А.А. Выприцкая, А.С. Выприцкий, А.А. Кузнецов, И.И. Мустафин

МАСЛИЧНЫЕ КУЛЬТУРЫ. Научно-технический бюллетень Всероссийского научно-исследовательского
института масличных культур. Вып. 1 (142-143), 2010
___________________________________________
А.А. Выприцкая,
кандидат биологических наук
А.С. Выприцкий,
младший научный сотрудник*
А.А. Кузнецов,
младший научный сотрудник
Филиал ГНУ Тамбовского НИИСХ Россельхозакадемии
«Среднерусская НИ фитопатологическая станция»
392553, Тамбовская область, Тамбовский район,
п. Новая жизнь, ул. Молодѐжная, 1
тел. (4752) 62-90-60
И.И. Мустафин,
кандидат сельскохозяйственных наук
ГНУ ТНИИСХ Россельхозакадемии
Тамбовская область, Ржаксинский район,
п. Жемчужный, ул. Зелѐная, 10
ВИДОВОЙ СОСТАВ И ВРЕДОНОСНОСТЬ МИКОБИОТЫ
СЕМЯН ПОДСОЛНЕЧНИКА В ТАМБОВСКОЙ ОБЛАСТИ
Ключевые слова: подсолнечник, семена, фитоэкспертиза, возбудитель, вредоносность.
УДК 632.93:631.53.01
Введение. Экономически значимые потери урожая могут вызывать не только возбудители
высоко вредоносных, а при определѐнных условиях и потенциально опасных болезней. но и те, что
ранее не представляли никакой угрозы культуре в конкретном регионе. Один из этапов ранней диагностики болезней – фитоэкспертиза семян, поскольку известно, что источником инфекции многих возбудителей являются заражѐнные семена.
Сведения о микобиоте семян необходимы для предупреждения ввоза заражѐнного посевного материала в регион, составления и эффективного проведения защитных мероприятий, а также при
проведении селекционно-генетических работ, направленных на создание сортов и гибридов с набором
положительных биологических признаков, в том числе с устойчивостью к различным вредоносным болезням.
Материал и методы. Объектами исследований служили семена сортов и гибридов подсолнечника российской и зарубежной селекции, поступившие на экологическое испытание в Тамбовскую областную государственную сортоиспытательную станцию (ТОГСИС) в 1993-1996 гг. –
первый период, а также семена сортообразцов подсолнечника из питомника конкурсного испыта-
ния лаборатории селекции подсолнечника Государственного научного учреждении Тамбовский
научно-исследовательский институт сельского хозяйства (ГНУ ТНИИСХ) (2003-2009 гг.) – второй
период. Работу проводили по методике О.В. Скрипка, М.А. Примаковской и др. [1], дополняя еѐ методами и приемами других исследователей [2, 3]. Перед посевом отбирали по 200 семян каждого образца и в
четырѐхкратной повторности (в каждой по 50 семян) подвергали поверхностной стерилизации 96 %-ным
спиртом в течение 1-2 минут, промывали в стерильной дистиллированной воде и раскладывали на голодный агар со стрептомицином в чашках Петри [2]. Для ограничения роста колоний грибов быстрорастущих видов, прежде всего из рода Alternaria и близких ему родов, в среду добавляли параморфоген
тритон [3]. Для индукции спорогенеза чашки Петри с семенами выдерживали 7-14 дней в боксе при
освещении лампами дневного и ультрафиолетового света [3]. Видовую или родовую принадлежность микроорганизмов устанавливали по определителям [4, 5, 6, 7, 8, 9] и другой справочной литературе [1, 10].
Результаты и обсуждение. В 1993 г. впервые в Тамбовской области нами начата работа по изучению микобиоты семян подсолнечника [11], которая с 2003 г. проводится ежегодно. Результаты исследований представлены в таблице, из которой видно, что видовой состав возбудителей болезней в
оба периода исследований не претерпел существенных изменений; заметно различалась распространѐнность грибов, зависящая от складывающихся климатических условий, в которых возделывался подсолнечник исследуемых периодов. Об этом же свидетельствуют данные литературы
[12]. В исследованных семенах обоих периодов преобладали виды грибов рода Alternaria Nees ex
Fr. Невысокая распространѐнность Alternaria spp. в последние годы (по сравнению с предыдущим периодом) обусловлена, на наш взгляд, тем обстоятельством, что при более тщательном изучении морфологических признаков этих грибов выяснилось, что значительная их часть относится
к близкородственным этому роду видам из родов Stemphyllium Wallroth и Ulocladium Preuss [9]. В
литературе есть сведения о патогенности отдельных видов этих родов в южных странах [13,14].
