Хронический гепатит

Хронический гепатит
Кафедра клинической лабораторной
диагностики РМАПО
СТРУКТУРА ПЕЧЕНИ
Портальный тракт
•печеночная артерия
•портальная вена
•желчный проток
Центральная
печеночная вена
Междольковый
желчный проток
Гепатоциты
Синусоид
Портальная вена
Печеночная
артерия
Центральная
печеночная вена
Желчный каналец
ПЕЧЕНОЧНЫЙ АЦИНУС
Желчные
канальцы
Желчный
проток
Центр
.
вена
Печеночная
артерия
Венозный
синусоид
Портальная
вена
Эндотелиальные
клетки
Купфферовы
клетки
Гепатоциты
Основные патологические
синдромы заболеваний печени
 Синдром цитолиза
 Синдром внутри- и внепеченочного холестаза
 Синдром токсического поражения
гепатоцитов
 Синдром недостаточности синтетических
процессов в гепатоцитах
 Синдром воспаления
СИНДРОМ ЦИТОЛИЗА
•Цитолиз характерен для инфекционного гепатита, токсических
поражений печени, отравлений
•Цитолиз обусловлен нарушением целостности мембран гепатоцитов
их органелл, проявляется гиперферментемией
•Цитолиз сопровождается повышением в сыворотке активности
индикаторных ферментов повреждения - АЛТ, АСТ, ЛДГ, ГлДГ
•Повышение проницаемости плазматических мембран оценивают по
повышению в сыворотке :
цитоплазматических ферментов - АЛТ. АСТ. ЛДГ
митохондриальных ферментов ГлДГ, АСТ
•О синдроме цитолиза с большой стеапенью веро-
ЛДГ
ятности свидетельствует преобладание ЛДГ-5
1 2 3 4 5
ИЗМЕНЕНИЕ АКТИВНОСТИ
ФЕРМЕНТОВ СЫВОРОТКИ
ПРИ ОСТРОМ ГЕПАТИТЕ

АЛТ




АСТ








- ГТ
ГлДГ









0
1
2
3
4
5
6
неделя после появления желтухи



7
СИНДРОМ
ХОЛЕСТАЗА
•Реактивные изменения эпителия желчевыводящих путей,
явления внутрипеченочного холестаза отражает активность
ЩФ, -ГТ, ЛАП
•В мембране желчевыводящих протоков ферменты
расположены вместе, их активность повышается
одновременно в равной степени
•Активность ЩФ помогает при дифференциальной
диагностике внутри- и внепеченочного холестаза
- при внутрипеченочной обтурации ЩФ  более 10 раз
- при внепеченочной обтурации ЩФ  в 2-3 раза
•Характерно повышение конъюгированного билирубина
Нормальная печень
Центральная
вена
Компрессия синусоидов и междольковых
артерий при жировой инфильтрации печени..
