Практикум по молекулярной биологии

Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Перейти на страницу с полной версией»
ÄËß ÏÅÄÀÃÎÃÈ×ÅÑÊÈÕ ÂÓÇÎÂ
ÏÐÀÊÒÈÊÓÌ
ÏÎ ÌÎËÅÊÓËßÐÍÎÉ
ÁÈÎËÎÃÈÈ
Ðåêîìåíäîâàíî ÓÌÎ ïî ñïåöèàëüíîñòÿì ïåäàãîãè÷åñêîãî îáðàçîâàíèÿ â êà÷åñòâå ó÷åáíîãî ïîñîáèÿ äëÿ ñòóäåíòîâ
âûñøèõ ó÷åáíûõ çàâåäåíèé, îáó÷àþùèõñÿ ïî ñïåöèàëüíîñòè «Áèîëîãèÿ»
ÌÎÑÊÂÀ «ÊîëîñÑ» 2012
1
Перейти на страницу с полной версией»
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Перейти на страницу с полной версией»
ÓÄÊ 577(075.8)
ÁÁÊ 28.070ÿ73
Ï69
À â ò î ð û: äîêòîð áèîëîãè÷åñêèõ íàóê À. Ñ. Êîíè÷åâ, äîêòîð áèîëîãè÷åñêèõ íàóê
È. Ë. Öâåòêîâ, êàíäèäàò áèîëîãè÷åñêèõ íàóê À. Ï. Ïîïîâ, êàíäèäàò áèîëîãè÷åñêèõ íàóê Ò. Í. Øàìøèíà, äèðåêòîð ÎÎÎ «ÊÎÌÏÀÍÈß «ÁÈÎÊÎÌ»
À. Á. Êîìàðîâ
Ð å ä à ê ò î ð À. Ñ. Ìàêñèìîâà
Ð å ö å í ç å í ò û: äîêòîð ïåäàãîãè÷åñêèõ íàóê Ñ. Â. Ñóìàòîõèí (ÌÃÏÈ), äîêòîð
áèîëîãè÷åñêèõ íàóê À. Í. Èãíàòîâ (Öåíòð «Áèîèíæåíåðèÿ» ÐÀÍ)
Èçäàíèå îñóùåñòâëåíî ïðè ôèíàíñîâîé ïîääåðæêå
ÎÎÎ «ÊÎÌÏÀÍÈß «ÁÈÎÊÎÌ»
Ïðàêòèêóì ïî ìîëåêóëÿðíîé áèîëîãèè / À. Ñ. Êîíè÷åâ,
Ï69 È. Ë. Öâåòêîâ, À. Ï. Ïîïîâ è äð. — Ì.: ÊîëîñÑ, 2012. —
151 ñ.: èë. — (Ó÷åáíèêè è ó÷åá. ïîñîáèÿ äëÿ ñòóäåíòîâ âûñø.
ó÷åá. çàâåäåíèé).
ISBN 978—5—9532—0815—4
Ïðèâåäåíû ïðîïèñè äëÿ ïðîâåäåíèÿ öèêëà ïðàêòè÷åñêèõ ðàáîò, ñâÿçàííûõ ñ èçó÷åíèåì ñòðîåíèÿ è ôóíêöèé íóêëåèíîâûõ êèñëîò è áåëêîâ, ñ èñïîëüçîâàíèåì íàèáîëåå øèðîêî ðàñïðîñòðàíåííûõ ìåòîäîâ ñîâðåìåííîé
ìîëåêóëÿðíîé áèîëîãèè. Íàðÿäó ñ ðàáîòàìè, òðåáóþùèìè ñîâðåìåííîãî è
â ðÿäå ñëó÷àåâ äîñòàòî÷íî äîðîãîñòîÿùåãî îáîðóäîâàíèÿ è ðåàêòèâîâ, ïðèâåäåíû ïðîïèñè âûïîëíåíèÿ ýëåìåíòàðíûõ ðàáîò, ïîçâîëÿþùèõ òåì íå ìåíåå ïîëó÷èòü îïðåäåëåííûå êà÷åñòâåííûå è êîëè÷åñòâåííûå ðåçóëüòàòû,
õàðàêòåðèçóþùèå ñâîéñòâà áåëêîâ è íóêëåèíîâûõ êèñëîò.
