ХЛОРОФИЛЛ И ЕГО ПРОИЗВОДНЫЕ: ПОЛУЧЕНИЕ, СТРУКТУРА

Òðóäû Êîìè íàó÷íîãî öåíòðà ÓðÎ Ðîññèéñêîé ÀÍ
¹ 162
1999
ÕËÎÐÎÔÈËË È ÅÃÎ ÏÐÎÈÇÂÎÄÍÛÅ:
ÏÎËÓ×ÅÍÈÅ, ÑÒÐÓÊÒÓÐÀ
Ä.Â. Áåëûõ, Ë.Ï. Êàðìàíîâà, À.Â. Êó÷èí
 ñâÿçè ñ òåì, ÷òî äëÿ ñèíòåçà ôîòîñåíñèáèëèçàòîðîâ II-ãî
ïîêîëåíèÿ äëÿ ôîòîäèíàìè÷åñêîé òåðàïèè â êà÷åñòâå èñõîäíûõ
âåùåñòâ øèðîêîå ïðèìåíåíèå íàõîäÿò òàêèå ïðîèçâîäíûå õëîðîôèëëà
(Õë), êàê ìåòèëîâûé ýôèð ôåîôîðáèäà "à" (ì.ý. Ôá. à), õëîðèí å6 è
ïóðïóðèí 18 (Ï-18), ïîëó÷åíèå ýòèõ âåùåñòâ â ÷èñòîì âèäå
ïðåäñòàâëÿåò ñóùåñòâåííûé èíòåðåñ
&+ &+
5
[1,2]. Ïî ëèòåðàòóðíûì äàííûì, èñõîäíûì ìàòåðèàëîì äëÿ ïîëó÷åíèÿ ýòèõ
&+
âåùåñòâ ìîæåò ñëóæèòü ÷èñòûé Õë à èëè &+
1
1
åãî áåçìåòàëüíûé àíàëîã ôåîôèòèí "à"
0J
(Ôí à), ñìåñü Õë à è b, à òàêæå ðàçëè÷íûå
1
1
îòõîäû ïåðåðàáîòêè ðàñòèòåëüíîãî ñû- &+
ðüÿ, ñîäåðæàùèå ôîðáèíîâûå ïðîèçâîä&+
+
íûå õëîðîôèëëà.
&+ + &+ &2
Ïåðâûé âàðèàíò ïðîùå âñåãî ðåà&+
&22&+
ëèçóåòñÿ â ñëó÷àå, åñëè â êà÷åñòâå èñõîä&22&+
íîãî ñûðüÿ èñïîëüçóåòñÿ ñèíå-çåëåíàÿ
âîäîðîñëü (íàïðèìåð, ñïèðóëèíà [3]).
5 &+
Ïðè èñïîëüçîâàíèè â êà÷åñòâå èñòî÷íèêà
5 &2+
E
õëîðîôèëëà âûñøèõ ðàñòåíèé (øïèíàò,
êðàïèâà [4,5]), à òàêæå îòõîäîâ ïåðåðàáîòêè ëåêàðñòâåííûõ ðàñòåíèé
(ñìîëà íàïåðñòÿíêè [6]) ïîëó÷àþò ñìåñü ñîåäèíåíèé à- è b- ðÿäîâ,
êîòîðóþ îáû÷íî òîëüêî â òîé èëè èíîé ñòåïåíè î÷èùàþò îò ïðèìåñåé
íåïîðôèðèíîâûõ âåùåñòâ è èñïîëüçóþò áåç ðàçäåëåíèÿ. Ñ÷èòàåòñÿ,
÷òî ñóùåñòâåííûì çàòðóäíåíèåì ïðè âûäåëåíèè õëîðîôèëëà ÿâëÿåòñÿ
àëëîìåðèçàöèÿ – ñîâîêóïíîñòü ïðîöåññîâ îêèñëåíèÿ õëîðîôèëëà ïî
ýêçîöèêëó V ïîä äåéñòâèåì êèñëîðîäà âîçäóõà [7,8]. Ïîýòîìó ïðè
âûäåëåíèè ñòàðòîâîãî ìàòåðèàëà äëÿ ïîëó÷åíèÿ ì.ý. Ôá à,
òðèìåòèëîâîãî ýôèðà õëîðèíà å6 è Ï-18 íåîáõîäèìî ðåøèòü äâå çàäà÷è:
13
âî-ïåðâûõ, íå äîïóñòèòü íåêîíòðîëèðóåìîå îêèñëåíèå õëîðîôèëëîâ
ïðè ýêñòðàêöèè èç ñûðüÿ; âî-âòîðûõ, ìàêñèìàëüíî î÷èñòèòü
õëîðîôèëëû îò âåùåñòâ íåïîðôèðèíîâîé ïðèðîäû.
Èçâåñòíî [3-8] áîëüøîå êîëè÷åñòâî ñàìûõ ðàçíîîáðàçíûõ
ñïîñîáîâ ïîëó÷åíèÿ Õë è åãî ïðîèçâîäíûõ. Ýòî äàåò îáøèðíóþ
èíôîðìàöèþ î òîì, êàê ìîæíî ðåøèòü ïîñòàâëåííûå âûøå çàäà÷è.
Äëÿ óäàëåíèÿ íåïîðôèðèíîâûõ ïðèìåñåé ïðåäëàãàþò ðÿä èíòåðåñíûõ
è óäîáíûõ â èñïîëíåíèè ñïîñîáîâ [3-6]. ×òî êàñàåòñÿ ñïîñîáîâ
ïðåäîòâðàùåíèÿ àëëîìåðèçàöèè, òî ýòî áîëåå ñëîæíàÿ çàäà÷à.
