Показания, техника проведения и эффективность ИМСИ Семенюк Л., РАРЧ, Волгоград, 2013. Нормы ВОЗ • Овальная головка с ровными краями. • Акросома чётко выражена и занимать 40-70% площади всей головки. • Отсутствие аномалий основания, шейки, хвостика. • Цитоплазматические остатки не должны превышать 1/3 размера головки. • Все пограничные формы считаются аномальными. WHO,2010 Морфометрические критерии: • Головка: длина 4 - 5 мкм, ширина 2,5 – 3,5 мкм, • отношение длины к ширине - 1,50 - 1,75; Акросома: 40 – 70% головки. • Средняя часть: длина 6 – 10 мкм, ширина менее 1 мкм. • Хвост: 45 мкм. Kruger, 1987 Классификация сперматозоидов 1. Bartoov B. (MSOME- оценка морфологии органелл подвижных сперматозоидов). LV – большая вакуоль; SV – маленькая вакуоль; LO – неправильная форма; Nr – сужение ядра; PA – деформированная акросома. Bartoov B. et al., 2002 IMSI – intracytoplasmic morphologically selected sperm injection - инъекция морфологически отобраного сперматозоида в цитоплазму яйцеклетки. Классификация сперматозоидов 2. Vanderzwalmen P. • Класс I – вакуоли отсутствуют; • Класс II – максимум 2 маленькие вакуоли (до 4% поверхности головки сперматозоида); • Класс III – одна большая вакуоль; Класс IV – большие вакуоли и другие аномалии. Vanderzwalmen P. et al., 2007 Классификация сперматозоидов 3. Cassuto G. ( HAVBIC: Head, Acrosome, Vacuole, Basis, Insertion, Cytoplasmic droplet). норма патология • Головка: 1-3 0 • Акросома: 1 0 • Вакуоль: отсутствует 2 одна 1 0 • Основание: 1 0 • Шейка: 1 0 • Остатки цитоплазмы: 1 0 • Жгутик: 1 0 Итого 10 • Cassuto G. et al., 2007 Частота аномалий сперматозоидов А.Бараш,2008 Sibling oocytes study IMSI ICSI No. of MII oocytes 340 355 Fertilization rate, % 90,3 ± 3,1 88,6 ± 2,3 ≤ 0,05 Cleavage rate, % 82,3 ± 2,9 85,1 ± 1,6 ≤ 0,05 D3 embryos, % 83,3 ± 2,7 82,1 ± 1,9 ≤ 0,05 Blastocyst formation rate, % 46,4 ± 2,2 38,6 ± 1,8 ≤ 0,05 А.Бараш , В.Зукин, ASRM,2008 P-value Формирование бластоцист и PR после IMSI Оценка сперматозоидов по HAVBIC Частота встречаемости Формирование бластоцист,% PR, % 0–3 28% 13,1 ± 1,9 25,0% (2/8) 4–7 57% 43,4 ± 2,5 48,3% (14/29) 8 – 10 15% 67,4 ± 3,9 53,3% (8/15) А.Бараш,2008 Беременности в группах с различными нарушениями сперматогенеза А.Бараш,2008 ICSI IMSI P Maternal age 40,8 41,1 0,552 Paternal age 38,8 39,4 0,630 High-quality embryos rate on day 3 44,3% 48,5% 0,615 Blastocyst formation rate 19,6% 34,1% 0,001 PR 13,8% 60,0% 0,001 IR 12,1% 38,3% 0,026 ESHRE,2013 Частота анеуплоидий в сперме в норме и патологии 43,7% нормозооспермия 67,7% 44,3% астенозооспермия тератозооспермия А.Бараш,2008 Частота разных видов анеуплоидий в сперме 21,8% 69,7% 31,7% 30% А.Бараш,2008 X,Y 18, 21 половые хромосомы и аутосомы полиплоидии 120 cycles of PGS 120 cycles PGS ICSI IMSI P autosomal aneuploidy 56,9 % 51,3 % 1/4.0920 sex chromosome aneuploidy 23,5% 15 % 1/4.0139 two or more chromosomal numerical abnormalities 27,5 % 18,8 % 1/4.0193 euploid XX embryos 21,6 % 30 % 1/4.0326 PR 47,1 % 53,8 % 1/4.5321 IR 40,9 % 55,6 % 1/4.5911 cancelation rate 11,8 % 2,5 % 1/4.0016 - one case abortion Fertility and Sterility, 2011 IMSI в клинике «Надия» 2008 2009 2010 2011 117 (6,9%) 155 (9,7%) 207 (22,8%) 297 (33,6%) ЕТ 104 137 186 230 163 59 Оплодотворение,% 80,2 88,65 91,78 83,4 77 78,6 - 59,2 50,99 51 52,2 59,9 PR,% 34,6 50,36 46,23 44,3 45,4 47,5 IR,% 20,8 20,9 22,16 29,05 34,07 36,7 циклов Бластуляция,% 2012 2013 227 105 (30,68%) (29,17%) Техническое оснащение • Инвертированый микроскоп (Olympus IX 71) с дифференциальной интерференционно-контрастной микроскопией (DIC – Nomarski differential interference contrast). • Объектив Uplan Apo ×100 oil/1.50. • Фотокамера Olympus DP 20. • Широкоформатный монитор (Samsung, размер диагонали 533,4 мм). • Роботизированый микроманипулятор Eppendorf. • Чашки Петри (Willco-dish; Willco wells BV, Amsterdam, The Netherlands, толщина дна чашки – 170 мкм). Ограничения IMSI • Низкая концентрация сперматозоидов. • Малое количество подвижных сперматозоидов. • Высокий уровень тератозооспермии. Высокая трудоемкость. Выводы • Морфология сперматозоида имеет определяющее значение для нормального развития эмбриона. • IMSI дает нам больший объем дополнительной информации о сперматозоиде. • Эффективно во всех случаях тератозооспермий. • Выше уровень бластуляции и имплантации. • Более быстрое достижение беременности в циклах с мужским бесплодием у пациентов старше 38 лет. • Эффективно после неудачных предыдущих попыток ICSI и в циклах с бесплодием неясного генеза. • Меньший процент отмены переносов и прерываний беременностей. • Эффективно при повышенных анеуплоидиях в сперме. • Не улучшает результатов при нормозооспермиях и астенозооспермиях. Заключение IMSI можно рекомендовать пациентам: • 1) с двумя и более неудачными попытками ICSI; • 2) с мужским бесплодием и высоким уровнем тератозооспермии; • 3) с бесплодием неясного генеза; при: • 4) неоднократно повторяющихся биохимических беременностях; • 5) повышенном уровне анеуплоидий в сперме; • 6) возрасте 38 лет и более; • 7) низком качестве эмбрионов и низком проценте бластуляции. Спасибо за внимание!