ТРОМБОЛИЗИС: ДОСТИЖЕНИЯ, ПРОБЛЕМЫ, ПЕРСПЕКТИВЫ
реклама
ÓÄÊ 612. 115 12: 577. 112. 089 ÒÐÎÌÁÎËÈÇÈÑ: ÄÎÑÒÈÆÅÍÈß, ÏÐÎÁËÅÌÛ, ÏÅÐÑÏÅÊÒÈÂÛ Ë. Ä. ÒÀÐÀÍ Èíñòèòóò áèîõèìèè èì. À. Â. Ïàëëàäèíà ÍÀÍ Óêðàèíû, Êèåâ; å-mail: [email protected]  îãëÿä³ ï³äñóìîâàíî äàí³ ùîäî ìåõàí³çìó àêòèâàö³¿ ïëàçì³íîãåíó òêàíèííèì àêòèâàòîðîì, ñòðåïòîê³íàçîþ ³ óðîê³íàçîïîä³áíèìè àêòèâàòîðàìè. Ïîêàçàíî ðåãóëÿòîðíó ðîëü ô³áðèíó â àêòèâàö³¿ ïëàçì³íîãåíó òêàíèííèì àêòèâàòîðîì, ùî âèÿâëÿº ïðÿìó ñïîð³äíåí³ñòü äî ô³áðèíó, òà ñòðåïòîê³íàçè ³ óðîê³íàçîïîä³áíèìè àêòèâàòîðàìè, ùî íå ìàþòü òàêî¿ ñïîð³äíåíîñò³. Íàâåäåíî ³íôîðìàö³þ ïðî àêòèâàòîðè ïëàçì³íîãåíó (ÀÏ), ÿê³ âèêîðèñòîâóþòüñÿ çàðàç ÿê òðîìáîë³òèêè. Ïðîàíàë³çîâàíî óñêëàäíåííÿ, ùî âèíèêàþòü çà ââåäåííÿ òàêèõ òðîìáîë³òè÷íèõ àãåíò³â, âèñëîâëåíî ïðèïóùåííÿ ùîäî ïðè÷èíè âèíèêíåííÿ öèõ óñêëàäíåíü. Äèñêóòóþòüñÿ ðåçóëüòàòè äîñë³äæåíü ìóòàíòíèõ ïîõ³äíèõ ÀÏ, îäåðæàíèõ çà òåõíîëî㳿 ðåêîìá³íàíòíèõ ÄÍÊ, à òàêîæ õ³ìåðíèõ (ã³áðèäíèõ) ôîðì ÀÏ òà ¿õí³õ êîíþãàò³â, îäåðæàíèõ õ³ì³÷íèìè ìåòîäàìè. Ïðîàíàë³çîâàíî òåíäåíö³þ ïîøóêó ÀÏ. Îõàðàêòåðèçîâàíî íîâèé íàïðÿìîê ó äîñë³äæåíí³ àêòèâàòîð³â çà óìîâè îäíî÷àñíîãî ââåäåííÿ ¿õ ³ ïîäàëüøèé ðîçâèòîê ìåòîä³â òðîìáîë³òè÷íî¿ òåðàﳿ. Ê ë þ ÷ î â ³ ñ ë î â à: àêòèâàòîðè ïëàçì³íîãåíó, ðåêîìá³íàíòí³ ôîðìè àêòèâàòîð³â ïëàçì³íîãåíó, õ³ì³÷í³ êîíþãàòè ³ õ³ìåðí³ ôîðìè, ô³áðèíîë³òè÷íà àêòèâí³ñòü, òðîìáîë³çèñ. Ó æå ìíîãèå äåñÿòèëåòèÿ ñåðäå÷íî-ñîñóäèñòûå çàáîëåâàíèÿ äåðæàò ïåðâåíñòâî ïî ðàñïðîñòðàíåííîñòè [1]. Äàæå â íàèáîëåå ðàçâèòûõ ñòðàíàõ ìèðà äîëÿ ëåòàëüíûõ èñõîäîâ îò ñåðäå÷íî-ñîñóäèñòûõ çàáîëåâàíèé ñîñòàâëÿåò â îáùåì ïîêàçàòåëå ñìåðòíîñòè 3639% â îñíîâíîì çà ñ÷åò èíôàðêòà ìèîêàðäà [2]. Âñå ýòî îáóñëîâèëî íåîáõîäèìîñòü ïðîâåäåíèÿ áèîõèìè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé, ïîçâîëÿþùèõ ðàñêðûòü ñóòü ïðîöåññîâ, ëåæàùèõ â îñíîâå òðîìáîîáðàçîâàíèÿ è ïðåäëîæèòü ýôôåêòèâíûå òðîìáîëèòè÷åñêèå ïðåïàðàòû. Áëàãîäàðÿ ïðèìåíåíèþ ñîâðåìåííîé âíóòðèâåííîé òðîìáîëèòè÷åñêîé òåðàïèè ïðè îñòðîì èíôàðêòå ìèîêàðäà óäàëîñü íà 2427% ñíèçèòü ñìåðòíîñòü [2]. Íåîáõîäèìî îòìåòèòü, ÷òî ðàçâèâàåòñÿ è õèðóðãè÷åñêîå íàïðàâëåíèå â ýòîé îáëàñòè [1]. Åñòåñòâåííî, ýôôåêòèâíûå òðîìáîëèòè÷åñêèå ëåêàðñòâåííûå ïðåïàðàòû îáëàäàþò íåñîìíåííûì ïðåèìóùåñòâîì ïåðåä îïåðàòèâíûì âìåøàòåëüñòâîì.  íàñòîÿùåé ðàáîòå àâòîðîì ñäåëàíà ïîïûòêà ñóììèðîâàíàòü ñîâðåìåííûå ïðåäñòàâëåíèÿ îá àêòèâàöèè ïëàçìèíîãåíà ðàçëè÷íûìè òèïàìè àêòèâàòîðîâ è îá èñïîëüçóåìûõ â ìèðîâîé ìåäèöèíñêîé ïðàêòèêå òðîìáîëèòèêàõ. Âûñêàçàíû òàêæå ïðåäïîëîæåíèÿ, îáúÿñíÿþùèå íåñîâåðøåíñòâî òðîìáîëèçèñà. Îáîáùåíû è êðèòè÷åñêè ïðîàíàëèçèðîâàíû ðåçóëüòàòû áèîõèìè÷åñêèõ è áèîìåäèöèíñêèõ èññëåäîâàíèé ïî ñîçäàíèþ íîâûõ âûñîêîýôôåêòèâíûõ òðîìáîëèòè÷åñêèõ àãåíòîâ.  êà÷åñòâå òðîìáîëèòèêîâ â íàñòîÿùåå âðåìÿ èñïîëüçóþò ãëàâíûì îáðàçîì àêòèâàòîðû ISSN 0201 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3 ïëàçìèíîãåíà (ÀÏ) è èõ ìîäèôèöèðîâàííûå ôîðìû, òàê êàê ïëàçìèíîãåí (ÏÃ) ÿâëÿåòñÿ ïðåäøåñòâåííèêîì ïëàçìèíà (ÏÌ) ôåðìåíòà, îñóùåñòâëÿþùåãî ëèçèñ òðîìáà in vivo [36].  ñòðóêòóðå íàòèâíîé ôîðìû Ïà (Glu-ÏÃ) îñîáàÿ ðîëü ïðèíàäëåæèò ïÿòè äîìåíàì, ñîîòâåòñòâóþùèì ïÿòè ãîìîëîãè÷íûì êðèíãëîâûì ñòðóêòóðàì, êîòîðûå îïðåäåëÿþò âçàèìîäåéñòâèå Ïà ñ ôèáðèíîì, α2-àíòèïëàçìèíîì è ñ èçâåñòíûìè èíãèáèòîðàìè ôèáðèíîëèçà àìèíîêàïðîíîâîé êèñëîòîé (6-ÀÃÊ) è åå àíàëîãàìè [7]. Ïðè àêòèâàöèè Ïà âñåìè èçâåñòíûìè àêòèâàòîðàìè ïîñëå ðàñùåïëåíèÿ ñâÿçè Arg561-Val562 îáðàçóåòñÿ àêòèâíûé ôåðìåíò ÏÌ [8, 9]. Îäíîé èç ïåðâîé â êëèíèêå ñòàëà ïðèìåíÿòüñÿ ñòðåïòîêèíàçà (ÑÊ) [10,11], êîòîðàÿ íå ÿâëÿåòñÿ ôèçèîëîãè÷åñêèì àêòèâàòîðîì ÏÃ. Ýòî áåëîê, êîòîðûé ïðîäóöèðóåòñÿ ãåìîëèòè÷åñêèìè ñòðåïòîêêîêàìè ñ Ìm 47 êÄà è ñîñòîèò áîëåå ÷åì èç 400 àìèíîêèñëîòíûõ îñòàòêîâ [12]. Èçâåñòíî, ÷òî îäíîöåïî÷å÷íàÿ ìîëåêóëà ÑÊ íå èìååò äèñóëüôèäíûõ ñâÿçåé è ñîñòîèò èç òðåõ äîìåíîâ, êîòîðûå îáîçíà÷àþòñÿ, íà÷èíàÿ ñ NÍ2-êîíöåâîé ÷àñòè ìîëåêóëû, êàê α, β è χ [13]. Îñîáåííîñòüþ ýòîãî àêòèâàòîðà ÿâëÿåòñÿ îòñóòñòâèå ýíçèìàòè÷åñêîé àêòèâíîñòè íàðÿäó ñî ñïîñîáíîñòüþ ïðåâðàùàòü Ïà â ÏÌ. Êðîìå òîãî, îíà îáëàäàåò âèäîâîé ñïåöèôè÷íîñòüþ; ñïîñîáíà àêòèâèðîâàòü Ïà ÷åëîâåêà, êîøêè, ñîáàêè, êðîëèêà, íî íå äåéñòâóåò íà ïðîôåðìåíò áûêà è ëîøàäè [14].  íàñòîÿùåå âðåìÿ ñ÷èòàþò, ÷òî ÑÊ îáðàçóåò ñòåõèîìåòðè÷åñêèé êîìïëåêñ ñ Ïà (è ÏÌ), êîòîðûé 25 ÎÃËßÄÈ îáëàäàåò àêòèâàòîðíûì äåéñòâèåì íà Ïà [15]. Óñòàíîâëåíî, ÷òî àêòèâíûé öåíòð ëîêàëèçîâàí â ïëàçìèíîãåíîâîé, à íå ñòðåïòîêèíàçíîé ÷àñòè êîìïëåêñà [16]. Ïðè âçàèìîäåéñòâèè Glu-Ïà ñî ñòåõèîìåòðè÷åñêèìè êîëè÷åñòâàìè ÑÊ ñíà÷àëà Glu-Ïà ïðåâðàùàåòñÿ â Glu-ÏÌ, à çàòåì GluÏÌ ïðåâðàùàåòñÿ â Lys-ÏÌ ïðè îòùåïëåíèè NÍ2-êîíöåâîãî ïåïòèäà [17]. Ôèáðèíîãåí è ôèáðèí óñêîðÿþò àêòèâàöèþ Glu-Ïà ïîä äåéñòâèåì ÑÊ, ïðè ýòîì àêòèâàòîð íå îáëàäàåò ñïîñîáíîñòüþ ñâÿçûâàòüñÿ íè ñ ôèáðèíîãåíîì, íè ñ ôèáðèíîì [18].  íàñòîÿùåå âðåìÿ ñ÷èòàþò, ÷òî àêòèâàöèÿ Glu-Ïà ñ ïîìîùüþ ÑÊ ïðîèñõîäèò ïî óíèêàëüíîìó ìåõàíèçìó, âêëþ÷àþùåìó êîíôîðìàöèîííûå ïðåîáðàçîâàíèÿ â ìîëåêóëå ïðîôåðìåíòà ïðè èõ âçàèìîäåéñòâèè, â ðåçóëüòàòå ÷åãî ïðîèñõîäèò îáðàçîâàíèå àêòèâíîãî êàòàëèòè÷åñêîãî öåíòðà â îòñóòñòâèå ïðîòåîëèçà [19, 20].  äàëüíåéøåì ìåõàíèçì íåýíçèìàòè÷åñêîãî ïðåâðàùåíèÿ Ïà â ÏÌ ïîä äåéñòâèåì ÑÊ áûë èññëåäîâàí áîëåå äåòàëüíî [2123]. Íàòèâíàÿ ôîðìà Ïà íàõîäèòñÿ â êîìïàêòíîé êîíôîðìàöèè, îáóñëîâëåííîé âíóòðèìîëåêóëÿðíûì âçàèìîäåéñòâèåì NÍ2-êîíöåâîãî ïåïòèäà ñ êðèíãëàìè 4 è 5. Îòùåïëåíèå NÍ2-êîíöåâîãî ïåïòèäà â ìîëåêóëå Glu-Ïà ïðèâîäèò ê ïåðåõîäó Ïà èç êîìïàêòíîé êîíôîðìàöèè ê áîëåå îáúåìíîé, êîòîðàÿ ðåàëèçóåòñÿ â ìîëåêóëå Lys-ÏÃ. Ðàçðóøåíèå âíóòðèìîëåêóëÿðíîãî âçàèìîäåéñòâèÿ â ìîëåêóëå Glu-Ïà 6-ÀÃÊ èëè åå àíàëîãàìè òàêæå ïðèâîäèò ê ïåðåõîäó Glu-Ïà îò êîìïàêòíîé ê îáúåìíîé êîíôîðìàöèè, íî ýòà êîíôîðìàöèÿ íå èäåíòè÷íà îáúåìíîé êîíôîðìàöèè Lys-ÏÃ. Ïðåäïî÷òèòåëüíîå ñâÿçûâàíèå ÑÊ ñ îáúåìíîé êîíôîðìàöèåé Ãëó-Ïà ïî ñðàâíåíèþ ñ êîìïàêòíîé êîíôîðìàöèåé, îáóñëîâëèâàåò òàêîé ïåðåõîä Glu-Ïà ïîñðåäñòâîì âçàèìîäåéñòâèÿ ÑÊ ïî ëèçèíñâÿçûâàþùèì ó÷àñòêàì, ÷òî ïðèâîäèò ê îáðàçîâàíèþ êîìïëåêñà ÏÃ-ÑÊ. Êàê áûëî óñòàíîâëåíî, ìåõàíèçì êîíôîðìàöèîííîé àêòèâàöèè ïðåäïîëàãàåò ââåäåíèå îñòàòêà Ile1 àìèíîêèñëîòíîé ïîñëåäîâàòåëüíîñòè ÑÊ â ïîëîæåíèå Val562 àìèíîêèñëîòíîé ïîñëåäîâàòåëüíîñòè Ïà è ýòî äåéñòâóåò êàê òðèããåð, èíèöèèðóþùèé ïîñòóïàòåëüíîå ïðåîáðàçîâàíèå Glu-Ïà â îáúåìíóþ êîíôîðìàöèþ è ðàññìàòðèâàåòñÿ êàê ðàííÿÿ ñòàäèÿ àêòèâàöèè.  