Грибы этих трѐх родов зарегистрированы нами также на вегетирующих растениях культуры.
Из особо вредоносных грибов высокую распространѐнность на сортах и семенах первого
периода имел Sclerotinia sclerotiorum Lib. de Bary, в то время как в последние годы эти показатели были значительно ниже. Последнее обстоятельство обусловлено, на наш взгляд, тем, что погодные условия предшествующих фитоэкспертизе лет, когда формировались анализируемые
семена, не способствовали развитию белой гнили. Распространѐнность возбудителей других
вредоносных болезней: As. helianthi (аскохитоз), B. cinerea (серая гниль), Fusarium spp. (фузариоз), P. macdonaldii (фомоз), R. nigricans (сухая гниль корзинок), S. bataticola (пепельная гниль
стеблей), S. helianthi (септориоз), V. dahliae (вертициллѐз) – в оба периода была невысокой.
Впервые в Тамбовской области в 1994-1995 гг. из семян сортов Вейделевский, Воронежский
638, Донской 22, Ермак, Казачий, Родник и Фаворит был выделен возбудитель фомопсиса, объект внутреннего карантина – Phomopsis helianthi Munt.-Čvet. [15]. Характерно, что семена этих
сортов поступили в Тамбовскую область из Белгородской и Воронежской областей и регионов
Северного Кавказа, где фомопсис в тот период был уже широко распространен. В Тамбовской
области фомопсис на вегетирующих растениях подсолнечника зарегистрирован в 2000 г. [16], и
распространенность его медленно, но неуклонно растет [17], что отразилось и на количестве
поражѐнных возбудителем семян второго периода (69,2 %). На лузге семян, поражѐнных фомопсисом, оставленных для дальнейших наблюдений, на 29-й день после посева на голодный
агар, сформировалась сумчатая стадия возбудителя Diaphorte helianthi Munt.-Čvet.
Размеры перитециев – 111,4 х 145,7 μ, сумок – 19,5 х 2,5 μ. На рисунке 1 (а, б) представлены
аски с аскоспорами, выходящие из разорвавшегося перитеция (сортообразец ПК-05). Учитывая, что
распространение фомопсиса возможно семенами с поражѐнных растений, на которых сформировалась
половая (инфекционная) стадия патогена [18], можно сделать вывод о том, что первоначально патоген
был ввезѐн в нашу область с семенами из южных регионов страны и, возможно, из за рубежа.
Таблица – Распространённость грибов на семенах сортообразцов, %
100,0
Семена**
36,9
100,0
0,5
Альтернариоз
A. alternata
0,0
0,0
76,9
9,8
-«-
A. cheiranthi
0,0
0,0
46,2
1,8
«-
A. helianthi
0,0
0,0
3,3
2,7
Чѐрно-бурая пятнистость
A. macrospora
0,0
0,0
61,5
2,6
-«-
Ascochyta helianthi
3,6
0,4
23,1
1,4
Чѐрная пятнистость листьев
Aspergillus spp.
82,1
9,5
30,8
0,5
Плесневение семян
A. flavus
0,0
0,0
30,8
0,5
-«-
A. niger
0,0
0,0
33,3
2,3
-«-
Bipolaris sorokiniana
Botrytis cinerea
3,6
10,7
0,3
1,0
2,4
0,5
Пятнистость листьев
66,7
0,3
Серая гниль
Chaetomium chartorum
7,2
7,5
0,0
0,0
Сaпротроф семян
Cladosporium sp.
71,4
4,6
61,5
2,2
Оливковая плесень
Drechslera spp.
3,6
0,3
2,4
0,5
Пятнистость листьев
Epicoccum spp.
0,0
0,0
Exserohilum rostratum
3,6
3,6
15,4
2,4
0,1
0,5
Точечная пятнистость
Пятнистость листьев
Fusarium spp.
