Из пробирок с комбинированной суточной средой,... сальмонелл, или из пробирок с суточной...

Из пробирок с комбинированной суточной средой, показавшей типичную окраску среды для
сальмонелл, или из пробирок с суточной культурой, пересеянной на МПА, проводят серологическое
исследование. Для этого петлей берут небольшое количество культуры из пробирки, эмульгируют в
капле физиологического раствора на предметном стекле. Добавляют каплю поливалентной Осыворотки к раствору и осторожно покачивают предметное стекло, чтобы смешать жидкости.
Положительная реакция на сальмонеллы (агглютинация) наблюдается в течение 30-60 сек.
Обязательная постановка отрицательной реакции (культура+физиологический раствор). Если при
проведении серологического исследования агглютинация не обнаруживается, конечный результат
записывают как отсутствие сальмонелл. Любая агглютинация, котороая появляется на стекле, говорит о
вероятности присутствия сальмонелл.
Серология (от лат. serum — сыворотка), наука о свойствах сыворотки крови. Обычно под серологией
понимают раздел иммунологии, изучающий взаимодействие антител сыворотки с антигенами.
Серологические реакции могут быть прямыми (двухкомпонентными) — агглютинация, пассивная
гемагглютинация, преципитация и др., и косвенными (трёхкомпонентными) — реакция нейтрализации
(например, микроба), реакция торможения гемагглютинации. Из нескольких «простых» складываются
сложные серологические реакции: бактериолиз, реакция связывания комплемента и др. Распространены
также иммунофлюоресцентные методы, основанные на окраске антител (антигенами) флюорохромами.
Особый вид серологических реакций — выявление иммобилизации подвижных форм микроорганизмов
(например, реакция иммобилизации бледных трепонем при сифилисе). Некоторые серологические
исследования проводят не в пробирке, а непосредственно в организме экспериментальных животных.
Серологические реакции применяют в научных и диагностических целях в инфекционной и
неинфекционной иммунологии: их используют, например, при переливании крови, для определения
групп крови, установления видовой и индивидуальной специфичности белков. Серологические
исследования применяют также в эпидемиологии и эпизоотологии для выявления источника инфекции,
серотипа, путей её передачи, эффективности вакцинации и т. п. Реакция между антигенами и
антителами лежит в основе серопрофилактики и серотерапии. Среди основных задач серологии —
разработка методов получения специфических диагностических и лечебных сывороток, оценка их
активности и выяснение механизма действия.
Сы́воротка кро́ви — плазма крови, лишённая фибриногена. Сыворотки получают либо путём
естественного свёртывания плазмы (нативные сыворотки), либо осаждением фибриногена ионами
кальция. В сыворотках сохранена большая часть антител, а за счёт отсутствия фибриногена резко
увеличивается стабильность.
Сыворотку выделяют при анализе крови на инфекционные заболевания, при оценке эффективности
вакцинации (титр антител), а также при биохимическом анализе крови.
Сыворотки используют в качестве лекарственных препаратов при многих инфекционных заболеваниях
(столбняке, дифтерии, гриппе) и отравлениях (яды змей, ботулотоксин).
Сыворотки, меченые ферментами, радионуклидами и люминофорами применяют в диагностике
некоторых заболеваний и в научных исследованиях.
Препараты представляют собой иммунные адсорбированные сыворотки кроликов, содержащие
агглютины к О- и Н-антигенам сальмонелл. В соответствии с серологической классификацией бактерий
рода Сальмонела препараты выпускают в виде моно- и поливалентных О- и Н-сывороток. О-сыворотки:
1; 2; 3; 10; 4; 5; 61; 62; 7; 627; 8; 9; vi; 10; 11; 121,2,3; 122; 123; 13,22; 14,24; 15; 16; 17; 18; 19; 20; 21; 23;
24; 25; 27; 28; 30; 34; 35; 38; 39; 40; 41; 42; 43; 44; 45; 46; 471,2,3; 48; 50; 52; 53; 54; 55; 57; 58; 59; 60; 61;
62; 63; 65; 66; 67. Н-сыворотки: a; b; c; d; eh; enz15; enx; f; g; i; h; k; lv; m; gm; p; q; r; st; s; t; u; x; y; w; v;
z; z6; z10; z13; z15; z23; z24; z28; z29; z32; z36; z39; z42; z51; 1,2; 1,5; 1,6; 1,7; 2; 5; 6; 7.
