R-6028 ИХТ «GiardiaCryptosporidium Тест

28 Pierre Köenig St., Talpiot Industrial Area
P.O.B 53231 Jerusalem 91531 ISRAEL
Phone: 972-2-6781861; Fax : 972-2-6781852
e-mail: [email protected]
Crypto-Giardia Тест
ЭКСПРЕСС-ТЕСТ ДЛЯ КАЧЕСТВЕННОГО ОДНОЭТАПНОГО ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИГЕНОВ
Cryptosporidium parvum и Giardia intestinalis В ФЕКАЛИЯХ ЧЕЛОВЕКА.
Кат. № R-6028.
ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ
НАЗНАЧЕНИЕ
Crypto-Giardia Тест производства компании Novamed Ltd., Израиль
- иммунохроматографическая тест-система для качественного
экспресс-выявления антигенов Cryptosporidium and Giardia в
фекалиях
человека
с
целью
быстрой
диагностики
криптоспорадиоза и лямблиоза.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ
Криптоспоридиоз-протозойное заболевание человека, обычно
протекающее в гастроинтестинальной форме осмотического
гипоферментативного типа (диарея) и принимающее тяжелые
формы у лиц с иммунодефицитом. Криптоспоридии
(Cryptosporidium spp) - простейшие (Protozoa), относящиеся к
подклассу кокцидий. Известно около 20 видов криптоспоридий,
хозяевами которых являются различные животные (телята, овцы
и др.). Человек - хозяин только одного вида криптоспоридии (С.
parvum), но строгой специфичности хозяев нет. Источником
инвазии являются человек и различные животные. Полное
развитие паразита происходит в организме одного хозяина
(человека или животного) и завершается выделением с
фекалиями ооцист, устойчивых к действию неблагоприятных
факторов, способных длительно сохраняться во внешней среде и
заражать новых хозяев. Ооцисты Криптоспоридии диаметром 4-5
мкм заглатываются человеком или животным с пищей или
водой. В кишечнике хозяина ооцисты проходят в течение 4-7
дней определенный цикл развития (спорозоиты, трофозоиты,
мерозоиты, гаметоциты) до образования и выделения с
фекалиями новых ооцист. Механизм передачи - фекальнооральный. Известны семейные и внутригоспитальные вспышки
криптоспоридиоза. Криптоспоридии - одна из частых причин
«диарей путешественников».
Лямблиоз (гиардиаз) -диарейное заболевание, вызываемое
жгутиковыми простейшими Giardia intestinalis, также известными
как G. lamblia и G. duodenalis или просто лямблиями,
паразитирующими в тонкой кишке, иногда в желчном пузыре.
Лямблии существуют в двух формах: подвижной (вегетативной) и
неподвижной (форма цисты). Заражение происходит при
употреблении загрязнённых цистами продуктов питания и воды, а
также через загрязнённые цистами ру́ ки и предметы обихода.
Попав в желудочно-кишечный тракт здорового человека, лямблии
размножаются в тонкой кишке, иногда в больших количествах, и
вызывают раздражение слизистой оболочки. Проникая из тонкой
кишки в толстую (где условия для них неблагоприятны), лямблии
теряют свою подвижность и превращаются в цисты. Цисты
выделяются
из
организма
больного
лямблиозом
с
испражнениями.По данным ВОЗ, ежегодно лямблиями заражаются
около 200 млн человек (страны Азии, Африки, Латинской
Америки). Клинические проявления лямблиоза регистрируются
почти у 500 млн больных в год во всём мире.
ПРИНЦИП
Crypto-Giardia Тест производства компании Novamed Ltd.,
Израиль представляет собой помещенную в пластиковый футляр
(кассету)
полоску
нитроцеллюлозной
мембраны
с
фиксированными на ней в области добавления пробы
моноклональными антителами к антигенам Cryptosporidium
parvum and Giardia intestinalis конъюгированные с окрашенными
частичками латекса ( красными в случае Cryptosporidium и
синими в случае Giardia). В области тестового окошка также
зафиксированы моноклональные антитела к к антигенам
Cryptosporidium parvum and Giardia intestinalis . Поликлональные
анти-антитела зафиксированы в контрольной зоне полоски.