äàëüíåéøåì ïðîèñõîäèò ñòàáèëèçàöèÿ àêòèâíîãî áåëêà, êàê ðåçóëüòàò âûñîêîãî ñðîäñòâà ÑÊ ê àêòèâíîé êîíôîðìàöèè êàòàëèòè÷åñêîãî äîìåíà.  íàñòîÿùåå âðåìÿ ÑÊ íàèáîëåå äåøåâûé òðîìáîëèòèê, êîòîðûé øèðîêî èñïîëüçóåòñÿ â ìåäèöèíñêîé ïðàêòèêå [24, 25]. Åñëè â òå÷åíèå ÷åòûðåõ ÷àñîâ ïîñëå ââåäåíèÿ ÑÊ â êðîâÿíîå ðóñëî ïðè èíôàðêòå ìèîêàðäà óäàâàëîñü äîñòè÷ü ïðîõîäèìîñòè ïîðàæåííîé êîðîíàðíîé àðòåðèè, òî ñìåðòíîñòü ñíèæàëàñü îò 81% äî 23%. Îäíàêî ÑÊ íå îáëàäàåò ôèáðèíîñïåöèôè÷íûì äåéñòâèåì è âåñüìà àíòèãåííà. Èç-çà îòñóòñòâèÿ ñïîñîáíîñòè ñâÿçûâàòüñÿ ñ ôèáðèíîâûì ñãóñòêîì, èñïîëüçîâàíèå ýòîãî àãåíòà ñîïðîâîæäàåòñÿ çàìåòíûì èñòîùåíèåì áåëêîâ ïëàçìû è, ïðåæäå âñåãî, ôèáðèíîãåíà, ÷òî â íåêîòîðûõ ñëó÷àÿõ ïîëíîñòüþ ïàðàëèçóåò ïðîöåññ ñâåðòûâàíèÿ è ïðèâîäèò ê ëåòàëüíîìó èñõîäó. Êðîìå òîãî, ââåäåíèå ÑÊ ÷àñòî âûçûâàåò àëëåðãèþ èç-çà åå àíòèãåííîñòè è â 1517% ñëó÷àåâ íàáëþäàåòñÿ ðåîêêëþçèÿ, à âðåìÿ ïîëóâûâåäåíèÿ åå èç êðîâîòîêà ñîñòàâëÿåò 1525 ìèíóò. Óðîêèíàçà (ÓÊ) ôèçèîëîãè÷ñêèé àêòèâàòîð ÏÃ, êîòîðûé òàêæå äàâíî èñïîëüçóåòñÿ â ìåäèöèíñêîé ïðàêòèêå â êà÷åñòâå òðîìáîëèòèêà. Åå âûäåëÿþò èç ìî÷è ÷åëîâåêà, èç êóëüòóðû ïî÷å÷íûõ êëåòîê ýìáðèîíà ÷åëîâåêà, à òàêæå ìåòîäàìè ãåííîé èíæåíåðèè [26, 27]. Óñòàíîâëåí ìåõàíèçì àêòèâàöèè Glu-Ïà ñ ïîìîùüþ ÓÊ [28]. Íà ïåðâîé ñòàäèè àêòèâàòîð êàòàëèçèðóåò ðàñùåïëåíèå ñâÿçè Arg561-Val562 â ìîëåêóëå ïðîôåðìåíòà è îáðàçóåòñÿ Glu-ÏÌ. Çàòåì ñëåäóåò ïðåâðàùåíèå GluÏÌ â Lys-ÏÌ â ðåçóëüòàòå îòùåïëåíèÿ NÍ2êîíöåâîãî ïåïòèäà. ÓÊ íå îáëàäàåò ñïåöèôè÷åñêèì ñðîäñòâîì ê ôèáðèíó [2931]. Åñëè ôèáðèíîâûé ñãóñòîê îáðàçîâàòü â ïðèñóòñòâèè ÓÊ, òî èç íåãî ýêñòðàãèðóåòñÿ ëèøü 6% àêòèâíîñòè àêòèâàòîðà. Ïðèñóòñòâèå ôèáðèíîãåíà èëè ôèáðèíà óâåëè÷èâàåò àêòèâàòîðíóþ àêòèâíîñòü ÓÊ. Ïðè ýòîì íè ôèáðèíîãåí, íè ôèáðèí íå âëèÿþò íà àêòèâíîñòü è ñïåöèôè÷íîñòü ÓÊ èëè íà àêòèâíîñòü ÏÌ. Ñëåäîâàòåëüíî, óñêîðåíèå àêòèâàöèè Glu-Ïà ñëåäóåò îòíåñòè íà ñ÷åò êîíôîðìàöèîííûõ èçìåíåíèé, ïðîèñõîäÿùèõ ïðè åãî âçàèìîäåéñòâèè ñ ôèáðèíîãåíîì èëè ôèáðèíîì. Èìåííî ïîýòîìó Lys-Ïà àêòèâèðóåòñÿ ñ áîëüøåé ñêîðîñòüþ ïî ñðàâíåíèþ ñ íàòèâíûì ÏÃ, à íàëè÷èå èëè îòñóòñòâèå ôèáðèíà íå âëèÿåò íà àêòèâàöèþ ýòîé ôîðìû ÏÃ. Ïîêàçàíî, ÷òî ïðåäïîëàãàåìûå êîíôîðìàöèîííûå èçìåíåíèÿ â ìîëåêóëå GluÏà ïðè åãî àêòèâàöèè ÓÊ â ïðèñóòñòâèè ëèçèíà ïðèâîäÿò ê óâåëè÷åíèþ ñðîäñòâà àêòèâàòîðà ê ïðîôåðìåíòó â 10 ðàç [32]. ÓÊ ñåêðåòèðóåòñÿ â êðîâîòîê â âèäå ïðîôåðìåíòà ïðîóðîêèíàçû (ÏÓ). Ïðè ðàñùåïëåíèè ÏÌ ñâÿçè Lys158-Ile159 â åãî ìîëåêóëå ïðîèñõîäèò îáðàçîâàíèå àêòèâíîãî äâóõöåïî÷å÷íîãî àêòèâàòîðà, êîòîðûé â êðîâîòîêå íåîáðàòèìî èíãèáèðóåòñÿ èíãèáèòîðîì àêòèâàòîðà ïëàçìèíîãåíà-1 (ÈÀÏ-1). Ýòî âûñîêîìîëåêóëÿðíàÿ ôîðìà ÓÊ.  äàëüíåéøåì ïðè ðàñùåïëåíèè ñâÿçè Lys135-Lys136 ïîä âîçäåéñòâèåì ÏÌ ïðîèñõîäèò îáðàçîâàíèå äâóõöåïî÷å÷íîé íèçêîìîëåêóëÿðíîé ôîðìû ÓÊ. Îíà òàêæå èíãèáèðóåòñÿ ÈÀÏ-1.  êëèíè÷åñêîé ïðàêòèêå èñïîëüçóþò îáå 26 ISSN 0201 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3 Ë. Ä. ÒÀÐÀÍ ôîðìû ÓÊ [33]. Íåñìîòðÿ íà çíà÷èòåëüíîå ñíèæåíèå ñìåðòíîñòè ïðè èñïîëüçîâàíèè ÓÊ ïðè îñòðîì èíôàðêòå ìèîêàðäà (ñðàâíèìî ñ äåéñòâèåì ÑÊ) è îòñóòñòâèåì àíòèãåííîñòè, â ýòîì ñëó÷àå âûÿâëåíû òå æå îñëîæíåíèÿ, ÷òî è ïðè ââåäåíèè ÑÊ. Òêàíåâîé àêòèâàòîð ïëàçìèíîãåíà (ÒÀÏ) òàêæå ÿâëÿåòñÿ ôèçèîëîãè÷åñêèì ÀÏ, êîòîðûé îòëè÷àåòñÿ îò ÓÊ áèîõèìè÷åñêèìè è èììóíîõèìè÷åñêèìè ñâîéñòâàìè è, ïðåæäå âñåãî, áîëüøåé ýôôåêòèâíîñòüþ àêòèâàöèè ïðîôåðìåíòà íà ôèáðèíîâîì ñãóñòêå [34]. Ýòîò òèï àêòèâàòîðà îáíàðóæåí â ïëàçìå, ðàçëè÷íûõ òêàíÿõ îðãàíèçìà ÷åëîâåêà è æèâîòíûõ, â ðàñòâîðàõ ïîñëå ïåðôóçèè ñîñóäîâ íèæíèõ êîíå÷íîñòåé òðóïîâ [35 37]. ÒÀÏ ñåêðåòèðóåòñÿ ýíäîòåëèàëüíûìè êëåòêàìè â êðîâîòîê â âèäå îäíîöåïî÷å÷íîãî ãëèêîïðîòåèíà ñ Ìm 70 êÄà. Ìîëåêóëà íàòèâíîãî àêòèâàòîðà ñîñòîèò èç íåñêîëüêèõ äîìåíîâ, êîòîðûì ïðèñóùè ðàçëè÷íûå ôóíêöèè [38]. Ïàëüöåîáðàçíûé äîìåí îòâåòñòâåíåí çà ñâÿçûâàíèå ñ ôèáðîíåêòèíîì, ýòîò æå äîìåí è äîìåí, ñîîòâåòñòâóþùèé êðèíãëó 2, îòâåòñòâåííû çà ñâÿçûâàíèÿ ñ ôèáðèíîì [39, 40]; äîìåí, ãîìîëîãè÷íûé ýïèäåðìàëüíîìó ôàêòîðó ðîñòà çà ðåöåïòîðíîå ñâÿçûâàíèå ñ êëåòêàìè ïå÷åíè è óñêîðåííûé êëèðåíñ, à äîìåí, ñîîòâåòñòâóþùèé êðèíãëó 1, ñóùåñòâåíåí äëÿ ñâÿçûâàíèÿ ñ ðåöåïòîðàìè ýíäîòåëèàëüíûõ êëåòîê. Ýòè äîìåíû ðàñïîëîæåíû â NH2-êîíöåâîé ÷àñòè ìîëåêóëû. Ñ-êîíöåâàÿ ÷àñòü ñîäåðæèò ïîòåíöèàëüíûé ïðîòåàçíûé äîìåí, êîòîðûé ïîñëå îãðàíè÷åííîãî ïðîòåîëèçà ÏÌ è ðàñùåïëåíèÿ ïåïòèäíîé ñâÿçè Arg275-Ile276 ïðåâðàùàåòñÿ â êàòàëèòè÷åñêèé äîìåí äâóõöåïî÷å÷íîé ôîðìû àêòèâàòîðà, ñîäåðæàùèé â ñâîåé ïîñëåäîâàòåëüíîñòè ó÷àñòîê ñâÿçûâàíèÿ ñ ÈÀÏ-1. Ýòî ñîîòâåòñòâóåò ïðåâðàùåíèþ îäíîöåïî÷å÷íîé ôîðìû àêòèâàòîðà, êîòîðûé â íîðìå ïðàêòè÷åñêè íå àêòèâåí, â äâóõöåïî÷å÷íóþ.  ïðèñóòñòâèè ôèáðèíà (èëè òðîìáà) îáå ôîðìû ÒÀÏ ñî ñõîäíîé ýôôåêòèâíîñòüþ êàòàëèçèðóþò ïðåâðàùåíèå Ïà â ÏÌ [41]. Äëÿ êëèíè÷åñêèõ öåëåé èñïîëüçóåòñÿ ïðåèìóùåñòâåííî îäíîöåïî÷å÷íàÿ ôîðìà ðåêîìáèíàíòíîãî àêòèâàòîðà, èìåþùàÿ êîììåð÷åñêîå íàçâàíèå àêòèâàçà èëè àëüòåïëàçà. Òåõíîëîãèÿ ðåêîìáèíàíòíûõ ÄÍÊ ïîçâîëèëà îðãàíèçîâàòü øèðîêîìàñøòàáíîå ïðîèçâîäñòâî ÒÀÏ. Îáùåïðèíÿòîé òî÷êîé çðåíèÿ íà ìåõàíèçì àêòèâàöèè Ïà â ïðèñóòñòâèè ôèáðèíà ýòèì òèïîì àêòèâàòîðà ÿâëÿåòñÿ ïðåäñòàâëåíèå î ñâÿçûâàíèè ìîëåêóëû ÒÀÏ ñ ïîâåðõíîñòüþ ñãóñòêà è ïîñëåäóþùèì ïðèñîåäèíåíèåì ìîëåêóëû Ïà ñ îáðàçîâàíèåì òðîéíîãî öèêëè÷åñêîãî êîìïëåêñà [42]. Êèíåòè÷åñêèìè èññëåäîâàíèÿìè in vitro áûëî óñòàíîâëåíî, ÷òî ýôôåêòèâíîñòü àêòèâàöèè Glu-Ïà è Lys-Ïà â ïðèñóòñòâèè ôèáðèíà óâåëè÷èâàåòñÿ â 700 è 1000 ðàç ñîîòâåòñòâåííî ïî ñðàâíåíèþ ñ àêòèâàöèåé â òåõ æå óñëîâèÿõ, íî â îòñóòñòâèå ôèáðèíà â ðåçóëüòàòå ñíèæåíèÿ Êm.  