17,8
1,6
76,9
2,8
Фузариоз
F. avenaceum
3,6
2,4
0.,0
0,0
-«-
F. javanicum
0,0
0,0
16,7
0,3
-«-
F. oxysporum
7,2
1,7
50,0
1,5
-«-
0,0
0,0
7,7
19
-«-
3,6
0,3
0,0
0,0
пятнистость листьев
Возбудитель
Alternaria spp.
F. oxysporum var. orthoceras
Macrosporium sp.
Сортообразец*
Сортообразец* Семена**
Вызываемая болезнь
Monillia sitophila
3,6
0,7
2,4
0,5
плесневение семян
Mucor spp.
60,7
26,3
83,3
3,9
-«-
Penicillium glaucum
64,3
12,7
38,5
1,2
-«-
Phomopsis helianthi
25,0
1,1
69,2
6,5
Фомопсис
Phoma macdonaldii
3,6
0,5
30,8
1,0
Фомоз
Pyrenochaeta sp.
53,6
28,6
9,9
2,8
7,7
0,2
Болезни других культур
Rhizopus nigricans
53,8
6,3
Сухая гниль корзинок
Sclerotinia sclerotiorum
7,0
12,4
38,5
2,1
Белая гниль
Sclerotium bataticola
07
2,0
23,1
0,5
Пепельная гниль стеблей
Septoria helianthi
0,0
3,6
30,8
0,5
Септориоз
Stachybotris spp.
3,6
4,5
7,7
1,2
Пятнистость листьев
Stemphyllium spp.
25,0
11,0
4,5
Коричнево-розоватая гниль
стеблей
S. solani
0,0
0.,0
4,2
-«-
Trichothecium roseum
14,3
0,0
3,5
0,0
46,2
3,7
Розовая плесень семян
84,6
4,8
Пятнистость листьев
14,3
21,4
1,1
4,4
15,4
0,3
Вертициллѐз
Actynomyces spp.
15,4
1,9
Bacillus spp.
67,9
5,8
61,5
7,0
Ulocladium spp.
Verticillium dahlia
53,8
61,5
Бактериозы
Примечание: * – количество (%) сортообразцов, на которых зарегистрированы возбудители;
** – количество (%) семян, заселѐнных данным возбудителем
а
б
Рисунок 1 – а) выход сумок; б) сумки с сумкоспорами
В наших исследованиях выделенные возбудители – S. sclerotiorum, Ph. helianthi, Fusarium
spp. и др. – снижали всхожесть семян более чем на 50 %, или даже полностью (рис. 2).
Среди микобиоты семян отметим три микомицета. Сумчатый гриб Chaetomium chartorum, выделенный нами с французских сортов Angella и Mastin,
описан в литературе как сапротроф [10]. В тоже время
в Индии один из видов рода Chaetomium является патогеном семян подсолнечника [13]. Второй несовершенный гриб – Trichothecium roseum – также
сапротроф семян подсолнечника [10], достаточно часто встречавшийся на семенах многих сортообразцов в
оба периода наблюдений. Кроме того, этот гриб регистрировали на стеблях и корзинках вегетирующих
растений в виде достаточно крупных (от 2 х 1 см) пятен светло-розового цвета, на которых хорошо видно
спороношение гриба [19]. В то же время в 2008 г. у
57,3 % семян образца ПК-05, пораженных этим возбудителем, была подавлена всхожесть, однако на вегетиРисунок 2 – Пикниды Ph. helianthi
рующих растениях этого образца гриб не проявился.
на семенах сорта Спартак
Третий микроорганизм, привлекший наше внимание, –
пикнидиальный гриб, который по морфологическим признакам не соответствовал ни одному из
приведенных в изученной нами литературе патогенов или сапротрофов подсолнечника. Колония
этого возбудителя на голодном агаре тѐмного, почти чѐрного цвета, мицелий скудный, почти полностью субстратный. Пикниды округлые, чуть овальные или несколько грушевидные, размером 154,418,5 х 107,3-124,4µ. В области устьиц пикнид имеются длинные и толстые (175,9-227,4 ×12,9-15,0µ) щетинки
тѐмно-оливкового или коричневатого цвета. Пикноспоры бесцветные, светло-желтые или светло-желтоватозеленоватые, одноклеточные, мелкие, диаметром в пределах 4,5µ, с довольно толстой оболочкой. По приведенным признакам мы посчитали возможным отнести этот гриб к роду Pyrenochaeta de Not., представители
которого являются патогенами ряда сельскохозяйственных культур – злаков, картофеля, лука, винограда и др.
