Изучение влияния мексидола на моторные нарушения при

На правах рукописи
Попова Ольга Александровна
ИЗУЧЕНИЕ ЭФФЕКТОВ МЕКСИДОЛА И ЕГО
КОМБИНАЦИИ С ГИМАНТАНОМ ПРИ
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ПАРКИНСОНИЧЕСКОМ
СИНДРОМЕ
14.00.25 - фармакология, клиническая фармакология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата биологических наук
МОСКВА – 2009
Работа выполнена в ГУ НИИ фармакологии имени В. В. Закусова РАМН
Научный руководитель:
доктор медицинских наук
Вальдман Елена Артуровна
Официальные оппоненты:
доктор биологических наук
Ганьшина Тамара Сергеевна
доктор медицинских наук,
профессор
Яснецов Владимир Викторович
Ведущая организация:
ГОУ ВПО Московская медицинская академия имени И.М.Сеченова Росздрава
Защита состоится «_____» _____________ 2009 г. в «_____» часов на заседании
диссертационного совета Д 001.024.01 при ГУ НИИ фармакологии имени В. В.
Закусова РАМН по адресу: 125315, г. Москва, ул. Балтийская, 8.
С диссертацией можно ознакомиться в ученой части ГУ НИИ фармакологии
им. В.В. Закусова РАМН по адресу: 125315, г. Москва, ул. Балтийская, д.8.
Автореферат разослан «___» _________ 2009 года.
Ученый секретарь диссертационного совета,
доктор медицинских наук
Вальдман Е.А.
2
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность. Болезнь Паркинсона (БП)* – нейродегенеративное заболевание,
проявляющееся двигательными, психическими и вегетативными расстройствами
(Гусев и соавт., 2000). Распространенность БП в мире в среднем составляет 100
случаев на 100000 человек. Прогредиентное течение, недостаточная эффективность
терапии,
тяжелая
инвалидизация,
наступающая
у
большинства
больных,
превращают БП в серьезную социальную проблему (Иллариошкин, 2006; Федорова
и соавт., 2006; Elbaz, Moisan, 2008).
В
основе
двигательных
олигокинезии
лежит
нарушений
первичное
при
БП
поражение
-
тремора,
ригидности,
дофаминергических
нейронов
компактной части черной субстанции и других пигментсодержащих ядер ствола
(Bonuccelli, Dotto, 2006), что приводит к снижению уровня дофамина (ДА) в
стриатуме (Carvey et al., 2006; Huot et al., 2007). Дефицит ДА индуцирует
гиперактивацию стриатных холинергических нейронов и, как следствие этого,
нарушение функций двигательных путей, проходящих через базальные ганглии,
образование генератора патологически усиленного возбуждения и формирование
патологической
системы
(Крыжановский,
1980;
1997).
Несмотря
на
многочисленные исследования, первичные причины гибели ДА нейронов при БП
остаются неизвестными. Наиболее вероятно, что заболевание развивается при
взаимодействии генетических и средовых факторов (Sherer et al., 2002). В качестве
основных патофизиологических механизмов БП рассматривают гиперактивацию
глутаматных
NMDA
оксидативный
стресс,
митохондрий
и
рецепторов,
приводящий
энергетическому
образование
к
свободных
нарушению
дефициту,
радикалов
и
дыхательной
функции
преждевременный
апоптоз,
иммунопатологические реакции (Bonuccelli, Dotto, 2006; Jenner, Olanow, 2006;
Schapira, 2006; Esposito et al., 2007).
*Список сокращений: 5-ОИУК – 5-оксииндолуксусной кислота; 5-ОТ – серотонин;
MФTП
–
N-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридин;
MФП+
–
1-метил-4фенилпиридиний; АХ – ацетилхолин; БП – Болезнь Паркинсона; ГВК – гомованилиновая
кислота; ДА – дофамин; ДОФУК – 3,4-диоксифенилуксусная кислота; НА –
норадреналин; ПОЛ – перекисное окисление липидов; ПС – паркинсонический синдром;
СМК – сенсомоторная кора; ХЯ – хвостатое ядро; ЧС – черная субстанция; ЭЭГ –
электрокортикограмма.
3
В соответствии с современной концепцией патогенеза БП разработаны
стратегия и основные принципы терапии этого заболевания (Яхно и соавт., 1995;
Шток, Федорова, 1997; Иванова-Смоленская и соавт., 2007; Shapira et al., 2006;
Soderstrom et al., 2006).
Основным
наиболее
эффективным
методом
лечения
БП
остается
заместительная терапия предшественником ДА - L-3,4-дигидроксифенилаланином
(L-ДОФА).
Кроме того, используются агонисты ДА рецепторов, ингибиторы ферментов
деградации ДА – моноаминооксидаз и катехол-О-метилтрансферазы, а также
препараты адамантанового ряда, которые способствуют высвобождению ДА из
пресинаптических терминалей, тормозят обратный захват ДА, блокируют NMDAглутаматные рецепторы (Гусев и соавт., 2000; Левин, 2004).
Многофакторный характер патогенеза БП обусловливает необходимость
комплексной
патогенетической
терапии,
принцип
которой
заключается
в
сочетанном воздействии на различные звенья нейропатологического синдрома
(Крыжановский, 1997; 2002; Poewe, 2006). Достижение этой цели возможно при
использовании препаратов, имеющих многокомпонентный механизм действия. К
таким препаратам относится новое производное 2-аминоадамантана гимантан,
имеющий
свойства
блокатора
глутаматных
рецепторов
NMDA-подтипа,
ингибитора МАО-В, проявляющий дофаминпозитивный эффект и умеренное
антирадикальное и иммуномодулирующее действие. В эксперименте доказаны его
преимущества перед широко используемым в практике амантадином (мидантаном)
(Вальдман и соавт., 1999; 2004; Неробкова и соавт. 2000). В клиническом
исследовании показана перспективность применения гимантана для лечения
ригидных и дрожательных форм паркинсонизма ранних стадий и определены
перспективы дальнейшего изучения его эффективности, в частности в комплексной
терапии БП (Катунина и соавт., 2008).
Другим подходом, не исключающим первый, является совместное применение
нескольких препаратов, воздействующих на разные звенья патогенетического
процесса. Наиболее широкое распространение получило включение в комплексную
терапию БП антиоксидантов.
