Документ 4049572


Для выполнения измерений на полуавтоматическом или автоматическом
биохимическом анализаторах следует:
8.9. Установить программу определения содержания железа согласно таблице:
Наименование параметра
Значение
Метод измерения
Конечная точка
562 (530-590)
Длина волны, нм
Измерение против
дист. вода
Температура реакции
15 – 25 ОС, (37 ОС)
Единица измерения
мкмоль /л
Число знаков после запятой
1
Изменение оптической плотности
Увеличивается
Соотношение рабочего реагента/проба
5:1
Концентрация калибратора, мкмоль /л
17,9
Время реакции, мин
5 (37 ОС)
Верхний предел абсорбции рабочего реагента против воды,
0,2
ед. опт. плот.
Нижний предел абсорбции рабочего реагента против воды,
0
ед. опт. плот.
Границы линейности, мкмоль /л
1 – 180
Минимум нормы, мкмоль /л
7,16*
Максимум нормы, мкмоль /л
31,3*
* Нормальные значения в сыворотке или плазме крови взрослого человека.
8.10. Если результат измерения содержания железа выше 180 мкмоль/л, следует разбавить образец
физраствором (NaCl - 9 г/л) в 2 раза, повторно провести измерение, полученный результат
умножить на 2.
9. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
9.1. Набор реагентов «ЖЕЛЕЗО-ФЗ - UTS» должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя
при температуре +2-8 ОС в течение всего срока годности.
9.2. Срок годности набора указан на этикетке набора.
9.3. Калибратор после вскрытия флакона может храниться при температуре +2–8 ОС в темном месте в
течение всего срока годности.
9.4. Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по
применению набора.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1.Perrotta G. Iron and iron-binding capacity. Kaplan A at al. Clin E.Chem The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto.
Princeton 1984; 1063-65.
2. Itano M. M. Co. St Louis. Toronto. Priceton 1984; 516-522.
3. Burtis A. et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999
4. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
5. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Производится ООО «Эйлитон» по заказу ЗАО «А/О Юнимед».
По вопросам, касающимся качества набора «ЖЕЛЕЗО-ФЗ - UTS» следует обращаться в ЗАО «А/О
ЮНИМЕД» по адресу: 129301, Москва, ул. Касаткина, 3а; Тел. (495) 734-91-31,
8-800-333-91-31,
Факс: (495) 564-86-41;
E-mail: [email protected];
http://www.unimedao.ru
ИНСТРУКЦИЯ
по применению реагентов для количественного определения содержания железа в сыворотке или
плазме крови человека феррозиновым методом
«ЖЕЛЕЗО-ФЗ - UTS»
Набор «ЖЕЛЕЗО-ФЗ - UTS» разрешен к производству, продаже и применению на территории РФ.
Регистрационное удостоверение № ФСР 2010/09374
Информация для заказа набора «ЖЕЛЕЗО-ФЗ – UTS»
Кат. №
Комплектация
ЖЕ-023-100
Р1 (80 мл) +Р2 (20 мл) + калибратор (1мл)
*v – объем фотометрической ячейки анализатора.
Количество
определений
100/v*
1. НАЗНАЧЕНИЕ
1.1. Набор предназначен для количественного определения содержания железа в сыворотке или плазме
крови человека колориметрическим феррозиновым методом в клинико-диагностических лабораториях и
научно-исследовательской практике для целей диагностики заболеваний и контроля проводимого
лечения пациентов.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип действия
2.1.1. Ионы железа Fe3+ в слабокислой среде высвобождаются из переносящего железо белкатрансферрина.
Высвободившиеся
ионы
Fe3+
восстанавливаются
в
двухвалентную
форму
Fe2+
с
2+
помощьюгуанидинхлорида. Ионы Fe в реакции с феррозином образуют окрашенный комплекс по
следующей схеме:
. гуанидинхлорид, рН 5
Трансферрин( Fe3 )2  2e Типол

