Обзоры Эпидермальный фактор роста и его рецепторы как

www.omr.by
Îáçîðû
Ýïèäåðìàëüíûé ôàêòîð ðîñòà è åãî ðåöåïòîðû êàê ïåðñïåêòèâíûå
êëèíèêî-äèàãíîñòè÷åñêèå è ïðîãíîñòè÷åñêèå ìàðêåðû îíêîïàòîëîãèè
Í.Â. Ïèâåíü1 , À.È. Áóðàêîâñêèé1, Â.È. Ïðîõîðîâà2, Ñ.À. Êðàñíûé2, Ë.Ì. Øèøëî2
1
Èíñòèòóò áèîîðãàíè÷åñêîé õèìèè ÍÀÍ Áåëàðóñè, ã. Ìèíñê, Áåëàðóñü
2
ÐÍÏÖ îíêîëîãèè è ìåäèöèíñêîé ðàäèîëîãèè èì. Í.Í. Àëåêñàíäðîâà, ã. Ìèíñê, Áåëàðóñü
Epidermal growth factor and its receptors as perspective
clinical, diagnostic and prognostic markers of cancer
N.V. Piven1 , A.I. Burakovski1, V.I. Prokhorova2, S.A. Krasny2, L.M. Shishlo2
Êëþ÷åâûå ñëîâà: ýïèäåðìàëüíûé ôàêòîð ðîñòà, ðåöåïòîðû ýïèäåðìàëüíîãî ôàêòîðà ðîñòà, îíêîìàðêåðû, èììóíîõèìè÷åñêèé àíàëèç
Ýïèäåðìàëüíûé ôàêòîð ðîñòà îòíîñèòñÿ ê ãðóïïå ðîñòîâûõ ôàêòîðîâ, ó÷àñòâóþùèõ â ìåõàíèçìàõ êîíòðîëÿ èíâàçèè, íåîâàñêóëÿðèçàöèè
è ïðîëèôåðàöèè îïóõîëåé. Íàðÿäó ñ äðóãèìè îíêîãåíàìè, ñóïðåññîðíûìè ãåíàìè è ñåêðåòîðíûìè áåëêàìè îí ÿâëÿåòñÿ ïåðñïåêòèâíûì
ìàðêåðîì áèîëîãè÷åñêîãî ïîâåäåíèÿ îïóõîëè.  ñèëó ýòîãî âîçíèêàåò íåîáõîäèìîñòü èäåíòèôèêàöèè è êîëè÷åñòâåííîé îöåíêè
ýïèäåðìàëüíîãî ôàêòîðà ðîñòà è åãî ðåöåïòîðîâ â ñûâîðîòêå êðîâè, ÷òî âîçìîæíî ïðè ïîìîùè ñîâðåìåííûõ ìåòîäîâ èììóíîõèìè÷åñêîãî
àíàëèçà (èììóíîôåðìåíòíûé, ýêñïðåññ-èììóíîõðîìàòîãðàôè÷åñêèé è äð.), ñî÷åòàþùèõ âûñîêóþ ÷óâñòâèòåëüíîñòü è ñïåöèôè÷íîñòü
èììóííîé ðåàêöèè «àíòèãåí-àíòèòåëî», ñ îäíîé ñòîðîíû, è ýêñïðåññíîñòü è ïðîñòîòó èñïîëíåíèÿ — ñ äðóãîé, ÷òî âûäâèãàåò èõ â ðÿä
ïðèîðèòåòíûõ ìåòîäîâ èññëåäîâàíèÿ.
Key words: epidermal growth factor, receptors epidermal growth factor, tumor markers, immunochemical analysis
Epidermal growth factor refers to the group of growth factors which are involved in the control mechanisms of invasion, neovascularization and
tumor proliferation. Along with other oncogenes, suppressor genes and secretory proteins it is a promising marker of tumor biological behavior.
For this reason there is advisability to identify and quantify the epidermal growth factor and its receptors in serum which is possible by means of
modern methods of immunochemical analysis (enzyme-linked immunosorbent assay, express immunochromatographic assay etc.), combining
high sensitivity and specificity of immune reaction «antigen-antibody» on the one hand and rapidity and simplicity of performance —on the
other, which places them in a number of the priority modern methods of investigations.
êà÷åñòâåííûõ íîâîîáðàçîâàíèé ê íàñòîÿùåìó âðåìåíè ñóùåñòâåííî ïðîäâèíóëàñü â ñèëó ïîÿâëåíèÿ íîâûõ ñâåäåíèé
î ìåõàíèçìàõ âîçíèêíîâåíèÿ è ïîâåäåíèè îïóõîëåâûõ êëåòîê â îðãàíèçìå. Äîêàçàíî, ÷òî ìàëèãíèçàöèÿ êëåòêè ïðîèñõîäèò âñëåäñòâèå íàêîïëåíèÿ â åå ÿäåðíîì àïïàðàòå ìóòàöèé è ãåíåòè÷åñêèõ èçìåíåíèé, ñëåäñòâèåì ÷åãî ÿâëÿåòñÿ
ïðîöåññ êàíöåðîãåíåçà, ïðèâîäÿùèé ê ñïîñîáíîñòè êëåòîê
îáðàçîâûâàòü çëîêà÷åñòâåííóþ îïóõîëü, à çàòåì â ñèëó âûñîêîé ãåíåòè÷åñêîé èçìåí÷èâîñòè è ñåëåêöèè, ïðîèñõîäÿ-
ÂÂÅÄÅÍÈÅ
Îíêîëîãè÷åñêèå çàáîëåâàíèÿ çàíèìàþò îäíó èç ëèäèðóþùèõ ïîçèöèé ñðåäè ïðè÷èí ñìåðòíîñòè âî âñåõ ñòðàíàõ
ìèðà. Ïî äàííûì ÂÎÇ åæåãîäíî äèàãíîñòèðóþò îíêîëîãè÷åñêèå çàáîëåâàíèÿ ðàçëè÷íûõ ëîêàëèçàöèé âíîâü ó 10 ìèëëèîíîâ ÷åëîâåê.
Áëàãîäàðÿ ìîëåêóëÿðíî-ãåíåòè÷åñêèì èññëåäîâàíèÿì 1990-õ ãîäîâ êîíöåïöèÿ ïðîèñõîæäåíèÿ è ðàçâèòèÿ çëî-
82
Review
Îíêîëîãè÷åñêèé æóðíàë, Ò.8, N1 (29), 2014
ùåé ïîä âëèÿíèåì ñîáñòâåííîãî îðãàíèçìà, ê âîçíèêíîâåíèþ è îòáîðó âñå áîëåå è áîëåå àâòîíîìíûõ è àãðåññèâíûõ
ñóáêëîíîâ. Ýòè ïðîöåññû, â ñâîþ î÷åðåäü, ïðèâîäÿò ê èçìåíåíèþ àíòèãåííûõ ñâîéñòâ êëåòîê, êîòîðûå âûðàæàþòñÿ â
ïîÿâëåíèè îïóõîëåñïåöèôè÷åñêèõ è îïóõîëåàññîöèèðîâàííûõ àíòèãåíîâ [1].
Ïîñòîÿííî óâåëè÷èâàþùååñÿ êîëè÷åñòâî ïîêàçàòåëåé,
ðàññìàòðèâàåìûõ â êà÷åñòâå ïîòåíöèàëüíûõ ìîëåêóëÿðíûõ
ìàðêåðîâ îíêîãåíåçà, îòðàæàåò äîñòèæåíèÿ â îáëàñòè èçó÷åíèÿ ìåõàíèçìîâ ðåãóëÿöèè ïðîëèôåðàöèè è äèôôåðåíöèðîâêè îïóõîëåâûõ êëåòîê.  èõ ÷èñëî âõîäÿò îíêîãåíû è
ïðîòîîíêîãåíû, îíêîáåëêè, ðàçëè÷íûå ôàêòîðû ðîñòà è èõ
ðåöåïòîðû, êîòîðûå â áîëüøèíñòâå ñëó÷àåâ òàêæå ÿâëÿþòñÿ ïðîäóêòàìè îíêîãåíîâ, ðåöåïòîðû ñòåðîèäíûõ è ïåïòèäíûõ ãîðìîíîâ, ñóïðåññîðíûå ãåíû è ïðîäóêòû èõ ýêñïðåññèè, ãîðìîíîçàâèñèìûå áåëêè, ïðîòåàçû, ó÷àñòâóþùèå â
ïðîöåññàõ ìåòàñòàçèðîâàíèÿ, èíòåãðèíû, îòâå÷àþùèå çà
ìåæêëåòî÷íûå êîíòàêòû, è äð. [2]
Èäåíòèôèêàöèÿ è êîëè÷åñòâåííîå îïðåäåëåíèå ëþáîãî ìàðêåðà èìååò âàæíîå íàó÷íî-ïðàêòè÷åñêîå çíà÷åíèå äëÿ
ðàííåé äèàãíîñòèêè íà÷àëüíûõ ñòàäèé îïóõîëåâîãî ïðîöåññà, âûÿâëåíèÿ ãðóïï ðèñêà â îòíîøåíèè îíêîïàòîëîãèè ðàçëè÷íîãî ãåíåçà ñðåäè äåòñêîãî è âçðîñëîãî íàñåëåíèÿ, îðãàíèçàöèè äèíàìè÷åñêîãî íàáëþäåíèÿ çà ðàçâèòèåì îíêîëîãè÷åñêîãî ïðîöåññà, êîíòðîëÿ åãî ñòåïåíè âûðàæåííîñòè è
ýôôåêòèâíîñòè ïðîâîäèìîé òåðàïèè, à òàêæå äëÿ ïðîãíîçèðîâàíèÿ òå÷åíèÿ áîëåçíè.
Áëàãîäàðÿ óñïåõàì áèîõèìèè, ãåíåòèêè, ìîëåêóëÿðíîé áèîëîãèè è áèîòåõíîëîãèè â àðñåíàëå èññëåäîâàòåëåé è
êëèíèöèñòîâ èìååòñÿ îãðîìíîå ÷èñëî èçó÷åííûõ áèîëîãè÷åñêè çíà÷èìûõ ïîêàçàòåëåé (áèîìàðêåðîâ), àññîöèèðîâàííûõ ñ ðàçëè÷íûìè ôîðìàìè îíêîïàòîëîãèè. Èõ âûÿâëåíèå è
êîëè÷åñòâåííàÿ îöåíêà èìåþò âàæíîå êëèíèêî-äèàãíîñòè÷åñêîå, ïàòîãåíåòè÷åñêîå è ïðîãíîñòè÷åñêîå çíà÷åíèå, ÷òî
ñóùåñòâåííî óëó÷øàåò êà÷åñòâî ðàííåé äèàãíîñòèêè, îáîñíîâûâàåò âûáîð ïîñëåäóþùåé òàðãåòíîé òåðàïèè, à òàêæå
âîçìîæíîñòü îöåíêè åå ýôôåêòèâíîñòè, è ìîæåò ïîìî÷ü â
ïðîãíîçå ðàçâèòèÿ îíêîïàòîëîãè÷åñêèõ çàáîëåâàíèé ðàçëè÷íîé ëîêàëèçàöèè [3].