Гепатоциты перегружены липидами: повышается давление в портальной вене
(портальная гипертензия), нарушается междольковой кровоток, в центре
дольки возникает гипоксия, атрофия и гибель клеток
СИНДРОМ ВОСПАЛЕНИЯ
ТРАВМА
СЕПСИС
ГИПОТАЛАМУС
ГИПОФИЗ
НАДПОЧЕЧНИКИ
ИЛ-1
ФНО-
МАКРОФАГИ
ИЛ-1
ТАФ
ИЛ-6, ИЛ-11
ИФ-
ИЛ-1
ФНО-
Протеолиз
инсулин
ПАНКРЕАС
глюкагон
Аминокислоты Аминокислоты
МЫШЦЫ
глюкокортикоиды
Синтез
белка
ПЕЧЕНЬ
 Острофазные
белки
 Альбумин
Эффект усиления
Ингибирующее
действие
Воспаление ведут медиаторы
БЕЛКИ ОСТРОЙ ФАЗЫ
«Главные реактанты,
увеличение в 20-1000 раз в
течение 6-12 ч
С-реактивный белок (СРБ)
Амилоидный белок А
сыворотки (SAA)
1-Антитрипсин
1-Кислый гликопротеин
Гаптоглобин
Фибриноген
Незначительное увеличение С3-, С4 компоненты компле
концентрации (на 20-60 %) мента
в течение 48 ч
Церулоплазмин
Умеренное увеличение
конц-ии (в 2-5 раз) в
течение 24 ч
СИНДРОМ ТОКСИЧЕСКОГО ПОРАЖЕНИЯ
ГЕПАТОЦИТОВ
 Интоксикация, при которой явления цитолиза
отсутствуют, но функция гепатоцитов
нарушена
 Повышение - ГТ - первый симптом
токсического действия алкоголя
 Повышение активности - ГТ в сочетании со
значительным повышением активности АСТ,
превышающим возрастание АЛТ - показатель
массивного повреждения печени
СИНДРОМ ТОКСИЧЕСКОГО ПОРАЖЕНИЯ
ГЕПАТОЦИТОВ
Септическая интоксикация печени
Токсины, которые не
зависят от метаболизма
печени, действуют в
первую очередь по
периферии печеночной
дольки.
Микровезикулярный
стеатоз по ходу артерий,
в которых присутствует
токсин
СИНДРОМ ТОКСИЧЕСКОГО ПОРАЖЕНИЯ
ГЕПАТОЦИТОВ
гипоксия и
токсины, которые
метаболизируются в
печени, вызывают
повреждения в
центре дольки
Жировая дистрофия печени
Аноксия, связанная с
метгемоглобинемией,
снижено окисление
жирных к-т.
Повреждены
центральные клетки
печеночной дольки
из-за нарушения
переноса кислорода
Синдром недостаточности синтетических процессов в гепатоцитах
Синдром проявляется снижением синтеза:





холинэстеразы
факторов свертывания крови (протромбин)
транспортных белков (альбумин)
липопротеидов (ЛПОНП, ЛПВП)
желчных кислот
Синдром часто возникает как следствие
токсического действия фармпрепаратов
 цитостатики
 эстрогены
 инсектициды
ВИРУСНЫЙ
ГЕПАТИТ
Вирусный гепатит в Мире
 Более 350 млн носителей гепатита В
 Более 150 млн носителей гепатита С
 Ежегодно 1 миллион человек погибает от
патологи, связанной с вирусными
гепатитами


700 000 – цирроз печени
300 000 – первичный рак печени
ХАРАКТЕРИСТИКА
ВИРУСНЫХ ГЕПАТИТОВ
ГЕПАТИТ
A
Нуклеин.
РНК
Кислота
Основные IgM anti-HAV
диагности
ческие
IgG anti-HAV
маркеры
HAV в
фекалиях
Носительство
Хронизация
Молниен.
гепатит
Рак
печени
Переда
вируса
Наличие
вакцины
РНК ВГА
B
2-х цеп.
ДНК
HBsAg
HBeAg
anti-HBc IgM
Anti-HBc
Anti-HВe
Anti-HBs
ДНК ВГВ
C
РНК
D
РНК
E
РНК
F
ДНК
G
РНК
Anti-HСV
Anti-HDV
Anti-HЕV
нет
РНКВГG
IgM-antiHCV
IgM-antiHDV
IgM-antiHЕV
РНК ВГС
РНК ВГД
РНК ВГЕ
TTV
1-цеп.
ДНК
ДНКTTV
нет
есть
есть
есть
нет
?
есть
есть
нет
до 5 %
60 - 80 %
15 - 20 %
нет
?
?
?
0,01-0,5 %
<1%
0,5 - 1 %
1 - 25 %
1%
?
?
?
нет
фекальнооральная
есть
парентеральная
есть
парентеральная
есть
парентеральная
есть
есть
нет
нет
antiHGV
нет
нет
?