[6]. Патогенность этого возбудителя к проросткам подсолнечника подтверждена нами экспериментально:
при искусственной инокуляции получено заражение 28,6 % главных корней и 71,4 % боковых корешков.
В наших исследованиях эти виды проявили высокую вредоносность: 100 % семян теряли
всхожесть. На рисунке 3 показано семя, поражѐнное T. roseum.
По нашим наблюдениям, грибы из родов Aspergillus, Cladosporium, Epicoccum, Monillia sp.,
Mucor, Penicillium, Stachybotrys sp. не вызывают сильного поражения семян. Очевидно, вредонос-
ность их определяется вырабатываемыми ими токсинами, являющимися органическими загрязнителями урожая, снижающими посевные, технологические и пищевые качества семян.
В последние годы в незначительном количестве, но постоянно присутствуют на семенах
и вегетирующих растениях подсолнечника Bipolaris sorokiniana, Exserohilum rostratum и Drechslera sp. В проанализированной нами отечественной литературе нам не встретились данные
об обнаружении на подсолнечнике в нашей
стране этих грибов. В то же время известно, что
B. sorоkiniana – космополит, поражающий растения из многих родов, в том числе и Helianthus
[7]. E. rostratum является достаточно серьѐзным
патогеном подсолнечника в Индии и Египте [13,
14]. В работах В.П. Шинкарѐва, А.А. Выприцкой данный гриб представлен как Drechslera
Рисунок 3 – T. roseum на семенах
rostrata, однако исследованиями Б.А. Хасанова
сортообразца ПК-05
[7] установлено иное таксономическое положение этого вида – Exserohilum rostratum. Сведений о причастности не установленных нами Drechslera spp. к подсолнечнику нам не встретилось. На данном этапе B. sorokiniana, Drechslera spp. и E. rostratum можно считать сопутствующими или даже случайными. Однако нельзя исключать, что приведѐнные возбудители, обычные для
южных стран, при благоприятных для них условиях могут широко распространиться и в наших широтах.
Достаточно часто из поражѐнных семян и растений выделялись лучистые грибки из класса Actinomycetes, также снижающие всхожесть семян подсолнечника. Их роль в жизни сельскохозяйственных культур неоднозначна. Представители одних семейств вызывают болезни сахарной свѐклы, картофеля,
крестоцветных [4, 20], у других установлены антагонистические свойства по отношению к патогенам, в
частности к S. sclerotiorum [5]. На основе некоторых актиномицетов в нашей стране и за рубежом созданы
биопрепараты для обеззараживания почвы, подавления грибных и бактериальных болезней многих культур.
В оба периода исследования семена более 60 % сортов были поражены Bacillus spp. (5,8 и
7,0 % соответственно). Поражѐнные бактериями семена теряли всхожесть и погибали. Видовую
принадлежность бактерий не устанавливали.
Практически все выявленные при экспертизе семян возбудители были выделены нами и с
поражѐнных вегетирующих растений.
Заключение. Впервые в Тамбовской области определены видовой состав, распространѐнность и вредоносность микобиоты семян подсолнечника. Впервые в области на посевном материале и вегетирующих растениях зарегистрирован возбудитель фомопсиса – Phomopsis helianthi, получена сумчатая стадия патогена,
свидетельствующая о способности семян быть источниками инфекции данного патогена. Показана высокая
вредоносность для семян Trichothecium roseum. Установлено, что на семенах подсолнечника паразитирует
пикнидиальный гриб Pyrenochaeta sp., известный в литературе как патоген злаков, лука и других культур.
Список литературы
1. Скрипка, О.В. Методические указания по выявлению фомопсиса (серой пятнистости) подсолнечника / О.В. Скрипка, М.А. Примаковская, В.П. Шинкарѐв, А.Н. Матвеенко. – М., 1988. – 20 с.
2. Афанасенко, О.С. Лабораторный метод оценки устойчивости сортообразцов ячменя к
возбудителю сетчатого гельминтоспориоза / О.С. Афанасенко // Сельскохозяйственная биология. –
1977. – Т. 12. – № 2. – С. 297-299.