4
Мексидол (2-этил-6-метил-3-оксипиридин сукцинат) является антиоксидантом,
обладающим нейропротекторными свойствами. Мексидол ингибирует процессы
перекисного окисления липидов (ПОЛ), увеличивает текучесть мембраны,
повышает активность антиоксидантных ферментов (Дюмаев и соавт., 1995),
активизирует
энергосинтезирующие
функции
митохондрий
и
улучшает
энергетический обмен в клетках (Лукьянова, 2000), модулирует рецепторные
комплексы мембран мозга, усиливая их способность к связыванию (Середенин и
соавт., 1987; Воронина и соавт., 2002). Мексидол повышает резистентность
организма
к
воздействию
повреждающих
факторов
и
оказывает
церебропротекторное действие (Симонова и соавт., 2006; Суслина и соавт., 2003,
2007). Мексидол обладает способностью потенцировать действие некоторых
нейропрсихотропных препаратов, уменьшает их побочные эффекты (Воронина и
соавт., 2001). На экспериментальной модели паркинсонизма показана способность
мексидола ослаблять активацию процесса ПОЛ, при совместном применении
повышать эффективность леводопы (Кучеряну, 2001), предотвращать повреждение
и гибель нигростриатных дофаминергических нейронов (Катунина, 2005). В
клинике отмечено достоверное снижение тремора покоя при применении
мексидола в терапии БП, протекающего в мягкой форме и на начальных стадиях
заболевания (Катунина и соавт., 2006).
В настоящее время мексидол в
инъекционной лекарственной форме широко используется в неврологической
практике при острой и хронической недостаточности мозгового кровообращения, в
остром и отдаленном периодах черепно-мозговой травмы, при постгипоксических
состояниях, расстройствах памяти и интоксикации. Однако, несмотря на все
имеющиеся предпосылки, комплексного экспериментального изучения мексидола
на моделях паркинсонизма не проведено, что препятствует широкому применению
препарата в клинике при лечении БП.
Цель
исследования
-
оценка
моторных,
нейрохимических
и
электрофизиологических эффектов мексидола в ампулированной лекарственной
форме и его комбинации с гимантаном на экспериментальных моделях
паркинсонического синдрома (ПС).
5
Задачи исследования:
1. Изучить влияние мексидола и его комбинации с гимантаном на двигательные и
вегетативные нарушения у мышей и крыс с ПС.
2. Провести анализ противопаркинсонической активности мексидола и его
комбинации с гимантаном в сравнении с леводопой, мидантаном, гимантаном на
экспериментальных моделях ПС.
3. Провести электрофизиологический анализ действия мексидола на модели ПС,
вызванного введением нейротоксина МФП+ в черную субстанцию мозга крыс.
4. Изучить
влияние
мексидола
на
уровень
нейромедиаторов (дофамина,
норадреналина, серотонина) и их метаболитов в структурах головного мозга при
МФТП-вызванном ПС у крыс.
5. Изучить антиоксидантную активность мексидола и его комбинации с
гимантаном в условиях модели ПС индуцированного введением МФТП мышам
C57BL/6.
Научная новизна. В комплексном исследовании установлено, что мексидол в
ампулированной лекарственной форме ослабляет моторные и вегетативные
проявления экспериментального ПС, вызванного МФТП и МФП+. Мексидол при
субхроническом введении предотвращает вызываемое МФТП снижение уровня
ДА, серотонина (5-ОТ) и их метаболитов – ДОФУК и 5-ОИУК в гиппокампе крыс.
Мексидол нормализует биоэлектрическую активность мозга на модели ПС,
вызванного интранигральным введением МФП+ у крыс, что выражается
в
снижении числа и длительности пароксизмальных разрядов, нормализации
характеристик ЭЭГ.
Впервые доказана возможность повышения эффектов гимантана при
сочетании с мексидолом на модели ареколинового тремора и при МФТПиндуцированном ПС. Впервые установлено взаимное усиление антиоксидантной
активности при комбинации мексидола с гимантаном, что проявлялось в снижении
содержания малонового диальдегида в мозге мышей с МФТП-индуцированным
ПС.
Научно-практическое
расширяют
значение.
имеющиеся
электрофизиологических
Полученные
представления
механизмах
результаты
о
действия
существенно
нейрохимических
мексидола.
и
Результаты
6
исследований показали способность мексидола ослаблять основные симптомы ПС:
олигонезию,
тремор
и
противопаркинсонического
ригидность,
препарата
и
усиливать
гимантана,
что
эффекты
подтверждает
целесообразность использования мексидола в ампулированной лекарственной
форме в сочетанной терапии при лечении БП.
Личный вклад. Автором самостоятельно выполнены эксперименты по оценке
поведения животных на различных моделях, проведена обработка полученных
результатов. Нейрохимические и нейрофизиологические исследования проведены
при активном участии автора.
Апробация
диссертации.
Материалы
диссертации
представлены
на
XIII
Международной конференции «Новые информационные технологии в медицине,
биологии и фармакологии» (Ялта-Гурзуф, 2005), на XIV и XV Российских
национальных конгрессах «Человек и лекарство» (2006, 2007), на научнопрактической конференции «Медико-биологические науки для теоретической и
клинической медицины» (Москва, 2008).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 7 работ, из них 2 статьи в
научных журналах, один из которых входит в перечень рекомендованных ВАК, и 5
тезисов.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 122 страницах,
включает введение, обзор литературы, материалы и методы исследования,
результаты собственных исследований и их обсуждение, заключение, выводы,
список литературы - 69 отечественных и 167 зарубежных источников. Работа
иллюстрирована 6 таблицами и 17 рисунками.
Материалы и методы
Животные: исследования проводилось на самцах аутбредных белых крыс и мышей, крыс
линии Wistar и мышей C57Bl/6.
Вещества: мексидол – 2-этил-6-метил-3-оксипиридина сукцинат (в ампулах по 2 мл 0,5%
раствора, Фармасофт); мидантан, гимантан, 1-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридин
(МФТП) и 1-метил-4-фенилпиридиния ион (МФП+) – (субстанции, синтезированые в ГУ
НИИ фармакологии им В.В. Закусова РАМН); ареколин гидробромид (Sigma-Aldrich
Company), галоперидол (Гедеон Рихтер АО, Венгрия), леводопа (Sigma-Aldrich Company).
Тремор у мышей вызывали подкожным введением мускаринового холиномиметика
ареколина
(25
мг/кг),
регистрировали
наличие
и
продолжительность
тремора.
7
Каталепсию вызывали введением галоперидола 1 мг/кг, в/б. Эффект оценивали по
способности исследуемых веществ уменьшать время каталептогенного состояния крыс и
процент животных с каталепсией в группе по методу Morpurgo (Воронина и соавт., 2005).
Паркинсонический синдром моделировали системным введением МФТП мышам
C57BL/6 и крысам (30 мг/кг, в/б) или интранигральным введением МФП+ крысам (10 мкг
МФП+ в 2 мкл физ. раствора). Регистрировали олигокинезию, ригидность и тремор, а
также учитывали наличие и выраженность слюнотечения, пилоэрекции, латеро- или
ретропульсии. Биоэлектрическую активность головного
мозга регистрировали у
крыс с хронически вживленными электродами в условиях свободного поведения на 21
канальном
компьютерном
электроэнцефалографе
«Нейро-КМ».