Ïðèìåíåíèå ñåðüåçíûõ ìåð ïðåäîñòîðîæíîñòè â îäíèõ ñëó÷àÿõ [7]
ðåçêî êîíòðàñòèðóåò ñ ïîëíûì ïðåíåáðåæåíèåì ýòèìè ìåðàìè â äðóãèõ [4]. Ïî-âèäèìîìó, òàêîãî ðîäà ðàçíîáîé ñâÿçàí ñ òåì, ÷òî ïðîöåññû
àëëîìåðèçàöèè ïëîõî èçó÷åíû. Ìîäåëüíûå ýêñïåðèìåíòû [8]
ïîçâîëÿþò ëèøü îïðåäåëèòü íàïðàâëåíèÿ îêèñëåíèÿ, íî íå äàþò
âîçìîæíîñòè ïðåäñêàçûâàòü ýòè ïðîöåññû â êàæäîì êîíêðåòíîì
ñëó÷àå. Ýòî ñâÿçàíî ñ òåì, ÷òî íà ïðîöåññ àëëîìåðèçàöèè îêàçûâàþò
âëèÿíèå íå òîëüêî ìîäåëèðóåìûå ôàêòîðû (ïðèðîäà ýêñòðàãåíòà,
ïðèñóòñòâèå êèñëîðîäà âîçäóõà ïðè âûäåëåíèè, âðåìÿ ïðîöåññà è ò.ä.),
íî è õèìè÷åñêèé ñîñòàâ ýêñòðàêòà, êîòîðûé çàâèñèò îò èñõîäíîãî
ñûðüÿ. Ïðåäñêàçàòü åãî âëèÿíèå íà íåêîíòðîëèðóåìîå îêèñëåíèå
õëîðîôèëëà äîâîëüíî ñëîæíî, òàê êàê íå èçâåñòíû: âî-ïåðâûõ, ïîëíûé
õèìè÷åñêèé ñîñòàâ ýêñòðàêòîâ è, âî-âòîðûõ, âåùåñòâà, âëèÿþùèå íà
àëëîìåðèçàöèþ. Ïîýòîìó â êàæäîì êîíêðåòíîì ñëó÷àå ïðè
ïðåïàðàòèâíîì ïîëó÷åíèè ïðîèçâîäíûõ Õë íåîáõîäèìî çíàòü, â êàêîé
ñòåïåíè àëëîìåðèçàöèÿ ïðåïÿòñòâóåò ïîëó÷åíèþ öåëåâûõ ïðîäóêòîâ
è, ïî-âîçìîæíîñòè, èñêëþ÷èòü ýòè ïðîöåññû. Ê ñîæàëåíèþ,
ïîäðîáíîñòè âûÿñíåíèÿ äåòàëåé îáû÷íî íå ïóáëèêóþòñÿ, à äàåòñÿ
òîëüêî êîíå÷íàÿ ìåòîäèêà.  íàñòîÿùåé ðàáîòå â êà÷åñòâå ñòàðòîâîãî
ìàòåðèàëà äëÿ ïîëó÷åíèÿ ïðîèçâîäíûõ Õë âûäåëåíû è èçó÷åíû ñìåñü
Ôí, ÷àñòè÷íî î÷èùåííûé ïî äèîêñàíîâîìó ìåòîäó Õë è õëîðîôèëëèíñûðåö èç õâîéíîé ëàïêè.
Âûäåëåíèå ôåîôèòèíà ïî ìåòîäó Ôèøåðà
Ïðè ïîëó÷åíèè Ôí ïî ìåòîäó Ôèøåðà èñïîëüçóåòñÿ ðàçëè÷íàÿ
ðàñòâîðèìîñòü Ôí è ñîîòâåòñòâóþùèõ Õë: Ôí ïëîõî ðàñòâîðèìû â
ýòàíîëå [4]. Ïðè ïîäêèñëåíèè ãóñòîãî ñïèðòîâîãî ýêñòðàêòà êðàïèâû
ñîëÿíîé êèñëîòîé ïðîèñõîäèò äèññîöèàöèÿ Õë è îáðàçîâàíèå Ôí,
êîòîðûå âûïàäàþò â îñàäîê. Ïîñêîëüêó êèñëîòà äîáàâëÿåòñÿ â
îòíîñèòåëüíî íåáîëüøîì êîëè÷åñòâå, äðóãèå âåùåñòâà ñîîñàæäàþòñÿ
14
ñ Ôí íåçíà÷èòåëüíî.  îñàäêå, ïîëó÷åííîì ïðè "äîñëîâíîì"
âîñïðîèçâåäåíèè ýòîãî ñïîñîáà, ìåòîäîì ÂÝÆÕ áûëè èäåíòèôèöèðîâàíû Ôí à è ýòèëîâûé ýôèð ôåîôîðáèäà "à" (ý.ý. Ôá à).
Ìåòèëèðîâàíèåì ýòîé ñìåñè 5%-íîé ñåðíîé êèñëîòîé â ìåòàíîëå
ïîëó÷åíà ñìåñü ì.ý. Ôá à è b (ìåòîä ÂÝÆÕ) ñ âûõîäîì 45-55 % îò
ìàññû èñõîäíîé ñìåñè. Ýòî ïîçâîëÿåò óòâåðæäàòü, ÷òî ñîïóòñòâóþùèå
Ôí à è ý.ý. Ôá à ïðîèçâîäíûå (b)-ðÿäà ïðåäñòàâëÿþò ñîáîé Ôí b è ý.ý.
Ôá b. Òàêèì îáðàçîì, ïðè ýêñòðàêöèè êðàïèâû 96%-íûì ýòàíîëîì
ïðîèñõîäèò ýòàíîëèç (ïî-âèäèìîìó, ôåðìåíòàòèâíûé) ôèòèëïðîïèîíàòíîãî îñòàòêà õëîðîôèëëîâ, è ÷àñòü õëîðîôèëëîâ ïåðåõîäèò â
ñîîòâåòñòâóþùèå ýòèëõëîðîôèëëèäû. Ïðè ïîñëåäóþùåì ïîäêèñëåíèè ýêñòðàêòà îáðàçóþùèåñÿ ý.ý. Ôá á âûïàäàþò â îñàäîê, òàê êàê
îíè, òàêæå êàê è Ôí, ïëîõî ðàñòâîðèìû â ýòàíîëå. Êðîìå Ôí è ý.ý.
Ôá, â âûïàâøåì îñàäêå ïðè ïîìîùè ÒÑÕ áûëè îáíàðóæåíû êñàíòîôèëëû, êàðîòèíîèäû è ðÿä íåèäåíòèôèöèðîâàííûõ áåñöâåòíûõ
âåùåñòâ. Ýòè âåùåñòâà ìîãóò áûòü â çíà÷èòåëüíîé ñòåïåíè óäàëåíû
èç ñìåñè ïåðåîñàæäåíèåì èç õëîðîôîðìà â ãåêñàí. Îäíàêî, ñóäÿ ïî
òîìó, ÷òî âûõîä ì.ý.Ôá ïðè ìåòèëèðîâàíèè äàííîé ñìåñè äîâîëüíî
âûñîê, ñîäåðæàíèå ýòèõ ïðèìåñåé â îñàäêå îòíîñèòåëüíî íåâåëèêî.
