
алкилиндола, группа эфиров
8 оксихинолина (PB-22f, FUB PB-22),
алкилиндазолы, группа амидов валина
(AB-CHMINACA, 5 FAB-PINACA),
а также психостимуляторы синтетического
происхождения , распространяемые на чёрном
рынке под названием «скорость»( альфа-PVP,
MDPV), МХР.
От общего числа исследованных биосред методом
ГХ/МС процент выявления в них наркотических и
психотропных веществ составляет 32.
Структура выявленных наркотических и психотропных веществ за 9
месяцев 2014года в % отношении.
ТГК
«MDPV»,
«альфа-PVP,
МХР»
Алкил
индолы
(PB-22F,
FUB- PB)
и пр.
Нафтоил
индолы
(THJ
2201)
Цикло
Пропоил
индолы
( XRL 11)
Алкилиндазолы
(AB-CHMINACA,
5 FAB-PINACA)
и пр.
Морфин,
дезомор
фин
Барбитураты
(Фенобарбитал)
Прочие
(баклофен,
атропин,
тропикамид)
15,3
26,2
30,1
3,2
3,9
10,6
1,0
7,0
2,7
ТГК
1
7
2.7
«MDPV», «PVP»
15.3
Алкилиндолы
10.6
Индазолы
Циклопропоилиндолы
3.9
3.2
26.2
Алкилиндазолы
морфин
барбитураты
30.1
прочие





Каждая биосреда, поступившая в лабораторию
исследуется 3 способами:
1) предворительный анализ методом жидкость /
жидкостной экстракцией для определения
лекарственных веществ и синтетических
амфетаминов.
2) щелочное извлечение с кислым гидролизом,
дериватизация с BSTFA.
3) кислое извлечение с щелочным гидролизом,
дериватизация с BSTFA.
Лаборанты заполняют бланки выполнения соответствующих
методик.

Перед исследованием биосред методом газовой
хроматографии с масспектрическим
дедектированием выполняется предварительный
анализ тест полосками на химико –
токсикологическом анализаторе IK 200609 для
обнаружения опиатов, амфетаминов, марихуаны,
бензодиазепинов, синтетических каннабиноидов.
Было замечено, что синтетические
каннабимиметики из группы алкилиндолов группы
эфиров 8-оксихинолина часто дают перекрёстную
реакцию на бензодиазепины. В тех биосредах,
которые дают положительную реакцию на
синтетические каннабиноиды и бензодиазепины на
тест полосках при исследовании их методом ГХ/МС
обычно обнаруживается FUB PB 22.

Увеличивается количество
выявляемых в биосредах
смесей (сочетание
нескольких видов
синтетических
каннабимиметиков,
синтетических амфетаминов
и тетрагидроканнабинола).
За 9 месяцев 2014 года
количество выявленных
смесей в биосредах
составило 17,4 % от общего
количества положительных
результатов. Примерные
составы смесей,
выявляемые в биосредах:
• ТГК, FUB PB 22, AB
CHMINACA
• ТГК, alpha -PVP
• TГК, PB-22f
• PVP, MDPV, , FUB PB 22,
XLR 11
• PVP, alpha –PVP, MXP.
• PVP, FUB PB 22, AB
CHMINACA.
• MDMB(N)Bz-F,
AB CHMINACA
• THJ2201,PB-22f, баклофен


Рис. 1а Хромотограмма пробы (DOAS) по
экстрагированным ионам, содержащим TMS
производные ТГК, FUB PB 22, AB
CHMINACA. Вещества идентифицированы по
временам удерживания и по масс-спектрам. Пик
с временем удерживания 20.19мин.
соответствует тетрагидроканнабинолу;
19.84мин. FUB PB 22 М; 30.97мин. - AB
CHMINACA М3.
Рис 1б Масс-спектр ТГК 2 TMS


Рис. 1а Хроматограмма пробы
(DOAS) по экстрагированным ионам,
содержащим TMS производные
PVP,MDPV, PB 22 f. Вещества
идентифицированы по временам
удерживания и по масс-спектрам. Пик
с временем удерживания 10.48мин.
Соответствует PVP; 13.24мин.
MDPV; 14.23мин. - PB 22 f.
Рис 1б Масс-спектр PB 22 f TMS
marker.

