КАЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ Качественный анализ – раздел аналитической химии, посвященный установлению качественного состава веществ, то есть обнаружению элементов и образуемых ими ионов, входящих в состав и простых, и сложных веществ. Химические реакции, пригодные для качественного анализа, должны сопровождаться заметным внешним эффектом (аналитическим эффектом). Это может быть: • выделение газа • изменение окраски раствора • выпадение осадка • растворение осадка • образование кристаллов характерной формы. ОФОРМЛЕНИЕ ОТЧЕТА № про бир ки Растворы веществ 1 Альбумин 2 Глюкоза 3 Полисахарид 4 Сок квашеной капусты Используемые реактивы Окраска продукта Качествен ная реакция Чем обусловлена реакция ФУНКЦИЯ КАЧЕСТВЕННЫХ РЕАКЦИЙ Для аминокислот, постоянно встречающихся в составе белков, разработано множество цветных (в том числе именных) реакций. Многие из них высокоспецифичны, что позволяет определять ничтожные количества той или иной аминокислоты. Надо помнить, что все качественные реакции – это реакции не собственно на белки, а на определенные аминокислоты, входящие в их состав. ЦВЕТНЫЕ РЕАКЦИИ НА БЕЛКИ 1. Биуретовая реакция Определяет наличие пептидной связи в растворе исследуемого соединения К 1 мл раствора белка добавить 1 мл раствора едкого натра, затем по каплям добавить раствор сернокислой меди (медного купороса) Аналитический эффект: раствор приобретает фиолетовый цвет. Первоначально пептидные группы полипептида претерпевают в щелочной среде енолизацию. Енольная форма полипептида взаимодействует с гидроксидом меди и образует окрашенный в сине-фиолетовый цвет комплекс. Биуретовая реакция обусловлена наличием пептидной связи, которая образует в щелочной среде с солями меди комплексную соль : ЦВЕТНЫЕ РЕАКЦИИ НА БЕЛКИ 2. Ксантопротеиновая реакция Определяет присутствие в белке ароматических и гетероциклических - аминокислот : триптофана, фенилаланина, тирозина, гистидина. К 3 мл раствора белка осторожно добавить 1 мл азотной кислоты (конц.). Затем нагреть до кипения. После охлаждения добавьте по каплям концентрированной раствор щелочи. Аналитический эффект: сначала раствор приобретает желтый цвет. Аналитический эффект: затем образуется оранжево-красное окрашивание. Реакция обусловлена образованием солей таутомерных нитроединений, образующихся после нитрования азотной ароматических аминокислот с последующей обработкой щелочью. ациформ кислотой УГЛЕВОДЫ МОНОСАХАРИДЫ 1. Проба Подобедова–Молиша (эта реакция является общей для углеводов). К 1 мл раствора глюкозы (лактозы, фруктозы и др.) добавьте 1-2 капли 10 % спиртового раствора α-нафтола и 4-6 капель конц. H2SO4 (работать очень осторожно). Аналитический эффект: на границе раздела двух слоев образуется фиолетовое кольцо (если вместо α-нафтола взять раствор тимола, то образуется красное кольцо). Реакция основана на том, что при действии концентрированной серной кислоты из пентоз получается фурфурол, а из гексоз – 5-оксиметилфурфурол, которые при конденсации с нафтолом образуют окрашенные соединения УГЛЕВОДЫ МОНОСАХАРИДЫ 2. Проба на восстановление солей меди. К 2 мл раствора глюкозы (лактозы, фруктозы, маннозы) добавьте 1 мл раствора едкого натра и 3 капли раствора сульфата меди. Нагрейте до кипения. Аналитический эффект: наблюдается образование желтого осадка Cu(OH)2, который при дальнейшем нагревании переходит в красный осадок Cu2О. УГЛЕВОДЫ ПОЛИСАХАРИДЫ К раствору крахмала добавьте 2–3 капли раствора йода в KJ. Аналитический эффект: окрашивание раствора в синий цвет для водного раствора крахмала. Реакция основана на образовании нестойкого адсорбционного соединения йода с амилозой АСКОРБИНОВАЯ КИСЛОТА Витамин С – аскорбиновая кислота, легко окисляется раствором йода (Люголя) согласно уравнению: С6Н8О6 + I2 = С6Н6О6 + 2HI ГИДРОЛИЗ ПОЛИСАХАРИДОВ Гидролиз полисахаридов происходит в разбавленных растворах минеральных кислот (или под действием ферментов). При этом в макромолекулах разрываются связи, соединяющие моносахаридные звенья гликозидные связи (аналогично гидролизу дисахаридов). Реакция гидролиза полисахаридов является обратной процессу их образования из моносахаридов. Полный гидролиз полисахаридов приводит к образованию моносахаридов (целюллоза, крахмал и гликоген гидролизуются до глюкозы): (C6H10O5)n + nH2O (H+) nC6H12O6 При неполном гидролизе образуются олигосахариды (в том числе, полисахариды). Способность полисахаридов к гидролизу увеличивается в ряду: целлюлоза < крахмал < гликоген