Òî, ÷òî ýòè âåùåñòâà ïî÷òè íå îáíàðóæèâàþòñÿ â ñìåñè ì.ý. Ôá,
ïîçâîëÿåò èñïîëüçîâàòü ñìåñü Ôí äëÿ ïîëó÷åíèÿ ïîñëåäíèõ áåç
äîïîëíèòåëüíîãî ïåðåîñàæäåíèÿ. Îêèñëåíèåì ñìåñè Ôí êèñëîðîäîì
âîçäóõà â ñïèðòîâîé ùåëî÷è ïðè íåáîëüøîì íàãðåâàíèè áûë ïîëó÷åí
Ï-18.
Ïîëó÷åíèå õëîðîôèëëà ïî äèîêñàíîâîìó ìåòîäó
"Äèîêñàíîâûé ìåòîä" âûäåëåíèÿ è î÷èñòêè Õë áûë ðàçðàáîòàí
îòíîñèòåëüíî íåäàâíî [5]. Îí çàêëþ÷àåòñÿ â âûñàæèâàíèè Õë âîäîé
èç ñìåñè ìåòàíîëüíîãî èëè
àöåòîíîâîãî ýêñòðàêòà èç
&+ &+
5
øïèíàòà äèîêñàíîì. Ïðè ýòîì
&+
èç ýêñòðàêòà âûïàäàåò â &+
1
1
&+ &+
îñàäîê Õë â âèäå õëîðîôèëë0J
2
2
äèîêñàíîâîãî àääóêòà –
&+ &+
1
1
&+
ýêñòðà-êîìïëåêñà õëîðîôèëëà
&+
+
ñ äèîêñàíîì.
&+ + &+ &2
Áîëüøàÿ ÷àñòü êîìïî&+
&22&+
íåíòîâ ýêñòðàêòà îñòàåòñÿ ïðè
&22&+
ýòîì â ðàñòâîðå. Äâå-òðè
15
îïåðàöèè ïåðåîñàæäåíèÿ ïîçâîëÿþò óäàëèòü îñíîâíûå ïðèìåñè [5].
Ñðåäè ïðåèìóùåñòâ ýòîãî ìåòîäà ìîæíî îòìåòèòü îòñóòñòâèå
àëëîìåðèçàöèè Õë. Ïîëó÷åííàÿ òàêèì îáðàçîì ñìåñü ìîæåò áûòü
èñïîëüçîâàíà äëÿ ïîëó÷åíèÿ Õë è åãî ïðîèçâîäíûõ (êîëîíî÷íàÿ
õðîìàòîãðàôèÿ) [10].  êà÷åñòâå èñòî÷íèêà õëîðîôèëëà àâòîðàìè ðàáîò
[5,9,10] èñïîëüçîâàëñÿ ñâåæèé øïèíàò.
Íàìè "äèîêñàíîâûì ìåòîäîì" Õë âûäåëåí èç êðàïèâû. Ïðè
äîáàâëåíèè âîäû ê ñìåñè ýòàíîëüíîãî èëè ìåòàíîëüíîãî ýêñòðàêòà
êðàïèâû ñ äèîêñàíîì ïîëó÷åí îñàäîê, ñîäåðæàùèé â îñíîâíîì
çåëåíûé ïèãìåíò. Òðåõêðàòíîå ïåðåîñàæäåíèå ïîçâîëèëî ïðàêòè÷åñêè
ïîëíîñòüþ îòäåëèòü ïðèìåñè (äàííûå ÂÝÆÕ). "×àñòè÷íî î÷èùåííûé
õëîðîôèëë" ïîëó÷àåòñÿ â âèäå ÿðêî-çåëåíîé âîñêîîáðàçíîé ìàññû.
Êîëîíî÷íîé õðîìàòîãðàôèåé íà öåëëþëîçå áûëè âûäåëåíû îáà
çåëåíûõ êîìïîíåíòà ñìåñè. Ýëåêòðîííûå ñïåêòðû ïîãëîùåíèÿ ýòèõ
êîìïîíåíòîâ ñîîòâåòñòâóþò Õë à è b. Ïðè ìåòèëèðîâàíèè ýòîãî îñàäêà
îáðàçóåòñÿ ñìåñü ì.ý. Ôá à è b (èäåíòèôèêàöèÿ ìåòîäîì ñâèäåòåëÿ,
ÂÝÆÕ). Ýòî ãîâîðèò î òîì, ÷òî ïðè âñåõ ïðîâîäèìûõ ïðîöåäóðàõ
öèêëîïåíòàíîâîå êîëüöî V îñòàåòñÿ íåèçìåííûì, ò.å. ïðîöåññ
àëëîìåðèçàöèè íå ïðîèñõîäèò. Äåéñòâèå ðàçáàâëåííîé ñîëÿíîé
êèñëîòû íà ÷àñòè÷íî î÷èùåííûé õëîðîôèëë äàåò ñìåñü Ôí à è b áåç
ïðèìåñè ý.ý. Ôá. Ýòî ãîâîðèò î òîì, ÷òî â îñàäîê âûïàäàþò òîëüêî
õëîðîôèëëû. Èññëåäîâàíèå ïîëó÷åííîãî îñàäêà ïðè ïîìîùè
íîðìàëüíî-ôàçîâîé ÂÝÆÕ ñ äåòåêòèðîâàíèåì ïðè äëèíå âîëíû 214
íì ïîçâîëèëî îáíàðóæèòü ìàëîïîëÿðíûå áåñöâåòíûå ïðèìåñè.
Ïåðåîñàæäåíèå ÷àñòè÷íî î÷èùåííîãî Õë èç äèýòèëîâîãî ýôèðà â
ãåêñàí ïîçâîëèëî ïî÷òè ïîëíîñòüþ óäàëèòü ýòè ïðèìåñè.
Ìåòèëèðîâàíèå äàííîé ñìåñè ìåòàíîëîì â ïðèñóòñòâèè 5%-íîé
ñåðíîé êèñëîòîé äàåò ñìåñü ì.ý. Ôá ñ âûõîäîì 45-50 %, ÷òî
ñâèäåòåëüñòâóåò î ìàëîì ñîäåðæàíèè íåïîðôèðèíîâûõ ïðèìåñåé â
ýòîì îñàäêå.
Ïðè îêèñëåíèè ÷àñòè÷íî î÷èùåííîãî Õë êèñëîðîäîì âîçäóõà â
ñïèðòîâîé ùåëî÷è ïðè íàãðåâàíèè áûë ïîëó÷åí Ï-18.
