Количественная оценка контаминации внутренней среды

Количественная оценка контаминации внутренней среды помещений г. Минска
плесневыми грибами и сопутствующей микробиотой
Щербинская И.П. ,Дудчик Н.В., Кравцова В.В., Науменко С.А.,*Мараховская С.В.,
**Кулеша З.В., ***Жевняк И.В.
Республиканский научно-практический центр гигиены, г. Минск
*Белорусский государственный медицинский университет, г. Минск
**Гродненский районный исполнительный комитет, г. Гродно
*** Республиканский центр гигиены, эпидемиологии и общественного здоровья
г. Минск
Реферат: В статье освещены актуальные вопросы воздействия биологического
фактора на организм человека. Представлены результаты количественной распространенности и таксономической принадлежности доминирующих родов плесневых грибов
во внутренней среде помещений жителей в шести районах г. Минска.
Ключевые слова: плесень, сырость, внутренняя среда помещений, микробиота.
Введение: Проблема качества жилых помещений и состояния внутрижилищной
среды еще более обостряется тем, что по данным ВОЗ [1-2], люди проводят более 80%
их времени дома, а некоторые группы населения, в первую очередь дети и люди старшего возраста – 90% и даже больше и качество внутренней среды в таких помещениях
в значительной степени определяет их состояние здоровья и самочувствия. В настоящее время к числу безусловных биологических факторов риска, вызывающих аллергизацию населения в условиях жилой среды можно отнести микологическое загрязнение.
Рост микроорганизмов приводит к увеличению содержания спор, клеточных фрагментов, аллергенов, микотоксинов, эндотоксинов, бета-глюканов и летучих органических
соединений в воздухе помещений. Причинные факторы нарушений здоровья окончательно не определены, однако, повышенное содержание любого из вышеперечисленных агентов представляет потенциальную опасность для здоровья.
Материал и методы исследований: Использованы микробиологические (исследование воздушной среды помещений, исследование поверхностей стеновых конструкций), гигиенические (анкетный опрос, визуальное обследование помещений, измерение температурно-влажностных параметров помещений) методы.
Результаты и их обсуждение: Для оценки микробиологического статуса и качества внутренней среды помещений было проведено анкетирование когортных групп
населения Центрального, Фрунзенского, Московского Октябрьского, Ленинского, Советского районов г. Минска.
Всего было проанкетировано 300 человек из них в контрольной группе 70 человек, из которых 50 взрослых (82%- женщины, 18 мужчины), 20 детей (55% - мальчики,
45% - девочки). Исследуемая группа состояла из 230 человек, из которых 130 взрослые
(92% -женщины, 8% - мужчины), 100 детей (53% - мальчики, 47 % - девочки). Возрастной состав опрашиваемых лиц был сходным как в исследуемой, так и в контрольной
группах и составлял для взрослых 25 – 75 лет, для детей 5-17 лет.
Анкетирование показало, что большинство из респондентов контрольной и исследуемой групп проживают в панельных домах (84,3%). В кирпичных домах проживает 15,7%. Время пребывания в помещении лиц контрольной и исследуемой группы колебалось от 12 до 18 часов в сутки и в среднем составило 16,0±1,5 часов.
Результаты анкетирования свидетельствуют о том, что большинство опрошенных лиц исследуемой группы высказывали жалобы на плохое самочувствие, наличие
аллергических заболеваний при этом связывали это с проживанием в данной квартире.
Также 65% опрошенных связывали появление плесневых поражений в квартире с пло-
хими микроклиматическими параметрами (низкая температура в квартире, сырость),
20% связывали появление плесени со строительными дефектами и отмечали наличие
плесневых поражений у соседей верхних и нижних этажей в аналогичных помещениях
и участках, 15 % опрошенных связывали появление плесени с плохой работой вентиляции. 98% опрошенных лиц исследуемой группы самостоятельно боролись с плесневым поражением и только 2% из них привлекали специалистов других служб. 5% из
числа опрошенных респондентов исследуемой группы заявили, что проведенные мероприятия по борьбе с плесенью были эффективными и плесневые поражения не появились вновь, в 50% случаев респонденты отмечали появление вторичных очагов плесневого поражения в ванной комнате и на кухне в 100% связывая это с плохой (недостаточной) работой либо отсутствием вентиляции. В анкете учитывалось скученное проживание (формула заселения n-2), курение в квартирах, наличие комнатных растений,
домашних животных. Полученные данные представлены в таблице 1.