Èññëåäîâàíèÿ, íàïðàâëåííûå íà âûÿâëåíèå îïóõîëåâûõ àíòèãåíîâ è èõ èäåíòèôèêàöèþ, íå òîëüêî ïðèâîäÿò ê
ïîíèìàíèþ êëåòî÷íûõ è ìîëåêóëÿðíûõ ìåõàíèçìîâ îïóõîëåâîé òðàíñôîðìàöèè, ïðîãðåññèè îïóõîëè è ìåõàíèçìîâ
«èçáåãàíèÿ» îïóõîëüþ èììóíîëîãè÷åñêîãî íàäçîðà, íî è
ÿâëÿþòñÿ îäíèì èç âàæíåéøèõ íàïðàâëåíèé â ñîâðåìåííîé
îíêîèììóíîëîãèè. Ðå÷ü, ïðåæäå âñåãî, èäåò îá èììóíîäèàãíîñòèêå îïóõîëåé â êëèíè÷åñêîé ïðàêòèêå.
ÐÎÑÒÎÂÛÅ ÔÀÊÒÎÐÛ È ÈÕ ÐÅÖÅÏÒÎÐÛ
Çà ïîñëåäíèå ãîäû ó èññëåäîâàòåëåé ñôîðìèðîâàëñÿ
ïîâûøåííûé èíòåðåñ ê ãåòåðîãåííîé ãðóïïå ïîëèïåïòèäíûõ
ìîëåêóë — ðîñòîâûì ôàêòîðàì. Ôàêòîðû ðîñòà ñòèìóëèðóþò ðîñò è ïðîëèôåðàöèþ êëåòîê ïóòåì àêòèâàöèè ñïåöèôè÷åñêèõ ðåöåïòîðîâ íà èõ ïîâåðõíîñòè, ÷òî ïðèâîäèò ê
ãåíåðèðîâàíèþ ðåöåïòîðîì ìèòîãåííîãî ñèãíàëà. Ê íàñòîÿùåìó âðåìåíè îáíàðóæåíî è îõàðàêòåðèçîâàíî áîëüøîå
êîëè÷åñòâî ôàêòîðîâ ðîñòà, äåéñòâóþùèõ íà ðàçíûå òèïû
êëåòîê, è çíà÷èòåëüíîå êîëè÷åñòâî ðåöåïòîðîâ, ëèãàíäàìè
êîòîðûõ îíè ÿâëÿþòñÿ. Îäíàêî, ýòè ïåïòèäû âûïîëíÿþò è
ðÿä äðóãèõ ôóíêöèé: êîíòðîëèðóþò ïîäâèæíîñòü, èíâàçèâíîñòü è ôåíîòèï òðàíñôîðìèðîâàííûõ êëåòîê, àíãèîãåíåç
è ò.ä. Ïðè èçó÷åíèè ðåãóëÿòîðíûõ ìåõàíèçìîâ îïóõîëåâîãî
ðîñòà è ìåòàñòàçèðîâàíèÿ îñîáîå ìåñòî çàíèìàåò èçó÷åíèå ìîäóëÿöèé îñíîâíûõ ôàêòîðîâ ðîñòà è ýêñïðåññèè èõ
ðåöåïòîðîâ [4].
Íàèáîëåå çíà÷èìûìè èç íèõ ÿâëÿþòñÿ: ñîñóäèñòî-ýíäîòåëèàëüíûé ôàêòîð ðîñòà (VEGF), ýïèäåðìàëüíûé ôàêòîð ðîñòà (EGF), ðîñòîâîé ôàêòîð êåðàòèíîöèòîâ, èíñóëèíîïîäîáíûé ðîñòîâîé ôàêòîð 1, òðàíñôîðìèðóþùèé ôàêòîð
ðîñòà, ôàêòîðà ðîñòà ãåïàòîöèòîâ è äð. [5]. Ðåöåïòîðû ýòèõ
ðîñòîâûõ ôàêòîðîâ áûëè îáíàðóæåíû â îïóõîëÿõ ðàçëè÷íîé
ëîêàëèçàöèè, à èõ ðîëü â ïàòîãåíåçå îíêîçàáîëåâàíèé èçó÷àåòñÿ â ïîñëåäíèå ãîäû äîñòàòî÷íî àêòèâíî.
Èçâåñòíî, ÷òî òêàíåâîé ãîìåîñòàç â ìíîãîêëåòî÷íîì
îðãàíèçìå ðåãóëèðóåòñÿ ïóòåì âçàèìîäåéñòâèÿ ìåæäó ðàçëè÷íûìè êëåòêàìè, â êàæäîé èç êîòîðûõ çàëîæåíà îïðåäåëåííàÿ ãåíåòè÷åñêàÿ ïðîãðàììà, îáóñëîâëèâàþùàÿ åå åñòåñòâåííóþ ãèáåëü (àïîïòîç) ïîä âëèÿíèåì ðàçëè÷íûõ ñòèìóëîâ [6]. Ïîëàãàþò, ÷òî èìåííî àïîïòîç ÿâëÿåòñÿ îäíîé èç
ñâîåîáðàçíûõ àëüòåðíàòèâ ïðîëèôåðàöèè êëåòîê è, ñëåäîâàòåëüíî, ìîæåò ïðîòèâîäåéñòâîâàòü îíêîãåíåçó. Òàêèì îáðàçîì, ðîñò îïóõîëè ìîæåò áûòü îáóñëîâëåí íàðóøåíèåì
áàëàíñà ìåæäó ïðîëèôåðàöèåé êëåòîê è èõ ïðîãðàììèðîâàííîé ãèáåëüþ, ïðè÷åì îáà ýòè ïðîöåññà ðåãóëèðóþòñÿ
ðàçëè÷íûìè ãðóïïàìè öèòîêèíîâ [7].
Îäíèì èç íàèáîëåå èçó÷åííûõ öèòîêèíîâ ÿâëÿåòñÿ EGF.
Îáíàðóæåíî áîëüøîå ñåìåéñòâî EGF è åãî ðåöåïòîðîâ, èãðàþùèõ âàæíóþ ðîëü â ðåãóëÿöèè æèçíåäåÿòåëüíîñòè íîðìàëüíûõ è îïóõîëåâûõ êëåòîê ïóòåì èõ âëèÿíèÿ íà ïðîëèôåðàöèþ è òêàíåâóþ äèôôåðåíöèðîâêó. Èçó÷åíèå ýòèõ
ìåõàíèçìîâ, ïî ìíåíèþ ñïåöèàëèñòîâ, îòêðûâàåò íîâûå âîçìîæíîñòè è ïåðñïåêòèâû äëÿ ïðèìåíåíèÿ ýòèõ ñîåäèíåíèé â
ìåäèöèíå è, â ÷àñòíîñòè, â îíêîëîãèè [8].
ÈÑÒÎÐÈß ÎÒÊÐÛÒÈß EGF
EGF áûë îäíèì èç ïåðâûõ îáíàðóæåííûõ ôàêòîðîâ
ðîñòà, à èçó÷åíèå EGF è åãî ðåöåïòîðîâ ïîðîäèëî ìíîãî ïàðàäèãì, êàñàþùèõñÿ îïîñðåäîâàííûõ ôàêòîðîì ðîñòà ñèãíàëüíûõ ïóòåé [9].
Ïðè èññëåäîâàíèè ýôôåêòîâ ôàêòîðà ðîñòà íåðâíîé
òêàíè Ñòåíëè Êîýí (àíãë. Stanley Cohen) îáíàðóæèë, ÷òî ïðè
ââåäåíèè íîâîðîæäåííûì ìûøàì ýêñòðàêòà ñëþííûõ æå-
Îáçîðû
83
www.omr.by
ëåç âçðîñëûõ ìûøåé, ïðîèñõîäèëî îòêðûòèå ãëàç íà 13–14å ñóòêè, â òî âðåìÿ êàê îáû÷íî ýòî ïðîèñõîäèëî íà 7-å. Êðîìå
òîãî, ó ýòèõ æå æèâîòíûõ íåîáû÷àéíî ðàíî ïðîðåçàëèñü çóáû.
Âûäåëåíèå èññëåäîâàòåëåì (Ñòåíëè Êîýíîì) â 1960 ãîäó èç
ìûøèíûõ ïîäúÿçû÷íûõ ñëþííûõ æåëåç òåðìîñòàáèëüíîãî
ïîëèïåïòèäà ïîçâîëèëî îáúÿñíèòü ðîëü ýòîãî ñîåäèíåíèÿ, êîíòðîëèðóþùåãî ðàííåå ðàçâèòèå è ðîñò ðåçöîâ ó íîâîðîæäåííûõ ìûøåé [10]. Îí áûë íàçâàí ýïèäåðìàëüíûì ôàêòîðîì
ðîñòà ìûøè (mEGF) â ñèëó åãî ìîùíîãî ñòèìóëèðóþùåãî
äåéñòâèÿ íà ïðîëèôåðàöèþ ýïèäåðìèñà è ïðîöåññû îðîãîâåíèÿ [11]. Ïîçæå â 1972 ã. Êîýí è åãî êîëëåãè îïðåäåëèëè àìèíîêèñëîòíóþ ïîñëåäîâàòåëüíîñòü ýòîãî ïîëèïåïòèäà [12]. Â
1975 ã. èç ìî÷è áåðåìåííûõ æåíùèí áûë âûäåëåí EGF ÷åëîâåêà (hEGF, óðîãàñòðîí), êîòîðûé èìåë ìîëåêóëÿðíûé âåñ è
àìèíîêèñëîòíóþ ïîñëåäîâàòåëüíîñòü, èäåíòè÷íóþ mEGF, òó
æå áèîëîãè÷åñêóþ àêòèâíîñòü è ïîòåíöèàë äëÿ ñâÿçûâàíèÿ ñ
òåìè æå ìåìáðàííûìè ðåöåïòîðàìè [13].
Íà îñíîâå ýòèõ ýêñïåðèìåíòîâ áûë ðàñêðûò ìåõàíèçì
âçàèìîäåéñòâèÿ EGF ñ ðåöåïòîðàìè è ïðîíèêíîâåíèÿ îáðàçîâàâøåãîñÿ êîìïëåêñà â êëåòêó. Áûëî ïîêàçàíî âûñîêîå
ñðîäñòâî EGF ê ñïåöèôè÷åñêèì ðåöåïòîðàì íà êëåòî÷íîé
ìåìáðàíå è âîçìîæíîñòü ñòèìóëÿöèè èì ïðîòåèíêèíàçíîé
àêòèâíîñòè [14]. Êðîìå òîãî, â ýòè æå ãîäû, áûë âûäåëåí â
÷èñòîì âèäå è îõàðàêòåðèçîâàí ðåöåïòîð ýïèäåðìàëüíîãî
ôàêòîðà ðîñòà (EGFR) [15].
Ðàáîòû Ñ. Êîýíà ñûãðàëè âàæíåéøóþ ðîëü â ïîñëåäóþùåì èçó÷åíèè íåèçâåñòíûõ ðàíåå ôàêòîðîâ ðîñòà è ïðîëèëè ñâåò íà ìåõàíèçìû ðàçâèòèÿ îïóõîëåâûõ ïðîöåññîâ, çà
÷òî â 1986 ã. Ñòåíëè Êîýí è Ðèòà Ëåâè-Ìîíòàëü÷èíè (èòàë.
Rita Levi-Montalcini) áûëè óäîñòîåíû Íîáåëåâñêîé ïðåìèè.
