«Сейфуллин оқулары–11: Жастар және ғылым» атты Республикалықалық ғылыми-теориялық конференциясының материалдары = Материалы Республиканской научно-теоретической конференции «Сейфуллинские чтения–11: Молодежь и наука». – 2015. – Т.І, ч.1. – С. 172-175 КАЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ НА НАЛИЧИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ Покровская Н.А., Кухар Е.В., Есжанова Г.Т. За последние десятилетия фитотерапия прочно вошла в арсенал лечебных приемов ветеринарного врача. Препараты, изготовленные из растительного лекарственного сырья, стоят дешевле синтетических, могут их с успехом заменять, что способствует снижению себестоимости продукции животноводства. Лечение дерматомикозов противогрибковыми антибиотиками вызывает дополнительные интоксикации и тяжелые аллергические реакции. А лекарственные растения дают быстрый экономический эффект без побочных явлений [1, 2]. Для разработки эффективных противогрибковых препаратов с фунгистатическим и/или фунгицидным действием необходимо подобрать лекарственное растительное сырьё (ЛРС), содержащее биологически активные компоненты с направленным действием. Для повышения фармакологической эффективности препаратов из растительного сырья необходимо тщательное изучение его химического состава, а также рациональности и активности полученных лекарственных форм [3, 4]. Целью работы является фитохимический анализ лекарственного растительного сырья (ЛРС) для выявления биологически активных веществ. Материалы и методы. В летний период 2014 г. был осуществлен сбор и заготовка, согласно методике [4, 5, 6, 7, 8, 9, 10], следующих лекарственных растений: трава чистотела, трава шалфея, почки березы, цветки календулы, листья одуванчика, трава полыни обыкновенной, трава тысячелистника, плоды облепихи. Сбор материала осуществляли с учетом фаз вегетации растений, в экологически чистых районах Казахстана: зона курорта Боровое, с. Малотимофеевка Акмолинской области. Получение вытяжки из лекарственных растений: 3,0 г измельченного сырья помещают в колбу на 100 мл со шлифом, заливают 30 мл 95% этиловым спиртом, устанавливают обратный холодильник и кипятят на водяной бане 20 минут. После охлаждения вытяжку фильтруют. Обнаружение кумаринов лактонной пробой: к 5 мл полученного раствора прибавляют 5 капель 10% раствора калия гидроксида и нагревают на водяной бане 5 минут. Обнаружение сапонинов пробой Лафона: к 2 мл водного настоя прибавляют 1 мл концентрата серной кислоты, 1 мл этанола, 1 каплю 10% раствора сульфата железа. При нагревании появляется сине-зеленое окрашивание. Обнаружение флавоноидов цианидиновой проба (проба Шинода): к спиртовому извлечению из сырья добавляют несколько капель концентрированной хлористоводородной кислоты и 20-30 мг порошка магния. Обнаружение дубильных веществ: к 2-3 мл спирто-водного извлечения добавляют 4-5 капель раствора железоаммониевых квасцов, в случае гидролизуемых дубильных веществ наблюдали черно-синее окрашивание или осадок, а в случае конденсированных – черно-зеленое окрашивание или осадок. Результаты исследований. Результаты выявления кумаринов приведены в таблице 1. Таблица 1 – Обнаружение кумаринов Вытяжка из растений Лактонная проба Тысячелистник Желтое окрашивание Облепиха (плоды) Ярко желтое окрашивание Календула Ярко-желтое окрашивание Одуванчик (листья) Цвет не изменился, зеленый Почки березы Светло-желтое окрашивание Чистотел Зеленое окрашивание Шалфей Ярко-зеленое окрашивание Полынь Желтое окрашивание Наличие/отсутствие + + + + + Наблюдение: появлялось желтое окрашивание, что свидетельствует о наличии кумаринов в исследуемом сырье. Результаты выявления сапонинов приведены в таблице 2. Таблица 2 – Обнаружение сапонинов Вытяжка из растений Проба Лафона Тысячелистник Цвет без изменения Облепиха (плоды) Цвет без изменения Календула Светло-зеленое окрашивание Одуванчик (листья) Зеленое окрашивание Почки березы Цвет без изменения Чистотел Цвет без изменения Шалфей Цвет без изменения Полынь Темно-зеленое окрашивание Наличие/отсутствие + + + Наблюдение: появилось зеленое окрашивание, что свидетельствует о наличии сапонинов в исследуемом