Таблица 1 – Результаты изучения качества жилья.
Квартиры с данным факто- Квартиры с данным факИзучаемый фактор
ром среди лиц исследуемой
тором среди лиц конгруппы %
трольной группы %
Скученность
42,6
35,4
Плесневое поражение стено100
вых конструкций
Курение
33,9
30,1
Наличие кошек
27,1
25,0
Наличие собак
19,5
10,8
Визуальное обследование помещений было произведено с целью обнаружения
протечек, видимого роста плесневых грибов на поверхностях строительных и отделочных материалов, оценки примерной площади очагов поражения стеновых конструкций
грибковой флорой. Идентификация возможного источника загрязнения воздуха осуществлялась при посещении помещения с учетом присутствия ощутимых запахов,
натурного осмотра помещения, предметов мебели, внутренней отделки, способа вентиляции и возможных внешних источников загрязнения. При визуальном обследовании
помещений жителей исследуемой группы в 100% случаев было установлено наличие
плесневого поражения, основными местами его локализации были ванная комната
(швы между плитками, потолок, стиральная машина), жилые комнаты (стык стеновых
конструкций), вытяжная вентиляция, кухня (рис. 1).
16
53
ванная комната
13
жилые помещения
кухня
вытяжная
вентиляция
8
Рисунок 1 – Удельный вес помещений с плесневым поражением у жителей исследуемой группы в %
Оценка микроклиматических условий проводилась по общепринятой методике.
Температура и относительная влажность воздуха измерялась в центре помещений гигрометром - термометром цифровым с диапазоном измерений: относительной влажностью от 10% до 100%, относительная влажность от - 300С до 600С. Класс точности измерений ± 3,0% ±0,50С (в точке 200С) ±0,60С в остальном диапазоне. В соответствии с
п.п. 14 - 15 Санитарных норм, правил и гигиенических нормативов «Гигиенические
требования к устройству, оборудованию и содержанию жилых домов», утвержденных
постановлением Министерства здравоохранения Республики Беларусь 25 августа 2009
г. № 95 «Система отопления должна обеспечивать равномерный прогрев воздуха в помещениях жилых домов в течение всего отопительного периода. Требования к допустимым параметрам микроклимата в жилых помещениях жилого дома в отопительный
период и сравнительный анализ полученных результатов отражены на таблице 2.
Таблица 2 – Результаты исследования помещений по микроклиматическим параметрам
Показатель в соотМикроклиматические
Контрольный Исследуемый райветствии с СанНпараметры
район
он
ПиГн
Температура воздуха
+18 ± 24°С
+18 ± 21°С
+21 ± 24°С
Относительная
влажне более 60 %
20 – 55%
55 – 77%
ность
Результаты исследования помещений по микроклиматическим параметрам свидетельствуют, что в помещениях жителей контрольного района микроклиматические
параметры соответствовали требованиям действующих Санитарных норм, правил и гигиенических нормативов «Гигиенические требования к устройству, оборудованию и
содержанию жилых домов», утвержденных постановлением Министерства здравоохранения Республики Беларусь 25 августа 2009 г. № 95. В помещениях жителей исследуемого района в 65% случаев отмечено превышение относительной влажности, что согласуется с результатами анкетного опроса жителей данной группы, когда появление
плесневых поражений в квартире жители связывали с плохими микроклиматическими
параметрами (низкая температура в квартире, сырость). При измерении температуры в
помещениях жителей исследуемого района не было зарегистрировано ни одного случая
несоответствия температурных параметров действующим Санитарным нормам, правилам и гигиеническим нормативам, это связано с тем, что в квартирах с плесневым поражением сами жильцы или эксплуатирующая организация приняли меры по утеплению помещений.
Изучение микробиологической контаминации воздуха жилых помещений проводили по следующим показателям:
общее число микроорганизмов в 1 м3 воздуха, КОЕ/1м3;
количество плесневых грибов, КОЕ/1м3;
количество гемолитических стрептококков и стафилококков, КОЕ/1м3.
Чашки с МПА инкубировали в течение 3 суток при температуре 30 0С, с КА в течение 3 суток при 370С, со средой Сабуро – 5 суток при температуре 240С.
Для определения общего микробного числа чашки инкубировали в термостате.
