Тестирование вирусной безопасности донорской крови

Тестирование вирусной безопасности
донорской крови
АмплиСенс®
HCV/HBV/HIV-FL
Набор реагентов «АмплиСенс® HCV/HBV/HIV-FL»
предназначен для одновременного выявления РНК
вируса гепатита С (HCV), вируса иммунодефицита человека типа 1 (HIV-1), типа 2 (HIV-2) и ДНК
вируса гепатита B (HBV) в клиническом материале
методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с
гибридизационно-флуоресцентной детекцией.
«АмплиСенс HCV/HBV/HIV-FL» разработан в ЦНИИ
Эпидемиологии Роспотребнадзора специально для обеспечения биологической безопасности при переливании крови,
трансплантациях и производстве препаратов, содержащих
компоненты крови. Исследованию подвергаются образцы
плазмы, в том числе объединенные в минипулы.
Принцип анализа
В основе метода — прямое определение РНК/ДНК возбудителей методом амплификации нуклеиновых кислот.
Рекомендуемый материал для исследования — образцы
плазмы крови или их пулы. Возможно проведение анализа
других видов клинического и биологического материала
(сыворотка, компоненты крови, биоптаты и др.).
Программно-аппаратный комплекс
для тестирования донорской крови
Для достижения максимальной чувствительности тестирования проводится одновременное выделение нуклеиновых
кислот из большего объема образца (до 1 мл).
Амплификация и детекция нуклеиновых кислот всех трёх
вирусов проводятся в одной пробирке, при этом мишени
независимо детектируются по 4 или 5 каналам:
РНК HCV
Green
РНК HIV-1
Yellow
ДНК HBV
Orange
РНК HIV-2
Crimson
Экзогенный внутренний контроль
Пулирование
Neon 100-1-8 (XIRIL)
Red
Два варианта проведения анализа:
• последовательный:
Выделение нуклеиновых кислот
и подготовка к проведению ПЦР
QIASymphony SP/AS (QIAGEN)
ПЦР-анализу подвергаются образцы плазмы, негативные по ИФА. Более экономичный, но более длительный.
• параллельный:
ПЦР и ИФА проводятся одновременно для всех образцов плазмы. Позволяет получить быстрое и полное заключение.
Амплификация и детекция
Rotor-Gene Q (QIAGEN)
Управление процессом
и анализ результатов
Пулирование образцов плазмы крови
Набор реагентов «АмплиСенс HCV/HBV/HIV-FL» может быть использован как для анализа индивидуальных образцов, так
и нескольких образцов плазмы, объединенных в мини-пул. Пулирование образцов позволяет уменьшить стоимость анализа
и увеличить пропускную способность лаборатории.
Рекомендуемое количество образцов плазмы крови, входящих в состав мини-пула, – от 4 до 10 с рекомендуемым общим
объемом 1000 мкл.
Способы пулирования плазмы:
Схема одинарного пулирования – каждый индивидуальный образец плазмы входит в состав только одного
пула. При пулировании 100 индивидуальных образцов
получается 10 пулов.
Рекомендуется, если:
• Частота встречаемости
положительных образцов в ПЦР-тестировании
<1%, при анализе негативных проб после
ИФА
• Нет необходимости в
быстрой расшифровке
положительных минипулов
10 пулов
1
11
21
31
41
51
61
71
81
91
2
12
22
32
42
52
62
72
82
92
3
13
23
33
43
53
63
73
83
93
4
14
24
34
44
54
64
74
84
94
5
15
25
35
45
55
65
75
85
95
6
16
26
36
46
56
66
76
86
96
7
17
27
37
47
57
67
77
87
97
8
18
28
38
48
58
68
78
88
98
9
19
29
39
49
59
69
79
89
99
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
Схема двойного пулирования (матричный способ) –
каждый образец входит в состав двух пулов. При пулировании 100 индивидуальных образцов получается 20 пулов.
Данная схема предназначена для быстрой расшифровки
минипулов в случае по20 пулов
ложительного результата.
Рекомендуется, если:
1
11
21
31
41
51
61
71
81
91
• Частота встречаемости
положительных образцов в ПЦР-тестировании
≥1%, при анализе негативных проб после ИФА
2
12
22
32
42
52
62
72
82
92
3
13
23
33
43
53
63
73
83
93
4
14
24
34
44
54
64
74
84
94
• Есть необходимость в быстрой выдаче результатов
по расшифровке положительных мини-пулов
5
15
25
35
45
55
65
75
85
95
6
16
26
36
46
56
66
76
86
96
7
17
27
37
47
57
67
77
87
97
8
18
28
38
48
58
68
78
88
98
9
19
29
39
49
59
69
79
89
99
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
Выделение нуклеиновых кислот
Рекомендованные способы выделения НК из плазмы крови
Ручные методы:
• РИБО-преп – преципитационный метод выделения НК из 100 мкл;
• РИБО-сорб – сорбентный метод выделения НК из 100 мкл;
• МАГНО-сорб – выделение НК с использованием магнетизированной силики из 200 или 1000 мкл;
Полуавтоматические методы:
• Станция «NucliSENS® easyMAG™» («bioMérieux», Франция) совместно с комплектом реагентов «ЕМ-плюс» из 100-1000 мкл.