ÑÅÌÅÉÑÒÂÎ EGF: ÑÎÂÐÅÌÅÍÍÎÅ
ÑÎÑÒÎßÍÈÅ ÂÎÏÐÎÑÀ
EGF âûäåëåí èç ìíîãèõ òêàíåé è æèäêîñòåé îðãàíèçìà ó
÷åëîâåêà è æèâîòíûõ: îí ïðèñóòñòâóåò â êðîâè, àìíèîòè÷åñêîé æèäêîñòè, ñëþíå, ìîëîêå, ìî÷å, à òàêæå – â ñëèçèñòûõ
âûäåëåíèÿõ èç äûõàòåëüíûõ è ïèùåâàðèòåëüíûõ ïóòåé [16].
Ó ÷åëîâåêà EGF ñèíòåçèðóåòñÿ â ôîðìå ðàñòâîðèìîãî
ìåìáðàíîñâÿçàííîãî ïðåäøåñòâåííèêà ìàññîé îêîëî 140
êÄa, âêëþ÷àþùåãî 1207 àìèíîêèñëîòíûõ îñòàòêîâ. Èç íåãî
îáðàçóåòñÿ çðåëàÿ ìîëåêóëà EGF, ïðåäñòàâëÿþùàÿ ñîáîé
ãëîáóëÿðíûé áåëîê ñ ìîëåêóëÿðíîé ìàññîé 6,4 êÄa è ñîñòîÿùàÿ èç 53 àìèíîêèñëîòíûõ îñòàòêîâ (ðèñ. 1). EGF ÿâëÿåòñÿ
ìîùíûì ìèòîãåíîì äëÿ êëåòîê ýêòîäåðìàëüíîãî, ìåçîäåðìàëüíîãî è ýíäîäåðìàëüíîãî ïðîèñõîæäåíèÿ [17]. Áîëüøàÿ
ìîëåêóëà-ïðåäøåñòâåííèê ÿâëÿåòñÿ ñóáñòðàòîì âíåêëåòî÷íûõ ïðîòåàç, êîòîðûå äåëÿò åãî öåïî÷êó íà ïåïòèäû ðàçëè÷íûõ ðàçìåðîâ. Ñòðóêòóðà è ôóíêöèîíàëüíûå îñîáåííîñòè
ïðîäóêòîâ ïðîòåîëèçà î÷åíü ïîõîæè íà EGF è ñîñòàâëÿþò
ñåìåéñòâî EGF-ïîäîáíûõ ëèãàíäîâ [18].
Ðèñóíîê 1 — Ñõåìàòè÷åñêîå èçîáðàæåíèå ñòðóêòóðû ìîëåêóëû EGF
Âñå ÷ëåíû ýòîãî ñóïåðñåìåéñòâà îáëàäàþò îáùíîñòüþ ñòðîåíèÿ: îíè ñîñòîÿò èç 50–60 àìèíîêèñëîòíûõ îñòàòêîâ è ñîäåðæàò øåñòü îñòàòêîâ öèñòåèíà (òàê íàçûâàåìûé
EGF-ìîòèâ), îáðàçóþùèõ òðè âíóòðèìîëåêóëÿðíûå äèñóëüôèäíûå ñâÿçè è èãðàþùèõ êëþ÷åâóþ ðîëü ïðè âçàèìîäåé-
84
ñòâèè ñ ðåöåïòîðîì. Èíòåðåñíî, ÷òî àíàëîãè÷íûå ìîòèâû
ñîäåðæàòñÿ â ðÿäå ìåìáðàííûõ áåëêîâ, à òàêæå â áåëêàõ
ýêñòðàöåëëþëÿðíîãî ìàòðèêñà, êîòîðûå ó÷àñòâóþò â ðåãóëÿöèè ïðîëèôåðàöèè, ìèãðàöèè è àäãåçèè êëåòîê, à òàêæå â
áåëîê-áåëêîâûõ âçàèìîäåéñòâèÿõ [19].
Review
Îíêîëîãè÷åñêèé æóðíàë, Ò.8, N1 (29), 2014
EGF ïðèíàäëåæèò ê ãðóïïå ïåïòèäíûõ ðîñòîâûõ ôàêòîðîâ, âêëþ÷àþùèõ, â òîì ÷èñëå èíñóëèíîïîäîáíûé è òðîìáîöèòàðíûé ôàêòîð ðîñòà. Èõ ðåöåïòîðû, ðàñïîëîæåííûå íà ïîâåðõíîñòè êëåòêè, îáëàäàþò òèðîçèíêèíàçíîé àêòèâíîñòüþ è ÿâëÿþòñÿ êëþ÷åâûìè ðåãóëÿòîðàìè íå òîëüêî íîðìàëüíûõ (ôèçèîëîãè÷åñêèõ) ñèãíàëüíûõ ïóòåé, íî èìåþò îãðîìíîå çíà÷åíèå ïðè ðàçâèòèè ìíîãèõ îïóõîëåâûõ íîâîîáðàçîâàíèé. Íåêîíòðîëèðóåìàÿ àêòèâíîñòü ýòèõ ìîëåêóë, âîçíèêàþùàÿ â ðåçóëüòàòå ìóòàöèè èëè ïîâûøåííîé êëåòî÷íîé ýêñïðåññèè, ìîæåò
ïðèâåñòè ê ðàçëè÷íûì ôîðìàì îïóõîëåâûõ îáðàçîâàíèé. Áîëåå 70% èçâåñòíûõ îíêîãåíîâ è ïðîòîíêîãåíîâ, ó÷àñòâóþùèõ â
ïàòîãåíåçå çëîêà÷åñòâåííûõ íîâîîáðàçîâàíèé, êîäèðóþò ñèíòåç ôåðìåíòîâ ñ ïðîòåèíêèíàçíîé àêòèâíîñòüþ [20].
EGF âçàèìîäåéñòâóåò ñ EGFR – êðóïíûì òðàíñìåìáðàííûì ãëèêîïðîòåèäîì (170 êÄà) íà ìåìáðàíàõ êëåòîê. Â
áîëüøèíñòâå òèïîâ êëåòîê ñîäåðæàíèå EGFR êîëåáëåòñÿ â
ïðåäåëàõ 2×104- 2×105 ðåöåïòîðîâ íà êëåòêó [21, 22]. EGFR
(ErbB-1, HER1 ó ÷åëîâåêà) — áåëîê, ñîñòîÿùèé èç 1186
àìèíîêèñëîòíûõ îñòàòêîâ ñ âíåêëåòî÷íûì äîìåíîì èç 621
àìèíîêèñëîò, çà êîòîðûì ñëåäóåò ìåìáðàííûé ó÷àñòîê è
öèòîïëàçìàòè÷åñêàÿ òèðîçèíêèíàçà (ðèñ. 2) [23].
Ýêñòðàöåëëþëÿðíûé ó÷àñòîê EGFR ñîñòîèò èç ÷åòûðåõ äîìåíîâ — I, II, III, IV. Äîìåíû I è III (L1 è L2, ëèãàíä-
ñâÿçûâàþùèå) è II è IV (CR1 è CR2, «áîãàòûå öèñòåèíîì»)
ãîìîëîãè÷íû äðóã äðóãó. Çà ýêñòðàöåëëþëÿðíûì äîìåíîì
ñëåäóþò êîðîòêèé òðàíñìåìáðàííûé äîìåí è èíòðàöåëëþëÿðíûé äîìåí, âêëþ÷àþùèé öèòîïëàçìàòè÷åñêóþ òèðîçèíêèíàçó, à òàêæå ïåðåìåííîé äëèíû ó÷àñòîê, êîòîðûå íåñåò
â ñåáå íåñêîëüêî ñàéòîâ ôîñôîðèëèðîâàíèÿ [24].
Ïðîâåäåííûå èññëåäîâàíèÿ ïîêàçàëè, ÷òî ñâÿçûâàíèå ëèãàíäîâ îïîñðåäóåòñÿ ïðåæäå âñåãî äîìåíîì III ñ
íåáîëüøèì âêëàäîì íåêîòîðûõ ó÷àñòêîâ â äîìåíà I [25].
Ëþáîïûòíî, ÷òî äîìåí IV áûë îïðåäåëåí êàê äîìåí, èíãèáèðóþùèé ñâÿçûâàíèå ëèãàíäîâ [26].
Ó ÷åëîâåêà îïðåäåëåíî òðè ðåöåïòîðà ñî ñòðóêòóðîé, ãîìîëîãè÷íîé ErbB-1: ErbB-2/HER2 [27], ErbB-3/HER3
[28] è ErbB-4/HER4 [29]. Ìåæäó EGF-ðåöåïòîðîì è åãî
òðåìÿ ãîìîëîãàìè ñóùåñòâóåò ñõîäñòâî (â 40–50%), êîòîðîå âàðüèðóåò â ðàçëè÷íûõ äîìåíàõ è ÿâëÿåòñÿ íàèáîëåå ïîñòîÿííûì â òèðîçèíêèíàçíûõ îñòàòêàõ — îêîëî
80% [30].
Ê EGF-ïîäîáíûì ëèãàíäàì, êîòîðûå àêòèâèðóþò ErbB
ðåöåïòîðû (ðèñ. 3), îòíîñÿò EGF, òðàíñôîðìèðóþùèé
ôàêòîð ðîñòà a (TGFa), àìôèðåãóëèí (Arg), áåòàöåëëþëèí
(Btc), ãåïàðèí ñâÿçûâàþùèé EGF-ïîäîáíûé ôàêòîð ðîñòà
(HBEGF), ýïèðåãóëèí (Erg) è íåóðåãóëèíû (NRG) [31].
Ðèñóíîê 2 — Ñõåìàòè÷åñêîå ñòðîåíèå EGFR
Îáçîðû
85
www.omr.by
Ðèñóíîê 3 — Ïàðû ëèãàíä-ðåöåïòîð. Ëèãàíä-ðåöåïòîðíûå âçàèìîäåéñòâèÿ, êîòîðûå âûçûâàþò ñèëüíûé îòâåò,
îáîçíà÷åíû ÷åðíûìè ñòðåëêàìè. Âçàèìîäåéñòâèÿ, êîòîðûå âûçûâàþò óìåðåííûé îòâåò, îáîçíà÷åíû ñåðûìè ñòðåëêàìè
Àìèíîêèñëîòíûå ïîñëåäîâàòåëüíîñòè ëèãàíäîâ EGF
ñåìåéñòâà ìîãóò áûòü âåñüìà ðàçíîîáðàçíûìè. Òàê EGF è
òðàíñôîðìèðóþùèé ôàêòîð ðîñòà-á ñâÿçûâàþòñÿ è àêòèâèðóþò EGFR, íî èìåþò ëèøü 40% èäåíòè÷íîñòè â àìèíîêèñëîòíîé ïîñëåäîâàòåëüíîñòè.
Êàæäûé ErbB ðåöåïòîð èìååò ó÷àñòîê (ïðèìåðíî èç 220
àìèíîêèñëîòíûõ îñòàòêîâ), ñëåäóþùèé çà êèíàçíûì ó÷àñòêîì, ñîäåðæàùèé ìíîæåñòâî ñàéòîâ ôîñôîðèëèðîâàíèÿ, êîòîðûå ìîäèôèöèðóþòñÿ ïðè àêòèâàöèè ðåöåïòîðà. Ýêñïðåññèðóåìûå ñòðóêòóðû äëÿ êàæäîãî ErbB ðåöåïòîðà è ëèãàíäà
ðàçëè÷íû è îïðåäåëÿþò ó÷àñòèå êàæäîãî ðåöåïòîðà â êà÷åñòâå ïîñðåäíèêà ðîñòà è äèôôåðåíöèðîâêè ðàçëè÷íûõ òèïîâ êëåòîê è òêàíåé [32].
