Встречаемость нескольких видов ВПЧ рода beta

МОНИКИ им. М.Ф.Владимирского, ЦНИИ Эпидемиологии
Роспотребнадзора
АССОЦИАЦИЯ ДОБРОКАЧЕСТВЕННЫХ
ОПУХОЛЕЙ С ВИРУСОМ ПАПИЛЛОМЫ
ЧЕЛОВЕКА РОДА БETA, В ТОМ ЧИСЛЕ У
ИММУНОСУПРЕССИВНЫХ ЛИЦ
Корнева Л.В., Молочков В.А.,
Снарская Е.С., Щербакова Е.О.,
Полянская А.А., Нодельман Е.К.
Москва, 2014
Филогенетическое древо ВПЧ (роды,
поражающие человека)
Вирусы папилломы человека рода бета

Более 90% всех охарактеризованных на сегодня вирусов папилломы
относятся к родам альфа и бета

Род альфа ВПЧ состоит из более чем 60-ти типов. Вирусы этой группы
поражают эпителий шейки матки, подтверждена их взаимосвязь с
раком шейки матки

ВПЧ рода бета наиболее часто выявляются в эпителиальных опухолях
кожи. Из участие в развитии кожных неоплазий изучается.
Заболевания, ассоциированные с
ВПЧ рода beta

верруциформная эпидермодисплазия

плоскоклеточный рак кожи

базально-клеточный рак кожи

кератоакантома

болезнь Бовена

актинический кератоз

себорейный кератоз
IARC Monographs on the Evaluation of Carcinogenic Risks to Humans, 2007,
Harwood, C. A., 2000, Pfister, 2003
Акрохордоны

синоним: фиброэпителиальные полипы, мягкие фибромы,
папилломы

распространенная доброкачественная опухоль кожи

локализуются на боковой поверхности шеи, в крупных
складках, иногда – на лице, спине и груди

чаще встречаются у женщин (особенно в
постменопаузальный период, и у беременных), их число
увеличивается с возрастом

Доказанные факторы риска - травмирование кожи,
ожирение и сахарный диабет 2 типа

Среди иммуносупрессивных пациентов
акрохордоны выявляют достаточно часто –
примерно в трети случаев (до 37% пациентов по
данным зарубежных исследований)

Есть тенденция к более частому обнаружению
при больших сроках имммуносупрессии
Chen Q, Aw D. C., 2010, Dianzani, C. 1998г
Встречаемость вирусов папилломы
человека в акрохордонах
Авторы
Выявляемые типы
Выявляемость
Dianzani, C., et al. 1998
6 и 11 тип
88%
Sallam M. A., 2003
6 и 11 тип
77%
Gupta, S. et al. 2008
6 и 11 тип
49 %
Попыток выявить ассоциацию акрохордонов с
ВПЧ рода beta ранее не предпринималось
Цели и задачи
Цели: изучить ассоциацию акрохордонов с ВПЧ рода beta на
основе ПЦР в режиме реального времени у реципиентов
почечного трансплантата (РПТ) и иммунокомпетентных
лиц
Задачи:
 Исследовать встречаемость ДНК ВПЧ рода beta в
акрохордонах и видимо здоровой коже РПТ и
иммунокомпетентных пациентов.
 Изучить частоту обнаружения нескольких видов ДНК
ВПЧ рода beta в акрохордонах и видимо здоровой коже
РПТ и иммунокомпетентных лиц.
Клинико-морфологическая
характеристика пациентов
РПТ (22)
И/К (30)
Здоровые доноры
(49)к
Мужчины:
женщины
8/14
12/18
21/28
Возраст
48±6
52±11
47±8
Срок
иммуносупрессии
3 года (от 0,5 до
17 лет)
-
-
Тип иммуносупрессивного режима:
18 человек - микофенолата мофетил, такролимус и преднизолон
4 человек – циклоспорина А, преднизолон
Распределение иммуносупрессивных и
иммунокомпетентных пациентов по нозологиям
Исследуем
Группа новообразований
ые
образцы
Акрохордоны
РПТ
И/К
Количество очагов
22
Видимо здоровая кожа у лиц с ЭОК
22
Акрохордоны
30
Видимо здоровая кожа у лиц с ЭОК
30
Здоровая кожа доноров
49
Выявление кожных типов ВПЧ рода beta методом
Real-time ПЦР (1)
ПЦР Real-Time с гибридизационно-флуоресцентной детекцией
ОЛИГОНУКЛЕОТИДЫ:
4 системы группоспецифических праймеров и зондов к β1, β2, β3, β4- β5 видам
из рода Бета ВПЧ
 1-я - для выявления генотипов вида β1 (5, 8, 12, 14, 21, 19, 25, 47, 36);
 2-я - для выявления генотипов вида β2 (9, 15, 17, 22, 23, 38, 37, 80);
 3-я - для выявления генотипов вида β3 (49, 75, 76);
 4-я - для выявления генотипов вида β4 (92), β5 (96), β1 (20,24 и 93 типы).