Автоматические методы:
• Neon 100-1-8 (XIRIL, Швейцария) для пулирования и QIAsymphony SP/AS (QIAGEN, Германия) для выделения НК
и подготовки проб к ПЦР.
Чувствительность
Объём образца
для выделения,
мкл
100
Аналитическая чувствительность выявления в пуле*
Метод выделения
Ручное выделение с реагентами «РИБО-сорб»
и «РИБО-преп»
HCV,
ME/мл
HBV,
ME/мл
HIV-1,
копий/мл
HIV-2**,
копий/мл
100
50
200
600
50
25
100
300
10
5
20
60
Автоматическая станция «NucliSENS easyMAG»
200
Ручное выделение с реагентами «МАГНО-сорб»
Ручное выделение с реагентами «МАГНО-сорб»
1000
Автоматическая сианция «NucliSENS easyMAG»
QIASymphony Virus/Bacteria Midi Kit
* Чувствительность для индивидуальных образцов кратна разведению при пулировании
** При использовании комплекта реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-4x (форма выпуска 6) РНК HIV-2 не детектируется
Преимущества набора реагентов «АмплиСенс HCV/HBV/HIV-FL»
• Одновременное выявление HCV, HBV, HIV-1 и HIV-2 в формате мультиплекс в одной пробирке
• Возможность выявлять инфицированных лиц при отрицательных результатах ИФА
• Значительное сокращение времени анализа и упрощение
процедуры тестирования по сравнению с моно-тестами на
один возбудитель
• Подтверждающее исследование при положительных результатах ИФА
• Аналитическая чувствительность и специфичность соответствует высочайшим мировым стандартам
• Возможность анализа индивидуальных образцов и минипулов
(до 10 образцов при пулировании)
• Реакция обратной транскрипции совмещена с реакцией
амплификации, что упрощает работу лаборантов и сокращает количество ошибок
• Возможность автоматического и ручного выделения нуклеиновых кислот из 1 мл плазмы крови для достижения максимальной чувствительности
• Защищенные РНК-содержащие контроли экстракции и
ДНК-контроли стадии амплификации позволяют оценивать проведение каждого этапа анализа
• Разработан программно-аппартаный комплекс для полной автоматизации анализа образцов и интерпретации
результатов
• Набор реагентов апробирован в ряде крупных станций
переливания крови и центрах трансплантологии. Прошел
государственные испытания в ГИСК им. Л.А. Тарасевича
• Регистрационное удостоверение Росздравнадзора
№ ФСР 2009/06187 от 06.06.2011
Информация для заказа:
Кат. №
Название
Описание
«АмплиСенс
HCV/HBV/HIV-FL»
Выявление HCV-РНК, HBV-ДНК, HIV-1-РНК, HIV-2-РНК (для 5-и и более канальных приборов). Набор реагентов полной комплектации.
Содержит комплект для выделения нуклеиновых кислот «МАГНО-сорб». 100 тестов
«АмплиСенс
HCV/HBV/HIV-FL»
Выявление HCV-РНК, HBV-ДНК, HIV-1-РНК, HIV-2-РНК (для 5-и и более канальных приборов). Набор реагентов для проведения реакции обратной транскрипции и амплификации.
Для выделения РНК/ДНК рекомендуются: «МАГНО-сорб» Вариант 1000 или реагенты для «NucliSENS® easyMAG» (+ комплект реагентов ЕМ-плюс). 100 тестов
«АмплиСенс
HCV/HBV/HIV-FL»
Выявление HCV-РНК, HBV-ДНК, HIV-1-РНК (для 4-х и более канальных приборов).
Набор реагентов для проведения реакции обратной транскрипции и амплификации.
Для выделения РНК/ДНК рекомендуются: «РИБО-сорб», «РИБО-преп», «МАГНОсорб» Вариант 1000 или реагенты для «NucliSENS® easyMAG»
(+ комплект реагентов ЕМ-плюс). 100 тестов
«МАГНО-сорб»
Для выделения РНК/ДНК из плазмы и сыворотки крови человека на магнитных
частицах из 1000 мкл.
Для ручного выделения или автоматического выделения с использованием станции Xiril). 100 тестов
К2-16-200
«МАГНО-сорб»
Для выделения РНК/ДНК из плазмы и сыворотки крови человека на магнитных
частицах из 200 мкл.
Для ручного выделения или автоматического выделения с использованием станции Xiril. 100 тестов
K2-9-Et-100
«РИБО-преп»
Набор для выделения РНК/ДНК методом высаживания из плазмы крови, ликвора,
слюны, амниотической жидкости, мазков. 100 тестов
K2-1-Et-100
«РИБО-сорб»
Набор для выделения РНК/ДНК методом аффинной сорбции на частицах силикагеля, универсальный. 100 тестов
К2-15-96
«ЕМ-плюс»
Комплект дополнительных реагентов для выделения РНК/ДНК с помощью автоматической станции «NucliSENS® easyMAG» при использовании набора реагентов
АмплиСенс® HCV/HBV/HIV-FL. 100 тестов
TR-V62-Ms
(RG,Dt)
R-V62(RG,Dt)
R-V50-4x
(RG,iQ,Мх,Dt)
К2-16-1000
115035, Россия, Москва, ул. Садовническая, д 20/13, стр. 2
ИнтерЛабСервис
Тел.: +7 (495) 664 2884, факс: (495) 664 2889
[email protected]
www.interlabservice.ru