ТРОМБОЛИЗИС: ДОСТИЖЕНИЯ, ПРОБЛЕМЫ, ПЕРСПЕКТИВЫ

ÓÄÊ 612. 115 12: 577. 112. 089
ÒÐÎÌÁÎËÈÇÈÑ: ÄÎÑÒÈÆÅÍÈß, ÏÐÎÁËÅÌÛ, ÏÅÐÑÏÅÊÒÈÂÛ
Ë. Ä. ÒÀÐÀÍ
Èíñòèòóò áèîõèìèè èì. À. Â. Ïàëëàäèíà ÍÀÍ Óêðàèíû, Êèåâ;
å-mail: taran48@yandex.ru
 îãëÿä³ ï³äñóìîâàíî äàí³ ùîäî ìåõàí³çìó àêòèâàö³¿ ïëàçì³íîãåíó òêàíèííèì àêòèâàòîðîì,
ñòðåïòîê³íàçîþ ³ óðîê³íàçîïîä³áíèìè àêòèâàòîðàìè. Ïîêàçàíî ðåãóëÿòîðíó ðîëü ô³áðèíó â àêòèâàö³¿
ïëàçì³íîãåíó òêàíèííèì àêòèâàòîðîì, ùî âèÿâëÿº ïðÿìó ñïîð³äíåí³ñòü äî ô³áðèíó, òà ñòðåïòîê³íàçè ³
óðîê³íàçîïîä³áíèìè àêòèâàòîðàìè, ùî íå ìàþòü òàêî¿ ñïîð³äíåíîñò³. Íàâåäåíî ³íôîðìàö³þ ïðî àêòèâàòîðè ïëàçì³íîãåíó (ÀÏ), ÿê³ âèêîðèñòîâóþòüñÿ çàðàç ÿê òðîìáîë³òèêè. Ïðîàíàë³çîâàíî óñêëàäíåííÿ,
ùî âèíèêàþòü çà ââåäåííÿ òàêèõ òðîìáîë³òè÷íèõ àãåíò³â, âèñëîâëåíî ïðèïóùåííÿ ùîäî ïðè÷èíè âèíèêíåííÿ öèõ óñêëàäíåíü. Äèñêóòóþòüñÿ ðåçóëüòàòè äîñë³äæåíü ìóòàíòíèõ ïîõ³äíèõ ÀÏ, îäåðæàíèõ çà
òåõíîëî㳿 ðåêîìá³íàíòíèõ ÄÍÊ, à òàêîæ õ³ìåðíèõ (ã³áðèäíèõ) ôîðì ÀÏ òà ¿õí³õ êîí’þãàò³â, îäåðæàíèõ
õ³ì³÷íèìè ìåòîäàìè. Ïðîàíàë³çîâàíî òåíäåíö³þ ïîøóêó ÀÏ. Îõàðàêòåðèçîâàíî íîâèé íàïðÿìîê ó äîñë³äæåíí³ àêòèâàòîð³â çà óìîâè îäíî÷àñíîãî ââåäåííÿ ¿õ ³ ïîäàëüøèé ðîçâèòîê ìåòîä³â òðîìáîë³òè÷íî¿
òåðàﳿ.
Ê ë þ ÷ î â ³ ñ ë î â à: àêòèâàòîðè ïëàçì³íîãåíó, ðåêîìá³íàíòí³ ôîðìè àêòèâàòîð³â ïëàçì³íîãåíó, õ³ì³÷í³ êîí’þãàòè ³ õ³ìåðí³ ôîðìè, ô³áðèíîë³òè÷íà àêòèâí³ñòü, òðîìáîë³çèñ.