Антигены Cryptosporidium parvum and Giardia intestinalis,
содержащиеся в пробе, реагируют
со специфическими
меченными моноклональными антителами, формируя комплекс
антиген-антитело, который мигрирует по мембране, образуя
красную в случае Cryptosporidium или синюю в случае Giardia
цветные линии в в тестовом окошке, что оценивается как
положительный результат. Непрореагировавший конъюгат
мигрирует далее к контрольной зоне, где
захватывается
поликлональными анти-антителами, формируя зеленую линию в
контрольной зоне тестового окошка. Kонтрольная линия
появляется всегда. Наличие контрольной линии подтверждает
корректность результатов теста (правильный объем пробы,
необходимый темп миграции, требуемое качество реагентов).
КОМПЛЕКТАЦИЯ НАБОРА
В состав набора входит:
20 тестовых устройств (кассет) Crypto-Giardia Тест упакованных
в индивидуальные алюминиевые пакетики;
20 одноразовых пластиковых пробирок-капельниц содержащих 1
мл буферa для разведения пробы;
1 инструкция к применению.
Необходимые,
не
предоставляемые
материалы:
- контейнер для отбора образца
- одноразовые перчатки
- таймер
производителем
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
1. Набор Crypto-Giardia Тест предназначен только для
использования in vitro в целях лабораторной диагностики.
2. Не допускается использование набора и его компонентов после
истечения срока годности.
3. Не использовать тест из поврежденной упаковки.
4. При проведении исследования необходимо следовать правилам
работы
в
лаборатории,
в
частности,
использовать
специализированную одежду, одноразовые перчатки, не
принимать пищу и не курить на рабочем месте.
5. Исследование проб фекалий регламентируется правилами
работы с инфекционными агентами.
6. После проведения исследования устройство должно быть
утилизировано в соответствующий контейнер для отходов.
7. Необходимо провести тест не позднее 2 ч после вскрытия
упаковки.
ХРАНЕНИЕ
Crypto-Giardia Тест необходимо хранить при температуре 2-30оС.
Не замораживать! Не допускается использование набора и его
компонентов после истечения срока годности. Срок годности
набора указан на упаковке. До использования тестовое устройство
должно находиться в неповрежденной индивидуальной упаковке.
ОТБОР, ХРАНЕНИЕ И ПОДГОТОВКА ПРОБ.
Фекалии собирают в чистый сухой контейнер без следов
консервантов или транспортных сред. Не рекомендуется
обрабатывать пробу растворами, содержащими формальдегид
или его производные. Для проведения теста необходима проба в
количестве 1-2 г или 1-2 мл, в случае жидкого образца. До
исследования пробу хранят в холодильнике при температуре
+2+4 °С в течение 1-2 дней, если исследование в течение этого
периода невозможно, пробу необходимо поместить в
морозильную камеру при температуре -20 оС. Перед
исследованием пробу размораживают и доводят до комнатной
температуры. Остатки проб утилизируют в соответствии с
правилами, принятыми в данном учреждении.
ТЕХНИКА ВЫПОЛНЕНИЯ АНАЛИЗА
Подготовка образца к тестированию (см. Рис.1):
Для каждого образца фекалий следует использовать отдельную
пробирку-капельницу с буфером для разведения. Открутить
крышку емкости пробоотборника с вмонтированным в нее
аппликатором. Аппликатор дважды погружают в фекальную
массу, при этом на кончике аппликатора должно остаться
приблизительно 150 мг образца. В случае жидкого стула,
забрать в качестве образца 150 мкл испражнений пипеткой и
перенести в пробирку-капельницу с буфером.
