78

78
ТЕЗИСЫ
МАТЕРИАЛЫ БЕЛОРУССКО-РОССИЙСКОЙ…
А.В. Смирнова1, И.Е. Трубицына1, Е.В. Ткаченко1, Г.Г. Варванина1, З.А. Соколова2,
О.С. Бурова2, А.Ю. Барышников2
ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ АЦЕТИЛХОЛИНА
НА СКОРОСТЬ ПРОЛИФЕРАЦИИ КЛЕТОК SW620 МЕТОДОМ МТТ
1
ГБУЗ ЦНИИГ ДЗМ, Москва
2
ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» РАМН, Москва
Введение. Ацетилхолин – нейромедиатор с выраженным про-пролиферативным действием регулирует процессы воспаления слизистой оболочки органов пищеварения, в зонах острого воспаления его концентрация остается стабильно высокой до 7–14 дня от начала повреждения, после чего его активность снижается. Трансформация нормальных эпителиальных клеток ЖКТ в опухолевые в условиях избытка ацетилхолина происходит более
активно именно в зоне хронического воспаления. Нарушение презентации антигенов опухолевой клетки в контексте с молекулами главного комплекса гистосовместимости (MHC) в конечном итоге приводит к несостоятельному противоопухолевому ответу.
Цель исследования. Определить способность ацетилхолина влиять на пролиферацию и установить взаимосвязь между клеточным ростом и дозами/временем инкубации с веществом методом МТТ на СОХ-2 позитивной линии аденокарциномы человека SW-620.
Материалы и методы. Статистическая обработка данных проводилась в программе Statistica 6.0 с использованием Т-критерия Стьюдента и непараметрического критерия Манна – Уитни; достоверность считали при
р≤0,05.
Результаты и выводы. Мы показали, что при инкубации 24, 72 и 96 ч ацетилхолин в однократной дозе способен влиять на скорость пролиферации. Было выявлено, что под действием препарата способность клеток образовывать монослой изменяется – формируются не характерные спирально закрученные области роста, которые
распадаются при смене среды без препарата. В лунках с контролем таких изменений не наблюдали. Статистически достоверно показано, что при инкубации 96 ч препарат в дозах 10-3, 10-4, 10-5М угнетает пролиферацию
на 28, 24 и 16% соответственно. В аналогичных дозах на 24 и 72 ч инкубации такого изменения не выявили.
Статистически достоверное цитотоксическое действие препарата в дозах 0,25–0,03М обусловлено диссоциацией молекул ацетилхолина на уксусную кислоту и холин. Пролиферация в этих лунках полностью восстанавливается к 96 ч инкубации.
А.В. Смирнова1, И.Е. Трубицына1, Е.В. Ткаченко1, Г.Г. Варванина1,
З.А. Соколова2, О.С. Бурова2, А.Ю. Барышников2
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВЛИЯНИЯ АЦЕТИЛХОЛИНА
НА ЭКСПРЕССИЮ МОЛЕКУЛ ГЛАВНОГО КОМПЛЕКСА ГИСТОСОВМЕСТИМОСТИ
У КЛЕТОЧНОЙ ЛИНИИ SW620
1
ГБУЗ ЦНИИГ ДЗМ, Москва
2
ФГБУ «РОНЦ им.Н.Н. Блохина» РАМН, Москва
Цель исследования. Определить влияние ацетилхолина на уровень экспрессии молекул главного комплекса
гистосовместимости in vitro на СОХ-2 позитивной линии аденокарциномы человека SW-620.
Материалы и методы. Обработка данных была проведена пакетом программ Statistica 6.0. ANOVA, достоверность определяли при р≤0,05.
Результаты. Ранее методом МТТ мы показали, что при действии ацетилхолина способность клеточной популяции к пролиферации может изменяться – уменьшаться в первые 24–72 ч и увеличиваться в период 72–96 ч.
Мы обнаружили, что влияние pH среды на уровень экспрессии молекул MHC I и II классов на поверхности клеток не существенно: сравнение нативных, клеток из культурального флакона и обработанных ацетилхолином
не выявило статистически значимых различий. При сравнении контроля и клеток с препаратом, которые инкубировали 72 ч с однократной дозой 0,003М, выявили снижение уровня экспрессии молекулы MHC II на 20% и
10-3М – увеличение на 45%; к 96 ч данная разница не выявлялась ни в одной группе сравнения. При сравнении
экспериментальных групп 72 и 96 ч инкубации с одинаковыми дозами препарата, были выявлены статистически значимые изменения уровня экспрессии только для молекулы MHC II класса для доз 0,06 М и 10-4М.
Выводы. Мы считаем, что изменения уровня экспрессии MHC II класса на клеточной линии аденокарциномы
SW620 связаны с циклами пролиферации: происходит отбор клонов с измененной экспрессией молекул MHC II
класса в ответ на высокую дозу нейромедиатора, в то время как при воздействии более низких доз таких процессов не наблюдают. Мы предполагаем, что такие изменения пролиферативной активности могут быть одним
из механизмов опухолевого ускользания в зонах хронического воспаления толстой кишки.
№ 2/том 12/2013
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