Первый
сеанс
регистрации проводился через 24 часа после интранигрального введения МФП+ на фоне
развернувшихся экстрапирамидных нарушений. Мексидол (150 мг/кг) вводили в/б через
24 часа после МФП+, а затем ежедневно в течение 6 дней. Регистрация электрограмм на
фоне мексидола производилась до инъекции препарата и через 60 минут (на 1 и 7 сутки
после введения МФП+). Анализ биоэлектрической активности мозга осуществлялся с
помощью компьютерной программы «BRAINSYS». Содержание моноаминов и их
метаболитов в структурах головного мозга оценивали через 90 мин после введения
МФТП у крыс, которым предварительно в течение 7 дней вводили мексидол (150 мг/кг,
в/б). Содержание моноаминов и их метаболитов во фронтальной коре, гиппокампе,
гипоталамусе, стриатуме и прилежащем ядре определяли методом высокоэффективной
жидкостной хроматографии с электрохимической детекцией (ВЭЖХ/ЭД). Эксперименты
проведены совместно с лабораторией нейрохимической фармакологии ГУ НИИ
фармакологии им. В.В. Закусова РАМН (зав. к.б.н. Кудрин В.С.). Определение продуктов
ПОЛ - диеновых конъюгатов и малонового диальдегида - в гомогенатах мозга мышей
C57BL/6 с МФТП-индуцированным ПС проводили через 90 мин после введения МФТП
(30 мг/кг, в/б) с использованием спектрофотометра DU-50 (Beckman, США) для диеновых
коньюгатов - при 233 нм, малонового диальдегида – 532 нм. Расчет количества
оцениваемых продуктов ПОЛ проводили на основании коэффициента молярной
экстинкции 2,2·105 М-1 см-1 или 1,56*105 М-1·см-1, соответственно. Статистическую
обработку данных проводили с использованием непараметрического U-критерия МаннаУитни, параметрического t-Student теста и критерия Фишера. Результаты представлены в
виде MSEM (среднее  стандартная ошибка среднего).
Результаты и обсуждение
1. Влияние мексидола и его комбинации с гимантаном на тремор, вызванный
ареколином у мышей. Под влиянием ареколина в контрольной группе животных
8
наблюдался выраженный тремор всего тела. Мексидол в дозе 100 мг/кг был не
эффективен, а в дозе 200 мг/кг достоверно снижал продолжительность тремора.
Мидантан (20 мг/кг) и леводопа (100 мг/кг) не обладали антитреморным действием,
гимантан (10 мг/кг) вызывал снижение продолжительности тремора в 1,55 раза, а
при сочетанном применении с мексидолом эффект значительно возрастал;
продолжительность тремора сокращалась в 2,1 раза (Рис.1).
Ареколин 25 мг/кг
Гимантан 10+Мексидол 200
**
Мексидол 200
*&&
Мексидол 100
*&
Гимантан 10
Мидантан 20
Леводопа 100
Дист. вода
0
3
6
9
12
15
Продолжительность тремора, мин.
18
Рисунок 1. Влияние соединений на продолжительность ареколинового тремора.
*, ** - P<0,05, P<0,01 достоверность различий по сравнению с «Ареколином»;
&, && - P<0,05, - P<0,01, достоверность различий по сравнению с комбинацией Гимантан
+ Мексидол.
Кроме того, активность комбинации мексидол-гимантан отразилась в
увеличении латентного периода начала тремора в 3,1 раза, по сравнению с
ареколином (Табл. 1).
Таблица 1. Влияние соединений на начало ареколинового тремора у мышей
Группы, доза
Латентный период начала тремора, мин.
Ареколин, 25 мг/кг
0,34+0,09
Ареколин+Гимантан, 10 мг/кг
0,52+0,11
Ареколин+Мексидол, 200 мг/кг
0,49+0,17
Ареколин+Гимантан+Мексидол
1,05+0,12*
* - P<0,05 достоверность различий в сравнении с «Ареколином».
2. Влияние мексидола на каталепсию, вызванную нейролептиком у крыс.
Галоперидол в дозе 1 мг/кг (в/б) вызывал у 100% крыс каталепсию максимальной
выраженности (6-ти балльная шкала) (Табл. 2). Мексидол, 200 мг/кг, значительно
снижал
каталептогенный
эффект
галоперидола.
Достоверное
снижение
экстрапирамидных нарушений под влиянием мексидола наблюдалось через 1, 2, 3
и 6 часов после введения галоперидола (Табл. 2). Мексидол в дозе 100 мг/кг в
условиях данной модели был не эффективен.
9
Таблица 2. Влияние веществ на выраженность каталепсии у крыс
Время наблюдения
Среднегрупповой показатель, баллы
Группа
60 минут 120 минут 180 минут 6 часов
Галоперидол, 1 мг/кг, в/б
6,0
6,0
6,0
4,0±0,42
Галоперидол+Мексидол, 100 мг/кг, в/б
4,9±1,58
5,9±1,29
5,6±0,84
3,6±0,84
Галоперидол+Мексидол, 200 мг/кг, в/б
3,6±1,32*
4,6±0,82*
4,6±0,52* 2,6±0,64*
Галоперидол+Леводопа, 100 мг/кг, в/б
2,4±1,46*
2,2±1,23*
3,8±0,91*
Галоперидол+Мидантан, 20 мг/кг, в/б
3,0±0,78*
4,1±1,64*
4,2±1,18* 2,7±0,41*
Галоперидол+Гимантан, 10 мг/кг, в/б
1,6±0,6*
1,8±0,52*
2,1±0,4*
2,8±1,35
1,3±0,5
*- P<0,05 достоверность различий в сравнении с «Галоперидолом».
Влияние мексидола на выраженность каталепсии также оценивалось по
уменьшению числа животных, у которых показатель каталепсии не достигал
максимального значения - 6 баллов. Так после введения мексидола в дозе 100 мг/кг
процент животных с максимальной каталепсией (регистрация через 60 минут)
снизился до 50% (P<0,05), а в дозе 200 мг/кг - до 30%.
Препараты сравнения леводопа, мидантан и гимантан оказывали более
выраженное, чем мексидол антикаталептическое действие (Табл. 2).
3. Изучение влияния мексидола на двигательные и вегетативные нарушения
при ПС, вызванном МФТП у мышей C57BL/6. Мексидол вводили за 24 часа,
гимантан, мидантан и леводопа вводились внутрибрюшинно за 30 минут до
введения МФТП. Оценка локомоторных и вегетативных нарушений в динамике
проводились сразу после введения МФТП (30 мг/кг, в/б). Через 3-5 минут начинали
проявляться все виды нарушений, характерных для ПС: мелкоамплитудный тремор
головы и всего тела, ретро- или латеропульсия, отмечалось появление ригидности,
что выражалось в нарушения походки, напряжении передних и задних
конечностей, изменении длины шага и появлении «горба». Так, на фоне МФТП
длина шага уменьшилась на 58,3% по сравнению с группой интактного контроля, а
под действием препаратов это нарушение было значительно меньше – на 26,3%,
37,86% и 17,46%, - в группах «Гимантан», «Мексидол» и «Мексидол+Гимантан»,
соответственно (Рис. 2)
Через 10-12 минут после введения нейротоксина ригидность проявлялась
также в виде «горба». При оценке этого показателя на фоне мексидола (100 мг/кг)
ригидность исчезала у 40 %, а в дозе 200 мг/кг – у 50 % животных. Леводопа
устраняла ригидность у 70%, а мидантан – у 60% мышей.