После инкубации чашки просматривались с помощью лупы, и подсчитывалось число
выросших колоний (рисунок 2).
Рисунок 2 – Рост микроорганизмов на чашках с МПА, через 3 суток
Для дифференциации выросших на МПА колоний чашки дополнительно выдерживались 48 ч при комнатной температуре. Затем проводилось изучение выросших колоний по морфологическим и биохимическим свойствам. Отмечалось количество пигментных колоний (желтых, белых, розоватых и др.), плесневых и споровых микроорганизмов. С целью дальнейшего изучения пигментных колоний производили окраску
всех типов колоний по Грамму. Из всего многообразия колоний в результате микроскопии были выявлены бактерии, имеющие сферическую форму, располагающиеся неправильными скоплениями, окрашивающиеся по Грамму положительно [3].
Поскольку медицинское значение имеют кокки семейства Micrococcaceae и
Streptococcaceae, проводили дифференциацию кокковых форм микроорганизмов. Основными признаками дифференцировки представителей этих семейств являются наличие или отсутствие цитохромов (отсутствуют у Streptococcaceae) и каталазная активность (отсутствует у большинства представителей Streptococcaceae). Поэтому с целью
дальнейшего изучения и идентификации выросших колоний был проведен тест на каталазу. Все изученные колонии оказались каталаза-положительными, вследствие чего
был сделан вывод о принадлежности изучаемых микроорганизмов по этому тесту к семейству Micrococcaceae. В ходе дальнейших исследований был проведен тест на оксидазную активность, в результате чего выяснилось, что выросшие на среде МПА бактерии оказались оксидаза-позитивными. На основании данных исследований была подтверждена принадлежность изученных микроорганизмов к роду Micrococcus.
Для определения количества гемолитических стрептококков и стафилококков,
КОЕ/1м3 был осуществлен посев на кровяной агар. Рост микроорганизмов на кровяном
агаре отсутствовал.
Для определения грибов и дрожжей был осуществлен посев на чашки со средой
Сабуро, чашки инкубировали в течение 5 суток при температуре 24 0С. После инкубации посевов в термостате чашки просматривались с помощью лупы и подсчитывали
число выросших характерных колоний плесневых грибов и дрожжей (рисунок 3)
Рисунок 3 – Рост грибов и дрожжей на чашках со средой Сабуро, через 5 суток
Колонии дрожжей и плесневых грибов разделяли визуально. Рост дрожжей на
агаризованной среде сопровождался образованием крупных, выпуклых, блестящих, серовато-белых колоний с гладкой поверхностью и ровным краем. Развитие плесневых
грибов на питательной среде сопровождалось появлением мицелия различной окраски.
Проводили микроскопические исследования путем приготовления из отдельных колоний препаратов методом раздавленной капли. В результате микроскопии были выявлены одноклеточные микроорганизмы круглой и овальной формы, почкующиеся, что дало нам основание отнести их к дрожжам; а также микроорганизмы, состоящие из нитей-гифов без перегородок, которые образуют боковые выросты и разветвления и были
определены как плесневые грибы. Результаты микробиологических исследований проб
воздуха жилых помещений у жителей контрольной и исследуемой групп представлены
в таблице 3
Таблица 3 – Результаты микробиологических исследований проб воздуха жилых
помещений у жителей контрольной и исследуемой групп
Показатель
Контрольный район
Исследуемый район
2
2
МАФАнМ, КОЕ/чашку
2,2±0,8 х10 - 4,0±1,2 х10
4,6±0,9 х103 - 7,3±1,6 х103
Гемолитическая
0
0
микрофлора, КОЕ/чашку
Плесневые
грибы,
Единичные колонии до
10,0±0,6 х101 – 3,6±1,5
КОЕ/чашку
8,0х101
х103
Дрожжи, КОЕ/чашку
0-5
2 - 10
Наиболее частыми контаминантами воздуха и поверхностей стен и потолков
внутри помещений были грибы из родов Penicillium и Aspergillus. Реже встречались
грибы из родoв Cladosporium, Stemphуlium, Rhizopus, Alternaria. В 80% обследованных
помещений у жителей исследуемого района воздух был загрязнен (>4,6±0,9 х103
КОЕ/м3) сочетанием нескольких видов грибов.
Результаты микологического обследования поверхностей внутри помещений
(бумажные обои, потолки, швы между плитками) свидетельствует о наличии различных видов грибов на поверхностях внутри жилых помещений соответствуют частоте их
обнаружения в воздухе.