Êàæäàÿ ðàáîòà ñîäåðæèò òåîðåòè÷åñêîå îïèñàíèå òîãî èëè èíîãî ìåòîäà
è íàèáîëåå âàæíûå àñïåêòû åãî ïðàêòè÷åñêîãî èñïîëüçîâàíèÿ, öåëåâîå íàçíà÷åíèå âñåõ íåîáõîäèìûõ ðåàêòèâîâ è îáîðóäîâàíèÿ, ïîäðîáíîå ïîñòàäèéíîå îïèñàíèå ëàáîðàòîðíûõ îïåðàöèé.
Âñå ïðåäñòàâëåííûå â ïðàêòèêóìå ðàáîòû ïðîøëè àïðîáàöèþ â ó÷åáíûõ
è íàó÷íûõ ëàáîðàòîðèÿõ ÌÃÎÓ è ÎÎÎ «ÊÎÌÏÀÍÈß «ÁÈÎÊÎÌ» è ñíàáæåíû èëëþñòðàöèÿìè.
Äëÿ ñòóäåíòîâ ïåäàãîãè÷åñêèõ âóçîâ, îáóùàþùèõñÿ ïî ñïåöèàëüíîñòè
«Áèîëîãèÿ».
ÓÄÊ 577(075.8)
ÁÁÊ 28.070ÿ73
Îðèãèíàë-ìàêåò êíèãè ÿâëÿåòñÿ ñîáñòâåííîñòüþ èçäàòåëüñòâà «ÊîëîñÑ»,
è åãî âîñïðîèçâåäåíèå â ëþáîì âèäå, âêëþ÷àÿ ýëåêòðîííûé,
áåç ñîãëàñèÿ èçäàòåëÿ çàïðåùåíî.
ISBN 978—5—9532—0815—4
 Èçäàòåëüñòâî «ÊîëîñÑ», 2012
2
Перейти на страницу с полной версией»
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Перейти на страницу с полной версией»
ÎÃËÀÂËÅÍÈÅ
•
Ïðåäèñëîâèå .................................................................................................................. 5
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 1. ÎÇÍÀÊÎÌËÅÍÈÅ Ñ ÎÑÍÎÂÍÛÌÈ ÏÐÈÁÎÐÀÌÈ È ÎÁÎÐÓÄÎÂÀÍÈÅÌ ÄËß ÏÐÀÊÒÈÊÓÌÀ ÏÎ ÌÎËÅÊÓËßÐÍÎÉ ÁÈÎËÎÃÈÈ .............................................................................................. 7
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 2. ÀÍÀËÈÇ ÄÍÊ ÌÅÒÎÄÎÌ ÝËÅÊÒÐÎÔÎÐÅÇÀ
 ÀÃÀÐÎÇÍÎÌ ÃÅËÅ ................................................................................................ 10
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 3. ÂÛÄÅËÅÍÈÅ È ÔÐÀÊÖÈÎÍÈÐÎÂÀÍÈÅ ÍÓÊËÅÈÍÎÂÛÕ ÊÈÑËÎÒ ÝÓÊÀÐÈÎÒ ÊËÀÑÑÈ×ÅÑÊÈÌÈ ÌÅÒÎÄÀÌÈ ........ 15
Ç à í ÿ ò è å ¹ 1. Ýêñòðàêöèÿ ÄÍÊ èç æèâîòíûõ îðãàíèçìîâ ñ ÄÄÑ-Na .............. 18
Ç à í ÿ ò è å ¹ 2. ÑÒÀÂ-ýêñòðàêöèÿ ÄÍÊ èç ðàñòåíèé ........................................... 20
Ç à í ÿ ò è å ¹ 3. Âûäåëåíèå òîòàëüíîé ÐÍÊ ïî Øåððåðó ..................................... 23
Ç à í ÿ ò è å ¹ 4. Ôðàêöèîíèðîâàíèå è îïðåäåëåíèå ñîîòíîøåíèé ðèáîñîìàëüíûõ è òðàíñïîðòíûõ ÐÍÊ ìåòîäîì ýëåêòðîôîðåçà â ïîëèàêðèëàìèäíîì ãåëå .... 25
Ç à í ÿ ò è å ¹ 5. Îïðåäåëåíèå êîíñòàíòû ñåäèìåíòàöèè ÐÍÊ ìåòîäîì
ýëåêòðîôîðåçà â ïîëèàêðèëàìèäíîì ãåëå ................................................................. 28
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 4. ÂÛÄÅËÅÍÈÅ ÍÓÊËÅÈÍÎÂÛÕ ÊÈÑËÎÒ
Ñ ÈÑÏÎËÜÇÎÂÀÍÈÅÌ ÑÎÐÁÅÍÒÎÂ ................................................................... 29
Ç à í ÿ ò è å ¹ 1. Âûäåëåíèå ÄÍÊ ñ èñïîëüçîâàíèåì íàáîðà DiatomTM DNA
Prep 100 ........................................................................................................................ 30
Ç à í ÿ ò è å ¹ 2. Âûäåëåíèå ÐÍÊ ñ èñïîëüçîâàíèåì íàáîðà DiatomTM RNA