10
Длина шага, см +/- S.E.
6
**
5
*
4
*&
#
3
2
1
0
Контр.
МФТП (30)
Гимантан (10)
+МФТП
Мексидол (200) Мексидол+
Гимантан +МФТП
+МФТП
Рисунок 2. Влияние веществ на ригидность у мышей с МФТП-вызванным ПС.
#, * - P<0,05, ** - 0,01, относительно интактного контроля и МФТП, соответственно;
& - P<0,05 достоверность различий по сравнению с группой Гимантан + Мексидол.
Через 90 мин после введения МФТП у животных всех групп отмечалась
высокая степень олигокинезии (Рис. 3). Мексидол (200 мг/кг) вызывал умеренное
(в виде тенденции) повышение двигательной активности в «Открытом поле». При
совместном введении мексидола (200 мг/кг) с гимантаном (10 мг/кг) на фоне
МФТП выявлено достоверное повышение двигательной активности почти в 3 раза
Двигательная активность
в "Открытом поле"
по сравнению с показателем в группе, получавшей только нейротоксин.
30
25
20
15
**
10
#
5
0
Контроль
МФТП 30
Гимантан 10
+ МФТП
Мексидол 200
+ МФТП
Гимантан +
Мексидол +МФТП
Рисунок 3. Влияние мексидола и гимантана на выраженность олигокинезии
у мышей с ПС. #, * - P<0,05,** - 0,01 относительно контроля и МФТП, соответственно.
Изучение влияния веществ на двигательную активность мышей с ПС в
актометре показало, что мексидол в дозе 100 мг/кг уменьшал степень олигокинезии
в 2,4 раза по сравнению с группой мышей получавших только МФТП. С
увеличением дозы мексидола до 200 мг/кг его эффективность увеличивалась, и
уровень двигательной активности повышался в 3,2 раза по сравнению с МФТП.
Леводопа значительно снизила степень олигокинезии, а на фоне мидантана
11
групповой показатель двигательной активности животных был сопоставим с
данными интактного контроля.
Таким
образом,
выявлено
собственное
дозозависимое
противопаркинсоническое действие мексидола. Препарат в дозе 200 мг/кг ослабляет
каталепсию, вызванную галоперидолом, уменьшает олигокинезию и ригидность
при ПС, вызванном нейротоксином МФТП, и ослабляет тремор, вызванный
ареколином. Следует отметить, что положительный эффект мексидола на
моторные
показатели
на
этих
моделях
был
умеренно
выраженным.
Антикаталептическая активность мексидола (200 мг/кг) сравнима с таковой
мидантана (20 мг/кг), но значительно меньше, чем у леводопы (100 мг/кг) и
гимантана (10 мг/кг). Особого внимания заслуживает установленное ослабление
ареколинового тремора. В этом тесте эффект мексидола был сопоставим с
активностью
гимантана.
Наличие
антитреморного
действия
в
спектре
фармакологической активности мексидола представляет собой большой интерес,
так
как
подтверждает
его
эффективность
при
дрожательной
форме
паркинсонического синдрома и согласуется с данными Катуниной (2005).
Наиболее выраженный антитреморный эффект отмечался при комбинированном
введении мексидола и гимантана. При этом происходило увеличение эффекта
последнего в два раза.
На модели МФТП-индуцированного ПС у мышей C57Bl/6 при сочетанном
применении мексидола и гимантана происходило значительное повышение
эффектов, что проявлялось в значительном снижении олигокинезии и ригидности
по сравнению с монотерапией гимантаном.
4. Анализ эффектов мексидола при однократном и субхроническом введении
на модели ПС, вызванного интранигральным введением МФП+ у крыс. На
данной модели оценивали поведение и функциональную активность головного
мозга на основе спектрально-когерентного анализа электрограмм. Через 1 час
после билатеральной интранигральной инъекции МФП+ (по 10 мкг МФП+ в 2 мкл
физ. раствора) наблюдалось последовательное появление основных симптомов ПС:
акинезия или олигокинезия, мелкоамплитудный тремор головы и передних лап,
ригидность
мышц
передних
и
задних
конечностей,
которые
достигали
максимального развития через 24 часа. У всех животных после инъекции МФП+
12
наблюдались нарушение походки, ригидность от 2 до 4 баллов (средний показатель
по группе 3,2 балла), тремор - 1-3 балла (1,9 баллов), ретро - или латеропульсия,
слюнотечение, пилоэрекция. В этот период у 60% животных регистрировалась
каталепсия от 1,5 до 2 баллов. У 80% животных отмечались эпизоды замирания. На
7-е сутки у животных группы «МФП+» отмечалось уменьшение ригидности и
тремора (Рис. 6), однако двигательная активность оставалась на низком уровне
(Рис. 7).
На 7 сутки под влиянием субхронического введения мексидола (150 мг/кг)
отмечено снижение ригидности в 2,4, тремора – в 3 раза по сравнению с группой
крыс получившей только МФП+ (Рис. 6). К тому же, применение мексидола
увеличивало двигательную активность животных в 2 раза по сравнению с МФП+
(Рис. 7).
3,5
Баллы
3
*
2,5
2
*
1,5
#
#
1
0,5
0
Тремор
МФП+ - 1 сутки;
Ригидность
МФП+ -7 сутки;
МФП+ + Мексидол 7 сутки
120
100
80
#,*
60
активность
Двигательная активность
Рисунок 6. Влияние мексидола на экстрапирамидные нарушения у крыс при
МФП+-вызванном ПС. *, # - P<0,05 достоверность различий относительно МФП+
в 1-е и на 7-е сутки после введения нейротоксина, соответственно.
*
40
*
20
0
Контроль
1 сутки
МФП+
7 сутки
7 сутки
МФП++Мексидол 150
Рисунок 7. Влияние мексидола на олигокинезию у крыс с ПС. *, # - P<0,05
достоверность различий относительно интактного контроля и МФП+, соответственно.
13
Таким образом, 7-и дневное введение мексидола в дозе 150 мг/кг крысам
эффективно устраняло проявления ПС, вызванного интранигральным введением
МФП+, что выразилось в уменьшении степени олигокинезии, значительной
редукции тремора и ригидности по сравнению с группой животных, получавших
только нейротоксин.