äàëüíåéøèõ èññëåäîâàíèÿõ [43] â óñëîâèÿõ, èñêëþ÷àþùèõ ãèäðîëèç ôèáðèíà, áûëî ïîêàçàíî, ÷òî ýôôåêòèâíîñòü àêòèâàöèè îáåèõ ôîðì Ïà îïðåäåëÿåòñÿ ãëàâíûì îáðàçîì ñòàáèëüíîñòüþ òðîéíîãî öèêëè÷åñêîãî êîìïëåêñà. Óñòàíîâëåíî, ÷òî â õîäå àêòèâàöèè Ïà ÒÀÏ íà ôèáðèíîâîì ñãóñòêå ïîñëåäîâàòåëüíî îáðàçóþòñÿ äâà àêòèâàòîðíûõ êîìïëåêñà, ñîîòâåòñòâóþùèõ äâóì ôàçàì àêòèâàöèè [44]: ïåðâîé ñ îòíîñèòåëüíî ñëàáîé ýôôåêòèâíîñòüþ àêòèâàöèè [45, 46] è âòîðîé, ñâÿçàííîé ñ ÷àñòè÷íûì ãèäðîëèçîì îáðàçóþùèìñÿ ÏÌ ôèáðèíîâîãî ñãóñòêà è âûñâîáîæäåíèåì Ñ-êîíöåâûõ ëèçèíîâûõ îñòàòêîâ. Äîïîëíèòåëüíîå ñâÿçûâàíèå ïî ýòèì îñòàòêàì Glu-Ïà â èçìåíåííîé êîíôîðìàöèè îáåñïå÷èâàåò áóëüøåå ñðîäñòâî ÒÀÏ ê ïðîôåðìåíòó è, ñëåäîâàòåëüíî, áóëüøóþ ýôôåêòèâíîñòü àêòèâàöèè [4749]. Îáðàçóþùèéñÿ íà ïåðâîé ñòàäèè ÏÌ êàòàëèçèðóåò ïðåâðàùåíèå Glu-Ïà â Lys-Ïà è îäíîöåïî÷å÷íîé ôîðìû àêòèâàòîðà â äâóõöåïî÷å÷íóþ [50, 51]. Ïåðâàÿ ôàçà àêòèâàöèè íà÷èíàåòñÿ ïîñëå îòùåïëåíèÿ ôèáðèíîïåïòèäîâ À îò ôèáðèíîãåíà è îáðàçîâàíèåì ïðîòîôèáðèëë, âòîðàÿ ïîñëå íà÷àëüíîé äåãðàäàöèè ïîëèìåðíîãî ôèáðèíà îáðàçóþùèìñÿ ÏÌ [52]. Íà ïåðâîé ñòàäèè îáðàçîâàíèå àêòèâàòîðíîãî êîìïëåêñà ïðîèñõîäèò, ïîâèäèìîìó, ñ ó÷àñòèåì αÑ-äîìåíîâ, òàê êàê, ñ îäíîé ñòîðîíû, ïîêàçàíî, ÷òî αÑ-äîìåíû àôôèííî ñâÿçûâàþò è Ïà è ÒÀÏ, à, ñ äðóãîé ñòîðîíû, ÷àñòè÷íîå îòùåïëåíèå ýòèõ äîìåíîâ ïðèâîäèò ê ïåðåõîäó ðåàêöèè âî âòîðóþ ñòàäèþ [53]. Íà âòîðîé ñòàäèè àêòèâàòîðíûé êîìïëåêñ îáðàçóåòñÿ íà ìåæäîìåííûõ ñóïåðñïèðàëèçîâàííûõ ó÷àñòêàõ, ïðèëåãàþùèõ ê DÅD-òðèàäå [54]. ×òî êàñàåòñÿ ðåçóëüòàòîâ áèîìåäèöèíñêèõ è êëèíè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé ïî ïðèìåíåíèþ ðåêîìáèíàíòíîãî ÒÀÏ â êà÷åñòâå òðîìáîëèòè÷åñêîãî ïðåïàðàòà, òî ñ ñîæàëåíèåì ïðèøëîñü êîíñòàòèðîâàòü, ÷òî õàðàêòåð è âåëè÷èíà îñëîæíåíèé ïîñëå ââåäåíèÿ òðîìáîëèòèêà áûëà ñðàâíèìà â ýòîì ñëó÷àå ñ ðåçóëüòàòàìè, ïîëó÷åííûìè ïðè èñïîëüçîâàíèè ÑÊ è ÓÊ [33]. È ýòî ïðè ãîðàçäî áîëåå âûñîêîé ñòîèìîñòè ëå÷åíèÿ. Îñíîâíàÿ ïðè÷èíà íàáëþäàåìûõ îñëîæíåíèé â ýòîì ñëó÷àå îáúÿñíÿåòñÿ, ïî-âèäèìîìó, íåîáõîäèìîñòüþ ââåäåíèÿ çíà÷èòåëüíûõ äîç ÒÀÏ (50 100 ìã), ïðåæäå âñåãî â ñâÿçè c íåçíà÷èòåëüíûì âðåìåíåì ïðåáûâàíèÿ åãî â êðîâîòîêå (34 ìèí). Ýòî îáúÿñíÿþò íåîáðàòèìûì èíãèáèðîâàíèåì àêòèâàòîðà ÈÀÏ-1 [24]. Íåîáõîäèìî èìåòü â ââèäó, ÷òî ýêñïðåññèÿ ìÐÍÊ àíòèãåíà ÈÀÏ-1 ïîâûøåíà â ýíäîòåëèàëüíûõ êëåòêàõ àòåðîñêëåðî- ISSN 0201 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3 27 ÎÃËßÄÈ òè÷åñêèõ êîðîíàðíûõ àðòåðèé [55]. Òî åñòü ñíèæåíèå ôèáðèíîëèòè÷åñêîé àêòèâíîñòè ïðè êîðîíàðíîé áîëåçíè ñâÿçàíî ñ ïîâûøåíèåì óðîâíÿ ÈÀÏ-1, êîòîðûé êîððåëèðóåò ñ óâåëè÷åíèåì êîíöåíòðàöèè òðèãëèöåðèäîâ, èíèöèèðóþùèõ ñåêðåöèþ èíãèáèòîðà [56]. Ìîæíî ïðåäïîëîæèòü, ÷òî íåîáõîäèìîñòü ââåäåíèÿ çíà÷èòåëüíûõ êîëè÷åñòâ ÒÀÏ ïðè òðîìáîëèòè÷åñêîé òåðàïèè îáóñëîâëåíà òàêæå ñíèæåíèåì ýôôåêòèâíîñòè àêòèâàöèè Ïà ïîä äåéñòâèåì ÒÀÏ ïðè ïàòîëîãèè. Ýôôåêòèâíîñòü àêòèâàöèè, âåðîÿòíî, ñíèæàåòñÿ, ïðåæäå âñåãî, â ðåçóëüòàòå èíãèáèðîâàíèÿ ýòîãî ïðîöåññà èíãèáèòîðîì ôèáðèíîëèçà àêòèâèðóåìûì òðîìáèíîì (ÒÀÈÔ), àêòèâíàÿ ôîðìà êîòîðîãî (ÒÀÈÔà) êàòàëèçèðóåò îòùåïëåíèå Ñ-êîíöåâûõ ëèçèíîâûõ îñòàòêîâ ôèáðèíà, âàæíûõ íà âòîðîé, íàèáîëåå ýôôåêòèâíîé ñòàäèè àêòèâàöèè Ïà ýòèì òèïîì àêòèâàòîðà [47 49]. Èçâåñòíî, ÷òî ïðè îáðàçîâàíèè ôèáðèíîâîãî ñãóñòêà â ïëàçìå íàáëþäàåòñÿ óâåëè÷åíèå êîíöåíòðàöèè ÒÀÈÔà. À ïðè ïðîâåäåíèè òðîìáîëèòè÷åñêîé òåðàïèè ÒÀÏ ñ ïðåäâàðèòåëüíûì ââåäåíèåì èíãèáèòîðà ÒÀÈÔà îáíàðóæåíî çíà÷èòåëüíîå óñèëåíèå ëèçèñà òðîìáà èëè óìåíüøåíèå êîëè÷åñòâà ÒÀÏ, íåîáõîäèìîãî äëÿ äîñòèæåíèÿ ìàêñèìàëüíîé ôèáðèíîëèòè÷åñêîé àêòèâíîñòè [57].  îïûòàõ in vitro ïîêàçàíî òàêæå [58, 59], ÷òî êîâàëåíòíàÿ ìîäèôèêàöèÿ ôèáðèíîâîãî ñãóñòêà ôàêòîðîì XIIIà, òî åñòü ïðîøèâêà ñãóñòêà ïî χ− è α-öåïÿì è êîâàëåíòíîå âêëþ÷åíèå â ñãóñòîê ôèáðîíåêòèíà (ìîäåëèðîâàíèå ñèòóàöèè, âîçíèêàþùåé in vivo ïðè ïàòîëîãèè) çíà÷èòåëüíî ñíèæàåò ýôôåêòèâíîñòü àêòèâàöèè Ïà ýòèì òèïîì àêòèâàòîðà (áîëåå ÷åì íà ïîðÿäîê) ãëàâíûì îáðàçîì çà ñ÷åò óâåëè÷åíèÿ Êm ðåàêöèè [60]. Ýòî ñâèäåòåëüñòâóåò î òîì, ÷òî, âåðîÿòíî, ïðè òðîìáîëèòè÷åñêîé òåðàïèè ñ ïðèìåíåíèåì ÒÀÏ íåîáõîäèìîñòü ââåäåíèÿ åãî â íåïîìåðíî áîëüøèõ êîëè÷åñòâàõ îáóñëîâëåíà åùå è äåôèöèòîì ñâîáîäíîãî ÏÃ, òàê êàê èçâåñòíî, ÷òî ïðèìåðíî 65% Ïà ïëàçìû íàõîäèòñÿ â êîìïëåêñå ñ äðóãèìè áåëêàìè [1]. Ïîýòîìó â íîðìå òîëüêî 5% Ïà ñïîñîáíî ñâÿçûâàòüñÿ ñ ôèáðèíîì è àêòèâèðîâàòüñÿ ÒÀÏ, à ïðè ïàòîëîãèè âîçíèêàåò äåôèöèò ñâîáîäíîãî Ïà èç-çà ñíèæåíèÿ Êm ðåàêöèè àêòèâàöèè.  ýêñïåðèìåíòàõ íà æèâîòíûõ â âåíó ìîðñêèì ñâèíêàì ââîäèëè òðîìá, îáðàçîâàííûé in vitro è ìå÷åííûé ôëóîðåñöåèíèçîòèîöèàíàòîì [1]. Ïàðàìåòðû ôèáðèíîëèçà îïðåäåëÿëè ïðè ââåäåíèè ïðîçàçèíà (àãåíòà, âûçûâàþùåãî ñåêðåöèþ ÒÀÏ) è ÏÃ. Ðàçíèöó â óâåëè÷åíèè ôèáðèíîëèòè÷åñêîé àêòèâíîñòè è ïðîëîíãèðîâàííîñòè äåéñòâèÿ ìåæäó îïûòàìè ñ ïîñëåäîâàòåëüíûì ââåäåíèåì Ïà è ïðîçàçèíà, èëè òîëüêî ïðîçàçèíà óñòàíàâëèâàëè ïî íàðàñòàíèþ ôèáðèíîëèòè÷åñêîé àêòèâíîñòè â ýóãëîáóëèíîâîé ôðàêöèè è ïî óâåëè÷åíèþ êîëè÷åñòâà ïðîäóêòîâ äåãðàäàöèè ôèáðèíà â îáðàçöàõ êðîâè. Ïðè ýòîì óðîâåíü àêòèâíîñòè ÏÌ, ñîäåðæàíèå ôèáðèíîãåíà è ïðîäóêòîâ äåãðàäàöèè ôèáðèíîãåíà ñâèäåòåëüñòâîâàëè îá îòñóòñòâèè ñèñòåìíûõ îñëîæíåíèé ïðè îäíîâðåìåííîì ââåäåíèè ëèáåðàòîðà è ÏÃ.  ýòîì ñëó÷àå áûë òàêæå îòìå÷åí ýôôåêò ïðîëîíãèðîâàííîãî äåéñòâèÿ òðîìáîëèòèêà (äî 120 ìèí). Òàêèì îáðàçîì, åñòü îñíîâàíèÿ ïîëàãàòü, ÷òî ââåäåíèå äîïîëíèòåëüíûõ êîëè÷åñòâ Ïà ïðè òåðàïèè ÒÀÏ ïîçâîëèò óìåíüøèòü êîíöåíòðàöèþ ââîäèìîãî àêòèâàòîðà è òåì ñàìûì ñíèçèòü ñèñòåìíûå îñëîæíåíèÿ è, âîçìîæíî, äîáèòüñÿ ïðîëîíãèðîâàíèÿ åãî äåéñòâèÿ. Ñëåäóåò îòìåòèòü òàêæå, ÷òî ââåäåíèå áîëüøèõ äîç ÒÀÏ ïîëíîñòüþ èíãèáèðóåò ïðîôèáðèíîëèòè÷åñêóþ ôóíêöèþ àêòèâèðîâàííîãî ïðîòåèíà Ñ (Ñà), âûòåñíÿÿ åãî èç êîìïëåêñà ñ ÈÀÏÃ-1 [6163]. Íåñêîëüêî ïîçæå ÷åì ÒÀÏ áèîìåäèöèíñêèì è êëèíè÷åñêèì èññëåäîâàíèÿì ïîäâåðãëàñü ïðîóðîêèíàçà (ÏÓ) ôèçèîëîãè÷åñêèé àêòèâàòîð Ïà óðîêèíàçíîãî òèïà, îáëàäàþùèé âûñîêèì ñðîäñòâîì ê ÷àñòè÷íî äåãðàäèðîâàííîìó ôèáðèíó.  êëèíèêå ïðè îñòðîì èíôàðêòå ìèîêàðäà èñïîëüçóþò åå ðåêîìáèíàíòíóþ ôîðìó ïîä íàçâàíèåì ñàðóïëàçà [33]. ÏÓ ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé ãëèêîïðîòåèí ñ Ìm 55 êÄà. Ðàñùåïëåíèå ÏÌ ïåïòèäíîé ñâÿçè Lys158-Ile159 â ìîëåêóëå ÏÓ ïðèâîäèò ê ïðåâðàùåíèþ åå â ÓÊ, êîòîðàÿ ðåàãèðóåò ñ ïðîòåàçíûìè èíãèáèòîðàìè ïëàçìû è ýíçèìàòè÷åñêè áîëåå àêòèâíà.  íîðìå êàòàëèòè÷åñêàÿ àêòèâíîñòü ÏÓ ñîñòàâëÿåò 0,46% îò àêòèâíîñòè ÓÊ. Ïðîôåðìåíò ìîæíî âûäåëèòü èç ìî÷è ÷åëîâåêà [64], èç êóëüòóðû êëåòîê ðàçëè÷íûõ òèïîâ [65], à òàêæå èç ïëàçìû, ãäå åå êîíöåíòðàöèÿ ñîñòàâëÿåò 5 íã â 1 ìë [66]. ÏÓ ëèøü ñëàáî ãèäðîëèçóåò íåáîëüøèå àìèäíûå ñóáñòðàòû è ïðàêòè÷åñêè íå èíãèáèðóåòñÿ ñèíòåòè÷åñêèìè èíãèáèòîðàìè è ïðîòåàçíûìè èíãèáèòîðàìè ïëàçìû, ÷òî ïîçâîëèëî îòíåñòè åå ê ïðîôåðìåíòó [67].  