?
фекально- парен парен фек-ор
оральная терал терал парен.
нет
нет
нет
нет
ВИРУСЫ ГЕПАТИТОВ и
ВИРУСЫ, ПРЕТЕНДУЮЩИЕ НА ЭТУ РОЛЬ
 ВИРУСЫ С ПАРЕНТЕРАЛЬНОЙ ПЕРЕДАЧЕЙ
ГЕПАТИТА В
ГЕПАТИТА D
ГЕПАТИТА С
ГЕПАТИТА G
TTV
SEN
 ВИРУСЫ С ФЕКАЛЬНО- ОРАЛЬНОЙ ПЕРЕДАЧЕЙ
ГЕПАТИТА А
ГЕПАТИТА Е
 ВИРУСЫ ГЕПАТИТОВ НИ А – НИ G
Вирус гепатита А (HAV)
характеристика
 РНК-вирус, очень устойчив, культивируется in vitro
 Гепатит А -кишечная инфекция с оральнофекальным способом передачи
 Имеет глобальное распространение, с ним
контактирует 70-90 % населения планеты
 С 2000 наблюдается подъем заболеваемости, это
касается и Северо-Кавказского региона
 Раньше рассматривалась как детская инфекция,
сейчас натбольшаязаболеваемость среди подростков
и взрослых в возрасте 20 – 29 лет
 Свыше 90 % -бесжелтушная форма
Гепатит А
инфекционный период
 Кишечная локализация отсутствует, ЖКТ только
место внедрения и резервуар после репликации
вируса в печени
 Вирус через воротную вену идет в гепатоциты
 Инкубационный период 10-50 дней, oбычно < 1
месяца
 Клиническим симптомам предшествует
нецитопатическая репликация вируса в
гепатоцитах (7-10 дней), в это время  АЛТ, вирус
выходит с желчью в кишечник
Гепатит А
клиника
 За периодом скрытой репликации следует
поражение гепатоцитов с развитием клиники
острого гепатита
 С этого момента больной незаразен для
окружающих
 Объем поражения печени ограничен, не
выходит за пределы фокальных повреждений
 Фульминантный гепатит (массивный некроз
гепатоцитов) практически отсутствует
Характеристика вирусов гепатита А, В и С
Anti-HAV -антитела против HAV (IgM и IgG),
маркер инфекции, показывает наличие иммунитета
против гепатита А
IgM anti-HAV - доказывает острую инфекцию
гепатита А
HBsAg - поверхностный белок вируса гепатита В,
ранний маркер острой и хрон. вирусной инфекции,
HBсAg -ядерный белок геп.В, anti-HBc
положительны после инфекции (острой и хронич.
HBеAg -модиф. ядерный антиген(HBсAg) указывает на высокую степень инфицированности
ДНК HBV - прямое определение вируса
РНК HCV- прямое определение вируса гепатита С
IgM-anti HCV - маркер острой вирусной инфекции
Аnti HCV - маркер инфекции гепатита С
Течение острого гепатита А
Лабораторная диагностика гепатита А
•Нарастание титров антител anti-HAV- IgM в
желтушном периоде
•Нарастание титров антител anti-HAV- IgG в период
реконвалесценции
•Определение лейкопении, относительного
лимфоцитоза, замедление СОЭ
•Определение конъюгированного (прямого)
билирубина
•Активность АЛТ и АСТ свидетельствует об
интенсивности цитолиза гепатоцитов
Лабораторная диагностика гепатита А
тест anti-HAV- IgM
 Гепатит А - единственная форма
гепатита, при острой форме которого в
100 % случаев есть IgM
 Тест anti-HAV- IgM : обнаружение даже в
1 пробе - свидетельство текущей или
недавней инфекции
 Тест anti-HAV- IgM используется в
эпидемиологической практике
Гепатит В
 Серьезная проблема здравоохранения
 100 % эффективного лечения не существует
 Наилучший путь снижения заболеваемости профилактика
 Передается через зараженные вирусом жидкости
человека
 Существует угроза заражения, связанная с
профессией или образом жизни
 3 % от всех заболеваний – медицинские
работники: хирурги, гинкологи, работники
службы крови
 Всеобщая вакцинация - реальная
действительность сегодня
Вирус гепатита В (HBV)
 ДНК-вирус
 На Земном Шаре около 5 % людей
инфицировано HBV
 У большинства в анамнезе нет острого
гепатита, но они носители HBV после
субклинической инфекции
 Способен персистировать в гепатоцитах,
поэтому продолжатся инфекция
Исходы гепатита В
Гепатит В
характеристика на 1998 г
 3-4 % случаев инфицирования при переливании
крови пропускается
 Специфическая профилактика законодательно
закреплена в календаре профилактических прививок
 В 1997 г привоты 68 тыс. человек из групп риска, в
1998 г 323 тыс., в 1999 г. 308 тыс.