5. Анализ биоэлектрической активности мозга крыс через 24 часа после
интранигрального введения МФП+ показал наличие в электрограммах всех
исследуемых структур дизритмичной активности с присутствием дельта- и тетаволн, амплитудой биопотенциалов 70-100 мкВ. В электрограммах черной
субстанции (ЧС) и хвостатых ядер (ХЯ) обоих полушарий отмечались синхронные
разряды высокоамплитудных медленных волн с заостренными вершинами в
диапазоне тета- и дельта-частот амплитудой 150-200 мкВ. Сходный паттерн
биоэлектрической активности мозга крыс сохранялся и через 7 суток после
введения
МФП+,
отмечалось
лишь
незначительное
снижение
амплитуды
пароксизмальных разрядов, однако, они становились более генерализованными и
регистрировалась во всех исследованных структурах. При этом несколько
изменялся характер пароксизмальной активности - разряды состояли из групп
высокоамплитудных тета-волн (Рис. 8А).
При проведении сравнительного визуального анализа электрограмм крысы
опытной группы, зарегистрированных через 24 часа после введения МФП+ и через
1 час после инъекции мексидола, отмечено значительное снижение числа и
амплитуды пароксизмальных разрядов высокоамплитудных острых и медленных
волн, наиболее заметное в электрограммах ХЯ и сенсо-моторной коры (СМК)
правого полушария. Также, на фоне однократного введения мексидола в
электрограммах всех исследуемых структур отмечалось усиление активности в
альфа- и бета-диапазонах.
Через 1 час после последнего введения мексидола во всех исследованных
структурах отмечалось уменьшение амплитуды и числа разрядов пароксизмальной
активности (Рис. 8Б). Кроме того, отмечалось уменьшение медленной активности и
усиление альфа-активности в электрограммах ЧС и СМК.
14
А
7 дней после введения МФП+
Мексидол (7 дней) на фоне МФП+
Б
Рисунок 8. Влияние субхронического введения мексидола на биоэлектрическую
активность мозга крыс с ПС вызванным МФП+.
Статистический анализ изменения мощности спектра биоэлектрической
активности мозга крыс после однократного приема мексидола выявил тенденцию к
её снижению в диапазоне дельта- и тета-частот и усилению в диапазоне альфа- и
бета-частот. Данные изменения были наиболее выраженными в спектрограммах
ХЯ и ЧС.
Статистический анализ спектрограмм группы крыс получавших мексидол в
течение 7 дней выявил достоверное увеличение мощности спектра в диапазоне
тета-активности в СМК правого полушария и ЧС левого полушария и снижение
мощности спектра в диапазоне дельта-активности в электрограммах всех
исследованных структур (Рис. 9).
Одновременно отмечалось статистически значимое увеличение мощности
спектра в бета1-диапазоне в спектрограммах всех структур и в диапазоне бета2частот в электрограмме ХЯ левого полушария (Рис. 9).
Таким образом, эффекты мексидола при однократном и семидневном
введении
однонаправлены,
и
проявляются
уменьшением
пароксизмальной
активности и нормализацией биоэлектрической активности.
На фоне субхронического введения препарата биоэлектрическая активность
становится более регулярной, отмечается появление тета-ритма частотой 7-8 Гц.
Следует отметить, что усиление бета-активности в электрограммах крыс на фоне
лечения мексидолом сопоставимо с эффектами амантадина и гимантана
15
(Неробкова и соавт., 2007), однако усиление альфа активности наблюдается лишь
на фоне приема мексидола.
50
θ
45
θ
Мощность спектра, мкВ%
40
δ
35
δ
θ
θ
*
θ
*
θ
δ
δ
δ
δ
30
25
20
β1
α
15
*
β2
10
α
β1
*
*
α
β1
β2
α
*
β2
β1
α β1
*
β2
α
*
β1
*
β2
β2
5
0
ХЯ(л)
ХЯ(пр)
СМК (л)
СМК (пр)
ЧС (л)
ЧС (пр)
- Мексидол 150 мг/кг, в/б на 7 сутки введения.
+
- МФП ;
Рисунок 9. Спектральный анализ влияния мексидола на биоэлектрическую
активность мозга крыс с МФП+-вызванным ПС. *- P<0,05 достоверность различий по
сравнению с МФП+.
Анализ пароксизмальной активности показал, что однократное введение
мексидола приводило к значительному уменьшению числа пароксизмальных
разрядов во всех исследованных структурах (кроме СМК пр.п.) (Рис. 10).
30
25
#
#
20
разрядов
Число разрядов
35
15
#
*
#
#
*
*
10
*
*
*
5
0
СтруктурыХЯ (л)
ХЯ(пр)
СМК(л) СМК(пр)
ЧС(л)
ЧС(пр)
МФП+ 1-е сутки
Мексидол, однократное введение
Мексидол, субхроническое введение
МФП+ 7-е сутки
Рисунок 10. Влияние мексидола на пароксизмальную активность мозга крыс с
МФП+ вызванным ПС. *- P<0,05 достоверность различий по сравнению с МФП+.
16
Отмеченные изменения пароксизмальной активности усиливались при 7-и
дневном введении препарата (Рис. 10).
В результате проведенного исследования было показано, что мексидол в дозе
150 мг/кг в условиях экспериментального ПС у крыс, вызванного интранигральным
введением МФП+, ослаблял проявления ПС: препарат уменьшал число и
длительность пароксизмальных разрядов. Мексидол нормализовал характеристики
ЭЭГ, увеличивал спектр мощности в диапазоне альфа- и бета-активности в
электрограммах хвостатых ядер. Этот эффект усиливался при субхроническом
введении мексидола и сопровождался уменьшением двигательных нарушений.
Настоящие данные позволяют предположить наличие антипаркинсонической
активности у мексидола, что возможно связано с его нейропротекторыми
эффектами. Полученные результаты согласуются с результатами Катуниной (2005),
где получено морфологическое подтверждение
уменьшения
выраженности
нейродегенеративных изменений при предварительном введении мексидола
(накануне дня эксперимента) на модели ПС у крыс, индуцированного МФТП.
6. Изучение влияния мексидола на содержание моноаминов и их метаболитов
в структурах головного мозга крыс с ПС, вызванным системным введением
МФТП
Известно, что МФТП вызывает как поведенческие расстройства, сходные с
симптоматикой БП, так и биохимические изменения, для которых характерно
селективное и необратимое снижение содержания дофамина (ДА) и его
метаболитов,
и
снижение
активности
тирозингидроксилазы
в
стриатуме,
прилежащем ядре и черной субстанции мозга (Przedborski, Vila, 2003; Sedelis et al,
2001). Кроме того, в патофизиологический процесс вовлекаются и другие
нейротрансмиттерные
системы
–
норадренергическая,
холинергическая,
серотонинергическая. (Scholtissen et al, 2006).
