Неврология, психиатрия, наркология РЕДОКС

Неврология, психиатрия,
наркология
УДК 616.831.001.5-005.4:615.235
РЕДОКС-СОСТОЯНИЕ ГОЛОВНОГО МОЗГА КРЫС В УСЛОВИЯХ
ЕГО ИШЕМИИ-РЕПЕРФУЗИИ И ВВЕДЕНИЯ АЦЕТИЛЦИСТЕИНА
Н.Е. Максимович, И.К. Дремза, Э.И. Троян, Е.Н. Максимович,
УО «Гродненский государственный медицинский университет им. Д.А. Маслакова», г. Гродно
Максимович Наталья Евгеньевна – е-mail: [email protected]
Цель работы: изучить редокс-состояние ткани головного мозга у крыс в условиях его ишемииреперфузии (ИР) и введения ацетилцистеина (АЦЦ). Эксперименты выполнены на 22 крысах
линии Wistar массой 200–250 г. Первую серию (n=8) составили ложнооперированные животные
(контроль). Вторую серию – животные с ИР (n=7). Крысам третьей группы с ИР головного мозга
(ИРГМ) за час до моделирования в/м вводили АЦЦ в дозе 100 мг/кг (n=7). ИРГМ моделировали
путем наложения и последующего снятия сосудистых зажимов на общие сонные артерии в
условиях наркоза. В гомогенатах предварительно замороженного в жидком азоте мозга
осуществляли определение концентрации восстановленного глутатиона, общих сульфгидрильных
групп глутатиона и белков, активности глутатионпероксидазы, продуктов, реагирующих с
тиобарбитуровой кислотой. Результаты согласуются с данными литературы о способности АЦЦ
способствовать корригированию тиолдисульфидного отношения.
Ключевые слова: редокс-состояние, головной мозг, ишемия, реперфузия, ацетилцистеин.
The purpose of this paper is to study the rats’ brain redox state under conditions of its ischemia-reperfusion (IR) and the introduction of Acetylcystein (ACC). Experiments were carried out on 22 Wistar-line rats
weighted 200–250 g. The first series (n=8) consisted of falsely-operated animals (control). The second
series was represented by IR animals (n=7). To rats of the third group with brain IR (n=7) ACC was administered in the dose of 100 mg/kg one hour before IR simulation. BIR was simulated by clipping common
carotid arteries and subsequent clip removal under anaesthetic. In homogenates of liquid-nitrogen prefrozen brain the concentration of reduced glutathione, common sulfhydryl groups of glutathione and
peroteins, glutathioneperoxidase activity, products reacting with thiobarbitur acid were determined. Results
comply with reference data on the ACC capability to further the correction of thiolene-sulfide relations.
Key words: redox-state, brain, ischemia, reperfusion, Acetylcystein.
И
звестно, что восстановление кровотока в ишемизированном мозге наряду с основным, репаративным,
восстановительным эффектом также оказывает и повреждающее воздействие на ткани, патогенез которого обусловлен в значительной мере окислительным стрессом.
Основной ролью системы глутатиона является защита
клеток от активных форм кислорода, продукция которых
значительно повышается при ИГМ. Снижение митохондриального тиолдисульфидного отношения (а именно,
увеличение GSSG и протеин-связанного SSG) может сопровождаться активацией апоптоза. N-ацетилцистеин выполняет важные антиоксидантную и биорегуляторную функции в клетке.
Цель исследования: изучить редокс-состояние ткани
головного мозга у крыс в условиях его ишемии-реперфузии
(ИР) и введения ацетилцистеина (АЦЦ).
Материалы и методы
Эксперименты выполнены на 22 крысах линии Wistar
массой 200–250 г. Проведены три серии исследований.
188
Первую серию (n=8) составили ложнооперированные
животные (контроль). Вторую серию – животные с ИР
(n=7). Крысам третьей группы с ИР головного мозга за час
до моделирования в/м вводили АЦЦ в дозе 100 мг/кг
(n=7).
Ишемию-реперфузию головного мозга (ИРГМ) моделировали путем наложения и последующего снятия сосудистых зажимов на общие сонные артерии в условиях наркоза (в/в тиопентал натрия, 60 мг/кг массы тела).
Исследования проведены через 1 час после возобновления
мозгового кровотока. В гомогенатах предварительно замороженного в жидком азоте мозга осуществляли определение концентрации восстановленного глутатиона (SH-),
общих сульфгидрильных групп глутатиона и белков (TSH),
активности глутатионпероксидазы, продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой (ТБКРС). Определение
показателей осуществляли с учетом коэффициента молярной экстинкции путем определения оптической плотности
исследуемых образцов на спектрофотометре Cary (USA).
№ 3 (27) авг уст 2013 МЕДИЦИНСКИЙ А ЛЬМАНАХ
Неврология, психиатрия,
наркология
Статистическая обработка данных осуществлялась непараметрическими методами статистики, с использованием
программы Statistica 6,0. Различия между группами устанавливали с помощью критерия Манна-Уитни.
Результаты исследования
У крыс с повреждением головного мозга, вызванным ИР,
обнаружено достоверное снижение SH- на 41% (p<0,05), TSH –
на 31% (p<0,05) и повышение активности глутатионпероксидазы – на 46% (p<0,05), отражающего высокую напряженность ферментативных механизмов антиоксидантной защиты. Отмечался рост ТБКРС на 27% (p<0,05). В условиях введения АЦЦ в постреперфузионный период выявлено менее значительное снижение SH- на 31% (p<0,05), TSH – на 8,4%
(p<0,05), повышение активности глутатионпероксидазы на
16% (p<0,05), рост ТБКРС на 11% (p<0,05), по сравнению со
значениями показателей у крыс контрольной группы.
189
Заключение
Результаты согласуются с данными литературы о способности АЦЦ способствовать корригированию тиолдисульфидного отношения, нарушение которого способствует
активации апоптоза вследствие уменьшения митохондриального мембранного потенциала и образования ATФ,
ингибирования транспорта mtGSH, поддержания системы
глутатиона как наиболее важной антиоксидантной системы клетки, необходимой для активности ключевых тиолсодержащих белков.
Исходя из полученных результатов, считаем, что коррекция редокс-состояния ткани головного мозга – одно из
важных направлений снижения выраженности повреждения головного мозга при его ишемии-реперфузии.
Работа выполнена при поддержке гранта БРФФИ
№ Б11ОБ-122 от 15 апреля 2011.
№ 3 (27) авг уст 2013 МЕДИЦИНСКИЙ А ЛЬМАНАХ