 За счет федерального бюджета закуплена вакцина
для прививок новорожденным
 В 2001 г закуплено доз препарата, которого
недостаточно для вакцинации подростков, нужны
средства из местных бюджетов
Факторы риска заражения гепатитом В,
связанные с образом жизни







Препараты крови
Медицинские учреждения
Тюрьмы
Наркомания
Сексуальная активность
Младенцы у матерей-носителей вируса
Районы с высокой эндемичностью
Распределение гепатита В по возрастным
группам в Российской Федерации
Гепатит В
клиника
 Клиническая реконвалесценция не всегда
сочетается с вирусологическим выздоровлением
 У 10% зараженных бессимптомное течение, однако
формируется хроническая (персистирующая)
инфекция
 «Застрявший» в гепатоцитах вирус может
спонтанно элиминироваться, а может
персистировать и заболевание эволюционирует до
цирроза печени и малигнизации с развитием
первичного рака печени
Гепатит В
иммунологический надзор
 Гепатоциты, несущие HBV, как правило
распознаются системой иммунного надзора
 Зараженные гепатоциты подвергаются
уничтожению через Т-зависимый цитолиз
и/или апоптоз
 Цитолиз является:


механизмом уничтожения вируса,
основой формирования хронического гепатита
Характеристика вирусов гепатита А, В и С
Anti-HAV -антитела против HAV (IgM и IgG),
маркер инфекции, показывает наличие иммунитета
против гепатита А
IgM anti-HAV - доказывает острую инфекцию
гепатита А
HBsAg - поверхностный белок вируса гепатита В,
ранний маркер острой и хрон. вирусной инфекции,
HBсAg -ядерный белок геп.В, anti-HBc
положительны после инфекции (острой и хронич.)
HBеAg -модиф. ядерный антиген(HBсAg) указывает на высокую степень инфицированности
ДНК HBV - прямое определение вируса
РНК HCV- прямое определение вируса гепатита С
IgM-anti HCV - маркер острой вирусной инфекции
Аnti HCV - маркер инфекции гепатита С
Изменение маркеров инфицирования при остром гепатите В
Клинические
симптомы
Инфекция
Anti HBc (IgGAg + IgM)
HBsAg
Anti-HBs
НВеAg
Anti-HBe
Anti-HBc IgM
0
2
4
6
8
10
12
недели
инкубация
острая фаза
реконвалесценция
выздоровление
3 - 12 нед.
