КИСЛОРОДЗАВИСИМАЯ АНТИМИКРОБНАЯ СИСТЕМА НЕЙТРОФИЛОВ

Казанский медицинский журнал. 2008 г., том 89, №4
УДК 618.11–006.6–07:612.112.91
КИСЛОРОДЗАВИСИМАЯ АНТИМИКРОБНАЯ СИСТЕМА НЕЙТРОФИЛОВ
В ДИНАМИКЕ РАЗВИТИЯ РАКА ЯИЧНИКОВ
Инна Ивановна Антонеева
Кафедра лучевой диагностики, лучевой терапии и онкологии (зав. — канд. мед. наук Р.Х. Мусина)
Ульяновского государственного университета, е-mail: [email protected]
Реферат
В нейтрофилах периферической крови 145 больных раком яичников на различных клинических
стадиях по FIGO цитохимически определяли активность миелопероксидазы и показатели спонтанного и
индуцированного теста НСТ. Установлено снижение
уровня миелопероксидазы в периферической крови
больных по сравнению с таковой у 120 доноров, прогрессировавшее в процессе развития опухоли, и отсутствие существенных изменений показателей НСТ-теста
на всех клинических стадиях заболевания.
Ключевые слова: нейтрофилы, рак яичников, прогрессирование опухоли, миелопероксидаза, НСТ-тест.
Кислородзависимая антимикробная
система нейтрофилов (Нф), представляющая особенный интерес в плане экстрацеллюлярной секреции оксидантов [6],
токсична не только для вирусов, грибов
и бактерий, но и для опухолевых клеток
[3, 11]. При этом, с одной стороны, депрессия функции Нф рассматривается как
фактор, усиливающий распространение
опухоли [10], с другой — с начала 1980-х
годов накапливается информация о мутагенном действии активированных Нф
на макроорганизмы и канцерогенном —
на клетки животных [8, 9]. НСТ-тест является информативным методом, отражающим итоговую реакцию этой ключевой ферментной системы. Известно, что в
периферическом кровотоке Нф находятся в состоянии готовности к выполнению
своих функций, и их потенциал может
быть выявлен при использовании нагрузочных тестов.
Целью исследования была оценка
активности миелопероксидазы (МПО),
а также показателей спонтанного и индуцированного НСТ-теста в Нф периферической крови в динамике прогрессии
рака яичников (РЯ).
В Нф периферической крови 120 практически здоровых женщин и 145 больных
476
РЯ (у 52 была I-II клинические стадии по
FIGO, у 69 — III, у 24 — IV) цитохимически
определяли активность МПО [7]. Результат выражали в виде среднего цитохимического коэффициента (СЦК). Пробу с
восстановлением нитросинего тетразолия
(НСТ) в спонтанном и стимулированном
опсонизированными частицами зимозана вариантах НСТ-теста проводили по
А.А. Быковой и Н.С. Сединой [4]. Тесты
выявляли изначальную активность и резервы при функционально-метаболической активации. Показатель интенсивности НСТ-теста выражали в условных
единицах (у.е.). Обработку данных производили с использованием непараметрических статистических методов. Для
определения значимости различий между несколькими группами использовали
Н-критерий Крускала–Уоллиса. Силу
связи между признаками устанавливали
ранговой корреляцией Спирмена.
МПО принято считать маркером
первичных азурофильных гранул. Этот
фермент выявляется на всех этапах дифференцировки гранулоцитов. Начиная
с промиелоцита активность фермента
возрастает по мере созревания клеток
и достигает максимума в зрелых Нф.
В достаточно обширной литературе,
представляющей результаты изучения
этого фермента в Нф, не существует единой точки зрения об активности его у
больных злокачественными заболеваниями. Авторы публикаций 1999–2007 гг.
сообщают о снижении, повышении или
нормальной активности МПО [1, 2, 13].
В результате проведенных нами исследований установлено (см. рис.), что активность МПО в Нф больных РЯ уже на I–II
клинических стадиях заболевания досто-
Казанский медицинский журнал. 2008 г., том 89, №4
Рис. Изменение активности МПО в Нф больных РЯ в процессе опухолевой прогрессии. Корреляция по Спирмену со стадиями РЯ отрицательная сильная (r=-0,8213).
верно ниже, чем в Нф доноров (1,60±0,12
против 2,03±0,01), и продолжает снижаться в процессе прогрессирования опухоли
(1,44±0,07 и 1,30±0,04 в НФ больных с III
и IV клинической стадией заболевания
соответственно). Различия статистически
значимы (р=0,0001).
Как показали исследования И.П. Терещенко и А.П. Кашулиной [8], применительно к Нф периферической крови хорошо работает правило исходного состояния
Вильдера—Лейтеса, согласно которому
ведущим признаком при характеристике
функциональной активности биологической системы является не величина исходного показателя, а исходное физиологическое
состояние, которое может быть различным
при одних и тех же значениях изучаемого
показателя. Нагрузочные тесты позволяют
оценить степень соответствия исходной величины показателя в каждом конкретном
случае исходному физиологическому состоянию. В качестве стимулятора использовались опсонизированные частицы зимозана.
Результаты оценки НСТ-теста представлены в табл. 1.
Среднее значение НСТ-теста в группе
доноров и у больных раком яичников на
всех клинических стадиях заболевания
сравнимы по величине. Добавление в
качестве стимулятора in vitro опсонизированного зимозана приводило к существенному повышению процента формазанположительных Нф у доноров (в 2,1 раза)
и у больных (в 1,9 раза). При этом у больных РЯ по сравнению с группой доноров
был существеннее разброс показателей
как спонтанного, так и индуцированного
НСТ-теста.
