Осин Н.С.

ИММУНОЧИПЫ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ
ИНФЕКЦИОННЫХ И
СОМАТИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
Осин Н.С. –начальник отдела ФГУП ГОсНИИБП,
доктор биологических наук
Volokolamskoye shosse, 75/1
Moscow 125424, Russia
Tel/Fax (+7 495) 490-5704
immunosс@immunoscreen.ru
www.immunoscreen.ru
Осин Н.С., генеральный директор
ЗАО «ИММУНОСКРИН»
ФОРМАТЫ ИММУНОЧИПОВ:
КАРТРИДЖИ, СЛАЙДЫ, ПРОБИРКИ, МИКРОПЛАНШЕТЫ
МИКРОПЛАНШЕТЫ ИМЕЮТ ПРЕИМУЩЕСТВА ДЛЯ РЕШЕНИЯ ЗАДАЧ
МАССОВОГО СКРИНИНГА: ПРОИЗВОДИТЕЛЬНОСТЬ,
ЭКОНОМИЧНОСТЬ, УДОБСТВО В РАБОТЕ
Производство наборов
реагентов для неонатального
скрининга
Производство наборов
реагентов для неонатального
скрининга
Приготовление
эритроцитарной массы
Производство наборов
реагентов для неонатального
скрининга
Контрольные и калибровочные
пробы
Производство наборов
реагентов для неонатального
скрининга
Лиофилизация компонентов
наборов
Производство наборов
реагентов для неонатального
скрининга
Подготовка (блокировка)
микропланшетов
Производство наборов
реагентов для неонатального
скрининга
Контроль компонентов наборов
Производство наборов
реагентов для неонатального
скрининга
Контроль компонентов наборов
ФОСФАН
МИКРОЭРРЭИ
ФОРМИРУЮТ С
ПОМОЩЬЮ
НАНОПЛОТТЕРА
МИКРОИГЛАМИ
ЗАПОЛНЕННЫМИ
ИММУНОРЕАГЕНТАМИ
ОТЛАДКА ТЕХНОЛОГИИ
НАНЕСЕНИЯ МИКРОПЯТЕН ИЗ
АНТИТЕЛ
СХЕМЫ ПРОВЕДЕНИЯ ФОСФОРЕСЦЕНТНОГО ИММУНОАНАЛИЗА
1. Прямой одностадийный вариант
Рисунок 4
1. Специфические антитела, сорбированные на дно лунки, в объеме 1 мкл
2. Аг в неизвестных или контрольных пробах.
3. Специфические антитела, меченные Pt-копропорфирином III.
2. Непрямой двухстадийный вариант
Рисунок 5
1. Специфические антитела, сорбированные на дно лунки, в объеме 1 мкл
2. Антиген в неизвестных или контрольных пробах
3. Специфические антитела, меченные биотином
4. Стрептавидин, меченный Pt-копропорфирином III
ФОСФАН
КОМПЛЕКСЫ ПОРФИРИНА С ПЛАТИНОЙ
ФОСФОРЕСЦЕНТНЫЕ МЕТЧИКИ, КОТОРЫЕ ИЗЛУЧАЮТ
ДЛИТЕЛЬНУЮ ЛЮМИНЕСЦЕНЦИЮ И ОБЕСПЕЧИВАЮТ
УЛЬТРАВЫСОКУЮ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ОБНАРУЖЕНИЯ
МАРКЕРОВ ИНФЕКЦИОННЫХ и СОМАТИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
ФОСФАН -МИКРОПЛАНШЕТНАЯ БИОЧИП - ТЕХНОЛОГИЯ С ПРИМЕНЕНИЕМ
ФОСФОРЕСЦИРУЮЩИХ НАНОЧАСТИЦ
Наночастицы
Микроэррэй
(микрозона)
Лунка с
нанесенными
микроэррэями
96 луночный
микропланшет
Биочип- анализатор ДИАГЕМ
Характеристики микропланшетного биочипанализатора
1.Чувствительность: 0,5 молекулы /кв. µ
2.Разрешение -0,02 мм
3.Производительность- 16 минут 96
луночный микропланшет
4.Линейный диапазон определяемых
концентраций Pt копропорфирина – от 0,5
до 5000 молекул /кв. µ
5.Воспроизводимость -1-2 %
6.Анализ до 25 микрозон Ø 0,2-0,7 мм в
лунке
ФОСФАН
СИГНАЛ ФОСФОРЕСЦЕНЦИИ РЕГИСТРИРУЮТ НА БИОЧИП-АНАЛИЗАТОРЕ
ПОКАЗАН ФРАГМЕНТ ИЗ 8 ЛУНОК С 4 ПЯТНАМИ В КАЖДОЙ
программные средств обработки
ФОСФАН
ФОСФАН
ИНДИКАЦИЯ ПАТОГЕНОВ
Технология
иммуночипов
ФОСФАН
Разработаны
монотесты
(«ЧумаФОСФАН»
«Туляремия-ФОСФАН»
«Антракс-ФОСФАН» «ВКЭ-ФОСФАН»
«ВЭЛ-ФОСФАН»
«КГЛ-ФОСФАН»
«ЛЗН-ФОСФАН»
«ОртопоксвирусФОСФАН»
«Энтеротоксин
ВФОСФАН»
«Холера-ФОСФАН»
«Ботултокс
А-ФОСФАН»
«РицинФОСФАН»), мультиплексные тесты
(«Бактерплекс3/АЧТ-ФОСФАН»
для
определения возбудителей сибирской
язвы,
чумы
и
туляремии,
«Вироплекс3/ККВ-ФОСФАН»
для
определения вирусов
клещевого
энцефалита, крымской геморрагической
лихорадки и ортопоксвирусов (вирус
вакцины) «Вироплекс3/ЗВВ-ФОСФАН»
для определения вирусов венесуэльского
энцефаломиелита лошадей, лихорадки
Западный Нил и ортопоксвирусов (вирус
вакцины),
«Токсиплекс
4/ВХЭРФОСФАН»
для
определения
ботулинического токсина типа А,
энтеротоксина В, холерного токсина и
рицина (ФГА).
