Рота/Адено КомбиСтик

28 Pierre Köenig St., Talpiot Industrial Area
P.O.B 53231 Jerusalem 91531 ISRAEL
Phone: 972-2-6781861; Fax : 972-2-6781852
e-mail: [email protected]
www.novamed.co.il
Рота/Адено КомбиСтик
ЭКСПРЕСС-ТЕСТ ДЛЯ КАЧЕСТВЕННОГО ОДНОЭТАПНОГО ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИГЕНОВ
РОТАВИРУСА И АДЕНОВИРУСА В ФЕКАЛИЯХ ЧЕЛОВЕКА.
Кат. № R-5192 (25 определений)
ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ
НАЗНАЧЕНИЕ
Рота/Адено КомбиСтик - иммунохроматографическая тест-система
для экспресс-диагностики рота- и адновирусных инфекций у
человека.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ
Ротавирус является одной из основных причин гастроэнтеритов у
детей. Ротавирусы вызывают некротические поражения эпителия
слизистой оболочки тонкого отдел кишечника, сопровождающиеся
развитием диарейного синдрома, тяжелого обезвоживания и
нарушения электролитного баланса организма 1. Служит причиной
госпитализации новорожденных и детей дошкольного возраста
почти в 50% случаев диареи2,3. Пик заболеваемости приходится на
холодные месяцы года в странах с умеренным климатом 4. В
тропических районах заболеваемость остается на одном уровне в
течение всего года 2. Помимо новорожденных и и детей раннего
возраста 4 также поражаются пожилые люди. Диагностика
ротавирусного гастроэнтерита основана на обнаружении
возбудителя с помощью электронной микроскопии или
иммунологических методов, одним из которых является метод
иммунохроматографии.
Аденовирус вызывает у людей поражения респираторного и
желудочно-кишечного трактов, а также глаз. Тест-система
Рота/Адено КомбиСтик позволяет выявлять специфические
антигены всех известных (41) серотипов аденовирусов человека.
ПРИНЦИП
Рота/Адено КомбиСтик производства компании Novamed Ltd.,
Израиль представляет собой полоску нитроцеллюлозной
мембраны с фиксированными на ней, в области добавления
пробы, моноклональными мышинными антителами к ротавирусу
и аденовирусу человека, конъюгированными с окрашенными
частичками латекса. В области тестового окошка также
зафиксированы моноклональные антитела к ротавирусу и
аденовирусу человека. Поликлональные антимышинные антитела
зафиксированы в контрольной зоне полоски. Ротавирус и/или
аденовирус человека содержащийся в пробе, реагирует со
специфическими
меченными моноклональными антителами,
формируя комплекс антиген-антитело, который мигрирует по
мембране, образуя красную и/или синюю цветные линии в
тестовой зоне мембраны, в зависимости от присутствия в образце
того или иного антигена или двух одновременно, что оценивается
как положительный результат. Непрореагировавший конъюгат
мигрирует далее к контрольной зоне, где
захватывается
поликлональными антимышинными антителами, формируя
зеленую цветную линию в контрольной зоне мембраны.
Kонтрольная линия появляется всегда. Наличие контрольной
линии
подтверждает
корректность
результатов
теста
(правильный объем пробы, необходимый темп миграции,
требуемое качество реагентов).
КОМПЛЕКТАЦИЯ НАБОРА
В состав набора входит:
25
полосок
Рота/Адено
КомбиСтик,
упакованных
в
индивидуальные алюминиевые пакеты;
25 пластиковых одноразовых пробирок в пластиковом штативе,
содержащих по 0.5 мл буфера для разведения пробы;
1 инструкция к применению.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
1. Не допускается использование набора и его компонентов после
истечения срока годности.
2. Все компоненты набора предназначены только для
использования in vitro в целях лабораторной диагностики.
3. Исследование проб фекалий регламентируется правилами
работы с инфекционными агентами.
4. Буфер для разведения пробы содержит азид натрия в качестве
бактериостатического агента, который способен реагировать со
свинцовыми и медными составными водопроводной системы
образуя азидные соли металлов, обладающие взрывоопасными
свойствами. Накопление азидов в системе водопровода можно
предотвратить обильным промыванием водой после удаления
реагента.
5. Не проводить исследование, используя компоненты наборов
разных серий.
6. Нарушение временного и температурного режимов инкубации
при проведении исследования может привести к получению
ошибочных результатов.
ХРАНЕНИЕ
Рота/Адено КомбиСтик необходимо хранить при температуре 430оС. Не замораживать! Срок годности набора указан на
упаковке.