эндогенный контроль – β-глобиновый ген человека
Положительный контроль – образцы с известной последовательностью ДНК
кожных типов (1,34,5,7,8,15,20,24,27,37,38,49,50,65)*
Положительные плазмидные контроли любезно
предоставлены:
Dr. E.-M. DE VILLIER, Division for tumorvirus
characterization, Applied Tumorvirology, Germany
Dr. M. Favre, Institut Pasteur, France
Выявление кожных типов ВПЧ рода beta методом
Real-time ПЦР(2)


Возможность точно оценить количество
искомой ДНК и провести
нормализацию вирусной ДНК на
количество клеток человека
Диапазон измерений от 103 до 109 ДНК
ВПЧ в мл

Надежность результатов достигается
благодаря использованию эндогенного
внутреннего контроля (амплификация
фрагмента ДНК человека)

Эндогенный внутренний контроль
позволяет оценить правильность
забора, хранения, выделения
материала
Кладова А.Ю., Куевда Д.А., Молочков В.А., Шипулина О.Ю., Киселев В.И., 2007
Частота обнаружения ДНК ВПЧ в образцах кожи
РПТ
Группа
новообразований
Акрохордоны
И/К
Видимо здоровая кожа у
лиц с ЭОК
Акрохордоны
Видимо здоровая кожа у
лиц с ЭОК
Здоровая кожа доноров
Всего
ВПЧ+
ВПЧ+(%)
22
14
64%
22
12
55%
30
18
60%
30
12
40%
49
23
47%
При единичных акрохордонах (менее 5) у РПТ ДНК ВПЧ обнаруживали в 43%
При множественных акрохордонах ( 5 и более) у РПТ ВПЧ обнаруживали в 87%
Встречаемость нескольких видов ВПЧ рода beta в
образцах эпителиальных опухолей и здоровой
коже
60%
50%
40%
35%
30%
Акрохордоны
30%
25%
20%
Видимо
здоровая кожа
у лиц с ЭОК
20%
15%
10%
10%
Здоровая кожа
доноров
5%
0%
0%
РПТ
Иммунокомпетентные
При единичных очагах СК (менее 5) у РПТ ДНК ВПЧ β1 и β2 обнаруживали в 43%
При множественных очагах СК (от 5 и более) у РПТ ДНК ВПЧ β1 и β2 обнаруживали в
91%
Выводы



В акрохордонах и видимо здоровой коже РПТ ВПЧ рода
beta обнаруживали с более высокой частотой, чем в коже
доноров
Отмечалась тенденция к более высокой встречаемости
нескольких видов ВПЧ в акрохордонах по сравнению со
здоровой кожей как у иммунокомпетентных лиц, так и у
РПТ
У пациентов с множественными очагами (более 5) ДНК
ВПЧ встречалась чаще, чем у пациентов с единичными
(менее 5) очагами (в 87% и 43%, соответственно).
Спасибо за внимание!