№
п/п
Индикация возбудителей,
растительных и бактериальных
токсинов
Порог
обнаружения
1
Чума
5000 м.т./мл; Ф1< 10 нг /мл
2
Сибирская язва
1000 м.т./мл; 10000 спор/мл
3
Туляремия
1000 м.т./мл
4
Клещевой энцефалит
В разведении не хуже чем
ИФА
5
Ортопоксвирусные инфекции
1000
6
Венесуэльский энцефаломиелит
В разведении не хуже чем
ИФА
7
Крымская – Конго геморрагическая
лихорадка
В разведении не хуже чем
ИФА
8
Западный Нил
В разведении не хуже чем
ИФА
9
Холерный токсин
< 10 нг /мл
10
Рицин
< 10 нг /мл
11
Стаф.энтеротоксин В
< 10 нг /мл
12
Ботулинический токсин А
< 10 нг /мл
ООЕ/МЛ
22
КОМПЛЕКТ ДЛЯ ОТБОРА И АНАЛИЗА ПРОБ «ТРЕСТ»
Индикатор
фосфоресценции
импульсный стриповый
“ИФИС”
Комплект индикаторных
средств "КИС-Фосфан"
Укладка для отбора
проб
Комплект предназначен для экспресс–индикации и идентификации патогенов возбудителей опасных
инфекционных заболеваний. Основан на технологии ФОСФАН
НЕОНАТАЛЬНЫЙ СКРИНИНГ
ПРОБЛЕМА РАСШИРЕНИЯ СПЕКТРА
ТЕСТИРУЕМЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
ДО 2000 г - ОДИН ТЕСТ-ОДНО ЗАБОЛЕВАНИЕ
МАЛО КРОВИ, ВЫСОКАЯ ТРУДОЕМКОСТЬ И СТОИМОСТЬ
ТЕСТИРОВАНИЯ, ОТСУТСТВИЕ ТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ ПЛАТФОРМ ДЛЯ
МУЛЬТИПЛЕКСНОГО АНАЛИЗА
ПОСЛЕ 2000 г - ОДИН ТЕСТ- НЕСКОЛЬКО ЗАБОЛЕВАНИЙ
СНИЖЕНИЕ РАСХОДА КРОВИ В РАСЧЕТЕ НА ОДИН ТЕСТ, ПОВЫШЕНИЕ
ПРОИЗВОДИТЕЛЬНОСТИ И СНИЖЕНИЕ СТОИМОСТИ ТЕСТИРОВАНИЯ ЗА
СЧЕТ ПРИМЕНЕНИЯ МУЛЬТИПЛЕКСНЫХ ТЕСТОВ
СКРИНИНГ НОВОРОЖДЕННЫХ
(контроль врожденных аномалий)
ОТБОР ПРОБЫ НА
БУМАЖНЫЙ БЛАНК
Неонатальный скрининг
2009 г. (1723927 обследовано)
Врожденный гипотиреоз – 471
Фенилкетонурия - 210
Адреногенитальный синдром -161
Муковисцидоз – 145
Галактоземия – 47
2010 г.(1781965 обследовано)
Врожденный гипотиреоз – 485
Фенилкетонурия - 242
Адреногенитальный синдром -202
Муковисцидоз – 166
Галактоземия – 62
Врожденный гипотиреоз (Тиротропин,тироксин)
Адреногенитальный синдром (17гидроксипрогестерон)
Муковисцидоз (Иммунореактивный трипсин)
Планируется:
РАСШИРЕНИЕ ПАНЕЛИ ИММУНОХИМИЧЕСКИХ
ТЕСТОВ ДЛЯ НЕОНАТАЛЬНОГО СКРИНИНГА:
МЕДИЦИНСКАЯ ГЕНЕТИКА :
САХАРНЫЙ ДИАБЕТ, ДИАГНОСТИКА ОНКОЗАБОЛЕВАНИЙ
ИНФЕКЦИОННАЯ ДИАГНОСТИКА:
ТОКСОПЛАЗМОЗ, ВИЧ-ИНФЕКЦИЯ, ВИРУСНЫЕ ГЕПАТИТЫ И
ДРУГИЕ ИНФЕКЦИИ.