îòëè÷èå îò ÒÀÏ è ÓÊ îíà ðåçèñòåíòíà ê íåîáðàòèìîìó èíãèáèðîâàíèþ ÈÀÏ-1 [24]. Ïðè èññëåäîâàíèè àêòèâàöèè Ïà ÏÓ in vitro áûëî óñòàíîâëåíî [68], ÷òî îíà îïèñûâàåòñÿ ïîñëåäîâàòåëüíîñòüþ òðåõ ðåàêöèé è ïîä÷èíÿåòñÿ êèíåòèêå ïî óðàíåíèþ Ìèõàýëèñà-Ìåíòåí. Íà ïåðâîé ñòàäèè ïðîèñõîäèò àêòèâàöèÿ Ïà äî ÏÌ ñ Êm 0,4 µÌ è êðàò.. 0,02 ñåê-1 Âòîðàÿ ñòàäèÿ ñîîòâåòñòâóåò ïðåâðàùåíèþ ÏÓ ïîä äåéñòâèåì ÏÌ (îáðàçîâàâøåãîñÿ íà ïåðâîé ñòàäèè) â ÓÊ ñ Êm 3,3 ìêÌ è êðàò.. 1,2 ñåê-1. È, íàêîíåö, òðåòüÿ ñòàäèÿ ñîîòâåòñòâóåò àêòèâàöèè Ïà ÓÊ, îáðàçîâàâøåéñÿ íà âòîðîé ñòàäèè ñ Êm 50 ìêÌ è êêàò. 1,0 ñåê-1.  îïûòàõ in 28 ISSN 0201 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3 Ë. Ä. ÒÀÐÀÍ vitro óñòàíîâëåíî, ÷òî ïðåâðàùåíèå ÏÓ â ÓÊ ñîñòàâëÿåò âàæíûé íà÷àëüíûé ýòàï ðàñòâîðåíèÿ ôèáðèíà, òàê êàê ôèáðèíîëèòè÷åñêàÿ àêòèâíîñòü ÏÓ íà 23 ïîðÿäêà ïðåâîñõîäèò ýôôåêò ìóòàíòíîé íåãèäðîëèçóåìîé ÏÌ ôîðìû ÏÓ è â 25 ðàç ýôôåêòèâíåå ÓÊ â òåõ æå óñëîâèÿõ [69]. Òî åñòü, â ïëàçìå â îòñóòñòâèå ôèáðèíà ÏÓ ñòàáèëüíà, íî â ïðèñóòñòâèè ôèáðèíîâîãî ñãóñòêà ÏÓ, íî íå ÓÊ, èíäóöèðóåò ñïåöèôè÷åñêèé ëèçèñ ôèáðèíà. Èçâåñòíî [24], ÷òî ÈÀÏ-1 êîíêóðåíòíî èíãèáèðóåò ÏÓ â ïëàçìå, íî êàê òîëüêî ïðîèñõîäèò âçàèìîäåéñòâèå ÏÓ â êîìïëåêñå ñ Ïà íà ôèáðèíå èíãèáèòîð îñâîáîæäàåòñÿ. Ñëåäóåò îòìåòèòü, ÷òî ìåõàíèçì ñïåöèôè÷åñêîé àêòèâàöèè Ïà ÏÓ íà ôèáðèíîâîì ñãóñòêå îêîí÷àòåëüíî íå óñòàíîâëåí, òàê êàê àêòèâàòîð íå îáëàäàåò íåïîñðåäñòâåííûì ñðîäñòâîì ê ôèáðèíó [70]. ÏÓ îáíàðóæèëà áîëåå âûñîêóþ ñïåöèôè÷åñêóþ òðîìáîëèòè÷åñêóþ àêòèâíîñòü ïî ñðàâíåíèþ ñ ÓÊ ïðè èññëåäîâàíèÿõ â ïðèñóòñòâèè ñãóñòêà ïëàçìû [71] è â ìîäåëüíûõ îïûòàõ íà æèâîòíûõ [72]. Íà èíòàêòíîì ôèáðèíå îíà îêàçàëàñü ñëàáûì àêòèâàòîðîì ÏÃ, íî â ðåçóëüòàòå ÷àñòè÷íîãî ãèäðîëèçà ôèáðèíà îáðàçóþùèìñÿ ÏÌ ÏÓ îáëàäàåò àêòèâàòîðíûì ïîòåíöèàëîì ÒÀÏ ïî îòíîøåíèþ ê Ïà [67]. Î÷åâèäíî, ÷àñòè÷íî äåãðàäèðîâàííûé ôèáðèí ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé êîíòàêòíóþ ïîâåðõíîñòü, ñïîñîáíóþ ñòèìóëèðîâàòü àêòèâàöèþ ÏÓ (äî 2025% îò àêòèâíîñòè ÓÊ) äëÿ àêòèâàöèè ÏÃ, ñâÿçàâøåãîñÿ ïî Ñ-êîíöåâûì îñòàòêàì ëèçèíà íà äåãðàäèðîâàííîì ôèáðèíå. Ïîêàçàíî, ÷òî ôðàãìåíòû ìîëåêóëû ôèáðèíà ïðè èõ ñâÿçûâàíèè ñ Glu-Ïà çàìåòíî ñòèìóëèðóþò àêòèâàöèþ ïðîôåðìåíòà ÏÓ â ðåçóëüòàòå êîíôîðìàöèîííûõ ïðåîáðàçîâàíèé, ïðîèñõîäÿùèõ ïðè ñâÿçûâàíèè Ïà [73]. Ýôôåêòèâíîñòü àêòèâàöèè Glu-Ïà ÏÓ â ïðèñóòñòâèè ÷àñòè÷íî äåãðàäèðîâàííîãî ôèáðèíà áûëà ñðàâíèìà ñ òàêîâîé äëÿ ÓÊ â ðàñòâîðå â îòñóòñòâèå ôèáðèíà. Ïðè ýòîì ôèáðèíîñïåöèôè÷íîñòü ÏÓ íå òðåáóåò ïðåâðàùåíèÿ ÏÓ â ÓÊ èëè ïåðåõîäà Glu-ôîðìû Ïà â Lys-ôîðìó, à ÿâëÿåòñÿ, ïî-âèäèìîìó, ñëåäñòâèåì äîïîëíèòåëüíîãî ñâÿçûâàíèÿ Ïà ñ ÷àñòè÷íî äåãðàäèðîâàííûì ôèáðèíîì. Èìåííî ïîýòîìó ÏÓ ìîæíî ñ÷èòàòü ôóíêöèîíàëüíûì ôèçèîëîãè÷åñêèì àêòèâàòîðîì Ïà â ïëàçìå. Ðîëü æå íåçíà÷èòåëüíûõ êîëè÷åñòâ ÓÊ, îáíàðóæåííûõ â ïëàçìå â êîëè÷åñòâå 99 íã â 1 ìë (êàòàëèòè÷åñêàÿ ýôôåêòèâíîñòü êîòîðûõ çíà÷èòåëüíî âûøå ïî ñðàâíåíèþ ñ ÏÓ â îòñóòñòâèå ôèáðèíà è ñòèìóëèðóåòñÿ ôèáðèíîì), çàêëþ÷àåòñÿ â èíäóöèðîâàíèè îáðàçîâàíèÿ ÏÌ, âûçûâàþùåãî ÷àñòè÷íûé ëèçèñ ôèáðèíîâîãî ñãóñòêà [74]. Ñïîñîáíîñòü ÏÓ ëèçèðîâàòü ôèáðèíîâûé ñãóñòîê, íå çàòðàãèâàÿ ïðè ýòîì ôèáðèíîãåí, îïèñàíà â ëèòåðàòóðå [73]. Ðåçóëüòàòû êëèíè÷åñêèõ èñïûòàíèé ñàðó- ïëàçû (ðåêîìáèíàíòíîé ôîðìû ÏÓ) îáíàðóæèëè íåîáõîäèìîñòü ââåäåíèÿ åå â çíà÷èòåëüíîì êîëè÷åñòâå, ÷òî, åñòåñòâåííî, ñêàçàëîñü íà ñòîèìîñòè ëå÷åíèÿ (áîëüøåé, ÷åì â ñëó÷àå èñïîëüçîâàíèÿ ÒÀÏ), à òàêæå íà âîçíèêàþùèõ ïîñëå òåðàïèè ýòèì òðîìáîëèòèêîì îñëîæíåíèé, ïðèñóùèõ ðàíåå èñïîëüçóåìûì àêòèâàòîðàì Ïà [33]. Âðåìÿ ïîëóâûâåäåíèÿ ÏÓ èç êðîâîòîêà òîæå îêàçàëîñü íåçíà÷èòåëüíûì 610 ìèí. Îäíîé èç ïðè÷èí ñëåäóåò, î÷åâèäíî, ñ÷èòàòü èíãèáèðîâàíèå ïðîöåññà àêòèâàöèè Ïà ïîä äåéñòâèåì ÏÓ íà ÷àñòè÷íî äåãðàäèðîâàííîì ôèáðèíå ÒÀÈÔà è äåôèöèò ñâîáîäíîãî Ïà ïëàçìû. Ïîäòâåðæäåíèåì ýòîãî ïðåäïîëîæåíèÿ ïîñëóæèëè îïûòû ïî îäíîâðåìåííîìó ââåäåíèþ ÏÓ è Ïà [75], ÷òî äàëî âîçìîæíîñòü äîñòàâèòü àêòèâàòîð ê î÷àãó ïîðàæåíèÿ è âîñïîëíèòü äåôèöèò ÏÃ. Ýôôåêò ââåäåíèÿ Lys-Ïà (5% îò îáùåé êîíöåíòðàöèè Ïà â ïëàçìå) â ñìåñè ñ ÏÓ îêàçàëñÿ âûøå, ÷åì ïðè èñïîëüçîâàíèè ñìåñè Glu-Ïà ñ ÏÓ èëè ïðîñòî ÏÓ. Ïðè ýòîì íå áûëî îòìå÷åíî ñêîëüêî-íèáóäü çíà÷èòåëüíîãî ðàñõîäîâàíèÿ α2-àíòèïëàçìèíà, ÷òî óêàçûâàëî íà ïðàêòè÷åñêè ïîëíîå îòñóòñòâèå àêòèâàöèè Ïà ïëàçìû â îòëè÷èå îò àíàëîãè÷íûõ îïûòîâ ñ èñïîëüçîâàíèåì ÑÊ è ÓÊ. Ñëåäóåò óïîìÿíóòü åùå î äâóõ òðîìáîëèòèêàõ, èñïîëüçóåìûõ â íàñòîÿùåå âðåìÿ â êëèíè÷åñêîé ïðàêòèêå. Îáà ïðåïàðàòà ïîëó÷åíû õèìè÷åñêîé ìîäèôèêàöèåé ÑÊ. Ïîääåðæèâàòü çàìåòíóþ ôèáðèíîëèòè÷åñêóþ àêòèâíîñòü â êðîâîòîêå óäàëîñü ñ èñïîëüçîâàíèåì àöèëôåðìåíòîâ [76]. Òàê, àíèçèëèðîâàíèåì ïî àêòèâíîìó öåíòðó êîìïëåêñà ÏÃ-ÑÊ [77], àêòèâíîñòü êîòîðîãî in vivo âîññòàíàâëèâàëàñü áëàãîäàðÿ ìåäëåííîìó äåàöèëèðîâàíèþ, ïîëó÷åí òðîìáîëèòè÷åñêèé ïðåïàðàò ïîä íàçâàíèåì àïñàê (ýìèíàçà, àíèñòðåïëàçà).  ìîäåëüíûõ îïûòàõ íà æèâîòíûõ áûëî ïîêàçàíî, ÷òî òàêîé ïðåïàðàò ìîæåò îáåñïå÷èòü ìåíüøóþ ñòåïåíü äåãðàäàöèè ôèáðèíîãåíà ïî ñðàâíåíèþ ñ èñïîëüçîâàíèåì ÓÊ è ÑÊ. Ïðè ýòîì óäàëîñü óâåëè÷èòü âðåìÿ ïîëóâûâåäåíèÿ àêòèâàòîðà èç êðîâîòîêà äî 5090 ìèí [33]. Òåì íå ìåíåå, îñòàåòñÿ óãðîçà âîçíèêíîâåíèÿ àëëåðãè÷åñêèõ ðåàêöèé, íàáëþäàþòñÿ ãåìîððàãè÷åñêèå îñëîæíåíèÿ, ÷àñòîòà ðåîêêëþçèè ñîñòàâëÿåò 10%, à öåíà ïðåïàðàòà ïðèìåðíî â òðè ðàçà ïðåâûøàåò ñòîèìîñòü ÑÊ. ×àñòîòà äîñòèæåíèÿ ðåïåðôóçèè íå îòëè÷àåòñÿ îò ñëó÷àåâ ïðèìåíåíèÿ óæå èñïîëüçóåìûõ òðîìáîëèòèêîâ.  