Ó
æå ìíîãèå äåñÿòèëåòèÿ ñåðäå÷íî-ñîñóäèñòûå çàáîëåâàíèÿ äåðæàò ïåðâåíñòâî ïî ðàñïðîñòðàíåííîñòè [1]. Äàæå â íàèáîëåå
ðàçâèòûõ ñòðàíàõ ìèðà äîëÿ ëåòàëüíûõ èñõîäîâ
îò ñåðäå÷íî-ñîñóäèñòûõ çàáîëåâàíèé ñîñòàâëÿåò
â îáùåì ïîêàçàòåëå ñìåðòíîñòè 36–39% â îñíîâíîì çà ñ÷åò èíôàðêòà ìèîêàðäà [2]. Âñå ýòî îáóñëîâèëî íåîáõîäèìîñòü ïðîâåäåíèÿ áèîõèìè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé, ïîçâîëÿþùèõ ðàñêðûòü ñóòü
ïðîöåññîâ, ëåæàùèõ â îñíîâå òðîìáîîáðàçîâàíèÿ
è ïðåäëîæèòü ýôôåêòèâíûå òðîìáîëèòè÷åñêèå
ïðåïàðàòû. Áëàãîäàðÿ ïðèìåíåíèþ ñîâðåìåííîé
âíóòðèâåííîé òðîìáîëèòè÷åñêîé òåðàïèè ïðè
îñòðîì èíôàðêòå ìèîêàðäà óäàëîñü íà 24–27%
ñíèçèòü ñìåðòíîñòü [2]. Íåîáõîäèìî îòìåòèòü,
÷òî ðàçâèâàåòñÿ è õèðóðãè÷åñêîå íàïðàâëåíèå â
ýòîé îáëàñòè [1]. Åñòåñòâåííî, ýôôåêòèâíûå òðîìáîëèòè÷åñêèå ëåêàðñòâåííûå ïðåïàðàòû îáëàäàþò íåñîìíåííûì ïðåèìóùåñòâîì ïåðåä îïåðàòèâíûì âìåøàòåëüñòâîì.
 íàñòîÿùåé ðàáîòå àâòîðîì ñäåëàíà ïîïûòêà ñóììèðîâàíàòü ñîâðåìåííûå ïðåäñòàâëåíèÿ îá
àêòèâàöèè ïëàçìèíîãåíà ðàçëè÷íûìè òèïàìè àêòèâàòîðîâ è îá èñïîëüçóåìûõ â ìèðîâîé ìåäèöèíñêîé ïðàêòèêå òðîìáîëèòèêàõ. Âûñêàçàíû òàêæå ïðåäïîëîæåíèÿ, îáúÿñíÿþùèå íåñîâåðøåíñòâî
òðîìáîëèçèñà. Îáîáùåíû è êðèòè÷åñêè ïðîàíàëèçèðîâàíû ðåçóëüòàòû áèîõèìè÷åñêèõ è áèîìåäèöèíñêèõ èññëåäîâàíèé ïî ñîçäàíèþ íîâûõ
âûñîêîýôôåêòèâíûõ òðîìáîëèòè÷åñêèõ àãåíòîâ.
 êà÷åñòâå òðîìáîëèòèêîâ â íàñòîÿùåå âðåìÿ èñïîëüçóþò ãëàâíûì îáðàçîì àêòèâàòîðû
ISSN 0201— 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3
ïëàçìèíîãåíà (ÀÏ) è èõ ìîäèôèöèðîâàííûå
ôîðìû, òàê êàê ïëàçìèíîãåí (ÏÃ) ÿâëÿåòñÿ ïðåäøåñòâåííèêîì ïëàçìèíà (ÏÌ) – ôåðìåíòà, îñóùåñòâëÿþùåãî ëèçèñ òðîìáà in vivo [3–6]. Â
ñòðóêòóðå íàòèâíîé ôîðìû ÏÃ (Glu-ÏÃ) îñîáàÿ
ðîëü ïðèíàäëåæèò ïÿòè äîìåíàì, ñîîòâåòñòâóþùèì ïÿòè ãîìîëîãè÷íûì êðèíãëîâûì ñòðóêòóðàì, êîòîðûå îïðåäåëÿþò âçàèìîäåéñòâèå Ïà ñ
ôèáðèíîì, α2-àíòèïëàçìèíîì è ñ èçâåñòíûìè
èíãèáèòîðàìè ôèáðèíîëèçà – àìèíîêàïðîíîâîé
êèñëîòîé (6-ÀÃÊ) è åå àíàëîãàìè [7]. Ïðè àêòèâàöèè ÏÃ âñåìè èçâåñòíûìè àêòèâàòîðàìè ïîñëå
ðàñùåïëåíèÿ ñâÿçè Arg561-Val562 îáðàçóåòñÿ àêòèâíûé ôåðìåíò ÏÌ [8, 9].
