СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ДИАГНОСТИКИ БАКТЕРИУРИИ С ПОМОЩЬЮ УСТРОЙСТВА ДИПСТРИК Шуляк Б.Ф., научный отдел ООО «ГЕМ» (Россия, Москва) hem Инфекции мочевыводящих путей (ИМТ) широко распространены среди населения По данным ВОЗ, ИМТ ежегодно диагностируют у 4% населения планеты. Эта цифра, вероятно, значительно занижена, т.к. в случаях субклинического течения большинство случаев ИМТ остается недиагностированными. ИМТ крайне опасны – они вызывают тяжелые болезни (гломерулонефрит, пиелонефрит, цистит, простатит, уретрит и др.) и являются одной из наиболее важных причин бактериемии. hem УРОПАТОГЕННЫЕ БАКТЕРИИ hem ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ КРИТЕРИИ Обнаружение в моче даже первичных уропатогенов не является основанием для постановки окончательного диагноза Для подтверждения «истинной» бактериурии необходимо доказать, что концентрация бактерий в моче достаточно высока hem Клинически значимые значения бактериурии Монокультуры E. coli и S. saprophyticus — титр ≥ 10³ КОЕ/мл Монокультуры других бактерий — титр ≥ 104 КОЕ/мл Смешанные культуры двух бактерий — титр ≥ 105 КОЕ/мл Способ взятия мочи При мочеиспускании (средняя порция) Наличие симптомов БМП + — Обнаруженные уропатогенов тип Первичные —“— Вторичные —“— Сомнительные Любые уропатогены —“— число 1 1-2 1 2 1 Диагностически значимый титр (КОЕ/мл) 102 103 104 (женщ.) - 103 (мужч.) 105 105 105 1-2 101 —“— 1-2 102 + —“— 1-3 104 — —“— 1 104 Надлобковая пункция ± При цистоскопии или 1-кр. катетеризации ± Из введенного на длительное время катетера МОЧА – ПРЕКРАСНАЯ ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ БАКТЕРИЙ! Концентрация бактерий в моче при комнатной температуре удваивается уже через 2 ч после взятия пробы. Поэтому оптимальное время посева мочи – 30-минутный интервал после ее взятия. Можно ли считать достоверным результат титрования бактерий в пробе мочи, которая длительно хранилась в доме пациента, поликлинике и приемном отделении лаборатории? hem Питательные среды, применяемые для бактериологического анализа мочи Универсальные среды (кровяной агар, CLED и др.) Селективные среды (Левина, МакКонки и др.) Хромогенные среды (Uriselect и др.) hem Лаборатория должна быть обеспечена всеми необходимыми для бактериологического анализа мочи средами. От их качества и стандартности зависит достоверность результатов анализов. Колонии Бактерии Диаметр, мм Цвет Характеристики β-глюкуронидаза β-глюкозидаза Индол Триптофандезаминаза E.coli 2-3 Фиолетовый + — + — P.mirabilis 2 Оранжево- — — — + коричневый E.faecalis 0,5-1 Светло-голубой — + — P.stuartii 2 Оранжево- — + ± — — — — — коричневый S.aureus 1-2 Белый Технология Дипслайда позволила усовершенствовать и упростить бактериологическое исследование мочи Дипслайды обеспечивают: - совмещение преаналитического и аналитического этапов - возможность посева пробы мочи в месте ее сбора - транспортировку и инкубирование посевов в закрытом контейнере - одновременный посев одной пробы мочи на разные среды - использование готовых стандартных высококачественных сред - экономию питательных сред - упрощение и стандартизацию бактериологического анализа мочи hem ОСНОВНОЙ НЕДОСТАТОК ДИПСЛАЙДОВ Недозированная технология засева дипслайдов (погружение в пробу) при высоком титре бактерий в моче ведет к газонному росту, при котором: Отсутствует возможность оценки морфологию выросших колоний Ингибиция и маскировка роста медленнорастущих бактерий колониями быстрорастущих бактерий (в смешанных культурах) Затруднено определение степени бактериурии по числу выросших колоний hem ДипСтрик усовершенствованный Дипслайд, обеспечивающий большую надежность бактериологического исследования мочи ДипСтрик ® - удачная комбинация технологий Дипслайда и традиционного посева на чашки Петри, обеспечивающая: ☼посев исследуемого материала неквалифицированным персоналом непосредственно на месте его сбора (это исключает чрезмерный рост бактериальной микрофлоры при транспортировки мочи в лабораторию). ☼ быстрое выявление, количественный учет и