Выводы:
1.
Результаты анкетирования свидетельствуют о том, что большинство
опрошенных лиц исследуемой группы высказывали жалобы на плохое самочувствие,
наличие аллергических заболеваний при этом связывали это с проживанием в данной
квартире. Также 65% опрошенных связывают появление плесневых поражений в квартире с плохими микроклиматическими параметрами (низкая температура в квартире,
сырость), 20% связывают появление плесени со строительными дефектами и отмечают
наличие плесневых поражений у соседей верхних и нижних этажей в аналогичных помещениях и участках, 15 % опрошенных связывают появление плесени с плохой работой вентиляции. 98% опрошенных лиц исследуемой группы самостоятельно боролись с
плесневым поражением и только 2% из них привлекали специалистов других служб.
5% из числа опрошенных респондентов заявили, что проведенные мероприятия по
борьбе с плесенью были эффективными и плесневые поражения не появились вновь, в
50% случаев респонденты отмечали появление вторичных очагов плесневого поражения в ванной комнате и на кухне в 100% связывая это с плохой (недостаточной) работой либо отсутствием вентиляции. Время пребывания в помещении лиц контрольной и
исследуемой группы в среднем составило 16,0±1,5 часов.
2.
При визуальном обследовании помещений жителей исследуемой группы
в 100% случаев было установлено наличие плесневого поражения. В помещениях жителей исследуемого района в 65% случаев отмечено превышение относительной влажности.
3.
При исследовании проб воздуха жилых помещений у жителей исследуемой группы было установлено, что МАФАнМ во всех точках исследования колебалась
в пределах 2,2±0,8 х102 – 4,0±1,2 х102 КОЕ/чашку (контрольный район) и 4,6±0,9 х103 –
7,3±1,6 х103 КОЕ/чашку в помещениях у жителей исследуемого района. Количество
плесневых грибов составило от единичных колоний до 8,0х101 в помещениях у жителей контрольного района и 10,0±0,6 х101 – 3,6±1,5 х103 КОЕ/чашку в помещениях у жителей исследуемого района. Дрожжи обнаруживались лишь в нескольких пробах и составляли единичные клетки - 0-5 (контрольный район) 2 – 10 в помещениях у жителей
исследуемого района.
4.
Наиболее частыми контаминантами воздуха, поверхностей стен и потолков внутри помещений были грибы из родов Penicillium и Aspergillus. Реже встречались
грибы из родoв Cladosporium, Stemphуlium, Rhizopus, Alternaria. В 80% обследованных
помещений у жителей исследуемого района воздух был загрязнен (>4,6±0,9 х103
КОЕ/м3) сочетанием нескольких видов грибов.
Список литературы:
1. Губернский Ю.Д. Перспективные направления гигиенических исследований урбанизационной жилой среды // Гигиена и санитария. 2000. - № 1. С.8-12.
2. Губернский Ю.Д., Калинина Н.В., Мельникова А.И. Экологогигиеническая оценка влияния факторов внутрижилищной среды на аллергизацию населения // Гигиена и санитария. 1998. - № 4. - С. 50-54.
3. Лабораторные исследования внешней среды / Под ред. А.В.Павлова. Киев, Здоровья, 1978. - 290 с.
Quantitative assessment of a kontamination of the internal environment of rooms
of Minsk mould mushrooms and an accompanying microbiota
Shcherbinskaja I.P., Dudchik N.V., Kravtsov V.V., Naumenko S.A.,* Marahovskaja S.V.,
** Kulesha Z.V., *** Zhevnjak I.V.
Republican scientifically-practical centre of hygiene, Minsk
* Belarusian state medical university, Minsk
** Grodno regional executive committee, Grodno
*** Republican center of hygiene, epidemiology and public health, Minsk
In article topical issues of influence of a biological factor on a human body are taken
up. Results of quantitative prevalence and taxonomical accessory of dominating childbirth of
mould mushrooms in the internal environment of rooms of inhabitants in six districts of
Minsk are presented. In article topical issues of influence of a biological factor on a human
body are taken up. Results of quantitative prevalence and taxonomical accessory of dominating childbirth of mould mushrooms in the internal environment of rooms of inhabitants in six
districts of Minsk are presented.
Keywords: mould, dampness, internal environment of rooms, microbiota.