Èññëåäîâàíèå õëîðîôèëëèíà-ñûðöà
Õëîðîôèëëèí-ñûðåö, ïîëó÷àåìûé èç õâîéíîé ëàïêè, ñ÷èòàåòñÿ
áîãàòûì èñòî÷íèêîì ïðîèçâîäíûõ õëîðîôèëëà [11]. Ïîýòîìó áûëà
èçó÷åíà âîçìîæíîñòü èñïîëüçîâàíèÿ ýòîãî êîíöåíòðàòà êàê èñòî÷íèêà
èíäèâèäóàëüíûõ ïðîèçâîäíûõ Õë.
16
Ïðîèçâîäíûå Õë ýêñòðàãèðîâàëè èç ýôèðíîãî ðàñòâîðà
õëîðîôèëëèíà-ñûðöà êîíöåíòðèðîâàííîé ñîëÿíîé êèñëîòîé (32-34 %).
Ñðåäè âûäåëåííûõ ñîåäèíåíèé, ïî äàííûì ÒÑÕ, íå îáíàðóæåíû Ôí
è Ôá à è b ðÿäîâ, õëîðèí å6. Èäåíòèôèöèðîâàí òîëüêî Ï-18, êîòîðûé
âûäåëåí êîëîíî÷íîé õðîìàòîãðàôèåé íà ñèëèêàãåëå èç ñìåñè
ïèãìåíòîâ. Âûäåëåííîå âåùåñòâî îêàçàëîñü èäåíòè÷íûì ïî
ýëåêòðîííîìó ñïåêòðó ïîãëîùåíèÿ è ïî õðîìàòîãðàôè÷åñêîé
ïîäâèæíîñòè (èäåíòèôèêàöèÿ ìåòîäîì ñâèäåòåëÿ, ÂÝÆÕ) ñòàíäàðòó
Ï-18. Ïðåïàðàòèâíûé âûõîä ýòîãî ñîåäèíåíèÿ ñîñòàâèë 0,6-1% îò
ìàññû èñõîäíîãî êîíöåíòðàòà. Ïîïûòêà ïîâûñèòü ñîäåðæàíèå Ï-18 â
ñìåñè ïðîèçâîäíûõ Õë èç õëîðîôèëëèíà-ñûðöà çà ñ÷åò îêèñëåíèÿ ýòîé
ñìåñè êèñëîðîäîì âîçäóõà íå îêàçàëàñü óñïåøíîé.
Ïîëó÷åíèå ìåòèëîâûõ ýôèðîâ ôåîôîðáèäîâ
Ñìåñü ì.ý. Ôá è èíäèâèäóàëüíûå ì.ý. Ôá à è b áûëè ïîëó÷åíû
èç îòõîäîâ ïåðåðàáîòêè ñåðïóõè âåíöåíîñíîé ñîãëàñíî [12].
Êàê âèäíî èç òàáë.1, ïîëîæåíèå
ïèêîâ â ñïåêòðå ßÌÐ 13Ñ ïîëó÷åííîãî
&+ &+
&+
ì.ý. Ôá à ñîãëàñóþòñÿ ñ ëèòåðàòóðíûìè
a
3
2
12
13
äàííûìè [13]. Êàê ïðàâèëî, ì.ý. Ôá à
1
&+
&+
4 ñîäåðæèò íåêîòîðîå êîëè÷åñòâî ì.ý. Ôá
14
1+
1
11
à´ – èçîìåðà ì.ý. Ôá à, îòëè÷àþùåãîñÿ
d
b
îò ïîñëåäíåãî êîíôèãóðàöèåé õèðàëü15
1
+1
&+ 8
5
íîãî öåíòðà ïðè Ñ-10. Äëÿ ðàçäåëåíèÿ
17
16
&+
7
ýòèõ èçîìåðîâ ïðîâîäèëè ïåðå+
g
6
10
7D&+ +
& &
îñàæäåíèå ñìåñè èç õëîðîôîðìà â
+
9
2
7E&+
ìåòàíîë.  ìàòî÷íîì ðàñòâîðå ïîñëå
7G
&2&+
7F&22&+
ïåðåîñàæäåíèÿ, ïî äàííûì ÂÝÆÕ,
ñîäåðæàëèñü äâà ìàæîðíûõ êîìïî
íåíòà, îäèí èç êîòîðûõ áûë èäåíòè÷åí
ì.ý. Ôá à. Ñïåêòð ßÌÐ 13Ñ ïèãìåíòîâ ìàòî÷íîãî ðàñòâîðà ìîæåò áûòü
èíòåðïðåòèðîâàí êàê íàëîæåíèå ñïåêòðîâ ì.ý. Ôá à è à'. Íàèáîëüøàÿ
ðàçíèöà õèìè÷åñêèõ ñäâèãîâ íàáëþäàåòñÿ äëÿ òåõ ÿäåð óãëåðîäà,
ýëåêòðîííîå îêðóæåíèå êîòîðûõ ñèëüíåå âñåãî çàâèñèò îò
êîíôèãóðàöèè õèðàëüíîãî öåíòðà ïðè Ñ-10. Ýòî ÿäðî Ñ-10, ÿäðà àòîìîâ
g- è d-ìåòèíîâûõ ìîñòèêîâ, ÿäðî Ñ-7 è ÿäðà óãëåðîäà ìåòèëïðîïèàíàòíîãî îñòàòêà ïðè íåì. Äîïîëíèòåëüíîå ïîäòâåðæäåíèå òîãî,
÷òî â ìàòî÷íîì ðàñòâîðå ñîäåðæàòñÿ ì.ý. Ôá à è à', áûëî ïîëó÷åíî
ñëåäóþùèì îáðàçîì. Èçâåñòíî, ÷òî ïðè êèïÿ÷åíèè ì.ý. Ôá à â
17
Ñïåêòð ßÌÐ Ñ ïðîèçâîäíûõ õëîðîôèëëà
13
>@
E
D
D
E
D
G
E
d
a
b
g
E
D
D
F
Òàáëèöà 1
ïèðèäèíå ïðîèñõîäèò äåêàðáîêñèëèðîâàíèå ïðè Ñ-10 è îáðàçóåòñÿ
ìåòèëîâûé ýôèð ïèðîôåîôîðáèäà "à" (ì.ý. ÏÔá à) [4].
18
&+
&+
&+
&+
&+
&+
1+
1
&+
+
+1
&+
+
+
&22&+
&
&
1+
+
2
+1
&+
&+
&+
&22&+
1
1
&+
&+
&+
&+
&+
1
&+
&+
+
+
&22&+
&
&
2
+
Êàê ïîêàçàëè äàííûå ÂÝÆÕ, òàêàÿ îáðàáîòêà êàê ÷èñòîãî ì.ý.
