Вестник Челябинского государственного университета. 2013. № 7 (298). Биология. Вып. 2. С. 64–65. С. В. Андреева, Э. А. Айбулатова, Н. В. Ярославцева, А. К. Малышева ВЫЖИВАЕМОСТЬ ПРОБИОТИКОВ ИЗ КИСЛОМОЛОЧНЫХ ПРОДУКТОВ РАЗНЫХ МАРОК В УСЛОВИЯХ, ИМИТИРУЮЩИХ ПИЩЕВАРЕНИЕ Приводятся результаты выживаемости пробиотиков, полученных из кисломолочных продуктов различных марок, в условиях, имитирующих процесс пищеварения у человека. Установлено, что выживаемость пробиотиков не зависела от марки кисломолочного продукта. Наблюдалось значительное снижение числа жизнеспособных пробиотических микроорганизмов, выделенных из кисломолочных продуктов всех исследованных марок. Ключевые слова: пробиотики, лактобактерии, бифидобактерии, выживаемость, кисломолочные продукты. Введение. В современном мире люди всё чаще сталкиваются с нарушениями состава нормальной микрофлоры [1; 6]. Пробиотики — живые микроорганизмы, чаще бифидо- или лактобактерии, являющиеся нормальными обитателям кишечника здорового человека, не патогенны, не токсичны, сохраняют жизнеспособность при прохождении через желудочно-кишечный тракт и при хранении [1; 5–7]. Использование в питании пробиотических кисломолочных продуктов вызывает существенное улучшение деятельности организма [4; 5; 7]. В настоящее время потребителям предлагается огромный выбор кисломолочных продуктов с пробиотиками. Вместе с тем не решён вопрос о выживаемости пробиотических микроорганизмов, входящих в состав кисломолочных продуктов разных торговых марок, в ходе их продвижения по пищеварительному тракту, что предопределяет необходимость проведения микробиологических исследований в данном направлении. Цель. Оценка выживаемости бифидобактерий и лактобактерий из кисломолочных продуктов различных марок в условиях in vitro, имитирующих пищеварение в желудке и кишечнике у человека. Материалы и методы. Исследование проводилось на базе бактериологической лаборатории Городской клинической больницы № 6 г. Челя­ бинска. В экспериментах использовали лакто- и бифидобактерии из молочных продуктов следующих марок: «Иммунеле» (ОАО «Вимм-БилльДанн»), «Активиа» (ООО «Данон Индустрим»), «Биобаланс» (ОАО «Компания ЮНИМИЛК»), «Биоряженка Первый вкус» (ОАО «Челябинский городской молочный комбинат»), «Бифилайф» (ОАО «Чебаркульский молочный завод»). Общее количество бактерий (ОКБ) пробиотиков в одном грамме продукта определяли подсчётом по методу Брида [3]. Изучение выживаемости пробиотиков проводили на модели in vitro, описанной в методических рекомендациях [2]. Модельные среды готовили на основе цитратнофосфатного буферного раствора и ферментных препаратов ацидин-пепсина (регистрационный номер ЛС001355; производство РУП «Белмедпрепараты», Беларусь) и панзинорм форте 20000 (регистрационный номер П № 014602 / 01; производство ООО «КRКА», Словения). Количество живых бифидобактерий в суспензиях из молочнокислых продуктов после взаимодействия с ферментными препаратами определяли методом серийных разведений исследуемых суспензий в жидкой питательной среде Блаурокка и определяли количество колониеобразующих единиц в миллилитре продукта (КОЕ/мл). Количество живых лактобактерий в суспензиях продуктов после взаимодействия с ферментными препаратами определяли высевом соответствующих десятикратных серийных разведений исследуемых суспензий на плотную среду Рогоза и подсчётом выросших колоний (КОЕ/мл). Результаты и обсуждение. Результаты определения выживаемости пробиотиков из кисломолочных продуктов различных марок в начале