Оценку изменений содержания моноаминов головного мозга под влиянием
мексидола проводили под контролем поведенческих проявлений ПС, вызванного
введением МФТП (30 мг/кг). Установлено, что субхроническое применение
мексидола в течение 7 дней (150 мг/кг) до введения нейротоксина вызывает
существенное уменьшение основной симптоматики ПС. На фоне мексидола
двигательная
активность
крыс
в
актометре
в
3,31
раза
превышала
17
соответствующий показатель группы животных, получавших только МФТП. Под
действием мексидола отмечалось уменьшение (в 2 раза) мелкоамплитудного
тремора головы и передних конечностей. Заметно снижалась (в 1,7 раза)
ригидность.
Анализ результатов полученных при изучении влияния мексидола на
нейромедиаторный баланс в структурах головного мозга интактных крыс выявил
наличие
разнонаправленных
незначительных
изменений
в
содержании
нейротрансмиттеров. Субхроническое введение мексидола в течение 7 дней
вызвало достоверное увеличение концентрации серотонина (5-ОТ) во фронтальной
коре и норадреналина (НА) в стриатуме, и снижение содержания дофамина (ДА) и
его метаболита – 3,4-диоксифенилуксусной кислоты (ДОФУК - показатель
внутриклеточного метаболизма дофамина) – в гипоталамусе по сравнению с
контрольной группой (Табл. 3).
Однократное введение МФТП за 90 минут до декапитации животных
вызывало
значительные
изменения
активности
катехоламинергических
нейротрансмитерных систем. При этом наблюдалось драматическое снижение
содержания ДА и ДОФУК во всех ДА-содержащих структурах мозга (за
исключением гиппокампа, где напротив, отмечался рост ДОФУК). Изменения
концентрации другого метаболита ДА – гомованилиновой кислоты (ГВК) показатель
постсинаптической
трансформации
дофамина
–
носили
разнонаправленный характер. Если во фронтальной коре этот показатель возрастал,
то в стриатуме и прилежащем ядре – снижался (Табл. 3). Разнонаправленным было
влияние МФТП и на содержание НА, которое увеличивалось в стриатуме, но
снижалось во фронтальной коре, гипоталамусе и гиппокампе. Уровень серотонина
(5-ОТ) был достоверно ниже во фронтальной коре и гиппокампе мозга крыс.
Концентрация его метаболита 5-оксииндолуксусной кислоты (5-ОИУК) во всех
изученных структурах мозга также была меньше аналогичных значений
контрольной группы, что может объясняться неспецифическими эффектами
МФТП, и согласуется с данными ряда исследователей (Chen et al, 1998; Scholtissen
et al, 2006; Ansah и соавт. 2007). Соотношение ДОФУК/ДА, характеризующее
скорость кругооборота ДА, достоверно снижалось во всех структурах мозга (где
определяли содержание ДОФУК), кроме гиппокампа, где отмечался рост этого
18
Таблица 3. Влияние мексидола на содержание моноаминов и их метаболитов в структурах головного мозга крыс в условиях
моделирования дофаминергической нейротоксичности, вызванной введением МФТП
Группа
НА
ДА
ДОФУК
Контроль
0,5790,065
Мексидол
0,5860,04
МФТП
0,0480,02*
Мексидол+ МФТП 0,0670,02*
0,710,02
0,6250,06
0,4190,04*
0,4190,02*
-
Контроль
8,9750,37
Мексидол
8,4570,47
МФТП
5,4010,48*
Мексидол+ МФТП 5,4850,21
2,1690,09
1,6470,1*
1,2830,13*
1,1370,13
0,4710,09
0,2110,03*
0,1330,04*
0,1540,02
Контроль
4,530,58
56,1052,72
Мексидол
4,4080,21 56,9132,76
МФТП
5,5530,47 38,6741,86*
Мексидол+ МФТП 5,9460,689 38,7891,98
8,1360,47
8,6490,44
1,5480,05*
1,6840,14
Контроль
2,4280,21
Мексидол
2,6390,15
МФТП
1,0690,23*
Мексидол+ МФТП 1,0440,27*
0,1140,02
0,1360,02
0,0590,01*
0,10,01#
0,1040,05
0,2580,09
0,190,05
0,1340,03
Контроль
0,3970,02 86,1681,43
Мексидол
0,5230,04* 90,5162,47
МФТП
0,7960,04* 63,8071,95*
Мексидол+ МФТП 0,810,05* 59,5591,58*
8,1440,21
8,7940,48
1,8620,11*
1,7120,14*
ГВК
5-ОТ
Фронтальная кора
0,3220,08 6,4690,26
0,180,02
7,50,24*
0,7750,12* 4,940,15*
1,0230,24* 4,8340,2*
Гипоталамус
0,4850,14
6,00,28
0,3710,1 5,6030,14
0,4650,07 6,090,33
1,120,29 5,5690,21
Прилежащее ядро
2,6440,14 7,0180,4
2,3560,28 6,1480,41
1,110,16* 6,640,23
1,2310,17 5,9870,38
Гиппокамп
0,3790,1 2,7930,25
0,5120,15 2,9420,13
0,6590,37 2,060,19*
0,6480,07 2,5990,34
Стриатум
3,7240,22 3,8710,09
3,9790,26 3,9910,14
1,7140,07* 3,6810,18
1,9240,13* 3,9220,16
5-0ИУК
ДОФУК/ДА
ГВК/ДА
5-0ИУК/5-ОТ
3,570,08
3,970,24
2,450,09*
2,540,08*
-
0,5360,14
0,330,06
1,8890,39*
2,7860,82*
0,5630,03
0,5510,06
0,5570,06
0,5730,04
3,4590,24
3,1440,16
2,4740,26*
2,2720,14*
0,2270,04
0,1280,02
0,1250,04*
0,1210,02
0,210,06
0,2410,06
0,3810,06
1,1120,33*
0,5870,04
0,5350,04
0,4030,03*
0,40,03
6,250,21
5,940,36
4,010,31*
3,4570,17
0,1470,01
0,1540,01
0,0380,003*
0,0450,003*
0,050,001
0,0420,005
0,030,01*
0,0340,01
0,910,04
0,9740,04
0,590,03*
0,590,03*
3,8390,13
4,3010,19
2,3950,25*
3,1960,14*#
0,460,2
3,2851,65
3,8551,34*
1,4290,26#
3,731,03
1,6630,83
7,8522,97
8,01,83
1,4760,132
1,5150,25
1,2740,18
1,6040,12#
5,750,19
6,3140,23
4,0610,18*
4,5060,08*
0,0940,005 0,0430,003
0,090,005
0,0440,004
0,0310,002* 0,0290,003*
0,0290,003* 0,0320,002*
Данные представлены в нмоль/г ткани, (Мm).* и #– р<0,05 - достоверность различий по сравнению с контролем и с МФТП,
соответственно.