HER2 è HER3 íå ñïîñîáíû ñàìîñòîÿòåëüíî ãåíåðèðîâàòü
ñèãíàë. Äëÿ ãåíåðàöèè ñèãíàëà èì íåîáõîäèìî îáðàçîâàíèå
ïàðû ñ äðóãèì ErbB ðåöåïòîðîì. Íåñìîòðÿ íà ìíîãî÷èñëåííûå
èññëåäîâàíèÿ âûñîêîàôèííûé ëèãàíä äëÿ HER2 íå áûë îáíàðóæåí, è âñå HER2-îïîñðåäîâàííûå ñèãíàëû ÿâëÿþòñÿ âòîðè÷íûìè ïî îòíîøåíèþ ê àêòèâàöèè äðóãèõ ErbB ðåöåïòîðîâ.
Äåéñòâèòåëüíî, âñå äðóãèå ErbB ðåöåïòîðû ñïîñîáíû îáðàçîâûâàòü ãåòåðîäèìåðíûå êîìïëåêñû ñ HER2 ïðè êîýêñïðåññèè
íà òîé æå êëåòêå [33]. Ñ äðóãîé ñòîðîíû, ó HER3 îòñóòñòâóåò
àêòèâíûé êèíàçíûé äîìåí èç-çà ìóòàöèè íåñêîëüêèõ îñòàòêîâ,
íåîáõîäèìûõ äëÿ àêòèâàöèè êèíàçû. Íå îáëàäàÿ àêòèâíîé êèíàçîé HER3 äîëæåí îáðàçîâàòü ïàðó è àêòèâèðîâàòü äðóãîé ErbB
ðåöåïòîð äëÿ ãåíåðàöèè ñèãíàëà. Ïðåäïî÷òèòåëüíûì ïàðòíåðîì äëÿ HER3, è ïî-âèäèìîìó, äëÿ HER1 è HER4 ÿâëÿåòñÿ HER2,
è, êàê ïîêàçàëè ìíîãî÷èñëåííûå èññëåäîâàíèÿ, ïàðà HER2/HER3
ãåíåðèðóåò ñèëüíûé ñèãíàë ïðîëèôåðàöèè. Èç-çà îòñóòñòâèÿ
86
ëèãàíäà äëÿ HER2 è íåñïîñîáíîñòè HER3 ê àêòèâàöèè âíóòðåííåé êèíàçíîé àêòèâíîñòè â îòâåò íà ëèãàíä, ýòè ðåöåïòîðû áûëè
íàçâàíû «ãëóõèìè è íåìûìè» ErbB ðåöåïòîðàìè [34].
ÒÐÀÍÑÌÅÌÁÐÀÍÍÀß ÏÅÐÅÄÀ×À
ÑÈÃÍÀËÀ Â ÊËÅÒÊÅ
Ôàêòîðû ðîñòà è èõ ðåöåïòîðû – ìîëåêóëû, ñ êîòîðûõ
íà÷èíàåòñÿ ïåðåäà÷à ñèãíàëîâ â êëåòêå. Ñâÿçûâàíèå ëèãàíäà
ñ ýêñòðàöåëëþëÿðíûì äîìåíîì åãî ðåöåïòîðà ìåíÿåò êîíôîðìàöèþ ðåöåïòîðà, ÷òî ïðèâîäèò ê àêòèâàöèè òèðîçèíêèíàçíîãî äîìåíà â öèòîïëàçìàòè÷åñêîì ó÷àñòêå ðåöåïòîðà.
Äàííûé öèòîïëàçìàòè÷åñêèé äîìåí-ôåðìåíò ïðîÿâëÿåò ïðîòåèíêèíàçíóþ àêòèâíîñòü [35]. Ïî îïðåäåëåíèþ
êèíàçû — ýòî ôåðìåíòû, êîòîðûå ïðèñîåäèíÿþò ôîñôàòíûå ãðóïïû ê èõ ñóáñòðàòàì. Ïðîòåèíêèíàçà ïåðåíîñèò ãàììàôîñôàò îò ATÔ íà áåëîê-ñóáñòðàò, ïðîèçâîäÿ, òàêèì
îáðàçîì, àêò ôîñôîðèëèðîâàíèÿ ýòîãî áåëêà.  ñëó÷àå ðåöåïòîðîâ ôàêòîðîâ ðîñòà ôîñôîðèëèðóþòñÿ òèðîçèíîâûå
îñòàòêè áåëêà-ñóáñòðàòà, êîòîðûé âçàèìîäåéñòâóåò ñ öèòîïëàçìàòè÷åñêèì äîìåíîì ðåöåïòîðà ôàêòîðà ðîñòà. Ñîîòâåòñòâåííî, ýòè ðåöåïòîðû íàçûâàþò ðåöåïòîðàìè, èìåþùèìè ïðîòåèíòèðîçèíêèíàçíóþ àêòèâíîñòü (÷òîáû îòëè÷èòü èõ îò ìíîãèõ äðóãèõ ïðîòåèíêèíàç, êîòîðûå âûïîëíÿþò äðóãèå ñèãíàëüíûå ôóíêöèè è ïðèêðåïëÿþò ôîñôàòû ê
ñåðèíîâûì èëè òðåîíèíîâûì îñòàòêàì áåëêîâ). Îíè èãðàþò êëþ÷åâóþ ðîëü â ðÿäå ïðîöåññîâ æèçíåäåÿòåëüíîñòè
êëåòêè: ðåãóëÿöèè òðàíñêðèïöèè, äèôôåðåíöèðîâêè êëåòîê, êëåòî÷íîãî öèêëà, öèòîñêåëåòíîé îðãàíèçàöèè, àïîïòîçà, èììóííîãî îòâåòà è äð. [36].
Review
Îíêîëîãè÷åñêèé æóðíàë, Ò.8, N1 (29), 2014
Àêòèâàöèÿ òèðîçèíêèíàçû ïðèâîäèò ê ôîñôîðèëèðîâàíèþ ðÿäà öèòîïëàçìàòè÷åñêèõ ñóáñòðàòíûõ áåëêîâ, êîòîðûå, â ñâîþ î÷åðåäü, ñòàíîâÿòñÿ àêòèâíûìè èëè èçìåíÿþò
ôóíêöèþ âñëåäñòâèå òîãî, ÷òî îíè ñòàëè ôîñôîðèëèðîâàííûìè. Äàëåå îíè ïîñûëàþò ñèãíàëû â êëåòêó, ÷òî, â êîíå÷íîì ñ÷åòå, ïðèâîäèò ê åå ðîñòó è äåëåíèþ [37].
 ðåçóëüòàòå ñâÿçûâàíèÿ ðåöåïòîðà ñ ëèãàíäîì â ñîîòíîøåíèè 1:1 (îäíà ìîëåêóëà ëèãàíäà ñ îäíîé ìîëåêóëîé
ðåöåïòîðà), ïðîèñõîäèò ãîìî- èëè ãåòåðîäèìåðèçàöèÿ ðåöåïòîðîâ [38]. Ôîðìèðóåòñÿ íîâûé êîìïëåêñ, ñîñòîÿùèé èç
2 ìîëåêóë ëèãàíäà è 2 ìîëåêóë ðåöåïòîðà. ×àñòî ñàì ôàêòîð ðîñòà èìååò äâà ðåöåïòîð-ñâÿçûâàþùèõ öåíòðà, âûïîëíÿÿ ôóíêöèþ ìîñòèêà ìåæäó äâóìÿ ñóáúåäèíèöàìè, êîòîðûé ñòàáèëèçèðóåò îáðàçîâàâøóþñÿ ïàðó. Äèìåðèçàöèÿ ýêñòðàöåëëþëÿðíûõ äîìåíîâ, â ñâîþ î÷åðåäü, ñòÿãèâàåò öèòîïëàçìàòè÷åñêèå äîìåíû îáåèõ ñóáúåäèíèö, ïðèâîäÿ èõ â
òåñíûé êîíòàêò. Ýòî ïîçâîëÿåò òèðîçèíêèíàçå îäíîé ðåöåïòîðíîé ìîëåêóëû ôîñôîðèëèðîâàòü êèíàçíûé äîìåí äðóãîé, ÷òî âûçûâàåò èçìåíåíèå åãî òðåõìåðíîé ñòðóêòóðû è
àêòèâàöèþ [39]. Òàêèì îáðàçîì, ñâÿçûâàíèå ëèãàíäà ïðèâîäèò ê òîìó, ÷òî îáå ïîëîâèíêè ðåöåïòîðà ôîñôîðèëèðóþò è
àêòèâèðóþò äðóã äðóãà (ïðîöåññ àóòî- è òðàíñôîñôîðèëèðîâàíèÿ). Ñðàçó æå ïîñëå èõ àêòèâàöèè îíè ïåðåõîäÿò ê ôîñôîðèëèðîâàíèþ ìíîæåñòâà áëèçëåæàùèõ öèòîïëàçìàòè÷åñêèõ ñóáñòðàòíûõ áåëêîâ, êîòîðûå çàòåì ïåðåäàþò ñèãíàë
äàëåå â êëåòêó [40].
Ïîñëå ñâÿçûâàíèÿ ëèãàíäà ìíîãèå ðåöåïòîðû ïóòåì
ýíäîöèòîçà ïîïàäàþò âíóòðü êëåòêè, èíòåðíàëèçóþòñÿ â ýíäîñîìû, êîòîðûå, â ñâîþ î÷åðåäü, ñëèâàþòñÿ ñ ëèçîñîìàìè
[41]. Áèîëîãè÷åñêîå çíà÷åíèå ïðîöåññà èíòåðíàëèçàöèè EGFðåöåïòîðíûõ êîìïëåêñîâ â ëèòåðàòóðå òðàêòóåòñÿ íåîäíîçíà÷íî. Íåêîòîðûå àâòîðû ðàññìàòðèâàþò åãî êàê ïðîñòîé
ìåõàíèçì äåñåíñèòåçàöèè êëåòêè ïî îòíîøåíèþ ê äåéñòâóþùåìó ôàêòîðó. Îäíàêî ðåçóëüòàòû âñåñòîðîííèõ èññëåäîâàíèé ôóíêöèîíàëüíîãî ñîñòîÿíèÿ èíòåðíàëèçîâàííîãî ðåöåïòîðà ïðîòèâîðå÷àò ýòîé êîíöåïöèè. Ê íàñòîÿùåìó âðåìåíè
ïîëó÷åíû ìîðôîëîãè÷åñêèå è áèîõèìè÷åñêèå äîêàçàòåëüñòâà
òîãî, ÷òî èíòåðíàëèçîâàííûé ðåöåïòîð EGF ñîõðàíÿåò ñâîþ
ñâÿçü ñ ëèãàíäîì âïëîòü äî ïîïàäàíèÿ â ëèçîçîìû [42].