2 - 12 недель
2 - 16 недель
от 5 месяцев до нескольких
лет
потенциальное
инфицирование
иммунитет
период инфицирования
Гепатит В
HBsAg
 Ключевой диагностический тест
 Первый маркер инфекции (появляется через
3-5 недель инфицирования)
 При благоприятном течении HBsAg
исчезает через 4-6 месяцев
 Если этого не происходит - диагностируется
хронический гепатит В
 Элиминация HBsAg из крови считается
критерием выздоровления
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА
ГЕПАТИТА В
 ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ НАБОРОВ ДЛЯ
ВЫЯВЛЕНИЯ HBsAg - 0,5-0,1 нг/мл
 СЛАБОПОЗИТИВНЫЙ КОНТРОЛЬ
(1 нг/мл) в КАЖДОМ НАБОРЕ.
 ВНЕДРЕНИЕ В СЛУЖБУ КРОВИ
ДЕТЕКЦИИ ДНК HBV
Гепатит В
HBсAg
 HBсAg -ядерный белок вируса гепатитаВ
 Может быть маркером вирусной инфекции
 В практической работе не используется
Гепатит В
HBеAg




Секретируется зараженными гепатоцитами
Является маркером вирусной инфекции
быстрая элиминация - благоприятный прогноз
Присутствие в крови более 2 мес свидетельствует о
хронизации гепатита В
 Хронический HBеAg (+) (позитивный) - наиболее
опасен
 Хронический HBеAg (-) (негативный) -интегративная
форма , может закончиться самоизлечением
 Активное лечение (интерфероном) применяют только
при HBеAg (+)
Гепатит В
HBV-ДНК
 Определяется с помощью полимеразной
цепной реакции (ПЦР)
 Абсолютный и высокочувствительный
критерий репликативной инфекции и
вирусемии
Гепатит В
Анти- HBs
 Антитела к HBs в остром периоде инфекции
отсутствуют
 Появляются в период реконвалесценции, через 2-4
нед. после исчезновения HBsAg
 Сохраняются пожизненно
 Являются индикатором резистентности к HBV
 Определение Анти- HBs - обязательная процедура
при вакцинации против гепатита В, т.к. вакцина это рекомбинантный HBsAg
 После вакцинации Анти- HBs появдяются у 80 %
вакцинированных в титре > 500 мМ/мл
Естественное снижение титра Anti-HBs
антител при разном исходном уровне
Ед./л
Уровень, при
котором
рекомендуется
проведение
прививки против
гепатита В
Месяцы
Рекомендуемые сроки вакцинации от гепатита
В в зависимости от уровня Anti-HBs в крови
Anti-HBs (Ед/л) Рекомендуемые
сроки вакцинации
< 10
Немедленно
11 – 100
Через 3 – 6 месяцев
101 – 1000
Через 1 год
1001 – 10000
Через 3,5 года
> 1000
Через 7 лет
Гепатит В
Анти- HBс IgM
При остром гепатите:
 Анти- HBс IgM - маркеры активной вирусной
репликации
 Свидетельство острой фазы гепатита В
 Максимальный уровень совпадает с желтушным
периодом
При хроническом гепатите:
 Анти- HBс IgM (+) - у больных происходит
активная вирусная репликация
 Анти- HBс IgM (-) - форма без вирусной
репликации
Гепатит В
Анти- HBс IgG
 Достигают максимума через 5-6 месяцев
после появления HBsAg
 Циркулируют пожизненно , нередко в
высоких титрах
Гепатит В
Анти- HBе
 Обнаруживаются в поздний период
заболевания (на 9-20 неделе)
 Длительно циркулируют в крови, иногда
пожизненно
 Их появление -благоприятный признак ,
свидетельствующий о прекращении
репликации вируса
Гепатит С (HCV)
 Регистрируется с 1994 г., заболеваемость 95
г. -7 чел., 97 г. - 14, 98 - 21 чел/100 тыс.