Рисунок 1
Pick up the sample
Mix the sample with
the buffer
Break the cap
FAECES
Процедура выполнения теста (см. Рис.2):
Перед началом тестирования следует довести тестовую кассету и
образец до комнатной температуры (15-30ºC). Не вскрывать
индивидуальную упаковку теста до начала исследования.
1. Непосредственно перед проведением исследования вскрыть
индивидуальную упаковку теста.
2. Маркировать
тестовую
кассету
инициалами
или
идентификационным номером пациента.
3. Суспендировать пробу энергичным встряхиванием пробиркикапельницы.
4. Отломить кончик крышки-капельницы и через открывшееся
отверстие внести 4 капли (100 мкл) тестируемой суспензии в
окошко для внесения пробы (S).
5. Результат анализа учитывают через 10 мин после загрузки
тестовой кассеты пробой.
Рисунок 2
4 drops of the mixture “sample + buffer”
S
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Рисунок 3
CRYPTO
GIARDIA
CRYPTO-GIARDIA NEGATIVE
INVALID
Отрицательный результат: одна зеленая линия появляется в
контрольной зоне (С) тестового окошка кассеты;
Положительный результат на Cryptosporidium parvum: в
дополнение к зеленой контрольной линии появляется красная
линия в тестовой зоне (Т) тестового окошка кассеты;
Положительный результат на Giardia intestinalis: в
дополнение к зеленой контрольной линии появляется синяя
линия в тестовой зоне (Т) тестового окошка кассеты;
Положительный результат на Cryptosporidium parvum и
Giardia intestinalis: в дополнение к зеленой контрольной линии
появляются красная (Cryptosporidium parvum) и синяя (Giardia
intestinalis) линии в тестовой зоне (Т) тестового окошка кассеты.
Одновременное появление двух цветных линий (красной и
синeй) в тестовой зоне говорит об одновременном
инфицировании двумя паразитами.
Недействительный результат: отсутствие зеленой контрольной
линии (С) вне зависимости от наличия или отсутствия
окрашенных линий (красной и/или синeй) в тестовой зоне (Т)
тестового окошка кассеты. Неправильный объем пробы,
несоблюдение процедуры тестирования или качество реагентов –
наиболее частые причины отсутствия контрольной линии.
Проанализируйте процедуру тестирования и повторите ее с
использованием новой тест-кассеты. Если проблема остается,
следует прекратить тестирование и связаться с
местным
дистрибьютором.
Замечания по интерпретации результатов
Интенсивность окраски красной и синeй линий в тестовой зоне
кассеты меняется в зависимости от концентрации антигенов в
образце. Однако ни количественное содержание антигенов, ни
степень их возрастания не могут быть установлены с помощью
данного качественного теста.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
1. Тест предусматривает внутренний контроль за правильностью
проведения процедуры. Зеленая линия появляющаяся в
контрольной зоне (C) тестовой кассеты, указывает
на
правильность проведения процедуры теста.
2. Результаты теста не учитывают в случае если неясный фон
мешает интерпретировать результаты.
ОЖИДАЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ
Как и у животных, криптоспоридиоз среди людей встречается
чаще у лиц молодого возраста. В за-падных странах 1,4—4,1%
детей младшего возраста, поступающих в медицинские
учреждения
с
гастроэнтеритом,
выделяют
ооцисты
криптоспоридий; в странах третьего мира эти цифры колеблются
от 4 до 11%. При вспышках болезней, сопровождающихся
диареей, в дневных центрах по уходу в 63% случаев в фека-лиях
у детей обнаруживались ооцисты криптоспоридий. Показатели
инвазированности у взрослых, страдающих от гастроэнтеритов,
составляют примерно 33% от таковых у детей и достигают
максимальных значений у членов семей иинфицированных
детей, медицинского персонала, ухаживающего за больными
криптоспоридиозом, у мужчин-гомосексуалистов и лиц,
выезжавших в зарубежные страны. Бессимптомное носительство
при криптоспоридиозе встречается редко.