идентификацию уропатогенов. hem ДипСтрик ® - идеальная альтернатива традиционного метода посева на чашки Петри признаваемого «золотым стандартом» бактериологического анализа мочи Что такое ДипСтрик®? Дипстрик ® представляет собой пластиковую пластинку, покрытую с обеих сторон питательными средами, вставленную одним концом в завинчивающуюся крышку и помещённую в прозрачный пластиковый контейнер. Система стерильна. Пластиковое кольцо с удлиненными зубцами прикреплено к другому концу пластинки таким образом, что над каждой ее стороной располагается по 3 зубца. hem Пользоваться Дипстриком очень просто Установить ДипСтрик на столе. Отвернуть крышку и одним движением извлечь слайд. hem Погрузить в мочу только зубцы до половины их длины (до точки изгиба). Установить слайд в отверстие пробирки зубцами вниз. Легким ударом ладони вставить слайд в пробирку и ввернуть крышку. Способ посева Пластиковое кольцо, расположенное в отверстии пробирки, препятствует проникновению зубцов при возвращении пластинки в контейнер. При этом зубцы (по 3 с каждой стороны) обеспечивают дозированный штриховой посев на обеих питательных средах (на каждом зубце задерживается по 1-1,2 мкл мочи) Уникальный механизм изоляции колоний Зубцы прочерчивают на каждой питательной среде полоскиштрихи с уменьшающейся концентрацией бактерий, что позволяет получить изолированные колонии и даже при высоких титрах бактерий (свыше 107 КОЕ/мл). 107 КOЕ/мл ДипСтрик ® hem 107 КOЕ/мл Дипслайд Способ количественной оценки Колоний: КOЕ/мл : <10 <103 hem <10 103 10-24 104 25-50 105 После инкубации, ДипСтрик осматривают на наличие роста бактерий. Количество колоний, выросших на средах CLED или МакКонки, сопоставляют с Таблицей плотности бактериального роста для определения уровня бактериурии. Комбинации сред на Дипстрике Возможности изоляции и и идентификации различных уропатогенов за счет выпуска Дипстрика с разными комбинациями сред: МакКонки + Uriselect 3 (более точные идентификация и подсчет титра Г-бактерий) CLED + Uriselect 3 (количественная и качественная оценка бактериурии Г+ и Г- бактерий) CLED + CNA Колумбийский кровяной агар (количественная и качественная оценка бактериурии Г+ бактерий) hem ЗАКЛЮЧЕНИЕ ИЛИ НЕСКОЛЬКО СЛОВ О ПРЕИМУЩЕСТВАХ Дипстрика Позволяет избежать размножения бактерий в пробах до посева на питательные среды минимизация ложно положительных результатов Возможность изоляции и идентификации практически всего спектра уропатогенных бактерий повышение надежности бактериологического анализа Применение в Дипстрике стандартных высококачественных питательных сред стандартные и оптимальные условия бактериологического анализа мочи Стандартность бактериологического анализа Дипстриками повторно исследуемых проб мочи получение достоверной информации об эффективности лечения hem Надежность и герметичность контейнера Дипстрика предотвращение контаминации проб и пробами транспортных средств, снижение риска заражения медработников ПРЕИМУЩЕСТВА ДИПСТРИКА Дипстрик экономичнее традиционных способов диагностики ИМП снижение расходов при сборе и транспортировке проб, отсутствие необходимости в самостоятельном производстве сред, упрощение и ускорение процедуры посева и пр. Посев мочи на Дипстрик в месте сбора проб позволяет отправлять в лабораторию только посевы мочи пациентов с ИМТ экономия транспортных расходов и снижение загруженности лабораторий hem Дипстрик представляет собой комбинацию 3 функциональных элементов: питательных сред, механизма посева и контейнера отсутствие необходимости в использовании соответствующих приспособлений (чашек Петри со средами, бактериологических петель, контейнеров). Преимущества Дипстрика Дипстрик – полуавтоматическое устройство, правильно пользоваться которомым могут даже неквалифицированный медицинский персонал или пациенты в амбулаториях, стационарах и даже домашних условиях. Применение Дипстрика позволяет повысить безопасность бактериологичсекого анализа мочи , т.к. в лабораторию вместо них поступают посевы в закрытых контейнерах. hem hem БЛАГОДАРЮ ЗА ВНИМАНИЕ!