ÐÎËÜ EGF È EGFR  ÔÈÇÈÎËÎÃÈ×ÅÑÊÈÕ
È ÏÀÒÎËÎÃÈ×ÅÑÊÈÕ ÏÐÎÖÅÑÑÀÕ
 ñåðåäèíå 90-õ ãîäîâ ïðîøëîãî âåêà áûëà îïðåäåëåíà ðîëü EGF â ðåãóëÿöèè ðîñòà, ñîçðåâàíèÿ è ôóíêöèé ýïèòåëèàëüíûõ òêàíåé (â îñîáåííîñòè ìîëî÷íîé æåëåçû è æåëóäî÷íî-êèøå÷íîãî òðàêòà) è íåðâíîé ñèñòåìû. Ñàìûå ïåðâûå èññëåäîâàíèÿ áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè EGF ïðîäåìîíñòðèðîâàëè åãî ñïîñîáíîñòü ñòèìóëèðîâàòü ïðîëèôåðàöèþ
ýïèòåëèàëüíûõ êëåòîê è èíãèáèðîâàòü ñåêðåöèþ æåëóäî÷íîãî ñîêà [43].  ïîñëåäóþùåì ñòèìóëÿöèÿ ïðîëèôåðàöèè
ýïèòåëèàëüíûõ êëåòîê ðÿäà îðãàíîâ, à òàêæå ôèáðîáëàñòîâ
è êåðàòèíîöèòîâ ïîä âîçäåéñòâèåì EGF áûëà ïðîäåìîíñòðèðîâàíà â ðàçëè÷íûõ ýêñïåðèìåíòàëüíûõ ìîäåëÿõ êàê in vitro,
òàê è in vivo [44].
EGF ó÷àñòâóåò âî ìíîãèõ ôèçèîëîãè÷åñêèõ ïðîöåññàõ
îðãàíèçìà. Åãî ðîëü ñîñòîèò â ðåãóëÿöèè ñîçðåâàíèÿ, ðîñòà,
ðàçâèòèÿ è ôóíêöèîíèðîâàíèÿ êèøå÷íèêà, õàðàêòåðà ñòðóêòóðíûõ ýëåìåíòîâ îðãàíèçìà (ñïîñîáñòâóåò ðîñòó ýïèòåëèàëüíûõ òêàíåé), ïîñòóïëåíèÿ ïèòàòåëüíûõ âåùåñòâ â ìîëîêî (ñïîñîáñòâóåò ðîñòó è ðàçâèòèþ ìîëî÷íûõ æåëåç, ðåãóëèðóåò ëàêòàöèþ), ñíèæåíèÿ êîíöåíòðàöèè áåëêîâ â ïëàçìå,
îòâåòñòâåííûõ çà ñâÿçûâàíèå è òðàíñïîðòèðîâêó èíñóëèíïîäîáíîãî ôàêòîðà ðîñòà 1 [45].
Ñåãîäíÿ èññëåäîâàòåëè èçó÷àþò âîçìîæíîñòè ïðèìåíåíèÿ EGF â ìåäèöèíå äëÿ ëå÷åíèÿ êîæíûõ çàáîëåâàíèé (ïðîöåññ çàæèâëåíèÿ ðàí [46] è ëå÷åíèå ïñîðèàçà [47]), áîëåçíåé
æåëóäî÷íî-êèøå÷íîãî òðàêòà [48], çàáîëåâàíèé êîñòíîé òêàíè [40], à òàêæå èñïîëüçîâàíèÿ EGF â êà÷åñòâå öèòîïðîòåêòîðà, îñíîâûâàÿñü íà ðåçóëüòàòàõ èññëåäîâàíèé, â êîòîðûõ ïîêàçàí ïîä âîçäåéñòâèåì ôàêòîðîâ ðîñòà ýôôåêò ñíèæåíèÿ
òîêñè÷åñêîãî äåéñòâèÿ ïðîòèâîîïóõîëåâûõ ïðåïàðàòîâ [49].
Íà ïîâåðõíîñòè êëåòîê ýêñïðåññèðîâàíû ðåöåïòîðû ê EGF è äðóãèì EGF-ïîäîáíûì ëèãàíäàì. Ýêñïðåññèÿ
EGFR ôèçèîëîãè÷åñêè íåîáõîäèìà äëÿ ôóíêöèîíèðîâàíèÿ êàê íîðìàëüíûõ, òàê è ïàòîëîãè÷åñêèõ êëåòîê. Íàðóøåíèå ôóíêöèé ñèãíàëüíîé ñèñòåìû ñ ó÷àñòèåì EGF è
EGFR ïðèâîäèò ê òîìó, ÷òî ðåöåïòîð äåéñòâóåò êàê îíêîáåëîê, à, ñîîòâåòñòâåííî, «íåèñïðàâíîñòü» êëåòî÷íîé ñèãíàëüíîé ñåòè ïðèâîäèò ê ðàçâèòèþ ðàêà è äðóãèõ ïðîëèôåðàòèâíûõ çàáîëåâàíèé. Íå óäèâèòåëüíî, ÷òî íàðóøåíèå ôóíêöèîíàëüíîé àêòèâíîñòè EGF (è äðóãèõ ëèãàíäîâ),
à òàêæå åãî ðåöåïòîðîâ îáóñëîâëèâàåò áîëåå 70% âñåõ
çëîêà÷åñòâåííûõ îïóõîëåé [50].
Ãèïåðýêñïðåññèÿ EGFR èëè ìóòàöèÿ ãåíà C-erb, êîäèðóþùåãî åãî ñèíòåç, õàðàêòåðíà äëÿ öåëîãî ðÿäà îïóõîëåé
[51]. Òàê, îáíàðóæåíî ïîâûøåíèå óðîâíÿ ErbB-1/HER1 ïðè
ìåëêîêëåòî÷íîé êàðöèíîìå ëåãêèõ, êîòîðîå êîððåëèðóåò ñ
íèçêèì óðîâíåì äèôôåðåíöèðîâêè êëåòîê è áûñòðûì ìåòàñòàçèðîâàíèåì îïóõîëè [52]. Îêîëî 45% ñëó÷àåâ ðàêà ìîëî÷íîé æåëåçû (ÐÌÆ) ñîïðîâîæäàåòñÿ ïîâûøåíèåì óðîâíÿ
ErbB-1/HER1 [53]. Ãèïåðýêñïðåññèÿ ðåöåïòîðà ErbB-2/HER2
õàðàêòåðíà äëÿ áîëüøèíñòâà êàðöèíîì, âêëþ÷àÿ êàðöèíîìó
ìîëî÷íîé æåëåçû, àäåíîêàðöèíîìó ëåãêèõ, êàðöèíîìó æåëóäêà è ìàòêè [54]. Òàê ãèïåðýêñïðåññèÿ îíêîáåëêà ErbB-2/
HER2 âûÿâëÿåòñÿ â 34% ñëó÷àåâ ïðè ðàêå æåëóäêà (ÐÆ) è â
25% — ïðè ÐÌÆ, à ïðîâåäåííûé àíàëèç äàííûõ ïîçâîëÿåò
ïðåäïîëàãàòü, ÷òî ýòè èçìåíåíèÿ ñâÿçàíû ñ ðàñïðîñòðàíåííîñòüþ è èíâàçèâíî-ìåòàñòàòè÷åñêèì ïîòåíöèàëîì îïóõîëåâîãî ïðîöåññà [55-56]. Ïîâûøåíèå ýêñïðåññèè ðåöåïòîðà
ErbB-3/HER3 íàáëþäàåòñÿ ïðè ðÿäå îïóõîëåé, òàêèõ êàê àäåíîêàðöèíîìà òîëñòîé è ïðÿìîé êèøêè, ÷òî êîððåëèðóåò ñ
ïëîõèì ïðîãíîçîì [57]. Èììóíîðåàêòèâíûé ErbB-4/HER4 áûë
Îáçîðû
87
www.omr.by
îáíàðóæåí ïðè îïóõîëÿõ ìîëî÷íîé æåëåçû, ÿè÷íèêà, ïîäæåëóäî÷íîé æåëåçû è ìî÷åâîãî ïóçûðÿ [58].
Íàêàïëèâàþòñÿ èññëåäîâàíèÿ, ïîñâÿùåííûå èçó÷åíèþ
âçàèìîñâÿçè, êàê êëèíè÷åñêîãî òå÷åíèÿ, òàê è ïðîãíîçà îíêîëîãè÷åñêîãî çàáîëåâàíèÿ ñ èçáûòî÷íîé ýêñïðåññèåé áåëêà
ErbB-2/HER2 â ïåðâè÷íîé îïóõîëè. Áîëüøèíñòâî èññëåäîâàíèé óêàçûâàåò íà òî, ÷òî åãî èçáûòî÷íàÿ ýêñïðåññèÿ àññîöèèðîâàíà ñ ïëîõèì ïðîãíîçîì çàáîëåâàíèÿ è ìîæåò ÿâëÿòüñÿ
íåîáõîäèìûì äîïîëíèòåëüíûì ïîêàçàòåëåì äëÿ âûÿâëåíèÿ
ãðóïï áîëüíûõ ñ áîëåå àãðåññèâíûì òå÷åíèåì çàáîëåâàíèÿ,
îêàçûâàåò íåáëàãîïðèÿòíîå âëèÿíèå íà îáùóþ è áåçðåöèäèâíóþ âûæèâàåìîñòü îíêîëîãè÷åñêèõ ïàöèåíòîâ, ÷òî ñâèäåòåëüñòâóåò î ïðîãíîñòè÷åñêîé öåííîñòè äàííîãî ïîêàçàòåëÿ
[59-62].  íàñòîÿùåå âðåìÿ ïðèíÿòî ñ÷èòàòü, ÷òî ïàöèåíòàì ñ
ErbB-2/HER2-ïîëîæèòåëüíûìè îïóõîëÿìè ñëåäóåò ðåêîìåíäîâàòü áîëåå èíòåíñèâíûå ðåæèìû õèìèîòåðàïèè, ÷åì áåç
ïîâûøåííîé ýêñïðåññèè ýòîãî îíêîãåíà. Îñîáûé èíòåðåñ èññëåäîâàíèå ïðîäóêöèè ýòîãî ðåöåïòîðà ñòàëî âûçûâàòü ïîñëå
ïîÿâëåíèÿ ïðåïàðàòà ãåðöåïòèí (òðàñòóçóìàá), ïðåäñòàâëÿþùåãî ñîáîé ãóìàíèçèðîâàííûå àíòèòåëà ê HER2, è íåîáõîäèìîñòè èíäèâèäóàëèçàöèè íàçíà÷åíèÿ ýòîãî ïðåïàðàòà [63].
äîâàíèÿ áèîëîãè÷åñêèõ ìàðêåðîâ ÿâëÿåòñÿ ðàçðàáîòêà ìåíåå èíâàçèâíûõ ñûâîðîòî÷íûõ òåñòîâ, ñïîñîáíûõ çàìåíèòü
(èëè äîïîëíèòü) èññëåäîâàíèå íà òêàíåâîì óðîâíå. Ðàçëè÷íûå ìîäèôèêàöèè ìåòîäîâ èììóíîõèìè÷åñêîãî àíàëèçà
(ÈÕÀ) ñî÷åòàþò â ñâîåé îñíîâå âûñîêóþ ÷óâñòâèòåëüíîñòü
è ñïåöèôè÷íîñòü èììóíîëîãè÷åñêîé ðåàêöèè «àíòèãåí-àíòèòåëî», ýêñïðåññíîñòü è ïðîñòîòó èñïîëíåíèÿ, ÷òî âûäâèãàåò èõ â ðÿä ïðèîðèòåòíûõ ìåòîäîâ ñîâðåìåííîé èììóíîäèàãíîñòèêè [64].