ðåçóëüòàòå ìîäèôèêàöèè ÑÊ ðàñòâîðèìûì àëüäåãèäîäåêñòðàíîì ïîëó÷åí ïðåïàðàò ñòðåïòîäåêàçà [33]. Òàêèì îáðàçîì óäàëîñü äîáèòüñÿ ïðîëîíãèðîâàííîãî äåéñòâèÿ òðîìáîëèòèêà, òî åñòü ñîõðàíåíèÿ âûñîêîãî óðîâíÿ ôèáðèíîëèòè÷åñêîé àêòèâíîñòè (äî 80 ÷àñîâ) áåç ïîäàâëåíèÿ çâåíà êîàãóëÿöèè. ×àñòîòà ðåîêêëþçèè ñîñòàâëÿåò â ñëó- ISSN 0201 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3 29 ÎÃËßÄÈ ÷àå èñïîëüçîâàíèÿ ýòîãî ïðåïàðàòà ëèøü 5%, ÷àñòîòà àëëåðãè÷åñêèõ îñëîæíåíèé 2%, ÷àñòîòà ðåïåðôóçèè íå îòëè÷àåòñÿ îò ñëó÷àåâ ïðèìåíåíèÿ âûøåíàçâàííûõ òðîìáîëèòèêîâ. Êðîìå òîãî, íàáëþäàþòñÿ òàêæå ñëó÷àè ãåìîððàãè÷åñêèõ îñëîæíåíèé. Öåíà ïðåïàðàòà â äâà ðàçà ïðåâûøàåò ñòîèìîñòü ÑÊ. Òàêèì îáðàçîì, íåñìîòðÿ íà íàáëþäàåìûé ïðîãðåññ â ðàçðàáîòêå òðîìáîëèòè÷åñêèõ ïðåïàðàòîâ íà îñíîâå ÀÏ, êîòîðûé çíà÷èòåëüíî ïîâûñèë ýôôåêòèâíîñòü òðîìáîëèòè÷åñêîé òåðàïèè, ñ ñîæàëåíèåì ïðèõîäèòüñÿ êîíñòàòèðîâàòü, ÷òî óñïåõè òðîìáîëèçèñà îêàçàëèñü íåïîëíûìè. Ïðèáëèçèòåëüíî â 30% ñëó÷àåâ íå óäàåòñÿ äîñòè÷ü ïðîõîäèìîñòè ïîðàæåííîé àðòåðèè ïðè èíôàðêòå, à â ïîñëåäóþùèå ÷àñû è äíè (ïîñëå ââåäåíèÿ âñåõ èñïîëüçóåìûõ òðîìáîëèòèêîâ) â íåêîòîðûõ ñëó÷àÿõ íàáëþäàåòñÿ ðåîêêëþçèÿ ñîñóäà è ãåìîððàãè÷åñêèå îñëîæíåíèÿ. Ñëåäóåò îòìåòèòü òàêæå, ÷òî ïðèìåíåíèå íàèáîëåå ñîâðåìåííûõ òðîìáîëèòèêîâ, ïîëó÷åííûõ òåõíîëîãèåé ðåêîìáèíàíòíûõ ÄÍÊ (ÒÀÏ, ÏÓ), ïðè èõ âûñîêîé ñòîèìîñòè è çíà÷èòåëüíûõ ñðåäñòâàõ, çàòðà÷åííûõ íà ïðîèçâîäñòâî è èñïûòàíèå, íå ïîêàçàëî ïðåèìóùåñòâ â äîñòèæåíèè ïî-íàñòîÿùåìó ýôôåêòèâíîãî òðîìáîëèçèñà [78]. Ñðàâíèòåëüíûå êëèíè÷åñêèå èñïûòàíèÿ ÏÓ ïðè îñòðîì èíôàðêòå ìèîêàðäà ïðîäåìîíñòðèðîâàëè, ÷òî îíà ïî ïîêàçàòåëþ ñìåðòíîñòè â òå÷åíèå 30 ñóòîê îò íà÷àëà ëå÷åíèÿ ïî êðàéíåé ìåðå ýêâèâàëåíòíà ÑÊ, à ïî íà÷àëüíûì ïîêàçàòåëÿì òåðàïèè (â èíòåðâàëå 45 ìèí 40 ÷àñîâ) îòìå÷àëîñü, ÷òî ÏÓ ýêâèâàëåíòíà ÒÀÏ. Òàêèå ñêðîìíûå ðåçóëüòàòû òðîìáîëèçèñà ïîçâîëèëè ñäåëàòü âûâîä, ÷òî äî ñèõ ïîð èäåàëüíûé òðîìáîëèòèê íå íàéäåí è â ýòîé îáëàñòè íàìåòèëñÿ çàìåòíûé êðèçèñ. Ýòî, åñòåñòâåííî, ñòèìóëèðîâàëî èññëåäîâàíèÿ ïî ðàçðàáîòêå íîâûõ, áîëåå ñîâåðøåííûõ òðîìáîëèòè÷åñêèõ ïðåïàðàòîâ íà îñíîâå àêòèâàòîðîâ Ïà [78, 79]. Âàæíûìè êðèòåðèÿìè äëÿ ðàçðàáîòêè è îòáîðà íîâûõ àêòèâàòîðîâ Ïà [80] ÿâëÿåòñÿ ïîâûøåíèå ñîáñòâåííîé êàòàëèòè÷åñêîé ýôôåêòèâíîñòè ÀÏ, ïîçâîëÿþùåé äîñòè÷ü ìàêñèìàëüíîé ñêîðîñòè ëèçèñà ôèáðèíîâîãî ñãóñòêà è ìèíèìàëüíîé ëàã-ôàçû ôèáðèíîëèçà, óâåëè÷åíèå ñðîäñòâà ÀÏ ê òðîìáó, ÷òî ïðèâåäåò ê ëîêàëüíîìó îáðàçîâàíèþ ÏÌ â î÷àãå ïîðàæåíèÿ áåç àêòèâàöèè âñåé ñèñòåìû ôèáðèíîëèçà è óâåëè÷åíèå âðåìåíè ïðåáûâàíèÿ òðîìáîëèòèêà â êðîâîòîêå ïðè äîïóñòèìûõ èììóíîëîãè÷åñêèõ è òîêñèêîëîãè÷åñêèõ ïîêàçàòåëÿõ. Ýòî ïîçâîëèò ââîäèòü ïðåïàðàòû â ìåíüøèõ äîçàõ ïðè ïðîäîëæèòåëüíîì ñîõðàíåíèè è äîñòàâêå ê òðîìáó ôèáðèíîëèòè÷åñêîãî àãåíòà ñ ïîòåíöèàëîì, äîñòàòî÷íûì äëÿ ëèêâèäàöèè ïàòîëîãèè. (Âñå ýòè ïîëîæåíèÿ âåðíû è àêòóàëüíû, îäíàêî, ñ òî÷êè çðåíèÿ àâòîðà, íå ó÷èòûâàþò ðåçóëüòàòû àíòèòðîìáîöèòàðíîé òåðàïèè, î ÷åì áóäåò ñêàçàíî íèæå). Ñ ýòèõ ïîçèöèé ïðåäñòàâëÿåò èíòåðåñ ñíà÷àëà îõàðàêòåðèçîâàòü îñíîâíûå íàïðàâëåíèÿ íàó÷íûõ áèîõèìè÷åñêèõ è áèîìåäèöèíñêèõ èññëåäîâàíèé, íàïðàâëåííûõ íà ðàçðàáîòêó è èñïûòàíèå íîâûõ ôîðì ÀÏ äëÿ èñïîëüçîâàíèÿ â òðîìáîëèòè÷åñêîé òåðàïèè.  êà÷åñòâå îäíîãî èç íàïðàâëåíèé ïîèñêà îòíîñèòåëüíî äåøåâûõ òðîìáîëèòèêîâ, îáëàäàþùèõ âûñîêîé êàòàëèòè÷åñêîé ýôôåêòèâíîñòüþ, ñëåäóåò îòìåòèòü ñòàôèëîêèíàçó [81, 82]. Îíà îáëàäàåò áîëüøåé êàòàëèòè÷åñêîé ýôôåêòèâíîñòüþ è ÿâëÿåòñÿ áîëåå ôèáðèíîñïåöèôè÷íûì àãåíòîì ïî ñðàâíåíèþ ñ ÑÊ. Ìóòàíòíûå ïðîèçâîäíûå íà îñíîâå ÒÀÏ [83] è ÏÓ [84] ïðåäñòàâëÿþò ñîáîé ÀÏ íîâîãî ïîêîëåíèÿ.  êà÷åñòâå ïðèìåðà ìîæíî ïðèâåñòè ìóòàíòíîå ïðîèçâîäíîå ÒÀÏ, ïîëó÷èâøåå íàçâàíèå ðåòåïëàçà [78]. Ýòî íåãëèêîçèëèðîâàííàÿ ôîðìà ÒÀÏ, ó êîòîðîé óäàëåíû ïàëüöåîáðàçíûé äîìåí è äîìåí, ãîìîëîãè÷íûé ýïèäåðìàëüíîìó ôàêòîðó ðîñòà, à òàêæå äîìåí, ñîîòâåòñòâóþùèé êðèíãëó 1. Òàêàÿ ìîäèôèêàöèÿ îáåñïå÷èëà ïðîëîíãàöèþ äåéñòâèÿ è ïîâûøåííóþ êàòàëèòè÷åñêóþ ýôôåêòèâíîñòü ìóòàíòà ïðè àðòåðèàëüíîì òðîìáîçå ó ñîáàê, ìåíüøåå èñòîùåíèå ãåìîñòàòè÷åñêèõ áåëêîâ ïëàçìû. Ïðîëîíãèðîâàííûé è áûñòðîäåéñòâóþùèé ýôôåêò ðåòåïëàçû áûë ïîäòâåðæäåí ó ïàöèåíòîâ ñ îñòðûì èíôàðêòîì ìèîêàðäà ïîñëå äâîéíîãî áîëþñíîãî âíóòðèâåííîãî ââåäåíèÿ. Ñëåäóåò îòìåòèòü è äðóãèå íàïðàâëåíèÿ â ïîëó÷åíèè ÀÏ íîâîãî ïîêîëåíèÿ: õèìè÷åñêîå êîíúþãèðîâàíèå ÀÏ ñ àãåíòàìè, îáëàäàþùèìè âûñîêèì ñðîäñòâîì ê ôèáðèíó [85], è ïîëó÷åíèå ãèáðèäíûõ ìîëåêóë, òàê íàçûâàåìûõ õèìåð. Ñèíòåçèðîâàëè êîíúþãàò áèîñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë 59Ä8 è ÒÑL8 (àíòèòåëî ïðîòèâ ÒÀÏ, ñ Êdis. âçàèìîäåéñòâèÿ 5×10-9 Ì) êîâàëåíòíîé ñøèâêîé áèôóíêöèîíàëüíûì õèìè÷åñêèì ñîåäèíåíèåì [24]. Òàêîé êîíúþãàò ïîñëå ââåäåíèÿ êîíöåíòðèðóåò òðîìáîëèòèê íà òðîìáå è ýòî ïîçâîëÿåò óâåëè÷èòü ýôôåêòèâíîñòü òðîìáîëèçèñà â 5 ðàç, ÷òî ïîêàçàíî â îïûòàõ íà êðîëèêàõ. Ïðè ýòîì íå îáíàðóæèëè çíà÷èòåëüíîãî ðàñõîäîâàíèÿ ôèáðèíîãåíà è α2-àíòèïëàçìèíà ïëàçìû. Ïîäîáíûå ðåçóëüòàòû ïîëó÷åíû äëÿ êîíúþãàòà ñ áèîñïåöèôè÷åñêèìè àíòèòåëàìè ê ôèáðèíó è ÓÊ. Íåîáõîäèìîñòü ñíèæåíèÿ èììóíîãåííîñòè òàêèõ ïðîèçâîäíûõ äèêòóåò ïðåèìóùåñòâåííîå êîíúþãèðîâàíèå íå ñàìèõ àíòèòåë, à èõ ôðàãìåíòîâ, áåç ïîñòîÿííîé íàèáîëåå èììóíîãåííîé îáëàñòè. Ïðèìåðîì õèìåð ìîæåò ñëóæèòü ãèáðèä, ïîëó÷åííûé êîâàëåíòíûì ïðèñîåäèíåíèåì ñóëüôãèäðèëüíîé ôîðìû NH2-êîíöåâîãî ó÷àñòêà òÿæåëîé öåïè Ïà (ÏÌ), îïðåäåëÿþùåé ñâÿçûâà- 30 ISSN 0201 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3 Ë. Ä. ÒÀÐÀÍ íèå ñ ôèáðèíîì, ñ Ñ-êîíöåâûì ó÷àñòêîì òÿæåëîé öåïè ÓÊ, ñîäåðæàùåé àêòèâíûé öåíòð [86]. Õèìåðíûé àêòèâàòîð îáëàäàåò áîëüøèì ñðîäñòâîì ê ôèáðèíó ïî ñðàâíåíèþ ñ ÓÊ. Àêòèâàöèÿ Ïà ãèáðèäîì ñòèìóëèðóåòñÿ ðàñòâîðèìûì ôèáðèíîì â 10 ðàç áîëüøå ïî ñðàâíåíèþ ñ íàòèâíûì àêòèâàòîðîì. Àíàëîãè÷íàÿ õèìåðà ÀÏ ïîëó÷åíà íà îñíîâå ÒÀÏ [87]. Òàêîé àêòèâàòîð îáëàäàåò áóëüøèì ñðîäñòâîì ê ôèáðèíó è áóëüøèì ôèáðèíîëèòè÷åñêèì ïîòåíöèàëîì ïî ñðàâíåíèþ ñ õèìåðîé íà îñíîâå ÓÊ. Õèìè÷åñêàÿ ìîäèôèêàöèÿ ðåêîìáèíàíòíûõ ìóòàíòíûõ èëè ãèáðèäíûõ ôîðì ÀÏ åùå îäíî íàïðàâëåíèå â ïîëó÷åíèè âûñîêîýôôåêòèâíûõ òðîìáîëèòè÷åñêèõ àãåíòîâ. Ñ öåëüþ óâåëè÷åíèÿ âðåìåíè ïîëóâûâåäåíèÿ ÏÓ èç êðîâîòîêà ñèíòåçèðîâàëè õèìè÷åñêèé êîíúþãàò ðåêîìáèíàíòíîé íèçêîìîëåêóëÿðíîé ôîðìû ÏÓ (ó íåå îòñóòñòâóåò äîìåí, ñîîòâåòñòâóþùèé ýïèäåðìàëüíîìó ôàêòîðó ðîñòà, è êðèíãëîâûé äîìåí â ðåçóëüòàòå ðàñùåïëåíèÿ ñâÿçè Glu143-Leu144) è àëüáóìèíà [88]. Èçâåñòíî, ÷òî óñïåøíîìó ëå÷åíèþ èíôàðêòà ìèîêàðäà ñ ïîìîùüþ ÏÓ ïðåïÿòñòâóåò íåçíà÷èòåëüíîå âðåìÿ ïðåáûâàíèÿ åå â êðîâîòîêå, ÷òî çàñòàâëÿåò èñïîëüçîâàòü äëÿ ëå÷åíèÿ çíà÷èòåëüíóþ äîçó. Ïðè ââåäåíèè ÏÓ â ëå÷åáíîé äîçå îíà íå îïðåäåëÿåòñÿ â ïëàçìå áîëüíîãî óæå ÷åðåç 2 ÷àñà. À ïðè ââåäåíèè êîíúþãàòà (5,2 ìêã íà 1 ìë ïëàçìû) ÷åðåç 3 ÷àñà êîíöåíòðàöèÿ ÏÓ ñîñòàâëÿåò 0,9 ìêã/ìë. Õèìè÷åñêàÿ ìîäèôèêàöèÿ îáðàòèìîãî