Чаще в биосредах стали обнаруживать альфатокоферола ацетат и олеамид ,что для нас стало
косвенным признаком присутствия в биосреде
синтетических каннабимиметиков. Эти
вещества добавлялись и в продукты первого
поколения. Но цель их добавления до сих пор не
ясна. Добавлялись ли они в качестве
консервантов или с целью замаскировать
действующие вещества. Токоферол действует
как антиоксидант. С другой стороны, олеамид,
принимаемый внутрь, вызывает такие же
поведенческие реакции, как каннабис, и его,
возможно, добавляли с целью коррекции
психотропного действия.
alpha-Toopheryl acetate в составе смесей 1
*В последние месяцы в лаборатории стал выявляться в биосредах
новый синтетический каннабимиметик :нафтоловый карбоксилат CBL2201 (нафталин-1-ил 1-(5-фторпентил)-1H-индол-3-карбоксилат)
*При его идентификации методом ГХ/МС необходима
дифференциальная диагностика с синтетическим каннабимиметиком
PB-22F( Хинолин-8-ил-(5-фторпентил)-1H-индол-3-карбоксилат ).
*При обнаружение 1-нафтола , который хорошо экстрагируется как в
кислой среде , так и в щелочной среде и наличие фторпентилиндольной
кислоты , которая выявляется при щелочном гидролизе кислом
извлечении подтверждается наличие в пробе CBL-2201.
*Для подтверждения обнаружения PB-22F необходимо доказать
наличие в пробе фторированного маркера 1-( 5 фторпентил) индол-3
карбоновой кислоты и 8-гидроксихинолина. Причём, 8
гидроксихинолин экстрагируется только в щелочной среде при кислом
гидролизе.
PB-22F включён в список НПС, CBL-2201 на данный момент не
подлежит контролю в РФ.
Рис. 1а Хромотограмма пробы (DOAS) по
экстрагированным ионам, содержащим TMS
производные 1-Naphthol. Вещество
идентифицировано по времени удерживания и
по масс-спектру. Пик с временем удерживания
8.678 мин. соответствует
1-Naphthol TMS.
Рис.1б Масс-спектр 1-Naphthol TMS.
Рис. 2а Хроматограмма пробы (DOAS) по
экстрагированным ионам, содержащим TMS marker
PB-22F. Вещество идентифицировано по времени
удерживания и по масс-спектру. Пик с временем
удерживания 14.042 мин. соответствует
. PB-22F –M TMS
Рис.2б Масс-спектр. PB-22F –M TMS.
Рис. 3а Хроматограмма пробы (DOAS) по
экстрагированным ионам, содержащим TMS
8-Hydroxyquinoline. Вещество идентифицировано
по времени удерживания и по масс-спектру.
Пик с временем удерживания 7.040мин. соответствует
8-Hydroxyquinoline TMS.
Рис. 4а Хроматограмма пробы (DOAS) по
экстрагированным ионам, содержащим TMS marker
PB-22F. Вещество идентифицировано по времени
удерживания и по масс-спектру. Пик с временем
удерживания 14.042 мин. соответствует
. PB-22F –M TMS.
Рис.1б Масс-спектр 8-Hydroxyquinoline TMS.
Рис.4б Масс-спектр. PB-22F –M TMS.
.
г.Новый Уренгой также не обошли стороной случаи отравления новым
синтетическим веществом MDMB(N) FUB.

28-29.09.2014г. в приемное отделение ГБУЗ ЯНАО Новоуренгойского
психоневрологического диспансера бригадами скорой медицинской помощи были
доставлены молодые люди в возрасте 17, 19, 27 лет с диагнозом «Наркотическое
опьянение». Со слов врачей , пациенты обнаружены в бессознательном состоянии
на улице, лестничной площадке. У одного из пациентов были судорожные
приступы. При поступлении: общее состояние оценено как тяжелое. Положение
пассивное. Сознание оглушено до сопора. Кожные покровы бледные, сухие. Следов
от инъекций, в местах доступности поверхностных вен нет. Дыхание частое,
поверхностное, ЧДД до 30 в минуту. Пульс частый, слабого наполнения,
с единичными экстрасистолами, АД 90/70 мм рт. ст.. Зрачки широкие, фотореакция
вялая. Речевому контакту доступны с трудом. Ответы на вопросы односложные,
после длительной паузы, реакция только на сильные раздражители.

После проведения дезинтоксикационной терапии, пациенты сообщали, что при
курении «спайса» они резко почувствовали себя плохо: испытывали чувство
тошноты, появлялись зрительные галлюцинации, изменение временного
восприятия, ощущение нереальности происходящего, затем возникала потеря
сознания. После выхода из состояния интоксикации пациенты жаловались на
плохое самочувствие, подавленное настроение, раздражительность.