ОТБОР И ХРАНЕНИЕ ПРОБ.
Фекалии собирают в чистый сухой контейнер без следов
телячьей/бычьей сыворотки, которые могут содержать антитела к
ротавирусам, или детергента. Для получения достоверных
результатов рекомендуется исследовать материал через 3-5 дн
после появления первых симптомов болезни (через 8 и более
дней концентрация антигена может снижаться ниже
детектируемого уровня ).
До исследования пробу хранят в холодильнике. В случае, когда
исследование материала невозможно в течение 48 ч после его
сбора, рекомендуется хранить его при температуре -20оС или
ниже. Повторное замораживание и размораживание материала
нежелательно. Остатки проб утилизируют в соответствии с
правилами, принятыми в данном учреждении.
ПОДГОТОВКА ПРОБ.
1. Открыть пробирку с буферным раствором.
2. Внести в пробирку 0.05 г (0.05 мл) пробы (величиной со
спичечную головку в случае твердого кала или 1-2 капли в
случае жидких испражнений) и плотно закрыть крышкой.
3. Суспендировать пробу энергичным встряхиванием пробирки.
4. Подождать, пока крупные частицы не осядут на дно пробирки.
ТЕХНИКА ВЫПОЛНЕНИЯ АНАЛИЗА.
1. Вытащить полоску из упаковки. Маркировать ее инициалами
или идентификационным номером обследуемого.
2. Вставить полоску вертикально в пробирку с разведенной
пробой (синими стрелками вниз). Обратить особое внимамие
на то, чтобы уровень суспензии в тестовой пробирке не
превышал уровня стрелок расположенных в нижней части
полоски и указывающих направление полоски при помещении
в пробирку.
3. Оставить полоску в пробирке в вертикальном положении до
появления результатов.
4. Результат анализа учитывают через 10 мин после внесения
полоски в пробирку с разведенной пробой. Не следует
принимать к рассмотрению результаты анализа полученные по
истечение 10 минут после внесения полоски в пробирку.
Рота-Адено КомбиСтик
Novamed Ltd
тест на Ротавирус
RIDA®QUICK
Rotavirus/Adenovirus
Combi тест на Ротавирус
+
ВСЕГО
+
ВСЕГО
16
0
16
Рота-Адено КомбиСтик
Novamed Ltd
тест на Аденовирус
RIDA®QUICK Rotavirus/Adenovirus
тест на Аденовирус
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Pотавирус
Aденовирус Pотавирус-Aденовирус Отрицат
Недействит
Отрицательный результат: одна зеленая линия появляется в
контрольной зоне (С) полоски;
Положительный результат на ротавирусную инфекцию: в
дополнение к зеленой контрольной линии появляется красная
линия в тестовой зоне (Т) полоски;
Положительный результат на аденовирусную инфекцию: в
дополнение к зеленой контрольной линии появляется синяя
линия в тестовой зоне (Т) полоски;
Положительный
результат
на
ротавирусную
и
аденовирусную инфекции: в дополнение к зеленой
контрольной линии появляются красная и синяя линии в
тестовой зоне (Т) полоски. Одновременное появление двух
цветных линий (красной и синeй) в тестовой зоне полоски
говорит об одновременном инфицировании двумя вирусами.
Недействительный результат: отсутствие зеленой контрольной
линии (С) вне зависимости от наличия или отсутствия
окрашенных линий (красной и/или синeй) в тестовой зоне (Т)
полоски. Неправильный объем пробы, несоблюдение процедуры
тестирования или качество реагентов – наиболее частые
причины отсутствия контрольной линии. Проанализируйте
процедуру тестирования и повторите ее с использованием новой
тест-полоски. Если проблема остается, следует прекратить
тестирование и связаться с местным дистрибьютором.
+
ВСЕГО
ОГРАНИЧЕНИЯ
1. Не исследовать пробы, содержащие консерванты и детергенты.
2. При отсутствии диффузии тестируемой пробы в мембрану (что
возможно по причине использования избыточного количества
пробы), рекомендуется дополнительно развести материал 0.5
мл буфера для разведения пробы (половиной объёма буфера из
неиспользованной пробирки) и повторить анализ с помощью
новой полоски.
3. Отрицательный результат теста не исключает возможность
ротавирусной или аденовирусной инфекции в отдельных
случаях по причине низкой концентрации вирусных антигенов
(стадия инфекции, неправильные пробоподготовка и хранение
материала).
ХАРАКТЕРНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ТЕСТА.
Технические характеристики набора Рота-Адено КомбиСтик
производства компании Novamed Ltd., Израиль были
установлены при сравнительном исследовании клинических
фекальных образцов на наличие аденовирусной и ротавирусной
инфекции
при
помощи
аналогичного
коммерческого
иммунохроматографического
метода
RIDA®QUICK
Rotavirus/Adenovirus Combi Rapid Test, производства RBiopharm, Германия.
2
28
30
16
22
38
ВСЕГО
10
28
38
Совпадение результатов при использовании наборов Рота-Адено
КомбиСтик, Novamed Ltd., Израиль и
RIDA®QUICK
Rotavirus/Adenovirus Combi Rapid Test, R-Biopharm, Германия
наблюдалось в 100% случаев для теста на Ротавирус и 95%
случаев для теста на Аденовирус.
С
целью
определения
уровней
чувствительности
и
специфичности набора Рота-Адено КомбиСтик производства
компании
Novamed
Ltd.,
Израиль
было
проведено
дополнительное сравнительное исследование клинических
образцов с использованием аналогичного коммерческого
иммунохроматографического теста.
Замечания по интерпретации результатов
Интенсивность окраски красной и синeй линий в тестовой зоне полоски
меняется в зависимости от концентрации антигенов в образце. Однако ни
количественное содержание антигенов, ни степень их возрастания не
могут быть установлены с помощью данного качественного теста.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
1. Тест предусматривает внутренний контроль за правильностью
проведения процедуры. Зеленая линия появляющаяся в
контрольной зоне (C) полоски, указывает на правильность
проведения процедуры теста.
2. Результаты теста не учитывают в случае если неясный фон
мешает интерпретировать результаты.
3. Перед началом работы каждую новую серию набора
необходимо тестировать с заведомо положительной контрольной
пробой. При отсутствии положительного результата с
контрольной пробой набор считают непригодным к применению.
+
8
0
8
0
22
22
Рота-Адено КомбиСтик
Novamed Ltd
тест на Ротавирус
Аналогичный
коммерческий
иммунохроматографический тест
+
ВСЕГО
+
ВСЕГО
34
0
34
Рота-Адено КомбиСтик
Novamed Ltd
тест на Аденовирус
Аналогичный
коммерческий
иммунохроматографический тест
+
ВСЕГО
+
14
0
14
0
14
14
0
34
34
34
14
48
ВСЕГО
14
34
48
VPP: >99%; NPP: >99%
Результаты проведенного исследования указывают на высокий
уровень чувствительности (>99%) и специфичности (>99%)
набора Рота-Адено КомбиСтик производства компании Novamed
Ltd., Израиль.
В соответствии с условиями испытаний набора Рота-Адено
КомбиСтик производства компании Novamed Ltd., Израиль с
применением
контрольного
антигена
был
установлен
количественный порог для опеделения ротавируса и аденовируса
равный 43.75 нг/мл для ротавируса и 4.68 нг/мл для аденовируса.
ЛИТЕРАТУРА:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
Cukor, G and Blacklow, NR. 1984. Microbiol. Rev. 48:157-179.
Kapikian, AZ, et al. in Viral, Rickettsial and Chlamydial Infections, 5th
Edition (Lennette, EH and Schmidt, NJ, editors). 1979. Am. Public
Health Assoc., pp. 927-996.
Kapikian, AZ, et al. in Viral Infections of Humans, 2nd Edition (Evans, AS,
editor). 1982. Plenum Books, pp. 283-326.
Barnett, B. 1982. Med. Clin. North Amer. 67:1031-1058.
Wadell, G. Adenoviruses in Principles and Practice of Clinical Virology
(Zuckerman, AJ et al., editors). 1990. John Wiley and Sons, pp. 267-287.
Horowitz, MS. Adenoviral diseases in Virology (Fields, BN et al., editors).
1985. Raven Press, pp. 477-495.
Madeley, CR. 1986. Paediatric Infectious Diseases 5:563-574.
Uhnoo, I et al. 1984. J. Clin. Microbiol. 20:365-372.
УТВЕРЖДАЮ
Генеральный директор ООО «ГЕМ»
________________С.А. Гольдберг
«23» июня 2010 г.
Представительство в РФ:
ООО «ГЕМ» г. Москва, Новый Зыковский
проезд, д. 4А.
+7 (495) 787-04-32
www.hemltd.ru
IFU-CombiStick-R-5192-HEM-russ.-v. v.05- 20.11.12