Мутации KRAS и BRAF как биологические маркеры

Мутации KRAS и BRAF как биологические маркеры
чувствительности к анти-EGFR терапии пациентов
с онкологическими заболеваниями
Мутации в генах KRAS и BRAF как биологические маркеры при колоректальном раке
Колоректальный рак является широко распространенной в мире патологией, ежегодная заболеваемость
достигает 1 миллиона случаев, а ежегодная смертность превышает 500 000. Колоректальный рак
занимает второе место по смертности от злокачественных новообразований среди мужчин и женщин.
Причем большое количество случаев заболевания относится к метастазной форме рака (mCRC). В
настоящее время терапия пациентов с колоректальным раком основывается на использовании
таргетных моноклональных антител, которые блокируют рецептор эпидермального фактора роста
(EGFR), в сочетании с традиционными хемотерапевтическими агентами. EGFR представляет собой
трансмембранный рецептор, контролирующий передачу сигнала от клеточной мембраны к ядру, что
играет ключевую роль в клеточном росте, дифференцировке и апоптозе. Дезрегуляция этого сигнального
пути приводит к онкогенезу. Таким образом, EGFR является объектом направленной антиопухолевой
терапии препаратами нового поколения на основе моноклональных антител. К таким препаратам
относятся Bevacizumab (Avastin®), Cetuximab (Erbitux®), Panitumumab (Vectibix™). В многочисленных
исследованиях было показано, что часть пациентов хорошо отвечает на анти-EGFR терапию, а другая
часть – нет. И этот факт объясняется наличием или отсутствием мутаций в генах KRAS и BRAF.
Мутации в гене KRAS были хорошо изучены на большой выборке различных опухолей человека, включая
метастатический колоректальный рак, немелкоклеточный рак легких, меланома и рак щитовидной
железы. Мутации в гене KRAS выявляются приблизительно в 60% случаев колоректального рака.
Основная мутагенная нагрузка приходится на кодоны 12, 13 и 16 гена KRAS, который локализуется на
хромосоме 12. Сигнальный путь Ras-Raf-MAPK запускается активацией рецептора EGFR. Мутация в гене
KRAS приводит к тому, что клетки становятся независимыми от активации/ингибирования EGFR в ходе
моноклональной анти-EGFR терапии. Таким образом, пациенты с такой мутацией становятся не
восприимчивыми к терапии препаратами на основе моноклональных антител.
BRAF представляет собой RAS-регулируемую серин/треонин киназу, которая наряду с KRAS является еще
одним участником сигнального пути, контролирующего клеточную пролиферацию, дифференцировку и
апоптоз. Гены BRAF, как и гены KRAS, склонны к мутациям. Мутации в гене BRAF часто обнаруживаются в
злокачественных опухолях человека, таких как метастатический колоректальный рак, немелкоклеточный
рак легких, меланомы и папиллярный рак щитовидной железы. Данные, представленные в 2012 году на
20-м Симпозиуме по таргетной и антиопухолевой терапии (20th Symposium on Molecular Targets and
Cancer Therapies) демонстрируют, что мутации в гене KRAS играют ведущую роль в активации
сигнального пути, который приводит к прогрессии опухоли и обнаруживается у 30–40% пациентов с
неэффективным ответом на терапию препаратами Erbitux (Cetuximab) и Vectibix (Panitumumab). Однако
мутации в гене BRAF ответственны за дополнительные 12–15% пациентов, которые не отвечает на антиEGFR терапию. Таким образом, тестирование гена BRAF дополняет анализ на KRAS-мутации, и имеет
ключевое значение для принятия решения о типе назначаемой противоопухолевой терапии.
Мутации BRAF как биологические маркеры предоперационной диагностики рака щитовидной железы
Пальпаторно определяемые тиреоидные узлы встречаются у 5–7% взрослого населения. При этом
представляется важным исключить случаи малигнизации увеличенных тиреоидных узлов, что составляет
5–15% всех увеличенных узлов. Тонкоигольная аспирация в настоящий момент является стандартной
диагностической процедурой, позволяющей гистологически охарактеризовать тиреоидные узлы, для
определения является ли узел доброкачественным или злокачественным. Однако в 10–40% случаев
гистологическая диагностика не дает однозначного ответа по причине перекрывающихся
цитологических характеристик доброкачественных и злокачественных тиреоидных узлов. Наличие
мутации в гене BRAF (в кодоне 600) в клетках аспирата щитовидной железы свидетельствует об
агрессивном характере опухоли, что определяет дальнейшую тактику оперативного вмешательства.
Официальный дистрибьютор компании Asuragen в России ЗАО «БиоХимМак» www.biochemmack.ru
СХЕМА ВЫПОЛНЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
Компания Asuragen (США) разработала диагностические реагенты для быстрого генетического
мультиплексного анализа KRAS и BRAF мутаций в образцах опухолевой ткани пациентов с
использованием анализатора Luminex® 100™ или 200™.
Набор Signature® KRAS Mutations Kit используется для быстрой детекции мутаций в гене KRAS при
исследовании геномной ДНК, выделенной из человеческих клеток, а также из свежих, замороженных и
фиксированных формалином парафиновых препаратов (FFPE) тканей. Принцип метода основан на
постановке мультиплексной ПЦР с последующей детекцией флуоресцентного сигнала. Тест позволяет
проводить одновременно обнаружение 7 основных KRAS мутаций в кодонах 12 и 13 вместе с
внутренним контролем в одной лунке. После постановки мультиплексной ПЦР, осуществляется
идентификация меченых ПЦР-продуктов путем гибридизации их на микросферах и детекция результатов
с использованием анализатора Luminex.
Набор Signature® BRAF Mutations Kit предназначен для определения BRAF мутаций в геномной ДНК,
выделенной из фиксированных формалином парафиновых препаратов (FFPE) ткани кишечника или из
аспирата щитовидной железы. Принцип метода также основан на постановке мультиплексной ПЦР с
последующей мультипараметрической детекцией флуоресцентного сигнала на анализаторе Luminex.
Тест позволяет проводить одновременно обнаружение нескольких BRAF мутаций вместе с внутренним
контролем в одной лунке.
ИНФОРМАЦИЯ ДЛЯ ЗАКАЗА
Кат. номер
Название набора
76017
Signature® KRAS
Mutations Kit
Signature® BRAF
Mutations Kit
76020
Назначение набора
Набор для определения мутаций в гене KRAS
Количество
тестов
48 тестов
Набор для определения мутаций в гене BRAF
48 тестов
Официальный дистрибьютор компании Asuragen в России
ЗАО «БиоХимМак»
119991, г. Москва, Ленинские горы, 1-11, МГУ им. Ломоносова
Тел.: (495) 647-2740, 939-2421, факс (495) 939-0997
E-mail: [email protected], www.biochemmack.ru