àöèëèðîâàííîãî ïî àêòèâíîìó öåíòðó ôðàãìåíòà ìîëåêóëû ÒÀÏ (ïîñëåäîâàòåëüíîñòü àìèíîêèñëîò 262527) è êîâàëåíòíàÿ ñøèâêà ñ ôðàãìåíòîì NH2 êîíöåâîé ïîñëåäîâàòåëüíîñòè Ïà (ïîñëåäîâàòåëüíîñòü àìèíîêèñëîò 1544) ïðèâîäèò ê 100-êðàòíîìó óâåëè÷åíèþ âðåìåíè ïîëóâûâåäåíèÿ õèìåðíîãî êîíúþãèðîâàííîãî ïðîèçâîäíîãî èç ïëàçìû è çíà÷èòåëüíîìó âîçðàñòàíèþ ýôôåêòèâíîñòè âåíîçíîãî òðîìáîëèçèñà [98]. Ñëåäóåò îòìåòèòü, ÷òî ñëîæèâøååñÿ ïðåäñòàâëåíèå î òðèããåðíîé ðîëè ÒÀÏ (èç-çà íåçíà÷èòåëüíîãî âðåìåíè ïðåáûâàíèÿ â êðîâîòîêå ) â àêòèâàöèè Ïà ïëàçìû íà ôèáðèíîâîì ñãóñòêå à, âîçìîæíî, è ÓÊ (èç-çà íåçíà÷èòåëüíûõ êîëè÷åñòâ, ïðèñóòñòâóþùèõ â ïëàçìå) ïðèâåëî ê çàêëþ÷åíèþ î òîì, ÷òî äàëüíåéøåå ðàçâèòèå ôèáðèíîëèçèñà ñâÿçàíî ñ àêòèâàöèåé Ïà ïîä äåéñòâèåì ÏÓ, ñîðáèðóþùåéñÿ â êîìïëåêñå ñ Ïà íà ñïåöèôè÷åñêèõ ó÷àñòêàõ, ïîÿâëÿþùèõñÿ íà äåãðàäèðîâàííîì ôèáðèíå. Òàêîå êîìïëåìåíòàðíîå äåéñòâèå ÒÀÏ (èëè, âîçìîæíî, è ÓÊ) êàê òðèããåðà ôèáðèíîëèçà, è ÏÓ, êàê àãåíòà, ïîääåðæèâàþùåãî ôèáðèíîëèç, îáåñïå÷èâàåò ýôôåêòèâíîå ðàñòâîðåíèå ôèáðèíîâîãî ñãóñòêà. Ýòà ñõåìà îäíîâðåìåííîãî äåéñòâèÿ àêòèâàòîðîâ áûëà àï- ðîáèðîâàíà â êëèíèêàõ íà ïàöèåíòàõ ñ äèàãíîçîì îñòðûé èíôàðêò ìèîêàðäà. Îäíîâðåìåííîå ââåäåíèå àêòèâàòîðîâ ÏÃ-ÓÊ ñ ÏÓ [80] èëè ÒÀÏ ñ ÏÓ [78] ïîçâîëèëî äîñòè÷ü ðåêàíàëèçàöèè, ñõîäíîé ñ ðåçóëüòàòàìè ìîíîòåðàïèè ïðè ñóùåñòâåííî ìåíüøèõ äîçàõ ââåäåíèÿ àêòèâàòîðîâ. Ýòî äàëî âîçìîæíîñòü óäåøåâèòü ëå÷åíèå è ñíèçèòü ïðîöåíò îñëîæíåíèé. Ïðè êîìáèíèðîâàííîì ââåäåíèè ÀÏ íàáëþäàåòñÿ ñíèæåíèå êîíöåíòðàöèè êîìïëåêñà òðîìáèíàíòèòðîìáèí III, ÷òî ñâèäåòåëüñòâóåò î ìåíüøåé âåðîÿòíîñòè ðåòðîìáîçà. Êðîìå òîãî, íàáëþäàåòñÿ íåçíà÷èòåëüíîå ñíèæåíèå êîíöåíòðàöèè ôèáðèíîãåíà, α2-àíòèïëàçìèíà è Ïà â ïåðèîä ëå÷åíèÿ è ìàëûé ïðîìåæóòîê âðåìåíè, íåîáõîäèìûé äëÿ âîññòàíîâëåíèÿ èõ ñîäåðæàíèÿ â ïëàçìå, ÷òî ñâèäåòåëüñòâóåò î òðîìáîñïåöèôè÷íîñòè äåéñòâèÿ è ñíèæåíèè âîçìîæíûõ ãåìîððàãè÷åñêèõ îñëîæíåíèé. Óäîâëåòâîðèòåëüíûå ðåçóëüòàòû ïîëó÷åíû òàêæå â îïûòàõ íà ñîáàêàõ ïðè èñïîëüçîâàíèè êîìáèíèðîâàííîé òåðàïèè ïðè ââåäåíèè ÒÀÏ è êîíúþãàòà ÓÊ ñ ôèáðèíîãåíîì [90].  ýòîì ñëó÷àå ïîêàçàíî, ÷òî ââåäåíèå ÀÏ ñ êîìïëåìåíòàðíûì ìåõàíèçìîì äåéñòâèÿ è ôàðìàêîëîãè÷åñêè ðàçëè÷èìûì ïðîôèëåì äîñòîâåðíî ñïîñîáñòâóåò äîñòèæåíèþ ýôôåêòèâíîãî òðîìáîëèçèñà in vivo. Òàêèì îáðàçîì, ïðè êëèíè÷åñêîì èñïîëüçîâàíèè òðîìáîëèòèêîâ íà îñíîâå ÀÏ, êîòîðîå ïîçâîëèëî çíà÷èòåëüíî ñíèçèòü ïîêàçàòåëü ñìåðòíîñòè ïðè èíôàðêòå ìèîêàðäà, òåì íå ìåíåå îáíàðóæèåíî ðÿä èõ ñóùåñòâåííûõ íåäîñòàòêîâ. Èçâåñòíî, ÷òî ïðèìåðíî â 30% ñëó÷àåâ ïðè ââåäåíèè ñîâðåìåííûõ òðîìáîòè÷åñêèõ ñðåäñòâ òàê è íå óäàåòñÿ âîññòàíîâèòü ïðîõîäèìîñòü ïîðàæåííîé êîðîíàðíîé àðòåðèè. Îäíà èç èçâåñòíûõ ïðè÷èí çàêëþ÷àåòñÿ â îáðàçîâàíèè in vivo òðîìáîâ, îáîãàùåííûõ òðîìáîöèòàìè, îáëàäàþùèìè ðåçèñòåíòíîñòüþ ê ïðîòåîëèçó ÏÌ, íåçàâèñèìî îò òèïà èñïîëüçóåìîãî àêòèâàòîðà. Ñëåäóåò îòìåòèòü, ÷òî òðîìáîöèòû èãðàþò îïðåäåëÿþùóþ ðîëü â òðîìáîýìáîëè÷åñêèõ êàðäèîñîñóäèñòûõ çàáîëåâàíèÿõ [91], à èõ ñêîïëåíèå ìîæåò ñïîñîáñòâîâàòü ðåîêêëþçèè êîðîíàðíûõ àðòåðèé âñëåä çà óñïåøíîé òåðàïèåé ó ïàöèåíòîâ ñ îñòðûì èíôàðêòîì ìèîêàðäà [92]. Èçâåñòíà òàêæå ñïîñîáíîñòü òðîìáîöèòîâ ñåêðåòèðîâàòü ÈÀÏ-1, êîòîðûé ñíèæàåò ôèáðèíîëèòè÷åñêèé ïîòåíöèàë, ÷òî òàêæå ìîæåò ñïîñîáñòâîâàòü ðåîêêëþçèè [93]. Ââåäåíèå èíãèáèòîðîâ àãðåãàöèè òðîìáîöèòîâ èëè ãèðóäèíà, èíãèáèðóþùåãî òðîìáèí íà ñãóñòêå äî ââåäåíèÿ ÒÀÏ, ïðèâîäèò ê óâåëè÷åíèþ ñêîðîñòè ðåïåðôóçèè è ïðåäîòâðàùåíèþ ðåîêêëþçèè [93]. Ïðåïàðàòû, èíãèáèðóþùèå àãðåãàöèþ òðîìáîöèòîâ (àñïèðèí, òèêëîïèäèí), ïîçâîëÿþò ñíèçèòü íà 2530% ðèñê èíôàðêòà ìèîêàðäà è ñìåðòíîñòè ó áîëüíûõ àòåðîñêëåðîçîì [94]. Ïåðñïåêòèâ- ISSN 0201 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3 31 ÎÃËßÄÈ íûì íàïðàâëåíèåì àíòèòðîìáîöèòàðíîé òåðàïèè ïðåäñòàâëÿåòñÿ ïðèìåíåíèå àíòàãîíèñòîâ IIb/IIIa ðåöåïòîðîâ, êàê ïðåïàðàòîâ, èíãèáèðóþùèõ êîíå÷íûé ýòàï àãðåãàöèè òðîìáîöèòîâ [94]. Êîìáèíèðîâàííîå ââåäåíèå àêòèâàòîðîâ ïëàçìèíîãåíà íàèáîëåå ñîâðåìåííàÿ òåíäåíöèÿ â òðîìáîëèòè÷åñêîé òåðàïèè íå ïðåîäîëåâàåò òðîìáîöèòàðíûõ îñëîæíåíèé, à ëèøü ïîçâîëÿåò íåñêîëüêî ñíèçèòü êîëè÷åñòâî èñïîëüçóåìûõ òðîìáîëèòè÷åñêèõ àãåíòîâ, ÷òî óäåøåâëÿåò ñòîèìîñòü ëå÷åíèÿ. Ñî÷åòàííàÿ òðîìáîëèòè÷åñêàÿ òåðàïèÿ, êðîìå òîãî, ëèøü ñíèæàåò, íî íå ïðåîäîëåâàåò òàêèå îñëîæíåíèÿ, êàê ðåîêêëþçèÿ êîðîíàðíûõ ñîñóäîâ è ãåìîððàãèè, êîòîðûå âîçíèêàþò èíîãäà âñëåä çà óñïåøíîé òðîìáîëèòè÷åñêîé òåðàïèåé. Ïî ìíåíèþ àâòîðà, äàæå íàèáîëåå ñîâðåìåííûå, ïåðñïåêòèâíûå è îõàðàêòåðèçîâàííûå âûøå íàïðàâëåíèÿ â ñîçäàíèè íîâûõ àêòèâàòîðîâ Ïà íå äàäóò ïîëîæèòåëüíûõ ðåçóëüòàòîâ áåç ó÷åòà ýôôåêòà àãðåãàöèè òðîìáîöèòîâ è âûòåêàþùèõ èç ýòîãî ïîñëåäñòâèé. Òàêæå íåîáõîäèìî ó÷èòûâàòü íàëè÷èå ñîðáèðîâàííîãî íà ôèáðèíîâîì ñãóñòêå òðîìáèíà, îñâîáîæäåíèå êîòîðîãî â êðîâÿíîå ðóñëî ïîñëå óñïåøíîé òðîìáîëèòè÷åñêîé òåðàïèè ïðèâîäèò ê ðåîêêëþçèè ñîñóäà. Èçâåñòíî, ÷òî êðîâîòå÷åíèÿ, ñîïðîâîæäàþùèå òðîìáîëèòè÷åñêóþ òåðàïèþ ïðè èñïîëüçîâàíèè ÑÊ è ÓÊ â ïðîöåññå ëå÷åíèÿ èíôàðêòà ìèîêàðäà, îáúÿñíÿþòñÿ íåîáõîäèìîñòüþ ââîäèòü èõ â çíà÷èòåëüíûõ êîëè÷åñòâàõ èç-çà îòñóòñòâèÿ ó ýòèõ àãåíòîâ òðîìáîñïåöèôè÷íîñòè äåéñòâèÿ è íåçíà÷èòåëüíîãî âðåìåíè ïðåáûâàíèÿ â êðîâîòîêå. Ñ òî÷êè çðåíèÿ àâòîðà, êðîâîòå÷åíèÿ, âîçíèêàþùèå ïðè èñïîëüçîâàíèè ôèçèîëîãè÷åñêèõ è íàèáîëåå ñïåöèôè÷íûõ ê òðîìáó àêòèâàòîðîâ ïëàçìèíîãåíà (ÒÀÏ è ÏÓ), òàêæå îáúÿñíÿþòñÿ íåîáõîäèìîñòüþ ââåäåíèÿ èõ â çíà÷èòåëüíûõ äîçàõ ïî ñðàâíåíèþ ñ ôèçèîëîãè÷åñêèìè êîíöåíòðàöèÿìè. Ýòî äîêàçûâàåò àêòóàëüíîñòü ïîëó÷åíèÿ ìîäèôèöèðîâàííûõ ôîðì ôèçèîëîãè÷åñêèõ àêòèâàòîðîâ ÏÃ, îáëàäàþùèõ áîëåå âûñîêèì ñðîäñòâîì ê òðîìáó è âûñîêîé êàòàëèòè÷åñêîé ýôôåêòèâíîñòüþ àêòèâàöèè, ÷òî ïîçâîëèò óâåëè÷èòü ôèáðèíîëèòè÷åñêèé ïîòåíöèàë. Èçâåñòíî, ÷òî íåîáõîäèìîñòü ââåäåíèÿ áîëüøèõ äîç ÀÏ îáóñëîâëåíà íåçíà÷èòåëüíûì âðåìåíåì ïîëóæèçíè àêòèâàòîðîâ â ïëàçìå.  