Prep 100 ........................................................................................................................ 32
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 5. ÂÛÄÅËÅÍÈÅ ÏËÀÇÌÈÄÍÎÉ ÄÍÊ ÈÇ ÐÅÊÎÌÁÈÍÀÍÒÍÛÕ ÁÀÊÒÅÐÈÀËÜÍÛÕ ÊËÅÒÎÊ ................................................ 33
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 6. ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈÅ ÊÎÍÖÅÍÒÐÀÖÈÈ
È ÊÀ×ÅÑÒÂÀ ÏÐÅÏÀÐÀÒΠÍÓÊËÅÈÍÎÂÛÕ ÊÈÑËÎÒ ÌÅÒÎÄÎÌ
ÑÏÅÊÒÐÎÔÎÒÎÌÅÒÐÈÈ ........................................................................................ 37
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 7. ÏÎÑÒÀÍÎÂÊÀ ÏÎËÈÌÅÐÀÇÍÎÉ ÖÅÏÍÎÉ
ÐÅÀÊÖÈÈ ................................................................................................................... 41
149
Перейти на страницу с полной версией»
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Перейти на страницу с полной версией»
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 8. Î×ÈÑÒÊÀ ÄÍÊ-ÔÐÀÃÌÅÍÒΠÏÎÑËÅ ÈÕ
ÐÀÇÄÅËÅÍÈß ÌÅÒÎÄÎÌ ÏÐÅÏÀÐÀÒÈÂÍÎÃÎ ÝËÅÊÒÐÎÔÎÐÅÇÀ
 ÀÃÀÐÎÇÍÎÌ ÃÅËÅ .............................................................................................. 50
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 9. ÐÅÀÊÖÈß ÎÁÐÀÒÍÎÉ ÒÐÀÍÑÊÐÈÏÖÈÈ ........... 56
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 10. ÐÅÑÒÐÈÊÖÈÎÍÍÛÉ ÀÍÀËÈÇ ÄÍÊ ................... 61
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 11. ÄÍÊ—ÄÍÊ-ÃÈÁÐÈÄÈÇÀÖÈß ............................... 65
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 12. ÊËÎÍÈÐÎÂÀÍÈÅ ÔÐÀÃÌÅÍÒΠÄÍÊ
 ÊËÅÒÊÀÕ E. ñoli .................................................................................................. 73
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 13. ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈÅ ÏÅÐÂÈ×ÍÎÉ ÑÒÐÓÊÒÓÐÛ
ÄÍÊ ............................................................................................................................ 80
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 14. ÈÍÔÎÐÌÀÖÈÎÍÍÛÉ ÏÎÈÑÊ Ñ ÈÑÏÎËÜÇÎÂÀÍÈÅÌ ÁÀÇ ÄÀÍÍÛÕ ÈÍÒÅÐÍÅÒÀ ............................................................ 87
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 15. ÝÊÑÒÐÀÊÖÈß ÁÅËÊΠÈÇ ÆÈÂÎÒÍÛÕ
È ÐÀÑÒÈÒÅËÜÍÛÕ ÒÊÀÍÅÉ ................................................................................ 90
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 16. ÎÑÀÆÄÅÍÈÅ ÁÅËÊΠÑÓËÜÔÀÒÎÌ
ÀÌÌÎÍÈß ............................................................................................................... 93
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 17. ÄÈÀËÈÇ ÁÅËÊΠ.................................................... 98