Ê ïðîáëåìå êîëè÷åñòâåííîé äåòåêöèè ðàçëè÷íûõ áèîðåãóëÿòîðîâ è áèîñóáñòàíöèé ñ ïîìîùüþ ñðåäñòâ ÈÕÀ ïðèâëå÷åíî âíèìàíèå ñïåöèàëèñòîâ ðàçëè÷íûõ îáëàñòåé íàóêè
(áèîõèìèêîâ, ãåíåòèêîâ, èììóíîáèîòåõíîëîãîâ, áèîëîãîâ,
ìåäèêîâ è äð.). Íåñìîòðÿ íà áîëüøîé îáúåì ïðîâîäèìûõ â
ìèðå èññëåäîâàíèé ïî ñîçäàíèþ íîâûõ ìåòîäîâ ÈÕÀ áèîðåãóëÿòîðíûõ è èììóíîìîäóëèðóþùèõ ìîëåêóë, äî ñèõ ïîð
èíòåðåñ ê ýòèì ìåòîäàì èññëåäîâàíèÿ íå óãàñàåò [65].
Íà áàçå ëàáîðàòîðèè ìåäèöèíñêîãî ìèêðîàíàëèçà
ÈÁÎÕ ÍÀÍ Áåëàðóñè ðàçðàáîòàíû íàó÷íûå îñíîâû òåõíîëîãèè íîâûõ ìåòîäîâ ÈÕÀ óðîâíÿ EGF è åãî ðåöåïòîðîâ â ñûâîðîòêå êðîâè è ìåòîäîëîãèè èõ èñïîëüçîâàíèÿ â ìåäèöèíñêîé ïðàêòèêå â êà÷åñòâå êîëè÷åñòâåííûõ êëèíèêî-äèàãíîñòè÷åñêèõ è ïðîãíîñòè÷åñêèõ êðèòåðèåâ äëÿ ðàçëè÷íûõ ôîðì
îíêîïàòîëîãèè, àññîöèèðîâàííîé ñ ãèïåðýêñïðåññèåé. Íèæå
ïðèâåäåíû èõ ïðèíöèïèàëüíûå îñíîâû.
ÈÌÌÓÍÎÕÈÌÈ×ÅÑÊÀß ÈÄÅÍÒÈÔÈÊÀÖÈß
È ÊÎËÈ×ÅÑÒÂÅÍÍÛÉ ÀÍÀËÈÇ
ÊÎÍÖÅÍÒÐÀÖÈÉ EGF È ÅÃÎ ÐÅÖÅÏÒÎÐÎÂ
Îáùåïðèíÿòûì è íàèáîëåå àäåêâàòíûì ìåòîäîì îöåíêè ýêñïðåññèè ôàêòîðîâ ðîñòà è èõ ðåöåïòîðîâ ÿâëÿåòñÿ
èììóíîãèñòîõèìè÷åñêîå îêðàøèâàíèå îïóõîëåâûõ òêàíåé
ñ ïîñëåäóþùåé îöåíêîé àìïëèôèêàöèè ãåíîâ ìåòîäîì ôëóîðåñöåíòíîé ãèáðèäèçàöèè in situ (FISH). Â òî æå âðåìÿ îäíèì èç âåäóùèõ ñîâðåìåííûõ íàïðàâëåíèé â îáëàñòè èññëå-
ÈÌÌÓÍÎÔÅÐÌÅÍÒÍÛÉ ÀÍÀËÈÇ
Çà îñíîâó ðàçðàáîòàííîãî âàðèàíòà èììóíîôåðìåíòíîé òåñò-ñèñòåìû äëÿ àíàëèçà êîíöåíòðàöèè EGF â ñûâîðîòêå êðîâè [66] áûë âûáðàí ôîðìàò íåïðÿìîãî «ñýíäâè÷»âàðèàíòà (ðèñ. 4).
Ðèñóíîê 4 — Ïðèíöèïèàëüíàÿ ñõåìà êîëè÷åñòâåííîãî èììóíîôåðìåíòíîãî àíàëèçà EGF â ñûâîðîòêå êðîâè
88
Review
Îíêîëîãè÷åñêèé æóðíàë, Ò.8, N1 (29), 2014
Àíàëèçèðóåìîå ñîåäèíåíèå, â äàííîì ñëó÷àå EGF, íàõîäÿùååñÿ â ñûâîðîòêå êðîâè ïàöèåíòà, ñâÿçûâàåòñÿ ñ ìîíîêëîíàëüíûìè àíòèòåëàìè, ïðåäâàðèòåëüíî èììîáèëèçîâàííûìè íà âíóòðåííåé ïîâåðõíîñòè ëóíîê ïîëèñòèðîëîâîãî ïëàíøåòà äëÿ èììóíîôåðìåíòíîãî àíàëèçà, ñ îáðàçîâàíèåì èììóíîêîìïëåêñà. Íåñâÿçàâøèåñÿ êîìïîíåíòû óäàëÿþòñÿ ïóòåì ïðîìûâàíèÿ. Íà âòîðîì ýòàïå ê îáðàçîâàâøåìóñÿ èììóíîêîìïëåêñó «àíòèãåí-àíòèòåëî» äîáàâëÿþò ïîëèêëîíàëüíûå
àíòèòåëà, ñïåöèôè÷íûå ê äðóãîé àíòèãåííîé äåòåðìèíàíòå
EGF, êîòîðûå ñâÿçûâàÿñü ñ íèì, îáðàçóþò «ñýíäâè÷-èììóíîêîìïëåêñ». Çàòåì, ïîñëå óäàëåíèÿ íåñâÿçàâøèõñÿ êîìïîíåíòîâ, â ñèñòåìó ââîäÿòñÿ ìå÷åííûå ïåðîêñèäàçîé õðåíà
àíòèâèäîâûå ïîëèêëîíàëüíûå àíòèòåëà, ïîçâîëÿþùèå äåòåêòèðîâàòü ðàíåå îáðàçîâàâøèéñÿ «ñýíäâè÷-êîìïëåêñ». Èíäè-
êàòîðîì â ýòîì òåñòå ÿâëÿåòñÿ õðîìîãåííûé ñóáñòðàò ôåðìåíòà ïåðîêñèäàçû — 3,3',5,5'-òåòðàìåòèëáåíçèäèí. Äîáàâëåíèåì ñòîï-ðàñòâîðà (4,8% ðàñòâîð H2SO4) îñòàíàâëèâàåòñÿ ðàçâèòèå öâåòíîé ðåàêöèè è ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêè èçìåðÿåòñÿ åå èíòåíñèâíîñòü, êîòîðàÿ ïðÿìî ïðîïîðöèîíàëüíà
êîíöåíòðàöèè EGF â îáðàçöå. Àíàëèòè÷åñêàÿ ÷óâñòâèòåëüíîñòü
àíàëèçà ñîñòàâëÿåò 7,7 ïã/ìë. Âðåìÿ àíàëèçà — 6 ÷àñîâ.
ÈÌÌÓÍÎÕÐÎÌÀÒÎÃÐÀÔÈ×ÅÑÊÈÉ
ÀÍÀËÈÇ EGF
Çà îñíîâó ðàçðàáîòàííîãî ëàáîðàòîðíîãî âàðèàíòà
ýêñïðåññíîé èììóíîõðîìàòîãðàôè÷åñêîé òåñò-ñèñòåìû äëÿ
àíàëèçà êîíöåíòðàöèè EGF â ñûâîðîòêå êðîâè [67, 68] âçÿò
ôîðìàò «ñýíäâè÷»-âàðèàíòà ÈÕÀ (ðèñ. 5).
Ðèñóíîê 5 — Ïðèíöèïèàëüíàÿ ñõåìà èììóíîõðîìàòîãðàôè÷åñêîãî êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ EGF
â ñûâîðîòêå êðîâè ñ èñïîëüçîâàíèåì ìóëüòèìåìáðàííîé òåñò ïîëîñêè
Íà íèòðîöåëëþëîçíîé ìåìáðàíå (ðàáî÷àÿ ìåìáðàíà)
çàðàíåå èììîáèëèçóþò ðåàãåíòû äëÿ àíàëèçà: ñïåöèôè÷åñêèå ìîíîêëîíàëüíûå àíòèòåëà ê EGF (ÌÀB-EGF) — àíàëèòè÷åñêàÿ çîíà; è àíòèâèäîâûå àíòèòåëà, ïîçâîëÿþùèå
êîíòðîëèðîâàòü «ðàáîòîñïîñîáíîñòü» òåñòà — êîíòðîëüíàÿ
çîíà. Íà äðóãîé ó÷àñòîê òåñò-ïîëîñêè (ìåìáðàíà äëÿ êîíúþãàòà) íàíåñåí êîíúþãàò ïîëèêëîíàëüíûõ àíòèòåë ê EGF
(PAB-EGF) ñ «ìåòêîé» — íàíî÷àñòèöàìè êîëëîèäíîãî çîëîòà. Ïðè íàíåñåíèè èññëåäóåìîãî îáðàçöà íà òåñò-ïîëîñêó (ìåìáðàíà äëÿ îáðàçöà) èëè ïðè ïîãðóæåíèè ñôîðìèðîâàííîé òàêèì îáðàçîì òåñò-ïîëîñêè â ïðîáó ñûâîðîòêè
êðîâè æèäêîñòü ïîäíèìàåòñÿ ïîä äåéñòâèåì êàïèëëÿðíûõ
ñèë. Ïðè ýòîì ïðîáà, ïîòåíöèàëüíî ñîäåðæàùàÿ EGF, âíà-
÷àëå âçàèìîäåéñòâóåò ñ ÷àñòèöàìè êîëëîèäíîãî çîëîòà, íà
ïîâåðõíîñòè êîòîðûõ àäñîðáèðîâàíû PAB-EGF. Çàòåì
ôðîíò æèäêîñòè ïðåîäîëåâàåò àíàëèòè÷åñêóþ çîíó, ãäå
ïðîèñõîäèò ñâÿçûâàíèå íà ó÷àñòêå ìåìáðàíû ñ èììîáèëèçîâàííûìè ÌÀB-EGF. Ñòåïåíü ñâÿçûâàíèÿ EGF ñ ÌÀBEGF è, ñîîòâåòñòâåííî, èíòåíñèâíîñòü îêðàøèâàíèÿ ìåìáðàíû îïðåäåëÿþòñÿ êîíöåíòðàöèåé EGF â ïðîáå. Äëÿ ïðîâåðêè êà÷åñòâà ðåàãåíòîâ è ñîõðàíåíèÿ ôóíêöèîíàëüíîñòè òåñò-ñèñòåìû èñïîëüçóåòñÿ ðàñïîëîæåííàÿ äàëåå êîíòðîëüíàÿ çîíà, â êîòîðîé PAB-EGF, ñîðáèðîâàííûå íà ÷àñòèöàõ êîëëîèäíîãî çîëîòà, ñâÿçûâàþòñÿ ñ àíòèâèäîâûìè
àíòèòåëàìè, èììîáèëèçîâàííûìè íà ìåìáðàíå. Òàêèì îáðàçîì, ôîðìèðîâàíèå íà òåñò-ïîëîñêå äâóõ ÿðêî îêðàøåí-
Îáçîðû
89
www.omr.by
ìîëåêóë: IV Ìåæäóíàðîäíàÿ íàó÷íàÿ êîíôåðåíöèÿ. — Ìèíñê.
— 17–19 îêòÿáðÿ, 2012. — Ñ. 169–170.