Îäíîé èç ïåðâîé â êëèíèêå ñòàëà ïðèìåíÿòüñÿ ñòðåïòîêèíàçà (ÑÊ) [10,11], êîòîðàÿ íå
ÿâëÿåòñÿ ôèçèîëîãè÷åñêèì àêòèâàòîðîì ÏÃ. Ýòî
áåëîê, êîòîðûé ïðîäóöèðóåòñÿ ãåìîëèòè÷åñêèìè
ñòðåïòîêêîêàìè ñ Ìm 47 êÄà è ñîñòîèò áîëåå ÷åì
èç 400 àìèíîêèñëîòíûõ îñòàòêîâ [12]. Èçâåñòíî,
÷òî îäíîöåïî÷å÷íàÿ ìîëåêóëà ÑÊ íå èìååò äèñóëüôèäíûõ ñâÿçåé è ñîñòîèò èç òðåõ äîìåíîâ,
êîòîðûå îáîçíà÷àþòñÿ, íà÷èíàÿ ñ NÍ2-êîíöåâîé
÷àñòè ìîëåêóëû, êàê α, β è χ [13]. Îñîáåííîñòüþ
ýòîãî àêòèâàòîðà ÿâëÿåòñÿ îòñóòñòâèå ýíçèìàòè÷åñêîé àêòèâíîñòè íàðÿäó ñî ñïîñîáíîñòüþ ïðåâðàùàòü Ïà â ÏÌ. Êðîìå òîãî, îíà îáëàäàåò âèäîâîé ñïåöèôè÷íîñòüþ; ñïîñîáíà àêòèâèðîâàòü
Ïà ÷åëîâåêà, êîøêè, ñîáàêè, êðîëèêà, íî íå äåéñòâóåò íà ïðîôåðìåíò áûêà è ëîøàäè [14].  íàñòîÿùåå âðåìÿ ñ÷èòàþò, ÷òî ÑÊ îáðàçóåò ñòåõèîìåòðè÷åñêèé êîìïëåêñ ñ Ïà (è ÏÌ), êîòîðûé
25
ÎÃËßÄÈ
îáëàäàåò àêòèâàòîðíûì äåéñòâèåì íà ÏÃ [15].
Óñòàíîâëåíî, ÷òî àêòèâíûé öåíòð ëîêàëèçîâàí â
ïëàçìèíîãåíîâîé, à íå ñòðåïòîêèíàçíîé ÷àñòè
êîìïëåêñà [16]. Ïðè âçàèìîäåéñòâèè Glu-ÏÃ ñî
ñòåõèîìåòðè÷åñêèìè êîëè÷åñòâàìè ÑÊ ñíà÷àëà
Glu-ÏÃ ïðåâðàùàåòñÿ â Glu-ÏÌ, à çàòåì GluÏÌ ïðåâðàùàåòñÿ â Lys-ÏÌ ïðè îòùåïëåíèè
NÍ2-êîíöåâîãî ïåïòèäà [17]. Ôèáðèíîãåí è ôèáðèí óñêîðÿþò àêòèâàöèþ Glu-ÏÃ ïîä äåéñòâèåì
ÑÊ, ïðè ýòîì àêòèâàòîð íå îáëàäàåò ñïîñîáíîñòüþ ñâÿçûâàòüñÿ íè ñ ôèáðèíîãåíîì, íè ñ ôèáðèíîì [18].  íàñòîÿùåå âðåìÿ ñ÷èòàþò, ÷òî àêòèâàöèÿ Glu-Ïà ñ ïîìîùüþ ÑÊ ïðîèñõîäèò ïî
óíèêàëüíîìó ìåõàíèçìó, âêëþ÷àþùåìó êîíôîðìàöèîííûå ïðåîáðàçîâàíèÿ â ìîëåêóëå ïðîôåðìåíòà ïðè èõ âçàèìîäåéñòâèè, â ðåçóëüòàòå ÷åãî
ïðîèñõîäèò îáðàçîâàíèå àêòèâíîãî êàòàëèòè÷åñêîãî öåíòðà â îòñóòñòâèå ïðîòåîëèçà [19, 20]. Â
äàëüíåéøåì ìåõàíèçì íåýíçèìàòè÷åñêîãî ïðåâðàùåíèÿ Ïà â ÏÌ ïîä äåéñòâèåì ÑÊ áûë èññëåäîâàí áîëåå äåòàëüíî [21–23]. Íàòèâíàÿ ôîðìà
ÏÃ íàõîäèòñÿ â êîìïàêòíîé êîíôîðìàöèè, îáóñëîâëåííîé âíóòðèìîëåêóëÿðíûì âçàèìîäåéñòâèåì NÍ2-êîíöåâîãî ïåïòèäà ñ êðèíãëàìè 4 è