1,4850,03
1,5870,05
1,120,065*
1,170,06*
показателя в 8,38 раза по сравнению с контролем. В то же время показатель
ГВК/ДА достоверно уменьшался в стриатуме и прилежащем ядре, тогда как во
фронтальной коре он возрастал на 150%. Следует отметить, что соотношение 5ОИУК/5-ОТ, свидетельствующее о скорости биодеградации 5-ОТ, снижалось в
гипоталамусе, стриатуме и прилежащем ядре (Табл. 3). Таким образом,
однократное введение МФТП вызывало значительные изменения активности
катехоламинергических нейротрансмиттерных систем.
Одной из структур мозга, поражающейся на ранних стадиях паркинсонизма
является гиппокамп (Shan, Chi, Bishop, 2006). Установлено, что МФТП вызывает
достоверное
снижение
нейромедиатора
при
в
гиппокампе
уровня
ДА
ПС;
увеличение
показателя
–
патогенетического
ДОФУК/ДА,
снижение
Концентрация,
нмольг/ткани
содержания 5-ОИУК/5-ОТ (Рис. 11 А, Б).
A
0,2
0,18
0,16
0,14
0,12
0,1
0,08
0,06
0,04
0,02
0
#
*
ДОФУК
ДА
Концентрация,
нмоль/г ткани
4.5
4
3.5
3
2.5
2
1.5
1
0.5
0
Мексидол + МФТП
МФТП
Контроль
Б
*
#*
*
*
#
#
* *
НА
5-ОТ
5-0ИУК
ДОФУК/ДА 5-0ИУК/5-ОТ
Рисунок 11. Влияние мексидола на содержание моноаминов и их метаболитов
в гипокампе крыс в условиях моделирования ПС, вызванного МФТП.
*, # - P<0,05 достоверность различий по сравнению с интактным контролем
и группой МФТП, соответственно.
20
Субхроническое введение мексидола крысам устраняло депримирующее
влияние МФТП на уровень ДА, 5-ОТ и их метаболитов – ДОФУК и 5-ОИУК в
гиппокампе. Под влиянием препарата в 1,7 раза повышался уровень ДА (Рис. 11А).
Позитивное влияние мексидола отмечалось в нормализации кругооборота ДА, о
чем свидетельствовало снижение в 2,7 раза соотношения ДОФУК/ДА относительно
показателя в группе «МФТП». Кроме того, влияние мексидола сказалось в
повышении в 1,3 раза уровня 5-ОИУК и соотношения 5-ОИУК/5-ОТ (Рис. 11Б).
При суммарной оценке результатов, полученных на основании исследований
других
структур
мозга,
выраженных
эффектов
мексидола
на
изменения
нейрохимических показателей, вызванных введением МФТП, не наблюдалось.
Эффекты МФТП обусловлены токсическим действием его метаболита –
МФП+, который вызывает энергетическую недостаточность, усиление процессов
свободнорадикального
окисления,
ведущих
к
структурно-пластической
недостаточности нейронов и их гибели (Przedborski et al, 2000, 2001; Watanabe et al,
2005). Корректирующий эффект мексидола может быть связан с тем что, обладая
антиоксидантными свойствами, он активизирует энергосинтезирующую функцию
митохондрий и улучшает энергетический обмен в клетках, делая их менее
чувствительными к действию нейротоксина. Наличие нейропротекторной и
мембранопротекторной активности в спектре действия мексидола (Воронина и
соавт., 2002) способствует уменьшению выраженности нейродегенеративных
изменений под действием нейротоксина МФТП, и, следовательно, увеличивает
число сохранных и слабоизмененных нейронов, обеспечивая нейропротекторный
эффект, что согласуется с данными Катуниной (2005).
Таким образом, мексидол значительно ослабляет моторные и вегетативные
проявления ПС, вызванного введением МФТП. Восстанавливающий эффект
мексидола
на
моторные
показатели
сопровождается
нормализацией
нейромедиаторного баланса мозга, наиболее выраженной в гиппокампе, что
проявляется восстановлением уровня ДА и соотношения ДА и 5-OT.
7. Определение продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в
гомогенатах мозга мышей. Одним из механизмов антипаркинсонического
влияния
мексидола
в
условиях
моделирования
ПС
может
быть
его
антиоксидантное действие, которое подтверждено в опытах in vivo и in vitro
21
(Клебанов и соавт., 2001; Матюшин и соавт., 2001; Нечипуренко и соавт., 2006;
Новиков и соавт., 2004; Смирнов, 2003). О состоянии процессов ПОЛ в тканях
мозга
мышей
с
МФТП-индуцированным
ПС
судили
по
содержанию
промежуточных и конечных продуктов липопероксидации – диеновых конъюгатов
и малонового диальдегида (Щербань и соавт., 2004). Увеличение концентрации
продуктов ПОЛ свидетельствует об усилении липопероксидации и срыва
антиоксидантной защиты организма.
На фоне введения нейротоксина МФТП возникала выраженная активация
процессов липопероксидации, о чем свидетельствовало увеличение содержания
диеновых конъюгатов на 134% и малонового диальдегида на 88% в гомогенатах
мозга мышей по сравнению с контролем (Табл. 4). Предварительное введение
мексидола (200 мг/кг) и гимантана (10 мг/кг) уменьшало интенсивность процессов
липопероксидации индуцированных применением МФТП, снижая концентрацию
продуктов ПОЛ в мозге мышей. Так, содержание диеновых коньюгатов
уменьшилось в среднем в 1,46 раза, а малонового диальдегида в 1,38 раза
относительно показателей в группе животных получавших только нейротоксин.
Наиболее значимый антиоксидантный эффект фиксировался при использовании
комбинации мексидола и гимантана. На фоне препаратов отмечалось снижение
содержания малонового диальдегида в мозге мышей до уровня нормы.
Таблица 4. Влияние веществ на содержание ПОЛ в гомогенатах мозга мышей.
Диеновые
Степ.
Малоновый
Степ.
Группа
конъюгаты
отлич.,
диальдегид
отлич.,
(мкмоль/мг ткани)
%
(мкмоль/мгткани)
%
Контроль
2,45±0,62
15,39±1,14
МФТП (30 мг/кг)
5,72±0,28 #
134%
28,97±1,45##
88%
Мексидол (200)+МФТП
3,91±0,19*
59%
21,04±1,0*&
37%
Гимантан (10)+МФТП
3,90±0,15*
59%
20,85±1,0*&
36%
Мексидол+Гимантан+ МФТП
3,93±0,18*
60%
17,91±0,7**
16%
#, *, (**) - р<0,05 (р<0,01) достоверность различий относительно контрольной и МФТП
групп, соответственно; & - P<0,05 достоверность различий по сравнению с группой
Гимантан + Мексидол.
Таким образом, при ПС, вызванном введением МФТП мышам С57Bl/6,
происходит увеличение интенсивности ПОЛ в головном мозге, характерное для
синдрома
мембранной
патологии
по
оксидативному
типу.