4. Áëîõèí Ä.Þ., ×ìóòèí Å.Ô., Èâàíîâ Ï.Ê. Ìîëåêóëÿðíûå
ìèøåíè äëÿ ïðîòèâîîïóõîëåâîé òåðàïèè: ôàêòîðû ðîñòà, àíãèîãåíåçà è àïîïòîçà // Ðîññèéñêèé áèîòåðàïåâòè÷åñêèé æóðíàë. —
2011. — Ò. 10, N3. — Ñ. 17–24.
5. Cummins A., Thompson F. Effect of breast milk and weaning
on epithelial growth of the small intestine in humans // Gut.—
2002. — Vol. 51. — P. 748–754.
6. Green D.R., McGahon A., Martin S.M. Regulation apoptosis
by oncogenes // J. Cell. Biochem. — 1996. — Vol. 77. — P. 33–38.
7. Ôèëü÷åíêîâ À.À. Öèòîêèíû ñóïåðñåìåéñòâà ÝÔÐ è îíêîãåíåç // Ýêñïåðèìåíòàëüíàÿ îíêîëîãèÿ. — 1998. — N 20. —
Ñ. 83–108.
8. Pouliot Y., Gauthier S. Milk growth factors as health
products: Some technological aspects // International Dairy Journal.
— 2006. Vol. 16. — P. 1415–1420.
9. Schlessinger J. Cell signaling by receptor tyrosine kinases
// Cell. — 2000. — Vol. 103. — P. 211–225.
10. Cohen S. Isolation of a mouse submaxillary gland protein
accelerating incisor eruption and eyelid opening in the newborn //
The Journal of Biological Chemistry. — 1962. — Vol. 237, N 5. —
P. 1555–1562.
11. Savage C.R., Inagami T., Cohen S. The primary structure of
epidermal growth factor // The Journal of Biological Chemistry. —
1972. — Vol. 247, N23. — P. 7612–7621.
12. Carpenter G., Cohen S. Epidermal growth factor // Annual
Review of Biochemistry. — 1979. — Vol. 48. — P. 193–216.
13. Brazzel R., Stern M., Aquavella J. et al. Human recombinant
epidermal growth factor in experimental corneal wound healing /
/ Investigative Ophthalmology and Visual Science. — 1991. —
Vol. 32, N 2. — P. 336–341.
14. Wrann M., Linsley P.S., Fox C.F. Identi?cation of the EGF
receptor on 3T3 cells by surface-speci?c iodination and gel
electrophoresis // FEBS Lett. — 1979. — Vol. 104. — P. 415–419.
15. Cohen S., Ushiro H., Stoscheck C. et al. A native 170,000
epidermal growth factor receptor-kinase complex from shed plasma
membrane // J. Biol. Chem. — 1982. — Vol. 257. — P. 1523–1531.
16. Dehnhard M., Claus R., Munz O. Course of epidermal
growth factor (EGF) and insulin-like growth factor I (IGF-I) in
mammary secretions of the goat during end-pregnancy and early
lactation // Journal of Veterinary Medicine. — 2000. — Vol. 47. —
P. 533–540.
17. Grosvenor C., Picciano M., Baumrucker C. Hormones and
growth factors in milk // Endocrine Reviews. — 1993. — Vol. 14, N
6. — P. 710–728.
18. Harris R., Chung E., Coffey R. EGF receptor ligands //
Experimental Cell Research. — 2003. — Vol. 284. — P. 2–13.
19. Ìîëäîãàçèåâà Í.Ò., Òåðåíüòüåâ À.À. Àëüôà-ôåòîïðîòå èí è ôàêòîðû ðîñòà. Ñòðóêòóðíî-ôóíêöèîíàëüíûå âçàèìîîòíîøåíèÿ è àíàëîãèè // Óñïåõè áèîëîãè÷åñêîé õèìèè. — 2006. —
Ò. 46. — Ñ. 99–148.
20. Weiss A., Schlessinger J. Switching signals on or off by
receptor dimerization // Cell. — 1998. — Vol. 94. — P. 277–280.
21. Razis A.F.A., Ismail E.N., Hambali Z. et al. The periplasmic
expression of recombinant human epidermal growth factor (hEGF)
íûõ ïîëîñ ñâèäåòåëüñòâóåò î ïîëîæèòåëüíîì ðåçóëüòàòå
àíàëèçà (ìèíèìàëüíî îïðåäåëÿåìàÿ êîíöåíòðàöèÿ EGF —
1 íã/ìë), òîãäà êàê ôîðìèðîâàíèå îäíîé ïîëîñû â êîíòðîëüíîé çîíå îçíà÷àåò, ÷òî êîíöåíòðàöèÿ EGF íèæå 1 íã/ìë.
Íåñâÿçàâøèéñÿ êîíúþãàò âçàèìîäåéñòâóåò ñ àíòèâèäîâûìè àíòèòåëàìè â êîíòðîëüíîé çîíå, îáðàçóÿ îêðàøåííóþ
ïîëîñêó, ÷òî óêàçûâàåò íà ïðàâèëüíîå ïðîâåäåíèå òåñòà.
Íåîñïîðèìûì ïðåèìóùåñòâîì äàííîãî ìåòîäà ÿâëÿåòñÿ
åãî ýêñïðåññíîñòü, âðåìÿ àíàëèçà — 10-15 ìèíóò.
ÇÀÊËÞ×ÅÍÈÅ
Èçó÷åíèå EGF è ñèãíàëüíûõ ïóòåé âçàèìîäåéñòâèÿ EGF
è EGFR ïîçâîëèò ñôîðìèðîâàòü íîâûå ïîäõîäû â äèàãíîñòèêå ðàííèõ ôîðì ðàçâèòèÿ îíêîïàòîëîãèè. Ðàçðàáîòàííûå
íîâûå ìåòîäû ñîâðåìåííîãî ÈÕÀ ïîçâîëÿþò ñ âûñîêèì óðîâíåì ÷óâñòâèòåëüíîñòè è ñïåöèôè÷íîñòè èäåíòèôèöèðîâàòü
è ïðîâîäèòü èçó÷åíèå îäíîãî èç ïàòîãåíåòè÷åñêèõ ìàðêåðîâ
îíêîïàòîëîãèè — EGF.
Èñïîëüçîâàíèå äâóõ âçàèìîäîïîëíÿþùèõ ñîâðåìåííûõ èììóíîõèìè÷åñêèõ ìåòîäîâ òåñòèðîâàíèÿ (èììóíîôåðìåíòíîãî è èììóíîõðîìàòîãðàôè÷åñêîãî ýêñïðåññ-îïðåäåëåíèÿ êîíöåíòðàöèè EGF) ìîæåò ñóùåñòâåííî ïîâûñèòü
ýôôåêòèâíîñòü äèàãíîñòèêè è ëå÷åíèÿ îíêîëîãè÷åñêèõ çàáîëåâàíèé ðàçëè÷íîé ëîêàëèçàöèè, àññîöèèðîâàííûõ ñ ãèïåðýêñïðåññèåé ïðåäñòàâèòåëåé ñåìåéñòâà EGF (ðàê ìîëî÷íîé æåëåçû, ëåãêîãî, êîëîðåêòàëüíûé ðàê è äð.), ÷òî èìååò
áîëüøóþ íàó÷íî-ïðàêòè÷åñêóþ è ñîöèàëüíóþ çíà÷èìîñòü.
Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèé ÿâëÿþòñÿ îáíàäåæèâàþùèìè â ñîçäàíèè êðèòåðèåâ èñïîëüçîâàíèÿ EGF è
åãî ðåöåïòîðîâ â êà÷åñòâå ïåðñïåêòèâíûõ îíêîìàðêåðîâ.
Îïðåäåëåíèå óðîâíÿ èõ ýêñïðåññèè ïîìîæåò â âûÿâëåíèè
ãðóïï ðèñêà ñ ïîâûøåííîé âåðîÿòíîñòüþ âîçíèêíîâåíèÿ
îíêîçàáîëåâàíèÿ, ñîçäàíèè èíäèâèäóàëüíîãî ïîäõîäà ïî íàçíà÷åíèþ òàðãåòíîé òåðàïèè òåì ïàöèåíòàì, äëÿ êîòîðûõ
ýòî áóäåò íàèáîëåå öåëåñîîáðàçíî, îöåíêå ýôôåêòèâíîñòè
ïðîâîäèìîé òåðàïèè, èçó÷åíèè îñíîâ îíêîïàòîãåíåçà, îñóùåñòâëåíèè äèíàìè÷åñêîãî ñëåæåíèå çà ðàçâèòèåì çàáîëåâàíèÿ è ïðîãíîçèðîâàíèè åãî èñõîäà.
Âñå âûøåñêàçàííîå ïîçâîëÿåò ãîâîðèòü î ïåðñïåêòèâíîñòè äàííîãî íàïðàâëåíèÿ è öåëåñîîáðàçíîñòè ïðîäîëæåíèÿ ðàáîò â ýòîé îáëàñòè.
Ñïèñîê èñïîëüçîâàííûõ èñòî÷íèêîâ
1. Ãàíöåâ Ø.Õ., Õóñíóòäèíîâ Ø.Ì. Ïàòîëîãèÿ è ìîðôîëîãè÷åñêàÿ õàðàêòåðèñòèêà îïóõîëåâîãî ðîñòà // Ì.: Ìåäèöèíñêîå
èíôîðìàöèîííîå àãåíòñòâî. — 2003. — 206 ñ.
2. Ãåðøòåéí Å.Ñ., Êóøëèíñêèé Í.Å. Òêàíåâûå ìàðêåðû êàê
ôàêòîðû ïðîãíîçà ïðè ðàêå ìîëî÷íîé æåëåçû // Ïðàêòè÷åñêàÿ
îíêîëîãèÿ. — 2002. — Ò. 3, N1. — Ñ. 38–44.
3. Ïèâåíü Í.Â., Áóðàêîâñêèé À.È., Ëóõâåð÷èê Ë.Í. Ñåìåéñòâî ýïèäåðìàëüíîãî ôàêòîðà ðîñòà êàê äèàãíîñòè÷åñêèé ìàðêåð ðàçâèòèÿ îíêîïàòîëîãèè // Õèìèÿ, ñòðóêòóðà è ôóíêöèÿ áèî-
90
Review
Îíêîëîãè÷åñêèé æóðíàë, Ò.8, N1 (29), 2014
in Escherichia // Asia Pacific Jjurnal of Molecular Biology and
Biotechnology. — 2006. — Vol. 14, N 2. — P. 41–45.
22. Mendelson J. Epidermal growth factor receptors as a target
for therapy with antireceptor monoclonal antibodies // Monography
National Cancer Institution. — 1992. — Vol. 13. — P. 125–30.
23. Warren C.M., Landgraf R. Signaling through ERBB
receptors: Multiple layers of diversity and control // Cell. Signal. —
2006. — Vol. 18. — P. 923–933.
24. Schlessinger J. Ligand-Induced, Receptor-Mediated
Dimerization and Activation of EGF Receptor // Cell. — 2002. — Vol.
110. — P. 669–672.
25. Kohda D., Odaka M., Lax I. et al. A 40-kDa epidermal
growth factor/transforming growth factor alpha-binding domain
produced by limited proteolysis of the extracellular domain of the
epidermal growth factor receptor // J. Biol. Chem. — 1993. — Vol.
268. — P. 1976–1981.