Ôá à, òàê è ñìåñè ì.ý. Ôá à è à' ïîçâîëÿåò ïîëó÷èòü îäíî âåùåñòâî. Èç
ñîïîñòàâëåíèÿ ñïåêòðà ßÌÐ 13Ñ ýòîãî âåùåñòâà ñî ñïåêòðîì ì.ý. Ôá à
âèäíî, ÷òî èñ÷åçëè ñèãíàëû êàðáìåòîêñèëüíîé ãðóïïû ïðè Ñ-10, à
ñèãíàë ñàìîãî Ñ-10 ñóùåñòâåííî ñìåñòèëñÿ â ñèëüíîå ïîëå. Äàííûå
ÏÌÐ-ñïåêòðîñêîïèè (òàáë.2) ñîãëàñóþòñÿ ñ äàííûìè ñïåêòðîñêîïèè
ßÌÐ13Ñ.  ÏÌÐ-ñïåêòðå ïîëó÷åííîãî âåùåñòâà ïî ñðàâíåíèþ ñî
ñïåêòðîì ì.ý. Ôá à èñ÷åçàåò ñèíãëåò, ñîîòâåòñòâóþùèé ìåòèëüíîé
ãðóïïå â ÑÎ2ÑÍ3 ïðè Ñ-10, à âìåñòî ñèíãëåòà àòîìà âîäîðîäà ïðè Ñ-10
(6,28 ì.ä.) íàáëþäàþòñÿ äóáëåòû ñ èñêàæåíèÿìè âòîðîãî ïîðÿäêà,
ñîîòâåòñòâóþùèå äâóì íåýêâèâàëåíòíûì àòîìàì âîäîðîäà ïðè Ñ-10
ì.ý. ÏÔá à. ÏÌÐ-ñïåêòð ñìåñè èçîìåðîâ äîâîëüíî ñëîæåí, îñîáåííî
â îáëàñòè ñèëüíîãî ïîëÿ. Ýòî ñâÿçàíî ñ áëèçîñòüþ èõ õàðàêòåðèñòèê.
Îäíàêî ïîëîæåíèÿ ñèãíàëîâ ïðîòîíîâ ìåòèíîâûõ ìîñòèêîâ îòäåëüíûõ
èçîìåðîâ óäàëîñü îïðåäåëèòü. Ñîïîñòàâëåíèå ýòèõ ôàêòîâ ñ òåì, ÷òî
èç äâóõ ïèãìåíòîâ ìàòî÷íîãî ðàñòâîðà ïîëó÷àåòñÿ îäíî âåùåñòâî, ò.å.
ïðîèñõîäèò ëèêâèäàöèÿ õèðàëüíîãî öåíòðà ïðè Ñ-10 è óòðà÷èâàåòñÿ
âîçìîæíîñòü èçîìåðèè, äàåò îñíîâàíèå óòâåðæäàòü, ÷òî ìèíîðíûé
êîìïîíåíò ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé ì.ý. Ôá à. Ïèãìåíòû ìàòî÷íîãî
ðàñòâîðà áûëè èñïîëüçîâàíû â êà÷åñòâå ñòàíäàðòíîé ñìåñè,
ñîäåðæàùåé ì.ý. Ôá à'. Ñòðóêòóðà ì.ý. Ôá b äîêàçàíà ïðè
ñîïîñòàâëåíèè ñïåêòðà ßÌÐ 13Ñ, çàïèñàííîãî ïî ìåòîäó ãåòåðîÿäåðíîé
J-ìîäóëÿöèè ïîëó÷åííîãî âåùåñòâà ñ àíàëîãè÷íûì ñïåêòðîì ì.ý. Ôá
à è à' (òàáë.3). Êàê âèäíî èç òàáë.3, â ñïåêòðå ïîëó÷åííîãî
19
Òàáëèöà 2
ÏÌÐ ïðîèçâîäíûõ õëîðîôèëëà
b
a
d
E E E
G
E
E
*
ÊÑÑÂ ìåæäó 2b-H òðàíñ è 2b-H öèñ ìåíüøå 1 Ãö èçìåðèòü íå óäàëîñü.
b-ïðîèçâîäíîãî îòñóòñòâóåò ñèãíàë ìåòèëüíîé ãðóïïû Ñ-3à è
ïîÿâëÿåòñÿ ñèãíàë àëüäåãèäíîé ãðóïïû ïðè 186,432 ì.ä.
20
Òàáëèöà 3
Ñïåêòð ßÌÐ Ñ ìåòèëôåîôîðáèäîâ (à) è (b),
çàïèñàííûé ïî ìåòîäó ãåòåðîÿäåðíîé J-ìîäóëÿöèè
13
>@
E
D
D
E
D
G
E
d
a
b
g
E
D
D
F
*
**
E
Àòîì óãëåðîäà ñîåäèíåí ñ íå÷åòíûì ÷èñëîì àòîìîâ âîäîðîäà;
Àòîì óãëåðîäà ñîåäèíåí ñ ÷åòíûì ÷èñëîì àòîìîâ âîäîðîäà.
21
Ïîëó÷åíèå ïóðïóðèíà 18
Ï-18 ïîëó÷åí ïî ìîäèôèöèðîâàííîé ìåòîäèêå [6] èç ñìåñè ì.ý.
Ôá îêèñëåíèåì êèñëîðîäîì âîçäóõà â 0,5%-íîì ðàñòâîðå ãèäðîêñèäà
íàòðèÿ â ýòàíîëå ïðè 50-60°Ñ.
&+
&+
&+
&+
&+
1+
1
&+
+
&+
1
&+
2.2+
&+2+
+1
&+
&+
&+
+
+
&22&+
&+
+
&+
& &2
&+
&2&+
&+
&+
&+
1+
1
1
+1
&+
+
2
2
2
&22+
Ýëåêòðîííûé ñïåêòð ïîãëîùåíèÿ ïîëó÷åííîãî âåùåñòâà
ñîâïàäàåò ñ ëèòåðàòóðíûìè äàííûìè äëÿ Ï-18 [6]. Â ÈÊ-ñïåêòðå
ïîëó÷åííîãî âåùåñòâà íàáëþäàåòñÿ ïîëîñà ïðè 1725 ñì-1, êîòîðàÿ
ñîîòâåòñòâóåò âàëåíòíûì êîëåáàíèÿì ñâÿçè Ñ=Î àíãèäðèäíîãî öèêëà.