ñëó÷àå òåðàïèè ÒÀÏ íåçíà÷èòåëüíîå âðåìÿ ïîëóâûâåäåíèÿ åãî èç êðîâîòîêà ñâÿçûâàþò ñ íåîáðàòèìûì èíãèáèðîâàíèåì ÈÀÏÃ-1. Îäíàêî íàðÿäó ñ ýòèì îáúÿñíåíèåì, ïî ïðåäïîëîæåíèþ àâòîðà, ñóùåñòâåííûì ÿâëÿåòñÿ ñíèæåíèå ýôôåêòèâíîñòè àêòèâàöèè Ïà ñ ïîìîùüþ ÒÀÏ ïðè ïàòîëîãèè, îáóñëîâëåííîå íåñêîëüêè- ìè ïðè÷èíàìè. Çíà÷èòåëüíûé âêëàä â èíãèáèðîâàíèå ïðîöåññà àêòèâàöèè Ïà ïîä äåéñòâèåì ÒÀÏ ïðè èíôàðêòå ìèîêàðäà âíîñèò ÒÀÈÔ, êîòîðûé àêòèâèðóåòñÿ âñëåä çà îáðàçîâàíèåì òðîìáà. Îí êàòàëèçèðóåò îòùåïëåíèå Ñ-êîíöåâûõ îñòàòêîâ ëèçèíà, îáðàçóþùèõñÿ íà ôèáðèíå ïî ìåðå ïðîòåîëèçà åãî ÏÌ, èãðàþùèõ ñóùåñòâåííóþ ðîëü íà âòîðîé íàèáîëåå ýôôåêòèâíîé ñòàäèè àêòèâàöèè Ïà ýòèì òèïîì àêòèâàòîðà. Êðîìå òîãî, â îïûòàõ in vitro ïîêàçàíî çíà÷èòåëüíîå ñíèæåíèå ýôôåêòèâíîñòè àêòèâàöèè Ïà ÒÀÏ (â ñëó÷àå ïðîøèòîãî ïî α- è γ-öåïÿì ôèáðèíà è ïðè âêëþ÷åíèè â òàêîé ñãóñòîê ôèáðîíåêòèíà) çà ñ÷åò óâåëè÷åíèÿ Êm ðåàêöèè áîëåå ÷åì íà ïîðÿäîê, ÷òî â ñî÷åòàíèè ñ îïûòàìè íà æèâîòíûõ ïîçâîëÿåò ïðåäïîëîæèòü íåäîñòàòî÷íîñòü ñâîáîäíîãî Ïà ïëàçìû äëÿ äîñòèæåíèÿ ìàêñèìàëüíîé ñêîðîñòè àêòèâàöèè ÒÀÏ ïðè ïàòîëîãèè. Åñòü îñíîâàíèÿ ïîëàãàòü, ÷òî íåîáõîäèìîñòü èñïîëüçîâàíèÿ çíà÷èòåëüíûõ êîëè÷åñòâ ÒÀÏ ïðè òðîìáîëèòè÷åñêîé òåðàïèè îáúÿñíÿåòñÿ òàêæå íåéòðàëèçàöèåé ïðîôèáðèíîëèòè÷åñêîé ôóíêöèè ÀÏÑ, ÷òî ñíèæàåò ôèáðèíîëèòè÷åñêèé ïîòåíöèàë.  ñëó÷àå òåðàïèè ñ ïðèìåíåíèåì ÏÓ, ôèçèîëîãè÷åñêîãî è ôèáðèíîñïåöèôè÷íîãî àêòèâàòîðà ïëàçìèíîãåíà, èíãèáèðîâàíèå àêòèâàöèè ÈÀÏÃ-1 íîñèò îáðàòèìûé õàðàêòåð è íå âëèÿåò íà åå ýôôåêòèâíîñòü. Íà íàø âçãëÿä, îïðåäåëÿþùàÿ ðîëü â èíãèáèðîâàíèè àêòèâàöèè Ïà ýòèì òèïîì àêòèâàòîðà íà ôèáðèíîâîì ñãóñòêå ïðèíàäëåæèò ÒÀÈÔà, êîíöåíòðàöèÿ êîòîðîãî ïðè ïàòîëîãèè âîçðàñòàåò. Ýòîò èíãèáèòîð çíà÷èòåëüíî ñíèæàåò ýôôåêòèâíîñòü àêòèâàöèè Ïà íà âòîðîé, îïðåäåëÿþùåé ñòàäèè àêòèâàöèè åãî íà äåãðàäèðîâàííîì ôèáðèíå, ãäå ÏÓ in vivo îòâîäèòñÿ îñíîâíàÿ ðîëü. Êàê ñëåäñòâèå âîçíèêàåò íåäîñòàòîê êîëè÷åñòâà ÏÃ, òðåáóåìîãî äëÿ äîñòèæåíèÿ ìàêñèìàëüíîé ñêîðîñòè àêòèâàöèè. Âîçìîæíî, ñóùåñòâóþò è äðóãèå ïðè÷èíû, îáúÿñíÿþùèå íåîáõîäèìîñòü ââåäåíèÿ çíà÷èòåëüíûõ äîç ýòîãî òðîìáîëèòèêà. Íà îñíîâàíèè äàííûõ ëèòåðàòóðû è ÷èñòî òåîðåòè÷åñêèõ ïðåäïîëîæåíèé, àâòîð ïðèøåë ê çàêëþ÷åíèþ, ÷òî êîìáèíèðîâàííàÿ òåðàïèÿ, îñíîâàííàÿ íà ñîâðåìåííûõ ïðåäñòàâëåíèÿõ î òðèããåðíîì ìåõàíèçìå àêòèâàöèè Ïà in vivo, äîëæíà ðàçâèâàòüñÿ ïî ëèíèè óñëîæíåíèÿ. Íåîáõîäèìî ó÷èòûâàòü âûøåïåðå÷èñëåííûå îòðèöàòåëüíûå ôàêòîðû è èñïîëüçîâàòü ñóùåñòâóþùèå íàïðàâëåíèÿ â ðàçðàáîòêå ñîâðåìåííûõ òðîìáîëèòè÷åñêèõ àãåíòîâ íîâîãî ïîêîëåíèÿ. Áåç ñîìíåíèÿ, î÷åíü âàæíî òàêæå îáðàòèòü âíèìàíèå íà ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèé è ïðåäëîæåíèé ïî àíòèòðîìáîöèòàðíîé òåðàïèè. 32 ISSN 0201 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3 Ë. Ä. ÒÀÐÀÍ THROMBOLYSIS: ACHIEVEMENTS, PROBLEMS, PROSPECTS 1. Êóäèíîâ Ñ. À. // Óêð. á³îõ³ì. æóðí. 2000. 72, ¹ 45. Ñ. 9098. 2. Sutherland J. E., Persky V. W., Brody J. A. // J. Amer. Med. Assoc. 1990. 264, N 11. P. 3178 3184. 3. Violand B. N., Castellino F. J. // J. Biol. Chem.1976. 252, N 13. P. 39063912. 4. Rickli E. F., Otawsky W. J. // Biochim. Biophys. Acta. 1971. 250, N 2. 447451. 5. Robbins K., Summaria L., Heich B. A. // J. Biol. Chem. 1967. 242, N 10. P. 23332342. 6.Wilcox R. J., Olsson C. J., Shent F. M. // Lancet. 1988. 2, N 2. Ð. 545544. 7. Iwamoto M. // Thromb. Diath. Haemorrh. 1975. 33, N 2. Ð. 577585. 8. Walen P., Kok. P., Renby N. // J. Biol. Chem. 1977. 47, N 1. Ð. 117128. 9. Davidson D. J., Higgins D. N., Castellino F. J. // Biochemistry. 1990. 29, N 8. Ð. 35853590. 10. Anderson H. V., Willerson J. T. // J. New. Engl. Med. 1993. 69, N 2. Ð. 703709. 11. Collen D., Lijnen H. R. // Blood. 1991. 78, N 7. Ð. 31143124. 12. Brokway W. J., Castellino F. J. // Biochemistry. 1974. 13, N 5 Ð.20632068. 13. Hiaogiang W., Xinli L., Jeffrey L. A. // Science. 1998. 281, N 4. Ð. 16621668. 14. Wulf W. J., Mertz E. F. // Canad. J. Biochem., 1969. 47, N 2. Ð. 929935. 15. Davies M. C., Englert M. E., Renzo E. C. // J. Biol. Chem. 1964. 239, N 8. Ð. 26152623. 16. Raidy K., Markus C. // Biochem. Biophys. Res. Communs. 1973. 51, N 2. Ð. 672633. 17. Mc Clintock D. K., Englert M. E., Dsiobkowaki G., Shederker E. H. // Biochemistry. 1974. 13, N 26. Ð. 53345338. 18. Robbins K. C., Summaria L., Haich B. A. // J. Biol. Chem. 1967. 242, N 10. Ð. 23332342. 19. Boxrud P. D., Fay W. P., Bock P. E. // Ibid. 2000. 275, N 24. Ð. 1457914589. 20. Wang S., Rul G. L., Hedstrom L. // Eur. J. Biochem. 2000. 267, N 8. Ð. 39944001. 21. Boxrud D. B., Bock P. E. // Biochemistry. 2000. 45, N 27. Ð. 1397413981. 22. LeiTong L., Huung A., Reed G. L. // Ibid. 39, N 11. Ð. 47404745. 23. Boxrud P. D., Ingrid M. A., Fay W. P., Bock P. E. // J. Biol. Chem. 2001. 276, N 45. Ð. 26034 26089. 24. Haber E., Quertermous T., Matsueda G. R., Marschal S. R. // Science. 1989. 243, N 1. Ð. 51 56. 25. Ëàøêóí Â. Â. / Àâòîð. äèñ. êàí. ìåä. íàóê , Çàïîðîæüå. 2000. Èçä-âî Ãîñóä. ìåä. óí-ò. 26. Ong E. B., Jonson A. J., Scheellman G. // Biochim. Biophys. Acta. 1976. 429, N 1. Ð. 252 257. 27. Âåðåìååíêî Ê. Í., Êèçèì À. È. // Âîïðîñû ìåä. õèìèè. 1984. 30, ¹ 1. Ð. 1322. 28. Binder B. R., Beckmann R., Jorg M. // Thrombos. and Haemost. 1987. 46, N 1. Ð. 1220. 29. Thorsen S., Glas-Glenwalt P., Astrup P. // Thrombos. Diathes. Haemorrh. 1989. 261, N 1. Ð. 313324. 30. Fears R. // Biochem. J. 1989. 261, N 1. Ð. 313324. 31. Maksimenko A. V., Torchilin V. P. // Thrombos. Res. 1985. 38, N 1 Ð. 289295. 32. Peltz B., Hardt T. A., Mangel W. V. // Biochemistry. 1982. 21, N 13. Ð. 27982804. 33. Ìàêñèìåíêî À. Â. // Ìîëåêóë. áèîë. 1995. 29, ¹ 1. Ñ. 3660. 34. Mattsson C., Nyberg- Frrhenius V., Wallen P. // Thrombos. Res. 1981. 21, N 2. Ð. 535545. 35. Cole E. R., Bachmann F. W. // J. Biol. Chem. 1977. 252, N 8. Ð. 37293757. 36. Rijken D. C., Wijn Gaards M., Zaal De Long // Biochim. Biophys. Acta. 1979. 580, N 1. Ð. 140 153. 37. Aasted B. // Ibid. 1980. 