 Протекает с желтухой в 20 % случаев, из них
в 60 % выход на цирроз печени
 Вирус очень быстро меняется по субтипам
 Время полувыведения 2,5 ч при очень
высокой продуктивности, за день образуется
1012 частиц
 Организм не успевает с ним справиться
 До 20 % HCV присутствует в клетках крови
ВИРУС ГЕПАТИТА С
 Основное место репликациигепатоцит
 Семейство флавивирусов, род
Гепацивирусов
 Инактивируется при t+60°C-в
течение 30 минут, при t+100°C-2
минуты
 РНК содержащий вирус
Гепатит С
трудности




Нет активной клиники
Отсутствует вакцинация
Характерна высокая изменчивость вируса
Лечение интерфероном требует затрат 4-5
тысяч USD/год, лечение охватывает 2-3
года
 Подтверждается инфекция только ПЦР
анализом
Структурные элементы HCV
Оболочка
Клеточная мембрана
Core (p21)
РНК
Вирус гепатита С
РНК- вирус
РНК HCV- прямое определение вируса гепатита С
IgM-anti HCV - маркер острой вирусной инфекции
Аnti HCV - маркер инфекции гепатита С
Гепатит С
диагностика
 ИФА-диагностика не позволяет надежно выявлять
гепатит С
 Антитела появляются только через 3 месяца
инфицирования, после излечения длительно
сохраняются
 Подтверждается гепатит С только ПЦР-анализом
 «Домашние тесты» плохие (Михайлов М.И.)
 Стандартность: необходимо, чтобы тесты выявляли 0,5
нг\мл белка вируса
 Самое основное - вести динамическое наблюдение за
больным
Организация HCV Генома
Гипервариабельный регион
Структурная
5’ NCR
C
Core
белок
E1
Не структурная область
E2
NS2
NS3
NS4
металло-протеаза
Оболочечные
гликопротеины
Протеаза Хеликаза
NS5A
Неизвестно
NS5B
Репликация
3’ NCR
РОССИЙСКИЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ
ПРЕПАРАТЫ (РЕКОМБИНАНТНЫЕ АНТИГЕНЫ)
ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИ-HCV
№ Фирма (название)
1
2.
3.
4.
5.
6.
7.
НПО «Диагностические
Препараты»,Н.Новгород
«ИФА-Анти-НСV)
ПКБ им.Мечникова, Москва,
«ГепаСкрин»,
«ГепаСкан»
ЗАО БК «Биосервис»
«ГепаСкрин»,
«ГепаСкан»
ЗАО «Вектор Бест»
,Новосибирск,
«Рекомбибест анти-ВГС»
«ЭКОлаб», Электрогорск,
«ЭКОлаб-ВГС»,
ЗАО «МБС», Новосибирск,
«ВГС-ДСМ»
ЗАО «ДИАплюс», Москва,
«АНТИ-НСV»
Время
Анализа
(минуты)
Белки
кодированные
Зонами РНК HCV
120
С-22;
NS3; NS4; NS5
75
105
С-22;
NS3; NS4; NS5
75
105
С-22;
NS3; NS4; NS5
Core;
NS3; NS4; NS5
85
85
90
55
C-22;
NS3; NS4
С-22;
NS3; NS4; NS5
Core;
NS3; NS4; NS5
ИЗМЕНЕНИЕ ЧИСЛА
УЧАСТНИКОВ РАЗДЕЛА
“ГЕПАТИТ С” с 1997-1999г.г.
250
200
150
100
50
0
уч-ки ФСВОК-97
уч-ки ФСВОК-98
уч-ки ФСВОК-99
РЕЗУЛЬТАТЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ anti-HCV В ЦИКЛАХ
1998-99 г.г.(%-лабораторий правильно решивших задачу)
80
70
60
50
40
30
20
10
0
1 цикл
1998г.
2 цикл
1998г.
1цикл
1999г.
2цикл
1999г.
3 цикл
1999г.
