BIO TEST BIO T

BIO
TEST
®
Проведение анализа
Образцы:
негемолитические сыворотки, гепарин.
или ЭДТА плазма
Длина волны
(334, 365) 340 нм
Кювета
1 см
Температура
(37 ± 0,1) °С
Рабочий раствор и реактив 2 нагревают перед анализом (37 °C)
АлАТ - УФ 600 P
(ALT UV 6 x 100 P)
Ном. номер 10003215
Хранить
(с +2 до +8) °С
Набор реактивов на приготовление 6 x 100 мл рабочего
раствора для определения каталитической активности
алан­инам­инотрансферазы в сыворотке или плазме в УФ
области. Метод по рекомендациям IFCC при 37 °С (DGKCh
„new“ 1994).
Принцип метода
L-аланин + 2-оксоглутарат
пируват + НАД(Н) + Н+ АлАТ
ЛДГ
пируват + L-глутамат
L - лактат + НАД+
Каталитическая активность АлАТ пропорциональна
уменьшению оптической плотности при 340, 334 или
365 нм.
Литература
Expert Panel on Enzymes of the IFCC, Clin. Chim. Acta 70,
F 19 (1976)
Реактивы
1 Смесь ферментов – НАД(Н)
(6 флаконов)
ЛДГ ≥ 2,0 мккат,
НАД(Н) 22 мкмоль/флакон
2 Стартер
(2 x 35 мл)
2 – оксоглутарат 180 ммоль/л
3 Буфер – субстрат
(6 x 100 мл)
трис 120 ммоль/л,
L – аланин 600 ммоль/л,
4 Активатор
(12 таблеток)
пиридоксал-5-фосфат 6 мкмоль/таблетку
Состав инкубационной смеси
Трис – буфер, рН 7,5 (37 °С) 100
L - аланин 500
НАД(Н)183,3
ЛДГ
≥ 16,7
2 - оксоглутарат 15
Пиридоксал-5-фосфат 100
Объемное соотношение
сыворотка/инкубационная смесь
Рабочий раствор (мл)
1,00
Сыворотка (мл)
0,10
Перемешивают и инкубируют 5–10 мин при 37 °С, затем
добавляют
Реактив 2 (мл)
0,10
Перемешивают и инкубируют 1 мин при 37 °С.
Измеряют оптическую плотность в интервалях 1 мин в течение не менее 3 мин и расчитывают изменение оптической
плотности за минуту (∆А)
Расчет
АлАТ (мккат/л)
= ∆А x 31,7 (340 нм)
∆A x 32,4 (334 нм)
∆A x 58,8 (365 нм)
Примечания
Пробы перед анализом не замораживать, только хранить при температуре (с
+2 до +8) °С не более 4 дня.
Если изменение оптической плотности ∆А превисит при 340 нм величину 0,150
то следует анализ провести повторно с пробой разведенной физиологическим
раствором в соотношении 1 + 9 (результат x 10).
Анализ может проводиться при температуре 30 °С без вырази­тельных изменений
характеристик метода.
Изменяются референтные величины:
АлАТ (мккат/л) 30 °С
мужчины:
0,1 – 0,8
женщины:
0,1 – 0,6
Рабочий раствор без пиридоксал-5-фосфата приготовляют разбавлением
содержимого одного флакона с реактивом 1 в содержимом одного флакона
с реактивом 3.
Устойчивость: 2 недели (с +2 до +8) °С в темном месте.
Пересчет единиц
1 кат/л
= 1 моль/л.с
1 мккат/л
= 60 Е/л
Рабочие (аналитические) характеристики
Диапазон измерений: до 10 мккат/л
Оптический предел измерения (изменение оптической плотности не более А/
мин=) 0,022 мккат/л
Чувствительность / Предел определения: 0,068 - 10 мккат/л
Специфичность / Интерференция: Аскорбиновая кислота: до 2,3 ммоль/л,
Гемоглобин: до 2 г/л, Триглицериды: до 11 ммоль/л
Воспроизводимость (при 37 °C)
ммоль/л
ммоль/л
мкмоль/л
мккат/л
ммоль/л
мкмоль/л
1/12
Референтные величины
АлАТ (мккат/л) 37 °С
мужчины 0,2 – 0,8
женщины 0,2 – 0,6
Приведеный диапазон референтных значений является
ориентировочным. Рекомендуется каждой лаборатории
вычислять свои диапазоны нормальных величин.
Контроль качества
Био-ЛА-Тест ® ЛИОНОРМ КАЛИБРАТОР, Ном. номер
10003200
Био-ЛА-Тест® ЛИОНОРМ ГУМ Н, Ном. номер 10003204
Био-ЛА-Тест® ЛИОНОРМ ГУМ П, Ном. номер 10003206
Внутрисерийная
(число измерений n=20)
Образец 1
Образец 2
Образец 3
Межсерийная
(число измерений n=10)
Образец 1
Образец 2
Образец 3
Среднеарифметическое
значение (мккат/л)
0,64
2,45
6,52
Среднеарифметическое
значение (мккат/л)
0,63
2,44
6,61
SD
(мккат/л)
0,01
0,01
0,03
SD
(мккат/л)
0,01
0,01
0,03
CV
(%)
1,89
0,45
0,44
CV
(%)
1,94
0,47
0,46
Сравнение методов
Сравнение было проведено с использованием реагентов Erba Lachema s.r.o. и
имеющихся в продаже реагентов с коммерчески доступной методикой.
N = 98, r = 0,999, y = 0,967 x +0,0997 µkat/l
Стабильность и хранение
Реактив следует хранить при температуре (с +2 до +8) °С в темноте.
Срок годности указан на каждой упаковке.
После использования флакон с реактивом немедленно закройте, чтобы
предотварить возможность испарения реактива или его контаминации.
Меры предосторожности
Набор реагентов предназначен для in vitro диагностики профессионально
обученным лаборантом.
В наборе не содержатся опасные реактивы. При случайном приеме внутрь
следует выпить 0,5 л тепловатой воды. При попадании в глаза их следует
промыть током чистой воды. При попадании на кожу ее следует отмыть теплой
водой и мылом. Пострадавшему необходимо оказать квалифицированную
медицинскую помощь.
Ликвидация мусора
Все тестированные пробы считают материалом, который может быть
инфицирован, и совместно с возможными остатками реактивов подлежит
уничтожению в соответствии с утвержденными внутрибольничными правилами.
Бумажную упаковку сдайте в макулатуру, выполосканую заводскую тару
в сортированный мусор.
Дата проведения последнего контроля: 11. 2. 2011
Приготовление рабочего раствора
Содержимое одного флакона с реактивом 1 растворяют
в содержимом флакона с реактивом 3 совместно с 2 таблетками
реактива 4.
Устойчивость: 10 дней (с +2 до +8) °С в темном месте.
Erba Lachema s.r.o., Karásek 1d, 621 33 Brno, CZ
e-mail: [email protected], www.lachema.com
В случае любых вопросов обращайтесь в Представи­тельство
Erba Lachema s.r.o. в Москве.
Tел/факс: 495-755 78 51, 495-755 55 80.