3. Выприцкая, А.А. Фитопатогенные грибы из родов Bipolaris, Curvularia, Drechslera и Exserohilum в
Средней Азии и Казахстане / А.А. Выприцкая // Дис. на соиск. уч. степ. канд. биол. наук. – М., 1993. – 195 с.
4. Хохряков, М.К. Определитель болезней растений / М.К. Хохряков, Т.Л. Доброзракова,
К.М. Степанов, М.Ф. Летова. – Ленинград: Колос, 1966. – 591 с.
5. Красильников, Н.А. Лучистые грибки / Н.А. Красильников. – М.: Наука, 1970. – 535 с.
6. Пидопличко, Н.М. Грибы – паразиты культурных растений /Н.М. Пидопличко // Определитель. – Киев: Наукова думка, 1977-1978. – Т. 1-3.
7. Хасанов, Б.А. Определитель грибов – возбудителей «гельминтоспориозов» растений из
родов Bipolaris, Drechslera и Exserohilum / Б.А. Хасанов. – Ташкент: Фан, 1992. – 244 с.
МАСЛИЧНЫЕ КУЛЬТУРЫ. Научно-технический бюллетень Всероссийского научно-исследовательского
института масличных культур. Вып. 1 (142-143), 2010
___________________________________________
8. Sprague, R. Diseases of cereals and grasses in North America (Fungi, except smuts and rusts) /
R. Sprague // Ronald Press Co. – 1950. – № 1. – 638 p.
9. Ellis, M.B. Dematiaceous Hyphomycetes / M.B. Ellis // CMI, Kew, Surrey, England. – 1971. – 608 p.
10. Наумова, Н.А. Анализ семян на грибную и бактериальную инфекцию / Н.А. Наумова. –
М.-Л.: Сельхозгиз, 1957. – 140 с.
11. Выприцкая, А.А. Микобиота семян подсолнечника / А.А. Выприцкая, В.В. Плахотник //
Проблемы воспроизводства плодородия почв и повышение продуктивности агроэкосистем: Материалы научно-практической конференции. – Мичуринск-Наукоград, 2004. – С. 265-266.
12. Шуляк, И.И. Патогенная микофлора семян подсолнечника в условиях Краснодарского
края / И.И. Шуляк // Защита и карантин растений. – 2009. – № 2. – С. 23-25.
13. Анащенко, А.В. Болезни подсолнечника и современные способы борьбы с ними / А.В.
Анащенко. – М., 1982. – 59 с.
14. Шинкарѐв, В.П. Распространение болезней подсолнечника и борьба с ними за рубежом /
В.П. Шинкарѐв, Т.И. Масленникова, Т.С. Дайнеко, Э.А. Кобилева. – М., 1990. – 72 с.
15. Выприцкая, А.А. Патогенный комплекс возбудителей болезней подсолнечника в ЦЧЗ / А.А. Выприцкая, В.В.
Плахотник // Современная микология в России: Тезисы докладов Первого съезда микологов. – М., 2002. – С. 216-217.
16. Якуткин, В.И. Болезни подсолнечника в России и борьба с ними /В.И. Якуткин // Защита
и карантин растений. – 2001. – № 10. – С. 26-29.
17. Плахотник, В.В. Фомопсис подсолнечника в Тамбовской области / В.В. Плахотник, А.С. Выприцкий, А.А. Выприцкая, О.В. Скрипка // Современные проблемы отрасли растениеводства и их практические решения: Материалы научно-практической конференции. – Мичуринск-Наукоград, 2007. – С. 277-282.
18. Пивень, В.Т. Семена подсолнечника – реальный источник распространения фомопсиса / В.Т. Пивень, Т.П.
Алифирова, И.И. Шуляк, Н.В. Мурадасилова, Г.М. Саенко // Защита и карантин растений. – 2010. – № 1. – С. 36-40.
19. Выприцкий, А.С. Возбудители пятнистостей подсолнечника / А.С. Выприцкий, В.В. Плахотник, А.А. Выприцкая // Биологическая защита растений – основа стабилизации агроэкосистем: Материалы международной научно-практической конференции.– Краснодар, 2006. – Вып. 4. – С. 136-138.
20. Пересыпкин, В.Ф. Болезни технических культур и картофеля / В.Ф. Пересыпкин. – Киев:
Урожай, 1990. – 246 с.