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 18. ÊÎËÈ×ÅÑÒÂÅÍÍÎÅ ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈÅ ÁÅËÊÀ
ÏÎ ÌÅÒÎÄÓ ËÎÓÐÈ .............................................................................................. 103
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 19. ÊÎËÈ×ÅÑÒÂÅÍÍÎÅ ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈÅ ÁÅËÊÀ
ÏÎ ÌÅÒÎÄÓ ÁÐÝÄÔÎÐÄ ...................................................................................... 106
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 20. ÏÎËÓ×ÅÍÈÅ ÑÓÁÊËÅÒÎ×ÍÛÕ ÔÐÀÊÖÈÉ
ÌÅÒÎÄÎÌ ÄÈÔÔÅÐÅÍÖÈÀËÜÍÎÃÎ ÖÅÍÒÐÈÔÓÃÈÐÎÂÀÍÈß ................ 108
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 21. ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈÅ ÑÓÁÚÅÄÈÍÈ×ÍÎÉ ÑÒÐÓÊÒÓÐÛ È ÌÎËÅÊÓËßÐÍÛÕ ÌÀÑÑ ÑÓÁÚÅÄÈÍÈÖ ÁÅËÊΠÌÅÒÎÄÎÌ ÝËÅÊÒÐÎÔÎÐÅÇÀ  ÏÎËÈÀÊÐÈËÀÌÈÄÍÎÌ ÃÅËÅ
Ñ ÄÎÄÅÖÈËÑÓËÜÔÀÒÎÌ ÍÀÒÐÈß ................................................................... 114
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 22. ÔÐÀÊÖÈÎÍÈÐÎÂÀÍÈÅ ÍÀÒÈÂÍÛÕ ÁÅËÊÎÂ
ÐÀÑÒÅÍÈÉ ÌÅÒÎÄÎÌ ÝËÅÊÒÐÎÔÎÐÅÇÀ Â ÏÎËÈÀÊÐÈËÀÌÈÄÍÎÌ
ÃÅËÅ .......................................................................................................................... 121
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 23. ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈÅ ÈÇÎÝËÅÊÒÐÈ×ÅÑÊÈÕ
ÒÎ×ÅÊ ÁÅËÊΠÌÅÒÎÄÎÌ ÈÇÎÝËÅÊÒÐÎÔÎÊÓÑÈÐÎÂÀÍÈß
 ÒÎÍÊÎÌ ÑËÎÅ ÏÎËÈÀÊÐÈËÀÌÈÄÍÎÃÎ ÃÅËß ........................................ 126
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 24. ÂÅÑÒÅÐÍ-ÁËÎÒÒÈÍà ............................................ 132
Ïðèëîæåíèÿ ................................................................................................................ 138
Ïðèëîæåíèå 1. Ïðèãîòîâëåíèå áóôåðíûõ ðàñòâîðîâ ............................................. 138
150
Перейти на страницу с полной версией»
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Перейти на страницу с полной версией»
Ïðèëîæåíèå 2. Ïðèíÿòûå ñîêðàùåíèÿ â áèáëèîãðàôè÷åñêèõ ññûëêàõ
íà ðàçíûõ ÿçûêàõ ...................................................................................................... 140
Ïðèëîæåíèå 3. Ïðàâèëà òåõíèêè áåçîïàñíîñòè ïðè ðàáîòå â ëàáîðàòîðèè ........ 141
Ïðèëîæåíèå 4. Îêàçàíèå ïåðâîé ìåäèöèíñêîé ïîìîùè ...................................... 144
Ïðèëîæåíèå 5. Ïåðå÷åíü ïðåïàðàòîâ è ñðåäñòâ ïåðâîé ïîìîùè â àïòå÷êå ........ 145
Ëèòåðàòóðà ............................................................................................................... 147
151
Перейти на страницу с полной версией»