ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ НОВОСИБИРСКОЙ ОБЛАСТИ «Новосибирский центр крови»

ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ
НОВОСИБИРСКОЙ ОБЛАСТИ
«Новосибирский центр крови»
УТВЕРЖДАЮ:
Главный врач ГБУЗ «НЦК»
Хальзов К.В.
____________________
«_15__» октября 2009 г.
Главным
врачам
муниципальных
учреждений
здравоохранения
г.
Новосибирска,
областных
лечебнопрофилактических
учреждений,
центральных районных больниц, гг.
Бердска и Оби, Искитима
ИНФОРМАЦИОННОЕ ПИСЬМО
«Алгоритм определения групповой принадлежности системы
АВО перекрестным способом с использованием
цоликлонов и стандартных эритроцитов»
Заведующая ОМО ГБУЗ «НЦК»
Гребенюк А.А
«14» марта 2009 г.
СОГЛАСОВАНО:
Заместитель главного врача
ГБУЗ ГНОКБ по
орг.-методической работе
Комиссарова Т.В.
Заключение о групповой принадлежности делают на основании
наличия или отсутствия антигенов А и В на эритроцитах, а также
присутствия анти – А и анти – В антител в исследуемой сыворотке.
Оснащение
- цоликлоны анти – А, анти – В, анти – АВ;
- раствор натрия хлорида 0,9%;
- пластинки со смачиваемой поверхностью;
- пипетки;
- стеклянные или пластмассовые палочки;
- стандартные эритроциты О, А, В.
Порядок проведения исследования
1. Промаркировать пластину (ФИО исследуемого лица, специфичность
реагентов анти-А, анти-В, анти-АВ)
2. Нанести на плоскость по одной большой капле (0,1мл) цоликлона анти-А,
анти-В, анти-АВ.
3. На нижнюю часть пластинки под соответствующим обозначением нанести
по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных эритроцитов О, А, В.
4. Из пробирки с исследуемой кровью осторожно взять пипеткой сыворотку
и поместить по одной большой капле (0,1 мл) рядом с подготовленными
стандартными эритроцитами.
5. Этой же пипеткой из пробирки взять исследуемые эритроциты и поместить
по одной маленькой капле (0,01 мл) рядом с каждой каплей цоликлонов.
6. Смешать отдельными чистыми стеклянными палочками каждую каплю
исследуемой крови с соответствующим реагентом.
7. Мягко покачать пластину.
8. Результат с цоликлонами оценить через 2,5 – 3 мин., со стандартными
эритроцитами через 5 мин.
9. Перед прочтением результатов в капли, где наступила агглютинация,
добавить по 0,05 мл раствора натрия хлорида.
10. Наличие агглютинации свидетельствует о положительном результате (+),
а ее отсутствие - об отрицательном (-)
11. Сделать заключение о группе крови (таблица №1)
Таблица №1
Цоликлоны
анти-А анти-В анти-АВ
+
+
+
+
+
+
+
Стандартные эритроциты
О
А
В
Группа
крови
-
О (I)
А (II)
В (III)
АВ (IV)
+
+
-
+
+
-
12. При получении положительного результата одновременно со всеми
цоликлонами (анти-А, анти-В, анти-АВ), для исключения неспецифической
реакции провести исследование с 0,9% NaCl.
12.1 . Нанести на плоскость одну большую каплю (0,1мл) 0,9% NaCl
10.2. Рядом нанести одну маленькую (0,01-0,05мл) каплю исследуемой крови
12.3. Смешать чистой стеклянной палочкой каплю исследуемой крови с
0,9% NaCl
12.4. Мягко покачать пластину в течение 2,5 минут
12.5. Оценить результат (таблица №2)
Реакция с 0,9% NaCl
+
Таблица №2
Группа крови
АВ (IV)
Неспецифическая агглютинация
группа крови не определяется.
12.6. При выявлении неспецифической реакции провести исследования (п.п.
1 – 7) с трижды отмытыми исследуемыми эритроцитами
13. При выявлении группы А (II) или АВ (IV), для уточнения варианта
антигена А и выявления подгруппы А2(II) или А2В (IV), провести
исследование с цоликлоном
Анти – А1 или лектином Анти – А1
13.1. Нанести на плоскость по одной большой капле (0,1мл) цоликлона антиА1, или лектина Анти – А1
13.2. Рядом с каждым реагентом нанести по одной маленькой (0,01-0,05мл)
капле исследуемой крови
13.3. Смешать отдельными чистыми стеклянными палочками каждую каплю
исследуемой крови с соответствующим реагентом
13.4. Мягко покачать пластину в течение 2,5 минут
13.5. Оценить результат исследования (таблица №3)
Исходная группа
А (II)
Реакция с цоликлоном
или лектином анти-А1
+
-
АВ (IV)
+
_
Таблица № 3
Группа крови
А (II)
А2 (II)
(подгруппа)
АВ (IV)
А2В (IV)
(подгруппа)