Среда Шедлера.

Рекомендации по применению плотной и жидкой сред Шедлера.
Агаризованная и жидкая среды Шедлера относятся к числу широко
применяемых в мировой микробиологической практике питательных
сред для культивирования неспорообразующих облигатно анаэробных
бактерий, включая бактероиды, фузобактерии и другие требовательные
микроорганизмы-анаэробы. В качестве источников питания в среду
включены гидролизаты казеина, сои, мяса, экстракт дрожжей, глюкоза.
Редокс-потенциал и рН среды обеспечивают гемин, L-цистин, витамин К,
трис-буфер, дикалия гидрофосфат, натрия хлорид. Это определяет высокий ростовой потенциал среды именно для анаэробных микроорганизмов - возбудителей заболеваний человека. Кроме того, среда может использоваться для роста любых требовательных микроорганизмов (в том
числе аэробных).
Наиболее широко используют плотную питательную среду Шедлера.
С соблюдением правил асептики заменяют резиновую пробку на ватномарлевую. Помещают флакон на водяную баню до расплавления среды
(не кипятить!) и разливают в чашки Петри по 15-20 мл. Перед употреблением в охлажденную до 50°С среду рекомендуют добавлять 5% крови.
Среда не обладает селективными свойствами, поэтому при необходимости в нее могут быть внесены антимикробные добавки для выделения
анаэробных или иных бактерий.
Посев чистой культуры осуществляют по общепринятой методике.
Посев биологического субстрата производят нанесением его на поверхность среды в чашке Петри (1 капля гноя или 2-3 капли другого биосубстрата). Распределяют посевной материал по поверхности агара.
Инкубацию ведут в анаэробных и аэробных условиях в течение суток.
СРЕДЫ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ МИКРООРГАНИЗМОВ К ПРОТИВОМИКРОБНЫМ ЛЕКАРСТВЕННЫМ СРЕДСТВАМ
Получение точных и воспроизводимых результатов при определении
чувствительности микроорганизмов к противомикробным лекарственным
средствам в значительной степени зависит от качества и стандартности
питательной среды. Вот почему во всем мире принято использовать
среду Мюллера-Хинтон. Она была предложена авторами для иных целей, но многолетние исследования показали, что среда обеспечивает
стандартность анализа чувствительности лучше, чем среды другого состава.
Плотную среду Мюллера-Хинтон используют при определении чув-
ствительности методом диффузии антимикробного вещества в засеянный агар из дисков («метод дисков») и методом серийных разведений в
плотной питательной среде (определение минимальных подавляющих
концентраций, МПК). Бульон Мюллера-Хинтон - для определения чувствительности (МПК) методом серийных разведений в двух вариантах:
макроразведений в пробирках и микроразведений в планшетах.
Прежде чем среда попадает в микробиологическую лабораторию,
она проходит специальный контроль. Оценивают цветность, прозрачность, содержание кальция и магния, рН, плотность геля (для агаризованной среды), ростовые свойства, процесс зонообразования при диффузии антибиотиков в засеянный тест-культурами агар и МГК антибиотиков для тест-культур при использовании метода серийных разведений. Диаметр зон и МПК должны соответствовать ранее установленным показателям.
Для отечественной практики плотный и жидкий варианты среды
Мюллера-Хинтон имеют особое значение при определении минимальных подавляющих концентраций методом серийных разведений. О критериях чувствительности микроорганизма (чувствительный, промежуточный, устойчивый) судят, сопоставляя результат с ранее найденными
критическими концентрациями. Они установлены только для МПК, полученных на среде Мюллера-Хинтон. Например, МПК гентамицина для
стафилококков в этом случае ≤ 4 мкг/мл - штамм чувствителен, 8 мкг/мл промежуточен, ≥ 16 мкг/мл - резистентен; для эритромицина ≤ 0,5; 1 - 4;
≥8 мкг/мл; для многих цефалоспоринов - ≤ 8; 16; ≥ 32 мкг/мл и т.д.