Для проведения химико-токсикологического исследования использовалась моча,
которая была взята у пациентов через 6-8 часов после поступления. Для
обнаружения синтетических каннабимиметиков использовали методику с щелочным
гидролизом . Дериватизацию проводили с BSTFA, содержащим 1% ТМС.
Условия подготовки пробы мочи.
Гидролиз: к 3 мл. мочи добавить 500мкл 5N раствора КOH,выдержать при 50С в
течение 30 мин. Экстракция: гидролизат экстрагировать 3 мл смеси гексан-этилацетат
7:1, при рH 2. Дериватизация: к упаренному досуха экстракту добавить 50 мкл
BSTFA и 50 мкл этилацетата.
ГХ/МС анализ.
Хромато-масс-спектрическое исследование проводилось на газовом хроматографе
«МАЭСТРО» ГХ 7820 с масс селективным детектором модели Agilent 5975N 2012
года выпуска с капиллярной кварцевой колонкой RESTEK(длина 30,0м, диаметр 250
мкм, толщина пленки 0,25 мкм) и Agilent 6890N с масс селективным детектором
модели Agilent 5973N 2005 года выпуска с капиллярной кварцевой колонкой
RESTEK(длина 30,0м, диаметр 250 мкм, толщина пленки 0,25 мкм).
Условия масс-спектрического детектирования.
Анализ проводили в режиме сканирования по полному ионному току, температура
источников ионов 230 С, температура анализатора 150 С, диапазон масс m/z 41650a.e.м., напряжение на умножителе результат полученный в режиме ATUNE
перфтобутиламину. Идентификация веществ проводилась в режиме автоматической
AMDIS библиотеки.
У всех троих пациентов был обнаружен MDMB(N)-Bz-F marker ТМS ,
идентифицированный по 3 основным ионам: 109, 253,338.

MDMB(N)-Bz-F (Метил 2-(1-(4-фторбензил)-1H-индазол-3-карбоксамидо)3,3-диметилбутаноат) был идентифицирован в 10 биосредах у 8 пациентов,
4 из которых поступили с признаками отравления в отделение интенсивной
терапии. Смертельных случаев в городе Новый Уренгой не было.

MDMB(N)-Bz-F В 3 случаях определялся в сочетании с ABCHMINACA, в 1 случае в сочетании с CBL-2201.

MDMB(N)-Bz-F был выявлен и в изъятых веществах в лаборатории
УМВД.

При исследовании «положительных» проб с щелочным гидролизом и
дериватизацией PFPA/PFPOH был получен предположительный спектр
MDMB(N)-Bz-F marker PFP, идентифицированный по ионам:109, 253,459.

Рис.a Хромотограмма исследуемого
образца по экстрагированным ионам,
соответствующим MDMB(N)-Bz-F marker
ТМS .
Рис.б Масс-спектр MDMB(N)-Bz-F TMS, со
временем удерживания 19,997 min
Рис.a Хроматограмма исследуемого
образца по экстрагированным ионам,
соответствующим MDMB(N)-Bz-F marker
PFP .
Рис.б Масс-спектр MDMB(N)-Bz-F PFP, со
временем удерживания 17,360 min.
Составы выявленных синтетических амфетаминов также
постоянно изменяются. На смену MDPV в сочетании с
PVP приходят новые смеси. В последние месяцы в
биосредах лиц с яркой клиникой психомоторного
возбуждения стали выявлятся новые сочетания «солей». В
пробах с alpha-PVP встречается новое психотропное
вещество метоксфенидин (MXP) , обладающее сильным
галлюциногенным действием, и пока не внесённым в
список НПС, подлежащим контролю в РФ.
Рис.a Хроматограмма исследуемого
образца по экстрагированным ионам,
соответствующим MXP .
Рис.б Масс-спектр MXP, со временем
удерживания 13,691min



В 2014 году количество поступивших в отделение
интенсивной терапии «НПНД» с диагнозом острая
интоксикация, вызванная употреблением наркотических
и психотропных средств , после приёма синтетических
амфетаминов и после приёма синтетических
каннабимиметиков находится в соотношениии 3:1.
В сентябре, начале октября были освидетельствованы
лица в состоянии психомоторного возбуждения, в
биосредах у которых было выявлено психоактивное
вещество из класса триптаминов 5-метокси-альфаметилтриптамин (5 МеО-АМТ) и 5 метоксиметилизопропилтриптамин. (5 МeO MIPT).
Данное вещество обнаруживается и в изъятых объектах
в лаборатории УМВД.
Рис. 1а Хромотограмма пробы (DOAS) по
экстрагированным ионам, содержащим 5
MeOAMT, 5MeO MIPT. Вещества
идентифицированы по времени
удерживания и по масс-спектру. Пик с
временем удерживания 12.891 мин.
соответствует 5 MeOAMT, пик со
временем удерживания 13,381 соответствует
5MeO MIPT.
Рис.1б Масс-спектр 5MeO MIPT.



Учитывая наш опыт применения
хроматомасспектрических методик для определения
новых синтетических наркотических и
психотропных средств были сделаны следующие
выводы:
1. В виду постоянного обновления каннабимиметиков на
рынке и появления смесей “старых” и “новых”
наркотических средств, важное значение имеет
своевременное пополнение библиотек масс спектров и
создание единой утверждённой библиотеки.
2. Обращает на себя внимание, что новые синтетические
наркотические и психотропные средства, в частности (
MDMB(N) FUB, CBL-2201, MXP) обладают более
выраженными тяжёлыми воздействиями на психическое
и физическое здоровье человека ,но ещё не входят в
списки НПС и не подлежат контролю в РФ.