Лямблиоз широко распространен среди населения. Пораженность
лямблиями среди детей достигает 15-20%, взрослых - 3-10%.
Чем ниже социально-экономический уровень населения, тем
выше инвазированность лямблиями. Течение лямблиоза может
варьироваться от субклинической до тяжелой формы и возникает
вследствие поражения лямблиями тонкого кишечника и печени.
В большинстве случаев зараженные лямблиозом люди являются
«здоровыми» носителями, но при этом являются источником
инфекции. Основным источником лямблиоза является больной
человек. Цисты лямблий обнаруживаются в хлорированной воде
из-под крана, в загрязненных водоемах. Достаточно проглотить
всего 10 цист лямблий, и при этом иметь снижение уровня
кислотности желудочного сока, чтобы заразиться лямблиозом.
ХАРАКТЕРНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ТЕСТА
Чувствительность и специфичность теста
Сравнительное изучение фекальных образцов методами
микроскопического исследования и Crypto-Giardia Тест
производства компании Novаmed Ltd, Израиль проведенное в
одной из клиник Испании показало показало уровни
чувствительности и специвфичности Crypto-Giardia Теста выше
99 % для обоих паразитов по сравнению с микроскопической
техникой.
Перекрестное реагирование
При исследовании проб, содержащих
заведомо известные
антигены Cryptosporidium parvum, Giardia intestinalis и
Entamoeba histolytica, Crypto-Giardia Тест производства компании
Novаmed Ltd, Израиль не показал неспецифических
перекрестных реакций.
ОГРАНИЧЕНИЯ
1. Устройство указывает исключительно на наличие паразитов в
образцах, обеспечивая качественную детекцию и может
использоваться только для исследования фекальных образцов.
2. Избыточное количество образца может повлечь за собой
получение некорректных результатов (появление коричневой
полосы). Необходимо повторно развести образец буферным
раствором и повторить тест.
3. Не использовать для исследования образцы, содерщащие
формальдегид и его производные.
4. Для постановки корректного диагноза необходимо обязательно
сопоставление результатов теста с прочей клинической
информацией.
Тест
обеспечивает
предварительную
диагностику и должен использоваться в совокупности с
результатаи прочих клинических тестов.
5. Отрицательный результат теста не исключает возможность
инфекции в отдельных случаях по причине низкой
концентрации вирусных антигенов.
6. Для повышения вероятности обнаружения антигенов
возбудителя тест рекомендуется проводить не позднее 1 недели
после возникновения первых симптомов заболевания
ЛИТЕРАТУРА:
1. Hill DR, Nash TE. Intestinal Flagellate and Ciliate Infections. In: Guerrant RL,
Walker DH, Weller PF, eds. Tropical Infectious Diseases. Principles,
Pathogens & Practice. 2nd ed. Elsevier, Philadelphia. 2006:984-8.
2. Copue S, Delabre K, Pouillot R et al. Detection of Cryptosporidium, Giardia
and Enterocytozoon bieneusi in surface water, including recreational areas: a
one year prospective study: FEMS Immunol Med Microbiol. 2006; 47:351-9.
3.Stuart JM, Orr HJ, Warburton FG, et al. Risk Factors for Sporadic Giardiasis:
A Case-Control Study in Southwestern England. Emerg. Infect Dis. 2003; 9, 2
УТВЕРЖДАЮ
Генеральный директор ООО «ГЕМ»
________________С.А. Гольдберг
«17» сентября 2010 г.
Представительство в РФ:
ООО «ГЕМ» г. Москва,
Зыковский проезд, д. 4А.
+7 (495) 787-04-32
www.hemltd.ru
Новый
IFU-Crypto-Giardia-R6028c-HEM-russ- v.01-20.08.11