Поливалентные сыворотки основных групп (A, B, C, D, E) содержат О-антитела против антигенов 1; 2;
3; 4; 5; 61; 62; 7; 8; 9; 10; 12; vi; редких групп (F, G, H, J, I, K, L, M, N, O, P, Q, R, S, T, U, W, X, Y, Z, 52,
53, 54, 55, 57, 58, 59, 60, 61) содержат О-антитела против антигенов: 11; 13; 22; 14; 24; 16; 17; 18; 21; 23;
25; 28; 30; 35; 38; 39; 40; 41; 42; 43; 44; 45; 47; 48; 50; 52; 53; 54; 55; 57; 58; 59; 60; 61.
Поливалентные Н-сыворотки содержат Н-антитела против родственных антигенных комплексов: G-gm,
gp, gq, gpu, fg, fgs, gst, gt, mt, gmt, gms; Z4Z24; Z4Z32; I-1,2; 1,5; 1,6; 1,7.
Титр специфических антител в О- и Н-сыворотках и поливалентных Н должен быть не ниже 1:80, а
поливалентных
О
–
1:40.
Диагностические сальмонеллёзные сыворотки предназначены для серологической идентификации
бактерий
рода
Salmonella
в
реакции
агглютинации
на
стекле.
Препарат
разлит
в
ампулы
по
1
или
2мл.
Выпускают
в
сухом
виде.
Срок годности поливалентных О-сывороток - 3 года, остальных сывороток – 5 лет при хранении в
сухом тёмном месте при температуре 4-80 С.
О-антиген представляет собой полисахаридные цепи, которые соединены с центральным
олигосахаридом. Эта часть ЛПС экспонирована в окружающую среду. Состав О-антигена варьирует в
зависимости от штамма бактерии. Чем протяжённее полисахариды О-антигена, тем хуже гидрофобные
антибиотики проникают через них в бактериальную клетку. Эта часть ЛПС является наиболее
иммуногенной и легко распознаётся иммунной системой хозяина, с чем и связано её название.
Антигенная структура детально изучена Кауфманом, Уайтом, положена в основу современной
серологической классификации бактерий рода Salmonella.
У бактерий рода Salmonella различают два основных антигенных комплекса: О- и Н-антигены. Это
структурные элементы бактериальной клетки. Соматические О-антигены термоустойчивы и
представляют собой липо-полисахариднополипептидные комплексы. Жгутиковые Н-антигены
термолабильны, имеют белковую природу. Кроме того, у бактерий рода Salmonella обнаружен ряд
других антигенов — поверхностных и капсульных. Между капсульными и поверхностными антигенами
не существует резкого разграничения, переход осуществляется постепенно, поэтому оба антигена, и
капсульный, и поверхностный, объединяются под общим названием К-антиген.
Название К происходит от немецкого слова «kapsel». В группе Salmonella доказано наличие трех Кантигенов: антиген 5, Vi-антиген и М-антиген.
Схема серологической классификации сальмонелл разработана Кауфманом и Уайтом. Согласно
предложенной схеме бактерии из рода Salmonella были разбиты на пять больших групп по общности
соматического 0-антигена: А, В, С, D, Е. Оказалось, что О-антигены неоднородны и состоят из двух и
более рецепторов (фракций), которые были обозначены в схеме римскими цифрами (I, II, III и т. д.). В
свою очередь H-антигены, специфические и неспецифические оказались также неоднородными.
Рецепторы специфических H-антигенов были обозначены малыми буквами латинского алфавита, а
рецепторы неспецифических H-антигенов — арабскими цифрами и частично буквами.
Дальнейшее изучение антигенной структуры бактерий из рода Salmonella, выделенных от людей и
животных, обнаруживало все большую сложность этой структуры, сопровождаясь все время открытием
новых О- и H-антигенов, а следовательно, и новых типов. В серологические схемы Кауфмана — Уайта в
1939 г. на II Международном конгрессе микробиологов было введено разделение H-антигена на фазы I
и II с упразднением деления на специфическую и неспецифическую фазы. В обозначении О-антигенов
сальмонелл римские цифры были заменены арабскими.