26. Elleman T.C., Domagala T., McKern N.M. et al. Identi?cation
of a determinant of epidermal growth factor receptor ligand-binding
speci?city using a truncated, high-af?nity form of the ectodomain /
/ Biochemistry. — 2001. — Vol. 40. — P. 8930–8939.
27. Schechter A., Hung M., Vaidyanathan L. et al. The neu
gene: An erbB-homologous gene distinct from and unlinked to the
gene encoding the EGF receptor // Science. — 1985. — Vol. 229. —
P. 976–978.
28. Kraus M.H., Issing W., Miki T. et al. Isolation and
characterization of ERBB3, a third member of the ERBB-epidermal
growth factor receptor family: Evidence for over expression in a
subset of human mammary tumors // Proceedings of National Academy
of Sciences of USA. — 1989. — Vol. 86. — P. 9193–9197.
29. Plowman G.D., Culouscou J.M., Whitney G.S. et al. Ligandspecific activation of HER40 p180erbB4, a fourth member of the
epidermal growth factor receptor family // Proceedings of National
Academy of Sciences of USA. — 1993. — Vol. 90. — P. 1746–1750.
30. Peles E., Yarden Y. Neu and its ligands: From an oncogene
to neural factors // BioEssays. — 1993. — Vol. 15. — P. 815–824.
31. Citri A., Yarden Y. EGF-ERBB signaling: towards the
systems level // Nat. Rew. Mol. Cell. Biol. — 2006. — Vol. 7. —
P. 505–516.
32. Olayioye M.A., Neve R.M., Lane H.A. et al. The ErbB signaling
network: Receptor heterodimerization in development and cancer //
EMBO J. — 2000. — Vol. 19. — P. 3159–3167.
33. Burgess A.W., Cho H.S., Eigenbrot C. et al. Anopen-andshut case? Recent insights into the activation of EGF/ErbB receptors
// Mol. Cell. — 2003. — Vol. 12. — P. 541–552.
34. Citri A., Skaria K.B., Yarden Y. The deaf and the dumb: The
biology of ErbB-2 and ErbB-3 // Exp. Cell Res. — 2003. — Vol. 284.
— P. 54–65.
35. Zhang X., Gureasko J., Shen K. et al. An allosteric
mechanism for activation of the kinase domain of epidermal growth
factor receptor // Cell. — 2006. — Vol. 125. — P. 1137–1149.
36. Èìÿíèòîâ Å.Í., Õàíñîí Ê.Ï. Ìîëåêóëÿðíàÿ îíêîëîãèÿ:
êëèíè÷åñêèå àñïåêòû // ÑÏá: Èçäàòåëüñêèé äîì ÑÏáÌÀÏÎ. —
2007. — 211 ñ.
37. Jorissen R.N., Walker F., Pouliot N. et al. Epidermal growth
factor receptor: mechanisms of activation and signaling // Exp. Cell
Res. — 2003. — Vol. 284. — P. 31–53.
38. Earp H.S., Dawson T.L., Li X. et al. Heterodimerization and
functional interaction between EGF receptor family members: A new
signaling paradigm with implications for breast cancer research //
Breast Cancer Res. Treat. — 1995. — Vol. 35. — P. 115–132.
39. Bublil E.M., Yarden Y. The EGF receptor family:
spearheading a merger of signaling and therapeutics // Curr. Opin.
Cell Biol. — 2007. — Vol. 19. — P. 124–134.
40. Xian C. Roles of epidermal growth factor family in the
regulation of postnatal somatic growth // Endocrine Reviews. —
2007. — Vol. 28, N 3. — P. 284–296.
41. Miaczynska M., Pelkmans L., Zerial M. Not just a sink:
endosomes in control of signal transduction // Curr. Opin. Cell Biol. —
2004. — Vol. 16. — P. 400–406.
42. Linggi B., Carpenter G. ErbB-4 s80 intracellular domain
abrogates ETO2-dependent transcriptional repression // J. Biol. Chem.
— 2006. — Vol. 281. — P. 25373–25380.
43. Gregory H. Isolation and structure of urogastrone and
its relationship to epidermal growth factor // Nature. — 1975. —
Vol. 257. — P. 325–327.
44. Carpenter G., Cohen S. Epidermal growth factor // J. Biol.
Chem. — 1990. — Vol. 265. — P. 7709–7712.
45. Vachkova Å.G., Bivolarski B.L. Origin, structure and
physiological role of the epidermal growth factor: a review // Bulgarian
Journal of Veterinary Medicine. — 2007. — Vol. 10, N 4. — P. 223–233.
46. Rayner T.E., Cowin A.J., Robertson J.G. et al. Mitogenic
whey extract stimulates wound repair activity in vitro and promotes
healing of rat incisional wounds // American Journal of Physiology
— Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. — 2000. —
Vol. 278. — P. 1651–1660.
47. Poulin Y., Pouliot Y., Lamiot E. et al. Safety and efficacy of
a milk-derived extract in the treatment of plaque psoriasis: An openlabel study // Journal of Cutaneous Medicine and Surgery. — 2005.
— Vol. 9, N 6. — P. 271–275.
48. Farrell R. Epidermal growth factor for ulcerative colitis //
The New England Journal of Medicine. — 2003. — Vol. 349, N 4. —
P. 395–397.
49. Taylor V., Goddard C., Read L. A milk growth factor extract
reduces chemotherapeutic drug toxicity in epithelial cells in vitro //
In Vitro Cellular & Developmental Biology — Animal. — 2001. —
Vol. 37, N 5. — P. 310–318.
50. Holt S.J., Alexander P., Inman C.B. et al. Epidermal growth
factor induced tyrosine phosphorilation of nuclear proteins associated
with translocation of epidermal growth factor receptor into the nucleus
// Biochemical Pharmacology. — 1994. — Vol. 47. — P.117–126.
51. Daughaday W.H., Deuel T.F. Tumor secretion of growth
factors // Endocrinol. Metab. Clin. North Am. — 1991. — Vol. 20,
N 3. — P. 539–563.
52. Pavelic K., Benjac Z., Pavelic J. et al. Evidence for a role of
EGF receptor in the progression of human lung carcinoma //
Anticancer Res. — 1993. — Vol. 13. — P. 1133–1138.
53. Klijn J.G., Berns P.M., Schmitz P.I. et al. The clinical
significance of epidermal growth factor receptor (EGF-R) in human
breast cancer: a review on 5232 patients // Endocr. Rev. — 1992. —
Vol. 13. — P. 3–17.
54. Sirotcovic-Skerlev M., Krizanac S., Kapitanovic S. et al.
Expression of c-myc, erbB-2, p53 and nm23-H1 gene product in
Îáçîðû
91
www.omr.by
62. Plosker G.L., Keam S.J. Trastuzumab: a review of its use in
the management of HER2-positive metastatic and early-stage breast
cancer // Drugs. — 2006. — Vol. 66. — P. 449–475.
63. Gravalos C., Jimeno A. HER2 in gastric cancer: a new
prognostic factor and a novel therapeutic target // Ann. Oncol. —
2008. — Vol. 19. — P. 1523–1529.
64. Ïèâåíü Í.Â. Èììóíîõèìè÷åñêèé àíàëèç: íàó÷íûå îñíîâû, òåíäåíöèè ðàçâèòèÿ è âîçìîæíîñòè ïðàêòè÷åñêîãî èñïîëüçîâàíèÿ // Èììóíîïàòîëîãèÿ, àëëåðãîëîãèÿ, èíôåêòîëîãèÿ. —
2007. — N 2. — Ñ. 6–22.
65. Ïèâåíü Í.Â., Áóðàêîâñêèé À.È. Ìåòîäû èììóíîõèìè÷åñêîãî àíàëèçà ñ èñïîëüçîâàíèåì ìå÷åíûõ ðåàãåíòîâ // Èììóíîïàòîëîãèÿ, àëëåðãîëîãèÿ, èíôåêòîëîãèÿ. — 2012. — N 1. —
Ñ. 93–102.
66. Ïèâåíü Í.Â., Áóðàêîâñêèé À.È., Òèøêåâè÷ Ì.Í. è äð.
Èììóíîõèìè÷åñêàÿ äåòåêöèÿ óðîâíÿ ýïèäåðìàëüíîãî ôàêòîðà
ðîñòà ïðè îíêîïàòîëîãèè ðàçëè÷íîé ëîêàëèçàöèè // Àëëåðãîëîãèÿ è èììóíîëîãèÿ. — 2013. — Ò. 14, N 3. — Ñ. 230–231.
67. Ïèâåíü Í.Â., Áóðàêîâñêèé À.È., Ëóõâåð÷èê Ë.Í. Ðàçðàáîòêà è àïðîáàöèÿ èììóíîõðîìàòîãðàôè÷åñêîãî àíàëèçà äëÿ îïðåäåëåíèÿ ýïèäåðìàëüíîãî ôàêòîðà ðîñòà // Õèìèÿ, ñòðóêòóðà è
ôóíêöèÿ áèîìîëåêóë: IV Ìåæäóíàðîäíàÿ íàó÷íàÿ êîíôåðåíöèÿ.
— Ìèíñê. — 17–19 îêòÿáðÿ, 2012. — Ñ. 132–133.
68. Piven N.V., Byzova N.A., Lukhverchik A.V. et al. Development
of an Immunochromatographic Test System for the Detection of Human
Epidermal Growth Factor // Applied Biochemistry and Microbiology. —
2013. — Vol. 49, N 6. — P. 606–612.
benign and malignant breast lesions: coexpression and correlation
with clinicopathologic parameters // Exp. Mol. Pathol. — 2005. —
Vol. 79, N1. — P. 42–50/
55. Çåíþêîâ À.Ñ., Áîðîâñêàÿ Ò.Ô., Ñòèëèäè È.Ñ. è äð. Ýêñïðåññèÿ c-erbB-2 (HER2/neu) ïðè ïðè ðàêå æåëóäêà: êëèíèêîìîðôîëîãè÷åñêèå îñîáåííîñòè // Ñèáèðñêèé îíêîëîãè÷åñêèé
æóðíàë. — 2011. — N1. — Ñ.5-10.
56. Eroles P., Bosch A., Perez-Fidalgo J. A. et al. Molecular
biology in breast cancer: Intrinsic subtypes and signaling pathways
// Cancer Treat. Rev. – 2012. – Vol. 38. – P. 698–707.
57. Kapitanovic S., Radosevic S., Slade N. et al. Expression of
erbB-3 protein in colorectal adenocarcinoma: correlation with poor
survival // J. Cancer Res. Clin. Oncol. — 2000. — Vol. 126, N 4. —
P. 205–211.
58. Wechselberger C., Bianco C., Strizzi L. et al. Modulation of
TGF-beta signaling by EGF-CFC proteins // Exp. Cell Res. — 2005. —
Vol. 310, N 2. — P. 249–255.
59. Jorgensen, J.T. Targeted HER2 treatment in advanced
gastric cancer // Oncology. — 2010. — Vol. 78. — P. 26–33.
60. Song Y., Huang J., Wang J.-W. Correlation of HER-2/neu
gene amplification and protein expression with the prognosis of
advanced gastric patients // Chin. J. Cancer. — 2010. — Vol. 29. —
P. 71–75.
61. The contribution of molecular markers to the prediction of
response in the treatment of breast cancer: A review of the literature
on HER2, p53 and BCL-2 / A. Hamilton, M. Piccart // Ann. Oncol. —
2000. — Vol. 1. — P. 647–663.
92
Review