 ÏÌÐ-ñïåêòðå ïîëó÷åííîãî âåùåñòâà (òàáë.2) ïðîÿâëÿþòñÿ âñå
ôðàãìåíòû, ïðèñóòñòâóþùèå â ì.ý. Ôá à, êðîìå ïðîòîíîâ
ñëîæíîýôèðíûõ ìåòèëîâ â ïðîïèîíàòíîì îñòàòêå è öèêëîïåíòàíîâîì
êîëüöå, à òàêæå ïðîòîíà ïðè Ñ10. Ýòî ïîçâîëÿåò ïîìåñòèòü àíãèäðèäíûé öèêë íà ìåñòî öèêëîïåíòàíîâîãî êîëüöà. Îòíåñåíèå ñèãíàëîâ
â ñïåêòðå ßÌÐ 13Ñ ïîëó÷åííîãî âåùåñòâà (òàáë.4) ïðîâåäåíî ïðè
ñîïîñòàâëåíèè ñ ëèòåðàòóðíûìè äàííûìè äëÿ ìåòèëîâîãî ýôèðà Ï-18.
Ïîëó÷åííûé Ï-18 èñïîëüçîâàëñÿ êàê ýòàëîí.
ÝÊÑÏÅÐÈÌÅÍÒÀËÜÍÀß ×ÀÑÒÜ
Ñïåêòðû ßÌÐ 1Í è 13Ñ ïîëó÷åííûõ âåùåñòâ çàïèñûâàëè íà
ïðèáîðå “Bruker AM-300” â äåéòåðîõëîðîôîðìå, ðàáî÷àÿ ÷àñòîòà –
300 ÌÃö; çàïèñü ÈÊ-ñïåêòðîâ ïðîâîäèëè íà ïðèáîðå “Specord M-80”
â òàáëåòêàõ KBr; ýëåêòðîííûå ñïåêòðû ïîãëîùåíèÿ çàïèñûâàëè íà
ïðèáîðå “Specord M-40” â õëîðîôîðìå, êþâåòû – 10 ìì.
Èññëåäîâàíèå âåùåñòâ è ñìåñåé ìåòîäîì ÂÝÆÕ ïðîâîäèëè íà
ïðèáîðå “Ìèëèõðîì-1”, èñïîëüçóÿ íîðìàëüíóþ (Silasorb 600) è
îáðàùåííóþ (Separon) ôàçû. Óñëîâèÿ àíàëèçà îáðàùåííî-ôàçîâîé
22
Ñïåêòð ßÌÐ 13Ñ ïóðïóðèíà 18
&'&O
D
D
E
D
D
E
D
G
d
a
b
g
E
D
F
>@
Òàáëèöà 4
23
ÂÝÆÕ äëÿ èññëåäîâàíèÿ Õë è ñìåñåé, ñîäåðæàùèõ Õë: êîëîíêà
2´60 ìì ñ ñîðáåíòîì Separon (äèàìåòð ÷àñòèö – 5 ìêì); ïîäâèæíàÿ
ôàçà – ìåòàíîë (ðàñõîä – 50 ìêë/ìèí); äåòåêòèðîâàíèå – ïðè 360 èëè
214 íì. Óñëîâèÿ àíàëèçà íîðìàëüíî-ôàçîâîé ÂÝÆÕ äëÿ îñòàëüíûõ
ñìåñåé: êîëîíêà 2´60 ìì ñ ñîðáåíòîâ Silasorb 600, ðàñõîä ïîäâèæíîé
ôàçû – 100 ìêë/ìèí; äåòåêòèðîâàíèå – ïðè 360 íì. Èñïîëüçîâàííûå
ýëþåíòû ïðèâåäåíû â òàáë. 5.
Òàáëèöà 5
Óñëîâèÿ èññëåäîâàíèÿ ïðîèçâîäíûõ õëîðîôèëëà
ïðè ïîìîùè íîðìàëüíî-ôàçîâîé ÂÝÆÕ
E E
E
E
E
l
Ìåòèëîâûé ýôèð ïèðîôåîôîðáèäà "à"
Ì.ý. Ôá à (150 ìã) êèïÿòèëè ñ îáðàòíûì õîëîäèëüíèêîì â
ïèðèäèíå (50 ìë) â òå÷åíèå 5 ÷àñîâ. Ðåàêöèîííóþ ñìåñü îõëàæäàëè,
ñìåøèâàëè ñ õëîðîôîðìîì (150 ìë), îòìûâàëè ïèðèäèí 5-7 %-íîé
ñîëÿíîé êèñëîòîé è èçáûòîê ñîëÿíîé êèñëîòû – âîäîé. Õëîðîôîðìíûé
ðàñòâîð ñóøèëè íàä áåçâîäíûì ñóëüôàòîì íàòðèÿ è óïàðèâàëè. Îñòàòîê
ïîñëå óïàðèâàíèÿ õðîìàòîãðàôèðîâàëè íà ñèëèêàãåëå ÀÑÊ (ýëþåíò –
ÑÑl4:àöåòîí, 2:1) äëÿ îòäåëåíèÿ ñìîëîîáðàçíûõ âåùåñòâ. Êîíòðîëü çà
õðîìàòîãðàôèðîâàíèåì îñóùåñòâëÿëè ïðè ïîìîùè ÒÑÕ (ñèëóôîë,
ýëþåíò – ÑÑl4:àöåòîí, 3:1). Ýëþàò, ñîäåðæàùèé ìåòèëïèðîôåîôîðáèä
(à), óïàðèâàëè íà ðîòîðíîì èñïàðèòåëå äîñóõà, è îñòàòîê ïîñëå
24
óïàðèâàíèÿ ïåðåîñàæäàëè èç õëîðîôîðìà â ìåòàíîë. Âûõîä ì.ý.
ÏÔá à – 110 ìã.