Острый гепатит С
РНК ВГС
ALT
anti-core/NS3
IgM
anti-core
anti-NS4
3
6
дни недели
12
Острый гепатит
18
24
1
года
4
7
10
13
Хронический гепатит С
РНК ВГС
ALT
anti-HCV-EIA
//
IgM
//
3
дни
6
недели
12
Острый гепатит
18
24
1
года
Хронический
гепатит
5
Хронический
гепатит
с малой
активностью
10
Хронический
гепатит с
высокой
активностью
15
20
Цирроз
/ГКК
ВЫЯВЛЕНИЕ CORE- АНТИГЕНА ВИРУСА
ГЕПАТИТА С в ИФА
Инфицирование РНК
HCV Ag
0
14
13
ИФА 3.0 ИФА 2.0
70
80
J.M.Sanches (Испания,1999) :
Обследовано: 6328 доноров крови негативных по анти-HCV
Core Ag HCV выявлен: у 26 (0,41%), подтвержден у 13 (0,21%)
B.M.Bruzzone et al (Италия,2000):
Обследовано: 1500 доноров крови негативных по анти-HCV,
Core Ag HCV выявлен: у 4 (0,26%)
A.M.Courouse et al.
Обследовано: 93 больных острым и хроническим гепатитом С
позитивных по РНК HCV и негативных по анти-HCV,
Core Ag HCV выявлен: у 81 (87%)
ИФА 1.0
150 (дни)
Почему используется ПЦР тест в
диагностике гепатита С
Применение в диагностике
гепатита C
HCV РНК как диагностический маркер
Аnti-HCV негативные
• Иммуносуппрессивные пациенты
• РНК HCV появляется в острой фазе заболевания до
появления anti-HCV
• Новорожденные от anti-HCV позитивных • РНК HCV обнаруживается у новорожденных
матерей
• Период окна
• РНК HCV может обнаруживаться через 1-2 недели
после инфицирования
Аnti-HCV позитивные
• подтверждение
• РНК HCV подтверждающий тест
• неопределенный результат при
выявлении anti-HCV
• Исчезновение РНК HCV свидетельствует об элиминации
вируса
Полимеразная цепная реакция
(ПЦР-анализ) при гепатите С
Тест Amplicor HCV monitor (фирма Рош)
 Определение уровня виремии до назначения
противовирусной терапии
 Мониторинг эффективности противовирусной терапии
 Прогноз
 Диагностика острой инфекции
 Диапазон определений 100-1000 копий /мл
 Высокая воспроизводимость
 Точный количественный анализ всех генотипов вируса
гепатита С
Вирус гепатита D (HDV)
дельта-инфекция
 Мелкий РНК-вирус
 Проникает только в гепатоциты,
зараженные гепатитов В
 Не экспрессируется на поверхности
гепатоцитов, не принимает участия в Тклеточном иммунном ответе
 Обладает прямой цитопатичностью
Вирус гепатита G
 РНК - вирус
 В разных регионах вирус G может вести
себя по-разному
 Для диагностики может быть
использован только ПЦР анализ
Вновь открываемые вирусы
 Около 10 % гепатитов остаются не
расшифрованными
 Название вновь открываемых вирусов стали
давать по инициалам больных (TTV, SEN)
 В разных регионах вирусы могут вести себя
по-разному
 Для диагностики новых вирусов может быть
использован только ПЦР-анализ
 Новые вирусы не так опасны, как вирусы
гепатита В и гепатита С
Вирус гепатита TTV
 Известно 16 вариантов TTV вируса, открыто
несколько изолянтов (Японский)
 По названию - посттрансфузионный, но выявляется в
желче, фекалиях, распространяется орально
 Обнаружен в мясе животных (куры, свиньи)
 Методом ПЦР выявляется во Франции в 1,5 %, в
России в 10 %, в Нигере > 50% случаев
 Вызывает ли гепатит ? Америка -нет, Япония - да
 Выявляется чаще у пациентов с нормальной АЛТ,
чем у пациентов с  АЛТ
 Гепатит при алкоголизме протекает тяжелее, если
есть TTV
ХАРАКТЕРИСТИКА ТТ-ВИРУСА




СФЕРИЧЕСКАЯ ЧАСТИЦА
РАЗМЕР ЧАСТИЦЫ - 30-50 нм.