621, N 1. Ð. 241254. ISSN 0201 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3 33 L. D. Taran Palladin Institute of Biochemistry, National Academy of Sciences of Ukraine, Kyiv; e-mail: [email protected] Summary Data on the mechanism of plasminogen activation by streptokinase, tissue and urokinase-type plasminogen activators (PAs) is reviewed. The regulatory role of fibrin in plasminogen activation involving its direct interaction with tissue-type PA and indirect interaction with streptokinase and urokinasetype PAs is demonstrated. Information on the current PAs use in thrombolytic therapy is also presented. The complications arising with administration of such thrombolytic agents are analyzed and the causes of complications are supposed. Recent information on the development of new PAs is also reviewed. The results of studies of PA mutant derivatives synthesized by recombinant DNA techniques as well as chimeric (hybrid) forms of PAs and their chemically synthesized conjugates are presented. The trend in search for PAs is analyzed. A new direction in the study of PAs for combined plasminogen activation and further development of the methods of thrombolytic therapy is outlined. K e y w o r d s: plasminogen activators, recombinant forms, chemical conjugates, chimeric forms, fibrinolytic activity, thrombolysis. ÎÃËßÄÈ 38. Pennica D., Holmes W. E., Kohr W., Harkins R. N. // Nature. 1983. N 1301. Ð. 214221. 39. Nechein M. E., Fredenburgh J. C., Larsen J. R. // J. Biol. Chem. 1990. 265, N 23. Ð. 21541 21548. 40. Anton J. G., Horreverents A. J. G. , Smilde A. et al. // Ibid. 1994. 269, N 16. Ð. 1263912644. 41. Rijken D. C., Heylayerts M. S., Collen D. // Ibid. 1982. 257, N 25. Ð. 29202925. 42. Heylayerts M. S., Rieken D. C., Lienen H. R., Collen D. // Ibid. N 7. Ð. 29122916. 43. Horreverents A. J. G., Pannekock H., Nesheim M. E. // Ibid. 1997. 272, N 5. Ð. 21832191. 44. Norman B., Wallen P., Ranby M. // Eur. J. Biochem. 1985. 149, N 1. Ð. 93200. 45. Rijken D. C., Hoylayerts M. S., Collen D. // J. Biol. Chem. 1982. 257, N 9. Ð. 29202925. 46. Òàðàí Ë. Ä., Ìàêîãîíåíêî Å. Ì., Íàçàðåíêî Í. À., Êóäèíîâ Ñ. À. // Áèîõèìèÿ. 1986. 51, ¹ 8. Ñ. 12561261. 47. Ìàêîãîíåíêî Å. Ì., Êèðïà Ñ. À., Ëóãîâñêîé Ý. Â., Íàçàðåíêî Í. À. // Òàì æå. 1987. 52, ¹ 9. Ð. 17461752. 48. Fredenburg J. C., Nesheim M. E. // J. Biol. Chem. 1992. 267, N 22. Ð. 2615026156. 49. Suenson E., Lut Zen J., Thorsen S. // Eur. J. Biochem. 1984. 140, N 1. Ð. 513522. 50. Horreverents A. J. G., Pannekock H., Nesheim M. J. // J. Biol. Chem. 1997 272, N 5. Ð. 2176 2182. 51. Suenson E., Thorsen S. // Bochemistry. 1988. 27, N 4. Ð. 24352443. 52. Suenson E., Bjerrum P., Holm et al. // J. Biol. Chem.1990. 265, N 25. Ð. 2222822237. 53. Lloud D. A., Cederholm-Williams S. A., Shorp A. A. // Thrombos. and Haemost. 1981. 46, N 1. Ð. 163169. 54. Äðóæèíà Í. Í., Ìàêîãîíåíêî Å. Ì., ßêîâëåâ Ñ. À. // Äîêëàäû ÀÍ ÑÑÑÐ. 1993. Ñåð. Â, ¹ 1. Ñ. 151154. 55. Grancha S., Estelles A., Falko C., Chiraella M. // Fibrinolys. and Proteol. 1998. 12, N 1. Ñ. 5360. 56. Eruksin P., Hamsten A. // Fatty Acids. 1997. 57, N 1. Ð. 516520. 57. Redetz A., Nicolini F. A., Malycky J. L., Topol F. J. // Circulation. 1996. 93, N 3. Ð. 13281330. 58. Refino C. J., Schmitt D., Pater C., Eaton D. // Fibrinolys. and Proteol. 1998 12, N 1. Ð. 29 31. 59. Nagashima M., Werner M., Zhad L., Light D. R. // Thromb. Res. 2000. 98, N 1. Ð. 337342. 60. Druzhina N. N., Yakovlev S. A., Makogonenko E. M. // Thrombos. and Haemost. 1995. 73, N 3. Ð. 11301136. 61. Rezaie A. R. // J. Biol. Chem. 2001. 276, N 21. Ð. 1556715570. 62. Fay W. P., Ower W. J. // Biochemistry. 1989. 28, N 13. Ð. 57735778. 63. Fouw N. J., Noverkate F., Bertina R. N. et al. // Blood. 1986. 67, N 4. Ð. 11891192. 64. Husocin S. S., Gurevitch V., Lipinsky B. // Thrombos. and Haemost. 1981. 46, N 1. Ð. 1116. 65. Wun T. C., Ossiwsky L., Reish E. // J. Biol. Chem. 1982. 257, N 15. Ð. 72627268. 66. Wun T. C., Schleuning W. D., Reich E. // Ibid. 1982. 257, N 7. Ð. 32763283. 67. Fleury V., Lijnen H. R., Angles-Cano E. // Ibid. 1993. 268, N 19. Ð. 1855418559. 68. Collen D., Zamarron C., Lijnen H. R. // Ibid. 1986. 261, N 4. Ð. 12591266. 69. Suclly M. F., Ellis V., Watakike G., Kakkar V. V. // Arch. biochem. biophys. 1989. 268, N 1. Ð. 434446. 70. Pannel A., Angles Comno E., Gurevich V. // Thrombos. and Haemost. 1990. 64, N 1. Ð. 556 558. 71. Lijnen H. R., Wreedi K., Demorsin T., Collen D. // Ibid. 1984 52, N 1. Ð. 3132. 72. Gurevich V., Pannel R., Louice S., Kelliy P. // J. Clin. Invest. 1984. 73, N 4. Ð. 17311739. 73. Liu J. N., Curevich V. // Biochemistry. 1992. 31, N 13. Ð. 63116317. 74. Dederk P. J., Lijnen H. R., Verstreken M. et al. // Blood. 1990. 75, N 4. Ð. 17941800. 75. Badylak S. F., Voytik S. L., Henkin J., Burke S. L. // Thrombos. Res. 1991 62, N 1. Ð. 115126. 76. Smith R. A. J., Dupe P. J., English P. D. // Nature. 1981. 290, N 1. Ð. 505508. 77. Dupe R. J., English P.D., Smith R. A. J. et al. // Thrombos. and Haemost. 1984. 51, N 1. Ð. 248 253. 78. Ìàêñèìåíêî À. Â. // Áèîîðãàí. õèìèÿ. 1999. 25, ¹ 8. Ð. 563571. 79. Tebbe U., Michels R., Adse Y. J. et al. // J. Amer. Coll. Cardiol. 1998. 31, N 1. Ð. 487 493. 80. Pinder G., Kolhler M., Sen S. et al. // Thrombos. Res. 1991 62, N 1. Ð.115162. 81. Lijnen H. R., Collen D. // J. Biol. Chem. 1993. 268. Ð. 82848289. 82. Lijnen H. R., Hoef B. V., De Cock F. // Ibid. 1991. 266, N 14. Ð. 1182611832. 83. Short R. // Brit. J. Cardiol. 1996. 3, N 1. Ð. 8993. 84. Liu J. N., Tang W., Sun Z. Y et. al. // Biochemistry. 1996. 35, N 16. Ð. 1407014076 85. Phaneuf M. D., Ozakic K., Johnstone M. T. et al. // Thrombos. and Haemost. 1994. 71, N 1. Ð. 481487. 86. Robbins K. C., Tanaka G. // Biochemistry. 1986. 25, N 8. Ð. 36033611. 87. Robbins K. C., Borewisha A. J. // Ibid. 1987. 261, N 10. Ð. 46614668. 34 ISSN 0201 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3 Ë. Ä. ÒÀÐÀÍ 88. Breton J., Pezzi N., Molirari L. // Eur. J. Biochem. 1995. 235, N 1. Ð. 563569. 89. Robinson J. H., Browne M. J., Carey J. E. et al. // Thrombos. Res. 1992. 86, N 2. Ð. 548552. 90. Ìàêñèìåíêî À. Â. // Õèì. ôàðìàöåâò. æóðí. 1998. 32, ¹1. Ñ. 3740.1994. 71, N 1. Ð. 481 487. 91. Jang J. K., Gold H. R., Ziskind A. A. et al. // Circulation. 1989. 79, N 2. Ð. 920928. 92. Dewerchin M., Lijnen H. R., Stassen J. M., et al. // Blood. 1991. 78, N 3. Ð. 10051018. 93. Topol E. J. // Circulation. 1998. 97, N 1. Ð. 211 218. 94. Äîáðîâîëüñêàÿ À. Á., Òèòàåâà Å. Â. // Áèîõèìèÿ. 2002. 67, ¹ 1. Ñ. 116126. Ïîëó÷åíî 28.07.2003 ISSN 0201 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3 35