Применение
22
антиоксиданта мексидола, гимантана, обладающего антирадикальной активностью,
и особенно комбинации гимантана и мексидола нормализовало ПОЛ в головном
мозге мышей. Антиоксидантное действие мексидола обусловлено его химической
структурой – наличием в составе производного гидроксипиридина (витамина В6
(пиридоксол) и придания ему антиоксидантных свойств за счет экранирования
алкильными группами фенольного гидроксила (Новиков и соавт., 2004).
Протективное
действие
мексидола
можно
объяснить
его
мембраностабилизирующим действием, которое проявляется угнетением ПОЛ
мембран и изменением их фосфолипидного состава, а также нормализацией
функционирования мембраносвязанных ферментов (Дюмаев, Воронина, Смирнов,
1995). Наряду с этим сукцинат мексидола легко проникает в клетки и окисляется в
цикле трикарбиновых кислот, что способствует поддержанию уровня макроэргов
при стрессорной гипоксии (Тилекеева и соавт., 1987; Лукьянова и соавт., 1993).
Умеренная антиоксидантная активность гимантана была установлена ранее. В
бесклеточной системе пероксидиза – пероксид водорода было показано, что
гимантан в концентрации 3*10-4М вызывает тушение хемилюминесценции за счет
взаимодействия со свободными радикалами. (Золотов и соавт. 2001; Вальдман,
2001). Антиоксидантная активность гимантана была также оценена на модели
аскорбат-зависимого перекисного окисления липидов в гомогенате печени крысы
по
концентрации
малонового диальдегида.
Достоверность различий
была
зарегистрирована только при применении гимантана в высокой концентрации 1мМ
(Вальдман, 2001). Полученные данные на модели МФТП-индуцированного ПС
подтверждают правильность ранее сделанных заключений о антирадикальной
активности гимантана. Усиление этой активности при совместном применении с
мексидолом свидетельствует в пользу целесообразности использования мексидола
в комплексном лечении болезни Паркинсона с целью повышения эффективности
симтоматической терапии и замедления прогрессирования заболевания.
Выводы:
1.
Мексидол в дозе 200 мг/кг проявляет положительный эффект в условиях
трех моделей двигательных нарушений при паркинсонизме: снижает выраженность
23
каталепсии, вызванной галоперидолом, и ареколинового тремора; уменьшает
олигокинезию и ригидность при МФТП – индуцированном ПС.
2.
По антикаталептической активности и по эффективности на модели МФТП-
индуцированного паркинсонизма мексидол в дозе 100-200 мг/кг уступает
препаратам сравнения – леводопе (100 мг/кг), мидантану (20 мг/кг) и гимантану (10
мг/кг), а в тесте ареколинового тремора – гимантану (10 мг/кг).
3.
Комбинация
мексидола
с
гимантаном
приводит
к
усилению
противопаркинсонической активности последнего, что выражается в значительном
снижении
тяжести
паркинсонических
симптомов
–
тремора,
ригидности,
повышении двигательной активность животных.
4.
Мексидол в дозе 150 мг/кг корректирует нарушения биоэлектрической
активности головного мозга крыс с МФП+-индуцированным паркинсоническим
синдромом, что проявляется в уменьшении числа и длительности пароксизмальных
разрядов на ЭЭГ. Мексидол увеличивает спектр мощности в диапазоне альфа- и
бета-активностей
в
электрограммах
хвостатых
ядер.
Эффекты
усиливаются при субхроническом введении препарата и
мексидола
сопровождаются
уменьшением двигательных нарушений.
5.
Предварительное субхроническое введение мексидола в дозе 150 мг/кг
снижает выраженность нейрохимических изменений в гиппокампе, вызываемых
нейротоксином МФТП, что выражается в уменьшении падения уровня дофамина и
нормализации кругооборота дофамина и серотонина.
6.
Мексидол (200 мг/кг), гимантан (10 мг/кг)
и в большей степени их
комбинация снижают содержание продуктов перекисного окисления липидов диеновых конъюгатов и малонового диальдегида в гомогенатах мозга мышей
С57Bl/6 с МФТП-индуцированным паркинсоническим синдромом.
Список работ, опубликованных по теме диссертации:
1. Воронина Т.А. Применение Мексидола в качестве противопаркинсонического
средства [Текст] / Т.А. Воронина, О.А. Попова, Л.Н. Неробкова // XIII
Международная конференция «Новые информационные технологии в медицине,
биологии и фармакологии». - М., 2005. - С. 367-369.
24
2. Воронина Т.А. Оценка клинической эффективности Мексидола и его
комбинации с паркинсоническими препаратами при болезни Паркинсона [Текст] /
Т.А. Воронина, О.А. Попова, Е.А. Катунина, Г.Н. Авакян //Сборник материалов
конгресса (тезисы докладов) XIV Российский национальный конгресс «Человек и
лекарство», Москва 2006. - М. 2006. -С. 127.
3.Попова О.А. Электрофизиологические механизмы противопаркинсонического
действия Мексидола на модели паркинсонического синдрома, вызванного
нейротоксином МФП+ [Текст] / О.А. Попова, Т.А.Воронина, Л.Н. Неробкова //
Сборник материалов конгресса (тезисы докладов) XIV Российский национальный
конгресс «Человек и лекарство» Москва 2006. - М. 2006.- С. 441.
4. Воронина Т.А. Особенности противопаркинсонического действия Мексидола в
эксперименте при моделировании паркинсонического синдрома и в клинике у
пациентов БП [Текст] / Т.А.Воронина, Г.Н. Авакян, О.А. Попова, Е.В. Катунина,
Л.Н. Неробкова, И.Г. Капица // Неврология и нейрохирургия Казахстана. - 2006. № 4. - С. 12-19.
5. Попова О.А. Влияние Мексидола на локомоторные нарушения у крыс с МФП+
паркинсоническим синдромом [Текст] / О.А. Попова, Т.А. Воронина, Е.А.
Вальдман, Л.Н. Неробкова // XV Российский национальный конгресс «Человек и
лекарство».- М., 2007.- С. 865.
6. Попова О.А. Влияние мексидола на нейрохимические изменения в структурах
мозга крыс при моделировании паркинсонического синдрома [Текст] / О.А.
Попова, В.С. Кудрин, П.М. Клодт, В.Б. Наркевич, Л.Н. Неробкова, И.Г. Капица,
Т.А. Воронина, Е.А. Вальдман // Вестник РГМУ. - 2008 - №1 (60). - С. 54-58.
7. Попова О.А. Антиоксидантная активность комбинации гимантана и мексидола
при экспериментальном паркинсоническом синдроме у мышей С57BL/6 [Текст] /
О.А. Попова, Н.Н. Золотов, И.Г. Капица, Л.Н. Неробкова, Е.А. Вальдман, Т.А.
Воронина
//
Материалы
научно-практической
конференции
«Медико-
биологические науки для теоретической и клинической медицины». Москва, 28
ноября 2008.- М.: Российский государственный медицинский университет, 2008. С. 83.
25