Ïóðïóðèí 18
Ñìåñü ì.ý. Ôá (200 ìã) ðàñòâîðÿëè ïðè ñëàáîì íàãðåâàíèè â 50
ìë 0,5%-íîãî ðàñòâîðà ãèäðîêñèäà íàòðèÿ â 96%-íîì ýòàíîëå. ×åðåç
ïîëó÷åííûé ðàñòâîð, íàãðåòûé äî 50-60°Ñ, â òå÷åíèå ÷àñà
áàðáîòèðîâàëñÿ âîçäóõ. Ðåàêöèîííóþ ñìåñü çàòåì îõëàæäàëè,
íåéòðàëèçîâûâàëè êîíöåíòðèðîâàííîé ñîëÿíîé êèñëîòîé äî ðÍ 3-4
(ïî óíèâåðñàëüíîé èíäèêàòîðíîé áóìàãå) è ýêñòðàãèðîâàëè
õëîðîôîðìîì. Õëîðîôîðìåííûé ðàñòâîð ïðîìûâàëè âîäîé äëÿ
óäàëåíèÿ îñòàâøåãîñÿ ýòàíîëà è ñîëÿíîé êèñëîòû, ñóøèëè íàä
áåçâîäíûì ñóëüôàòîì íàòðèÿ è óïàðèâàëè. Îñòàòîê ïîñëå óïàðèâàíèÿ
õðîìàòîãðàôèðîâàëè íà ñèëèêàãåëå ÀÑÊ (ýëþåíò – ÑÑl4:àöåòîí, 4:1).
Êîíòðîëü çà õðîìàòîãðàôèðîâàíèåì îñóùåñòâëÿëè ïðè ïîìîùè ÒÑÕ
(ñèëóôîë, ýëþåíò – ÑÑl4:àöåòîí, 3:1). Ýëþàò, ñîäåðæàùèé ïóðïóðèí
18, óïàðèâàëè íà ðîòîðíîì èñïàðèòåëå, è îñòàòîê ïîñëå óïàðèâàíèÿ
ïåðåîñàæäàëè èç õëîðîôîðìà â ãåêñàí. Âûõîä Ï-18 – 20 ìã.
Ôåîôîðáèäû "à" è "b"
Ì.ý. Ôá à (40 ìã) ðàñòâîðÿëè â àöåòîíå (4 ìë) è äîáàâëÿëè
êîíöåíòðèðîâàííóþ ñîëÿíóþ êèñëîòó (0,2 ìë). Ïîëó÷åííóþ ñìåñü
îñòàâëÿëè íà îäíè ñóòêè â òåìíîòå ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå.
Ðåàêöèîííóþ ñìåñü ðàçáàâëÿëè õëîðîôîðìîì (20 ìë), îòìûâàëè
ñîëÿíóþ êèñëîòó è àöåòîí âîäîé, ïîëó÷åííûé õëîðîôîðìåííûé
ðàñòâîð ñóøèëè íàä áåçâîäíûì ñóëüôàòîì íàòðèÿ è óïàðèâàëè. Îñòàòîê
ïîñëå óïàðèâàíèÿ õðîìàòîãðàôèðîâàëè íà ñèëèêàãåëå ÀÑÊ (ýëþåíò –
ÑÑl4:àöåòîí, 4:1). Êîíòðîëü çà õðîìàòîãðàôèðîâàíèåì îñóùåñòâëÿëè
ïðè ïîìîùè ÒÑÕ (ñèëóôîë, ýëþåíò – ÑÑl4:àöåòîí, 3:1). Ýëþàò,
ñîäåðæàùèé Ôá à, óïàðèâàëè íà ðîòîðíîì èñïàðèòåëå äîñóõà, è
îñòàòîê ïîñëå óïàðèâàíèÿ ïåðåîñàæäàëè èç õëîðîôîðìà â ìåòàíîë.
Âûõîä Ôá à – 25 ìã.
Ôá b ïîëó÷àëè àíàëîãè÷íî ïðîöåññó ïîëó÷åíèÿ Ôá à. Èç 15 ìã
Ì.ý. Ôá b ïîëó÷åíî 6 ìã Ôá b.
Ôåîôèòèí
×åðåç êðàïèâó (75 ã) â äåëèòåëüíîé âîðîíêå íà 100 ìë
ïðîïóñêàëè 96%-íûé ýòàíîë (90 ìë). Ïîëó÷åííûé ýêñòðàêò ïîäêèñëÿëè
10%-íîé ñîëÿíîé êèñëîòîé (0,5 ìë). ×åðåç 3 ÷àñà âûïàâøèé îñàäîê
îòôèëüòðîâûâàëè íà ñòåêëÿííîì ôèëüòðå è ïðîìûâàëè 70%-íûì
âîäíûì ýòàíîëîì. Îñàäîê âûñóøèâàëè íà âîçäóõå. Âûõîä Ôí – 115 ìã.
25
Õëîðîôèëë
75 ã êðàïèâû ïåðåìåøèâàëè ñ 300 ìë 96%-íîãî ýòàíîëà â òå÷åíèå
äâóõ ÷àñîâ. Ýòàíîëüíûé ýêñòðàêò îòôèëüòðîâûâàëè, ñìåøèâàëè ñ
20 ìë äèîêñàíà è ïî êàïëÿì äîáàâëÿëè âîäó äî ïîìóòíåíèÿ ðàñòâîðà.
×åðåç 2 ÷àñà âûïàâøèé îñàäîê îòäåëÿëè öåíòðèôóãèðîâàíèåì,
ïðîìûâàëè âîäîé è ðàñòâîðÿëè â 50 ìë ýòàíîëà. Ê ïîëó÷åííîìó
ðàñòâîðó ïðèáàâëÿëè 5 ìë äèîêñàíà è ïî êàïëÿì äîáàâëÿëè âîäó äî
ïîìóòíåíèÿ ðàñòâîðà. Îñàäîê îòäåëÿëè àíàëîãè÷íûì ñïîñîáîì,
ñóøèëè íà âîçäóõå è ïåðåîñàæäàëè èç äèýòèëîâîãî ýôèðà â ãåêñàí.
Âûõîä Õë – 73 ìã.
10 ìã ïîëó÷åííîé ñìåñè õðîìàòîãðàôèðîâàëè íà ìèêðîêðèñòàëëè÷åñêîé öåëëþëîçå (ýëþåíò – ïåòðîëåéíûé ýôèð:ïðîïèëîâûé
ñïèðò, 100:0,5) äëÿ âûäåëåíèÿ èíäèâèäóàëüíûõ Õë à è b.
Ìåòèëèðîâàíèå ôåîôèòèíà è õëîðîôèëëà
Ôí (50 ìã) èëè ÷àñòè÷íî î÷èùåííûé Õë (30 ìã) ðàñòâîðÿëè â
ñìåñè 5 ìë ìåòàíîëà ñ 0,25 ìë êîíöåíòðèðîâàííîé ñåðíîé êèñëîòû.
Ðàñòâîð îñòàâëÿëè íà 12 ÷àñîâ ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå.