Таким образом, у больных РЯ по сравнению с донорами нами установлено снижение активности МПО в НФ, прогресТаблица 1
Показатели спонтанного и индуцированного НСТ-теста НФ при РЯ в процессе опухолевой прогрессии
Спонтанный НСТ-тест
Стимулированный НСТ-тест
Группы обследованных
% активных клеток
НСТ, усл.ед.
% активных клеток
НСТ, усл.ед.
Доноры (n=120)
9,0±1,1
21,4±1,3
29,3±2,1
45,6±1,9
Больные РЯ
I–II стадии (n=52)
9,6±1,7
20,7±3,2
30,1±1,9*
40,3±2,6*
III стадия (n=69)
10,1±2,1
22,3±3,4
31,4±1,8*
41,9±2,3*
IV стадия (n=24)
9,2±1,4
21,9±4,0
28,3±2,6*
39,6±3,1*
Коэффициент корреляции по Пирсону
-0,04225
0,326164
-0,32847
-0,0869
* Различия статистически значимы (р=0,0001).
477
Казанский медицинский журнал. 2008 г., том 89, №4
сирующее в процессе развития опухоли,
и отсутствие существенных изменений
показателей НСТ- теста у больных РЯ на
всех клинических стадиях заболевания.
Исходя из того, что изменение состояния
Нф под влиянием растущей опухоли и
эффективность их участия в противоопухолевой защите определяются в том числе
характером биологической активности
новообразования, следует, видимо, предполагать снижение киллерного эффекта
Нф при РЯ на поздних клинических стадиях заболевания.
На сегодняшний день иммунотерапия
в качестве метода лечения РЯ не имеет
широкого распространения. Более того,
получены данные, подтверждающие отрицательное влияние иммуномодуляторов, в частности ронколейкина, на выживаемость больных РЯ [12]. Полученные
нами данные могут быть использованы
для обоснования схем лечения РЯ, включающих иммуномодулирующую сопроводительную терапию [5].
ЛИТЕРАТУРА
1. Асадов Ч.Д., Нумерова Л.С. Функциональная активность нейтрофилов крови при хроническом миелолейкозе // Лаб.дело.–1990.– № 10.– С.59.
2. Блиндарь В.Н. Функциональные особенности
нейтрофилов крови онкологических больных: Автореф. дисс. …докт. биол.наук. –М., 2002.
3. Блиндарь В.Н., Зубрихина Г.Н. Современное представление о роли нейтрофилов в противоопухолевом
иммунитете // Клин.лаб.диагност. — 2005. — № 8. —
С.51.
4. Быкова А.А., Седина Н.С. Состояние фагоцитарной системы крови в НСТ-тесте в отдаленном периоде
у участников ликвидации аварии на Чернобыльской
АЭС // Клин.лаб.диагност. — 2003. — № 7. — С.16.
478
5. Ганцев Ш.Х., Рахматуллина И.Р. Оптимизация
методов сопроводительной терапии рака яичников //
Росс.онкол.журн. — 2001. — № 4. — С.23.
6. Долгушин И.И., Бухарин О.В. Нейтрофилы и гомеостаз. — Екатеринбург, 2001. — С.41.
7. Лабораторные методы исследования в клинике
Под ред. В.В. Меньшикова. — М.,1987. –356 с.
8. Терещенко И.П., Кашулина А.П. Роль системы нейтрофильных гранулоцитов в формировании особенностей развития патологического процесса // Пат.физиол. —
1993.– № 4. — С.56.
9. Browder D.E. et al. Antiangiogenic scheduling of
chemotherapy improves efficacy against experimental drugresistant cancer // Cancer Res. — 2000. — Vol.60. — P.1878.
10. Burcher E.C. Cellular and molecular mechanism
that direct leukocyte traffic // Ann.Pathol. — 1990. —
Vol.136. — P.3.
11. Clark R., Klebanoff S.I. The mieloperoxidasehydrogen peroxidase-halide system as effector of neutrophil —
mediated tumor cell cytotoxity // J.Immunol. — 1981. —
Vol.126, № 4. — P.1295.
12. Marth C., Alberts D., Alvarez R.D. et al. A randomized
phase 3 trial of interferon gamma-1b plus standard
carboplatin/paclitaxel (c/p) versus carboplatin/paclitaxel
alone for first-line treatment of advanced ovarian (OC)
and primary peritoneal carcinomas (PPC): results from a
prospectively design // 15th international meeting of the
european society of gynaecological oncology (ESGO). —
Berlin, Germany, 2007. — P.1185.
13. Sulowicz W. Phagocytosis and peroxidasa activity
in neutrophils from peripherai blood of patients with
maligmant tumours of lang, stomach and large intestine //
Folia haematol. — 1983.–Vol.110.–P. 48.
Поступила 15.02.08.
OXYGEN-DEPENDENT ANTIMICROBIAL SYSTEM
OF NEUTROPHILS IN THE DYNAMICS OF
OVARIAN CANCER
I.I. Antoneeva
Summary
Myeloperoxidase activity and indicators of spontaneous
and induced NBT-test were studied in peripheral blood
neutrophils of 145 patients with different stage of ovarian
cancer. The tumor-progression-dependent reduction of
myeloperoxidase activity in peripheral blood was found in
patients compared with 120 donors, while no significant
changes in NBT-test was determined at all stages of disease.