  
 Fe3  апоТрансферрин
ин
Fe3 гидроксила
  м
 Fe2 
Fe 2 Феррозин

 Окрашенный _ комплекс
2.1.2. Фотометрическое измерение основано на наличии максимума поглощения света при длине волны 562 нм
молекулами окрашенного комплекса. Все остальные компоненты реакционной смеси слабо поглощают свет на этой
длине волны. Таким образом, увеличение оптической плотности реакционной смеси на длине волны 562 (530-590) нм
пропорционально содержанию железа в пробе [1,2].
2.2. Клиническая диагностика
2.2.1. Железо - это компонент, входящий в состав большого количества ферментов и белков. Железо
входит в состав гемоглобина, молекулы которого участвуют в доставке и переносе кислорода клеткам
тканей человека.
Недостаток железа вызывает «железодефицитное состояние» - одно из наиболее распространенных
заболеваний человека.
Высокий уровень железа обнаруживается при наследственном гемохроматозе, циррозе, гепатите и при
повышенном содержании трансферрина. На этом основано клиническое значение анализа [1,3,4].
2.2.2. Клинический диагноз не может быть поставлен по результатам одного анализа, он должен
объединять как клинические, так и лабораторные данные.
3. СОСТАВ НАБОРА
3.1. Поскольку рабочий реагент, содержащий все компоненты для обеспечения химических реакций
(1) и (2) нестабилен, набор «ЖЕЛЕЗО-ФЗ - UTS» поставляется в виде двух реагентов Р1, Р2 и раствора
калибратора.
Компоненты и их состав:
Наименование
Состав
Концентрация
Реагент 1 (Р1)
Ацетатный буфер, рН 4,0
400 ммоль/л
буфер/восстановитель
Гуанидинхлорид
1 ммоль/л
Гидроксиламин
0,6 моль/л
Типол
Реагент 2 (Р2) хромоген
Феррозин
40 ммоль/л
Ацетат натрия
400 ммоль/л
Калибратор
Водный раствор FeCl3
17,9 мкмоль/л (100
мкг/100мл)
4. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
4.1. Набор обеспечивает линейную область определения содержания железа в диапазоне 1 мкмоль/л
(5,6 мг/100 мл) до 180 мкмоль/л (1000 мкг/100 мл), отклонение от линейности не превышает 5%.
Чувствительность – не более 1 мкмоль/л (5,6 мкг/100 мл), коэффициент вариации результатов
определений – не более 5%.
4.2. Качество набора можно оценивать по отечественным или зарубежным контрольным сывороткам,
аттестованным данным методом.
4.3. Нормальные величины содержания железа в сыворотке или плазме крови составляют:
у мужчин 11,6-31,3 мкмоль/л (65-175 мкг/100 мл);*
у женщин 7,16-26,85 мкмоль/л (40-150 мкг/100 мл);*
4.4. Указанные значения даны только для ориентировочных целей, каждая лаборатория должна
установить свои референтные границы.
4.5. Перечень лекарственных препаратов, влияющих на определение содержания железа, приведены в
обзоре [5].
*Результаты сильно зависят от точности выполнения метода.
5 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
5.1. Потенциальный риск применения набора – класс 1.
5.2. Реагенты 1 и 2 содержат кислоты, реагент 2 - феррозин. Следует избегать попадания реагентов на
кожу и слизистые. В случае попадания их на кожу и слизистые оболочки необходимо промыть
поражённые участки большим количеством проточной воды.
5.3. При работе с набором необходимо соблюдать «Правила устройства, техники безопасности,
производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в
лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы
Министерства здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г.).
5.4. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т.к.
образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные
длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирусы гепатита или любой другой возбудитель
вирусной инфекции.
6. ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ
6.1. Спектрофотометр, программируемый фотометр или анализатор, длина волны 562 (540-580) нм,
кювета с длиной оптического пути 10 мм*;
6.2. Дозаторы для отбора жидкостей объемом 200 и 1000 мкл.**
6.3. Термостат, поддерживающий температуру 37 0,5 ОС;
6.4. Физиологический раствор (NaCl, 9г/л);
6.5. Пробирки пластиковые или стеклянные объемом не менее 3 мл***;
6.6. Вода дистиллированная (ГОСТ 6709-72).
*При использовании биохимического анализатора с ненормированной длиной оптического пути
требуется калибровка по сывороточным калибраторам, аттестованным по значению содержания железа.
**Рекомендуется использовать одноразовые пластиковые расходные материалы.
***При использовании стеклянной посуды она должна быть выдержана в течение 6 часов в растворе
HCl (20%) и затем тщательно ополоснута дистиллированной водой и высушена перед использованием.
7. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
7.1. Негемолизированная сыворотка или гепаринизированная плазма крови. Сыворотку или плазму крови
следует отделить от форменных элементов крови как можно быстрее после забора крови. Образцы
стабильны 7 дней при 2 – 8 ОС. Образец можно заморозить единожды для длительного хранения. [1].

8. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Проведение ручного анализа с использованием фотометра или фотоэлектроколориметра.
8.1. Приготовьте рабочий реагент смешиванием 4 частей реагента Р1 и 1 части реагента Р2. Рабочий
реагент стабилен 6 месяцев при температуре 2 - 8 ОС.
8.2. Компоненты реакционной смеси отбирать в количествах, указанных в таблице:
Объем, мкл
Холостая
Холостая
Калибровочная Анализируемая
проба по
проба по
проба, мкл
проба, мкл
реагенту, мкл
образцу, мкл
Рабочий реагент
1000
1000
1000
Реагент 1
1000
Калибратор
200
H2O
200
Анализируемый
200
200
образец
8.3. Пробы перемешать и инкубировать в течение 5 минут при 15 – 25 ОС или 37 ОС.
8.4. Измерить оптические плотности при длине волны 562 (540-580) нм: калибровочной пробы (Акал), а
также анализируемой пробы (Аобр) и холостой пробы по образцу (Ахол/обр) против холостой пробы по
рабочему реагенту.Окраска проб стабильна в течение 30 минут.
8.5. Содержание железа в сыворотке или плазме крови человека в (мкмоль/л) определить по формуле:
С
где:
Аобр  Ахол / обр
Акал
 Cкал
- С – содержание железа,мкмоль/л;
Аобр - оптическая плотность анализируемой пробы против холостой пробы по реагенту, ед.опт.пл.;
Ахол/обр - оптическая плотность холостой пробы по образцу против холостой пробы по реагенту,
ед.опт.пл.;
Акал – оптическая плотность калибровочной пробы против холостой пробы по реагенту, ед. опт.пл.;
Скал – содержание железа в калибраторе, равное 17,9 мкмоль/л.
8.6. Если результаты измерений превышают предел линейности, анализируемый образец следует развести
физиологическим раствором (9 г/л) в 2 раза, провести повторные измерения и полученный результат
определения умножить на 2.