Ðåàêöèîííóþ ñìåñü ðàçáàâëÿëè õëîðîôîðìîì (50 ìë), îòìûâàëè âîäîé
ìåòàíîë è ñåðíóþ êèñëîòó. Õëîðîôîðìíûé ðàñòâîð ñóøèëè íàä
áåçâîäíûì ñóëüôàòîì íàòðèÿ è óïàðèâàëè. Îñòàòîê ïîñëå óïàðèâàíèÿ
ïåðåîñàæäàëè èç õëîðîôîðìà â ìåòàíîë. Âûõîä èç Ôí – 20-25 ìã; èç
÷àñòè÷íî î÷èùåííîãî Õë – 10-12 ìã.
Âûäåëåíèå ñìåñè ïðîèçâîäíûõ õëîðîôèëëà
èç õëîðîôèëëèíà-ñûðöà
Ðàñòâîð 1 ã õëîðîôèëëèíà-ñûðöà â 200 ìë äèýòèëîâîãî ýôèðà
âñòðÿõèâàëè ñ 50 ìë êîíöåíòðèðîâàííîé ñîëÿíîé êèñëîòû (30-34 %).
Ïîñëå ðàññëîåíèÿ ôàç âîäíûé ñëîé îòäåëÿëè, ñìåøèâàëè ñî ñâåæèì
ýôèðîì (300 ìë) è ðàçáàâëÿëè âîäîé (500 ìë). Ýôèðíûé ñëîé îòìûâàëè
îò ñîëÿíîé êèñëîòû âîäîé, ñóøèëè íàä áåçâîäíûì ñóëüôàòîì íàòðèÿ
è óïàðèâàëè äî 20% èñõîäíîãî îáúåìà. Ñìåñü ïðîèçâîäíûõ Õë
âûñàæèâàëè èç ïîëó÷åííîãî ðàñòâîðà ãåêñàíîì. Âûõîä ïðîèçâîäíûõ
Õë – 80 ìã.
Ëèòåðàòóðà
1. Ðåøåòíèêîâ À.Â., Øâåö Â.È., Ïîíîìàðåâ Ã.Â. Âîäîðàñòâîðèìûå òåòðàïèððîëüíûå ôîòîñåíñèáèëèçàòîðû äëÿ ôîòîäèíàìè÷åñêîé òåðàïèè ðàêà. –
 ïå÷àòè.
26
2. Ìèðîíîâ À.Ô. Ðàçðàáîòêà ñåíñèáèëèçàòîðîâ âòîðîãî ïîêîëåíèÿ íà îñíîâå
ïðèðîäíûõ õëîðîôèëëîâ // Ðîññèéñêèé õèìè÷åñêèé æóðíàë. – 1998. –
¹5. – Ñ. 23-36.
3. Ïðîìûøëåííîå ïðîèçâîäñòâî Spirulina – ðåàëüíûé èñòî÷íèê
ïîëó÷åíèÿ ôîòîñåíñèáèëèçàòîðîâ íà îñíîâå õëîðîôèëëà (à) / Â.Â.
Àøìàðîâ, Ð.Ô. Áàóì, À.Ë. Ìåùåðÿêîâà, Ã.Â. Ïîíîìàðåâ, Ã.Ì. Ñóõèí // VII
Ìåæäóíàðîäíàÿ êîíôåðåíöèÿ ïî õèìèè ïîðôèðèíîâ è èõ àíàëîãîâ: Òåç.
äîêë. – ÑÏá., 1995.
4. Ïîðôèðèíû: ñòðóêòóðà, ñâîéñòâà, ñèíòåç / Ïîä ðåä. Í.Ñ.Åíèêîëîïÿíà.
– Ì.: Íàóêà, 1985. – 334 ñ.
5. Iriyama K., Shiraki M. An Improved Method for Extraction, Partial Purification,
Separation and Isolation of Chlorophyll from Spinach // J.Liq.Chromatogr. –
1979. – ¹ 2(2). – Ñ. 255-276.
6. Ìèðîíîâ À.Ô., Ëåâèíñîí Å.Ã. Ñèíòåç ìîäåëüíûõ ïîðôèðèí-õëîðèíîâûõ
äèìåðîâ ñ ïðîñòîé ýôèðíîé ñâÿçüþ // Áèîîðãàíè÷åñêàÿ õèìèÿ. – 1995. –
¹3. – Ñ. 230-234.
7. Áåðåçèí Á.Ä. Êîìïëåêñíûå ñîåäèíåíèÿ ïîðôèðèíîâ è ôòàëëîöèàíèíà. –
Ì.: Íàóêà, 1978. – 280 ñ.
1
8. H and 13C NMR-Spectra of the Metanolic Allomerisation Products of
132(R)-Chlorophyll (a) / K. Hyvärien, J. Helaja, P. Kuronen, I. Kilpeläinen,
P.H. Hynnenen // Magnetic Resonance in Chemistry. – 1995. – Vol. 33. – P. 646656.
9. Birigare R.R., Kennicutt M.C., Keeny-Kennicutt W.L. Isolation and
Purification of Chlorophylls (a) and (b) for the Determination of Stable Carbon
and Nitrogen Isotope Composition // Anal. Chem. – 1991. – Vol. 63. – Ð. 130-133.
10. Hynnenen P.H., Lötönen S. Preparation of Phorbin Derivatives from
Chlorophyll Mixture Utilising the Principle of Selective Hydrolysis //
Synthesis. – 1980. – ¹7. – P. 539-541.
11. ßãîäèí Â.È. Îñíîâû õèìèè è òåõíîëîãèè ïåðåðàáîòêè äðåâåñíîé çåëåíè. –
Ë.: Íàóêà, 1981. – 224 ñ.
12. Êàðìàíîâà Ë.Ï., Áåëûõ Ä.Â., Êó÷èí À.Â. Ïðîèçâîäíûå õëîðîôèëëà:
âûäåëåíèå è ñòðóêòóðà //Àêòóàëüíûå ïðîáëåìû õèìèè è õèìè÷åñêîé
òåõíîëîãèè "Õèìèÿ-99". - Èâàíîâî, 1999. - Ñ.139.
13. Chlorophyllon (a), a new pheophorbide (a) related compound isolated from
Ruditapes phyllipinarum as an antioxidative compound / K. Sakata, K.
Yamamoto, H. Ishikawa, A. Yagi, H. Etoh, K. Ina // Tetragedron. Lett. – 1990. –
¹38. – Ð. 1165-1168.
14. Ma L., Dolphyn D. Stereosellective Synthesis of New Chlorophyll (a) Related
Antioxidants Isolated from Marine Organisms // J. Org. Chem. – 1996. –
Vol.61. – Ð. 2501-2510.
27