сырье. Результаты выявления флавоноидов приведены в таблице 3. Таблица 3 – Обнаружение флавоноидов Вытяжка из растений Цианидиновая проба Тысячелистник Оранжевое окрашивание Облепиха (плоды) Цвет без изменения Календула Оранжевое окрашивание Одуванчик (листья) Цвет без изменения Почки березы Оранжевое окрашивание Чистотел Цвет без изменения Шалфей Оранжевое окрашивание Полынь Цвет без изменения Наличие/отсутствие + + + + - Наблюдение: появилось оранжевое окрашивание, что свидетельствует о наличии флавоноидов в исследуемом сырье. Результаты выявления дубильных веществ приведены в таблице 4. Таблица 4 – Обнаружение дубильных веществ Вытяжка из растений Дубильные вещества Наличие/отсутствие Тысячелистник Черно-зеленое окрашивание + Облепиха (плоды) Цвет без изменения Календула Цвет без изменения Одуванчик (листья) Черное окрашивание + Почки березы Черное окрашивание + Чистотел Темно-зеленое окрашивание + Шалфей Черно-зеленое окрашивание + Полынь Зеленое окрашивание + Наблюдение: появилось темно-зеленое окрашивание, что свидетельствует о наличии конденсированных дубильных веществ в исследуемом сырье. Результаты выявления алкалоидов методом тонкослойной хроматографии приведены в таблице 5. Таблица 5 – Обнаружение алкалоидов методом ТСХ Вытяжка из растений Алкалоиды Наличие/отсутствие Тысячелистник Желтое пятна + Облепиха (плоды) Календула Одуванчик (листья) Почки березы Желто-оранжевое пятно + Чистотел Оранжевое пятно + Шалфей Полынь Наблюдение: появление желто-оранжевых пятен свидетельствует о наличии алкалоидов в исследуемом сырье. Обобщенные данные по содержанию биологически активных компонентов в составе лекарственного растительного сырья показаны в таблице 6: Таблица 6 – Результаты качественных химических реакций Вытяжка из растений Флавоноиды Кумарины Сапонины Тысячелистник Облепиха (плоды) Календула Одуванчик (листья) Почки березы Чистотел Шалфей Полынь + + + + - + + + + + + + + Дубильные вещества + + + + + + Алкалоиды + + + - Заключение Таким образом, в результате проведенного анализа в составе исследуемых растений обнаружены следующие виды биологически активных веществ вторичного синтеза: - в траве тысячелистника – алкалоиды, флавоноиды, кумарины, дубильные вещества. - в плодах облепихи – кумарины. - в цветках календулы – флавоноиды, сапонины, кумарины. - в листьях одуванчика – сапонины и дубильные вещества. - в траве чистотела – алкалоиды и дубильные вещества. - в составе травы шалфея – дубильные вещества. - в полыни обыкновенной - сапонины, кумарины и дубильные вещества. - в почках березы обнаружены флавоноиды, кумарины, дубильные вещества и алкалоиды. Полученные данные обосновывают проведение количественного определения вышеназванных биологически активных веществ для определения ценности сырья. С учетом совместимости биологически активных начал, исследованное растительное сырье может быть использовано для получения комплексных лекарственных форм с высокой фармакологической активностью. Список литературы 1. Государственная фармакопея Республики Казахстан. – Т.1. – Алматы, 2008. – С. 567-568. 2. Ветеринарная фармация. Под ред. В. Д. Соколова. – М.: КолосС, 2003. – С. 328. 3. Herbal medicines for treatment of fungal infections: a systematic review of controlled clinical trials. Mycoses.Martin KW1, Ernst E. 2004 Apr;47(3-4):87-92. 4. Карпук В.В. Фармакогнозия: учебное пособие. – Минск, 2011. – С. 57-61. 5. Практикум по фармакогнозии / Под ред. В. Н. Ковалева. – Харьков, 2004. – 510 с. 6. Рабинович М.И. Ветеринарная фитотерапия. – М., 1988. – 325 с. 7. Журба О.В., Дмитриев М.Я. Лекарственные, ядовитые и вредные растения. – М.: КолосС, 2005. – С. 167-168. 8. Введение в фитохимические исследования и выявление биологической активности веществ растений / Под ред. Л.К. Мамонова и Р.А. Музычкиной. – Алматы, 2008. – 216 с. 9. The classical drug discovery approach to defining bioactive constituents of botanicals. Kinghorn AD, Chai HB, Sung CK, Keller WJ. Fitoterapia. 2011 Jan;82(1):71-9. doi: 10.1016/j.fitote.2010.08.015. Epub 2010 Sep 6. 10. Clinical Aspects. 2nd edition. Benzie IFF, Wachtel-Galor S, editors. Boca Raton (FL): CRC Press; 2011.