эксперимента (0 ч), через 4 ч инкубации в кислой среде (рН = 2,0) в присутствии ацидин-пепсина и через 12 ч инкубации в щелочной среде (рН = 7,2) в присутствии панзинорм форте 20000 представлены в таблице. Из представленных данных следует, что выживаемость пробиотиков после инкубации мик­ роорганизмов последовательно в кислой и щелочной модельных средах при температуре 37 °С в течение среднего времени пребывания смешанной пищи соответственно в желудке и кишечни- 65 Выживаемость пробиотиков из кисломолочных продуктов разных марок в условиях, имитирующих пищеварение Выживаемость пробиотиков, выделенных из кисломолочных продуктов различных марок, в условиях in vitro, имитирующих пищеварение у человека Кисломолочный продукт Вид пробиотиков ОКБ в 1 мл продукта, по Бриду Содержание живых бактерий в пробе, КОЕ/мл 0ч 4ч 12 ч Иммунеле Lactobacillus spp. 1,7 ∙ 107 1,5 ∙ 107 1 ∙ 105 1 ∙ 103 Биобаланс Lactobacillus spp. 1,9 ∙ 107 1,8 ∙ 107 1 ∙ 104 1 ∙ 102 Bifidobacterium spp. 1,5 ∙ 107 1 ∙ 107 1 ∙ 104 1 ∙ 102 Биоряженка Bifidobacterium spp. 1,9 ∙ 107 1 ∙ 107 1 ∙ 105 1 ∙ 103 Активиа Bifidobacterium spp. 1,8 ∙ 107 1 ∙ 107 1 ∙ 105 1 ∙ 102 Бифилайф Bifidobacterium spp. 1,7 ∙ 107 1 ∙ 107 1 ∙ 105 1 ∙ 103 ке человека не зависела от марки кисломолочного продукта. В результате воздействия на пробиотические микроорганизмы факторов, имитирующих таковые в желудочно-кишечном тракте человека, происходило заметное снижение числа жизнеспособных микробных клеток. В кислой среде число жизнеспособных микроорганизмов снижалось на два-три порядка по сравнению с исходным количеством, и в щелочной среде — ещё на один-два порядка. Выводы и заключение. Выживаемость пробио­ тиков в условиях, имитирующих пищеварение, не зависела от марки кисломолочного продукта. Наблюдалось значительное снижение числа жизнеспособных лакто- и бифидобактерий из кисломолочных продуктов всех исследованных марок. Таким образом, на основании полученных экспериментальных данных можно предположить, что и в реальных условиях при употреблении кисломолочных продуктов исследованных марок в результате пассажа через желудочно-кишечный тракт в толстую кишку человека поступает сниженное количество пробиотических микроорганизмов. Список литературы 1. Дармов, И. В. Выживаемость микроорганизмов пробиотиков в условиях in vitro, ими- тирующих процесс пищеварения у человека / И. В. Дармов, И. Ю. Чичерин, И. П. Погорельский, И. А. Лундовских // Эксперимент. и клинич. гастроэнтерология. 2011. № 3. С. 6–11. 2. Оценка безопасности наноматериалов : метод. рекомендации : утв. приказом Роспотребнадзора 12.10.2007 № 280. М. : Роспотребнадзор, 2007. 3. Каменская, Е. П. Количественный учёт мик­ роорганизмов : метод. рекомендации к лаборатор. работам / Е. П. Каменская, Е. В. Аверьянова. Барнаул : Изд-во Алтайс. гос. тех. ун-та, 2007. 35 с. 4. Каширская, Н. Ю. Значение пробиотиков и пребиотиков в регуляции кишечной микрофлоры // Рус. мед. журн. 2000. № 13. С. 14. 5. Fuller, R. Probiotics and prebiotics: microphlora management for improved gut health / R. Fuller, G. R. Gibson // Clin. Microbiol. Infect. 1998. № 4. P. 477–480. 6. Gibson, G. R. Aspects of in vitro and In vivo research approaches directed toward identifying probiotics and prebiotics for human use / G. R. Gibson, R. Fuller // J. Nutr. 2000. Vol. 130, № 2. P. 391–395. 7. Шаковец, Н. В. Значение пробиотиков для здоровья организма и микробиоценоза полости рта / Н. В. Шаковец, Т. Н. Терехова // Воен. медицина. 2011. № 2. С. 134–139.