Пренатальная диагностика синдрома Дауна в 1 и 2
триместре беременности.
Маркеры: Бета субъединица хорионического
гонадотропина, плацентарный ассоциированный с
беременностью белок А;
альфафетопротеин,неконъюгированный эстриол
для определения IgM или IgG антител к возбудителям иксодового
клещевого бореллиоза
(ИКБ, эритемная форма)
Osp C IgM
Cpos
p41/p39/VLSE IgM
100
Тр17+Тр47 IgM
90
DbpA IgG
80
70
p41/p39/VLSE IgG
60
Тр17+Тр47 IgG
50
40
30
20
10
0
1
11
21
Тр17+Тр47 IgG
31
p41/p39/VLSE IgG
41
ser u
DbpA IgG
51
m
61
Тр17+Тр47 IgM
71
p41/p39/VLSE IgM
81
Osp C IgM
91
для диагностики ВИЧ-инфекции
Структура иммуночипа АТ ВИЧ-1,2/АГ р24
Анти р24 МКА
gp41+ gp120
+p24
ВИЧ-1
gp32-36
ВИЧ-2
Анти р24 МКА
Результаты выявления антител к ВИЧ1,2 и антигена р24
в формате мультитеста
Исследуемый образец
Иммуночип АТ ВИЧ-1,2
Результаты выявления АТ к
ВИЧ-1,2 в микрозонах с
рекомбинантными антигенами
Иммуночип АТ ВИЧ-1,2/АГ р24
Результаты выявления АТ к ВИЧ-1,2 и АГ р24 в микрозонах
с рекомбинантными антигенами и МКА к р24 ВИЧ-1
p24
gp41
+
gp41
long
gp12
0
gp32
+gp3
6
p24
+ gp41
+ gp41 long
+ gp120
gp32
+gp3
6
МКА к
р24
МКА к р24
Контрольный положительный образец К+1
(АТ к ВИЧ-1,2)
29,8
12,1
37,8
1,8
49,7
2,3
0,9
0,9
Контрольный положительный образец К+2
(АГ р24 ВИЧ-1,
100 пг/мл))
<1
<1
<1
<1
<1
<1
3,8
3,4
Сыворотки «Стандарт АТ(+)ВИЧ-1»
№13
№14
№15
№16
1,8
1,5
1,1
<1
5,1
3,1
8,9
8,3
2,3
3,9
2,4
3,2
<1
<1
<1
<1
6,1
3,9
6,9
7,1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
Сыворотки «Стандарт АТ(+)ВИЧ-2»
№1
№2
№3
№5
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
5,1
3,9
2,8
3,3
<1
<1
<1
<1
4,9
3,5
3,0
3,7
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
Контрольный отрицательный образец КСыворотки «Стандарт
АТ(-)ВИЧ»
№1
№2
№3
№4
№13
№14
№15
№16
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
<1
Метаболизм андрогенов
Изменения андрогенного статуса
(мужчины)
ФИО
Кортизол
Андростенди
он
Тестостерон
Свободный
тестостерон
Дигидротестостерон
Андростандиол
глюкуронид
SHBG
ДЭА
Пролактин
(150-770
нмоль/л)
(2,4-12,6
нмоль/л)
(9,0-42,0
нмоль/л)
(8,5-52
пг/мл)
(250-990
пг/мл)
(0,44-2,86
нмоль/л)
(13-71
нмоль/л)
(0,8-5,6
мкг/мл)
(64-650
мед/мл)
№
5
Е-в
322,4
6,0
11,3
34,2
960
0,82
11,1
2,9
296
12
Ч-н
265,5
>35,0
296,0
150,0
2500
13,00
3,8
1,5
352
фосфан
RU № 2197732 (2003.01.27)
METHOD FOR DETECTING AND
IDENTIFYING MICROBIAL CELLS AND
VIRUSES
RU № 2190208 (2002.09.27)
DEVICE MEASURING LUMINESCENCE OF
BIOLOGICAL SPECIMENS
RU № 2184970 (2002.07.10)
METHOD OF MULTIANALYTE IMMUNOASSAY
RU № 2066455 (1996.09.10)
MARKER FOR LUMINESCENT
IMMUNOANALYSIS
RU № 2009505 (1994.03.15)
METHOD OF LUMINESCENT
IMMUNOANALYSIS
RU № 2296756 (2005.22.05.)
CHEMICAL COMPOUNDS – THE
COMPLEXIONS OF EUROPIUM ION
SENSITIZERS
ФОСФАН
Дипломы по технологии ФОСФАН, полученные на международных и
Российских выставках
ФОСФАН
БЛАГОДАРЮ ЗА ВНИМАНИЕ