Коррекция свободно-радикальных процессов липосомальными

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА КОРРЕКЦИИ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫХ
ПРОЦЕССОВ ЛИПОСОМАЛЬНЫМИ ФОРМАМИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ
ПРЕПАРАТОВ У ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ НА ФОНЕ ДЕЙСТВИЯ
Кремнева Г.М., Романова Л.В., Литвиненко И.Л., Килинкарова Н.Н., Оверченко В.В.
ГБОУ ВПО Ставропольский государственный медицинский университет
Актуальность темы. В настоящее время появляются многочисленные сообщения о
широком использовании липосом в качестве транспортеров биологически активных веществ
и лекарственных препаратов. Липосомы обладают возможностью in vivo направлять
заключенные в них вещества в определенные органы, позволяют заметно снижать дозу
препарата
при
сохранении
эффективности
биологического
действия.
Токсичность
липосомальных лекарственных препаратов резко снижается, а продолжительность их
биологического действия возрастает [3,5].
Однако в специальной литературе практически отсутствуют данные о применении
липосомальных лекарственных препаратов для коррекции гомеостаза у экспериментальных
животных на фоне действия сальмонеллезного эндотоксина (ЭД), и d-хлорметана (ССl4).
Интенсивность процессов свободнорадикального окисления зависит от состояния
антиоксидантных систем, которые могут изменяться в результате действия сальмонеллезного
ЭД и ССl4.
Большинство ученых считают, что причиной интенсификации ПОЛ являются
активированные фагоциты, продуцирующие активные формы кислорода [2,7], которые
непосредственно действуют на функциональные группы микросомальных ферментов и
ускоряют перекисное окисление липидов в мембранах [1,4]. Обезвреживание перекиси
водорода осуществляется с помощью гемсодержащих ферментов - каталазы и пероксидазы.
Цель и задачи работы. Изучение степени изменений интенсивности перекисного
окисления
липидов
мембран
(ПОЛ),
вызванных
воздействием
на
организм
экспериментальных животных сальмонеллезного ЭД, ССl4 и сравнительная оценка
коррекции данных изменений липосомальными лекарственными препаратами введенными
перорально.
Материалы и методы. Эксперимент проводили в течение 30 суток на 1000 белых
беспородных мышах обоего пола весом 18-20 грамм.
Животных декапитировали и определяли на 3, 10, 20, 30 сутки в крови продукты ПОЛ и
активность ферментов антиоксидантной защиты:
- содержания продуктов малонового диальдегида (МДА) в сыворотке крови по методу В. Б.
Гаврилова, [7];
- каталазы по методу С. И. Крайнева, [6];
- суммарной пероксидазной активности (СПА) в плазме крови по методу А.А. Покровского
[9].
Статистическая обработка результатов исследования проводилась согласно общепринятым
методам с определением средней арифметической ошибки.
Достоверность различий между исследуемыми группами определяли с помощью tкритерия Стьюдента. Статистически достоверными считали отличия, соответствующие
величине ошибки достоверности р<0,05.
Результаты и обсуждение. После введения сальмонеллезного ЭД у животных на 30 сутки
содержание МДА уменьшилось до 4,0±0,32 мкмоль/мл, у группы животных, которым
вводили ССl4, наблюдалось достоверное повышение содержания МДА до 5,10±0,44мкмоль/л
(р<0,05) (норма 3,6±0,06 мкмоль/мл). СПА при сальмонеллезной интоксикации увеличилась
до 1,100±0,046013 ед.опт.пл./мл, а при интоксикации ССl4 активность СПА - до 1,000±0,082
ед.опт.пл./мл (р<0,05) (норма 0,125±0,013 ед.опт.пл./мл) (р<0,05). Активность каталазы после
введения сальмонеллезного ЭД и ССl4 снизилась до 9,25±0,89 ммоль/мл/мин и до 12,60±0,77
ммоль/мл/мин соответственно (р<0,05) (норма 24,00 ±0,23 ммоль/мл/мин).
Коррекцию проводили липосомальными лекарственными препаратами, в которые
включены: аскорбиновая кислота (2,0 мг), АТФ (1,0 мг), α-токоферол (0,5 мкг), селенит
натрия (0,00017 мг), эссенциале (2,5 мг). Лекарственные средства в липосомальной форме
вводили перорально на 2, 5, 8, 11, 14, 17 сутки [10].
В сыворотке крови у животных при лечении сальмонеллезной интоксикации содержание
МДА к концу эксперимента (на 30 сутки) стало ниже нормы – 3,4±0,17 мкмоль/мл, а после
лечения мышей при интоксикации ССl4 уровень МДА достиг нормы. СПА оставалась выше
нормы – 0,312 ±0,021 ед.опт.пл./мл (р<0,05) после лечения мышей при сальмонеллезной
интоксикации,
уровень СПА снижался, но оставался выше нормы – 0,675±0,083
ед.опт.пл./мл (р<0,05) у животных, которым проводили коррекцию липосомальными
препаратами при интоксикации ССl4. Активность каталазы незначительно увеличилась и
составила 10,25±0,62 ммоль/мл/мин после лечения белых мышей с сальмонеллезной
интоксикацией, повышалась и практически достигла нормы – 22,3±0,23 ммоль/мл/мин
(р<0,05) после лечения животных при интоксикации ССl4.
Выводы:
1. Внутрибрюшное ведение ЭД и ССl4 приводило к изменению ПОЛ, но наиболее эти
изменения выражены у животных, которым вводили ЭД.
2. Липосомальные лекарственные препараты, введенные перорально, у животных на
фоне действия ССl4 приводили к концу эксперимента к нормализации уровня МДА
активности каталазы, наблюдалась тенденция к восстановлению СПА.
3. У
животных
при
сальмонеллезной
интоксикации
липосомальные
формы
лекарственных средств, введенные перорально приводили к восстановлению уровня
МДА и имела тенденция к восстановлению СПА и активности каталазы.
Литература
1.
Владимиров, Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах/ Ю.
А. Владимиров, А.И. Арчаков.- М., 1972. –252с.
2.
Губский, Ю.И. Коррекция химического поражения печени/ Ю.И. Губский.- Киев,
1989. – С. 11-14.
3.
Еськов,А.П.Эндотоксикоз.
Модель
и
лабораторная
диагностика/
А.П.Еськов, Р. И.Каюмов, А. Е Соколов//Токсикологич. вестн.- 2001.- №4.- С. 13-16.
4.
Еськов, А. П. Механизм повреждающего действия бактериального эндотоксина/ А.
П. Еськов// Эфферент. терапия.- 2003.- №12.- С. 71-74.
5.
Ефременко, В.И. Липосомы (получение, свойства, аспекты применения в биологии и
медицине)/ В. И. Ефременко.– Ставрополь, 1999. – 263с.
6.
Кушманова, О.Д. Руководство к практическим занятиям по биологической химии/ О.
Д. Кушманова, Г.М.Ивченко. -М, 1974. – 424с.
7.
Камышников, В.С. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и
лабораторной диагностике/В.С.Камышников.-М.,»МЕДпрессинформ»,2004.-589с.
8.
Мартыненко, Л. Д. Перекисное окисление липидов при экспериментальной
сальмонеллезной
инфекции/
Л.
Д.
Мартыненко,
А.
П.
Шевелев,
Симованьян//Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунол.- 1990.- №4.9.
Э.
Н.
С. 7-11.
Покровский, А.А. Биохимические методы исследования в клинике/
А.А.Покровский.- М., 1977. – 168 с.
10. Справочник Видаль (Vidal): лекарственные препараты в России.- М.,2006.- 1632 с.
.