ЛИПИДНАЯ ОБОЛОЧКА ОТСУТСТВУЕТ
ГЕНОМ – ОДНОЦЕПОЧЕЧНАЯ
КОЛЬЦЕВАЯ ДНК

ПОЛЯРНОСТЬ ГЕНОМА НЕГАТИВНАЯ
Три поколения ПЦР-систем
для выявления ДНК ТТV
I-поколение: клон N22 (T.Nishizawa,1997)
II-поколение:ORF I (H.Okamoto,1998)
III-поколение:
НКО (M.Takahashi,1999)
Чувствительность систем
ЧАСТОТА ВЫЯВЛЕНИЯ ТТV СРЕДИ
ПЕРВИЧНЫХ ДОНОРОВ КРОВИ
РАЗЛИЧНЫХ РЕГИОНОВ РОССИИ
Город
n
+ДНК ТТV
II-генерация
+ДНК ТТV
III-генерация
Москва
60
12 (20,0%)
27 (45,0%)
Казань
56
12 (21,4%)
25 (44,6%)
Липецк
68
16 (23,5%)
нет данных
Череповец
60
16 (26,7%)
30 (50,0%)
Екатеринбург
60
17 (28,3%)
33 (55,0%)
Хабаровск
60
19 (31,7%)
32 (53,3%)
ЧАСТОТА ВЫЯВЛЕНИЯ ДНК TTV в
СЫВОРОТКАХ КРОВИ КОРОВ, КУР и
СВИНЕЙ ( Тест III-поколения)
СВИНЬИ
(n=60)
18,3%
КУРЫ
(n=60)
16,7%
КОРОВЫ
(n=60)
0,00%
12,5%
5,00%
10,00% 15,00% 20,00%
Синдром снижения инактивации
токсических веществ
 Детоксикацию осуществляют ферменты
эндоплазматического ретикулума конъюгированием
токсинов с глюкуроновой кислотой, глутатионом и
экскрецией в желчь
 Оценку детоксикационной функции печени
проводят, используя нагрузочные тесты с
галактозой, меченными соединениями
 При печеночной коме детоксикационную функцию
печени оценивают по содержанию в крови аммиака
NS 5
NS 4
NS 2
5-1-1
C100-3
E2
NS 3
Control
C22-C
C33-C
Core
E1
SOD
POS
4+
NEG
POS
2+
IND
IND
КОНТРОЛЬНАЯ ПАНЕЛЬ СЫВОРОТОК КРОВИ ДЛЯ
ОЦЕНКИ КАЧЕСТВА ВЫЯВЛЕНИЯ ANTI-HCV
Образец
№ Наличие ANTI-HCV
Результат
1
( - ) негативный
2
( - ) негативный
3
( + ) обязателен к выявлению
4
( + ) обязателен к выявлению
5
( + ) обязателен к выявлению
6 ( + или +/- ) желательно выявить
7 ( + или +/- ) желательно выявить
8 ( + или +/- ) желательно выявить
ВЫЯВЛЕНИЕ CORE- АНТИГЕНА ВИРУСА
ГЕПАТИТА С в ИММУНОФЕРМЕНТНОМ
АНАЛИЗЕ
 Разработан и коммерчески выпускается диагностикум
[“Ortho-Clinical Diagnostic”(CША) и “Kokusai (Япония)] для
выявленя Core Ag HCV в ИФА;
 Определение НСV-инфекции до момента появления антиHCV
 Выявление НСV среди лиц с иммунодифицитными
состояниями инфицированными НСV без анти-HCV
 Высокая специфичность при тестировании крови доноров
 Отсутствие этапа предварительной обработки исследуемого
материала
 Наличие подтверждающего теста
Заболеваемость гепатитом В в России и г.
Москве
1998 год - 65 человек\100 тыс. населения