5. Îòùåïëåíèå NÍ2-êîíöåâîãî ïåïòèäà â ìîëåêóëå Glu-ÏÃ ïðèâîäèò ê ïåðåõîäó ÏÃ èç êîìïàêòíîé êîíôîðìàöèè ê áîëåå îáúåìíîé, êîòîðàÿ ðåàëèçóåòñÿ â ìîëåêóëå Lys-ÏÃ. Ðàçðóøåíèå
âíóòðèìîëåêóëÿðíîãî âçàèìîäåéñòâèÿ â ìîëåêóëå Glu-Ïà 6-ÀÃÊ èëè åå àíàëîãàìè òàêæå ïðèâîäèò ê ïåðåõîäó Glu-Ïà îò êîìïàêòíîé ê îáúåìíîé êîíôîðìàöèè, íî ýòà êîíôîðìàöèÿ íå èäåíòè÷íà îáúåìíîé êîíôîðìàöèè Lys-ÏÃ. Ïðåäïî÷òèòåëüíîå ñâÿçûâàíèå ÑÊ ñ îáúåìíîé êîíôîðìàöèåé Ãëó-Ïà ïî ñðàâíåíèþ ñ êîìïàêòíîé êîíôîðìàöèåé, îáóñëîâëèâàåò òàêîé ïåðåõîä Glu-ÏÃ
ïîñðåäñòâîì âçàèìîäåéñòâèÿ ÑÊ ïî ëèçèíñâÿçûâàþùèì ó÷àñòêàì, ÷òî ïðèâîäèò ê îáðàçîâàíèþ êîìïëåêñà ÏÃ-ÑÊ. Êàê áûëî óñòàíîâëåíî, ìåõàíèçì êîíôîðìàöèîííîé àêòèâàöèè ïðåäïîëàãàåò ââåäåíèå îñòàòêà Ile1 àìèíîêèñëîòíîé
ïîñëåäîâàòåëüíîñòè ÑÊ â ïîëîæåíèå Val562 àìèíîêèñëîòíîé ïîñëåäîâàòåëüíîñòè Ïà è ýòî äåéñòâóåò êàê òðèããåð, èíèöèèðóþùèé ïîñòóïàòåëüíîå ïðåîáðàçîâàíèå Glu-Ïà â îáúåìíóþ êîíôîðìàöèþ è ðàññìàòðèâàåòñÿ êàê ðàííÿÿ ñòàäèÿ àêòèâàöèè.  äàëüíåéøåì ïðîèñõîäèò ñòàáèëèçàöèÿ àêòèâíîãî áåëêà, êàê ðåçóëüòàò âûñîêîãî ñðîäñòâà ÑÊ ê àêòèâíîé êîíôîðìàöèè êàòàëèòè÷åñêîãî äîìåíà.
 íàñòîÿùåå âðåìÿ ÑÊ – íàèáîëåå äåøåâûé
òðîìáîëèòèê, êîòîðûé øèðîêî èñïîëüçóåòñÿ â
ìåäèöèíñêîé ïðàêòèêå [24, 25]. Åñëè â òå÷åíèå
÷åòûðåõ ÷àñîâ ïîñëå ââåäåíèÿ ÑÊ â êðîâÿíîå
ðóñëî ïðè èíôàðêòå ìèîêàðäà óäàâàëîñü äîñòè÷ü
ïðîõîäèìîñòè ïîðàæåííîé êîðîíàðíîé àðòåðèè,
òî ñìåðòíîñòü ñíèæàëàñü îò 81% äî 23%. Îäíàêî
ÑÊ íå îáëàäàåò ôèáðèíîñïåöèôè÷íûì äåéñòâèåì è âåñüìà àíòèãåííà. Èç-çà îòñóòñòâèÿ ñïîñîáíîñòè ñâÿçûâàòüñÿ ñ ôèáðèíîâûì ñãóñòêîì, èñïîëüçîâàíèå ýòîãî àãåíòà ñîïðîâîæäàåòñÿ çàìåòíûì èñòîùåíèåì áåëêîâ ïëàçìû è, ïðåæäå âñåãî, ôèáðèíîãåíà, ÷òî â íåêîòîðûõ ñëó÷àÿõ ïîëíîñòüþ ïàðàëèçóåò ïðîöåññ ñâåðòûâàíèÿ è ïðèâîäèò ê ëåòàëüíîìó èñõîäó. Êðîìå òîãî, ââåäåíèå ÑÊ ÷àñòî âûçûâàåò àëëåðãèþ èç-çà åå àíòèãåííîñòè è â 15–17% ñëó÷àåâ íàáëþäàåòñÿ ðåîêêëþçèÿ, à âðåìÿ ïîëóâûâåäåíèÿ åå èç êðîâîòîêà
ñîñòàâëÿåò 15–25 ìèíóò.
Óðîêèíàçà (ÓÊ) – ôèçèîëîãè÷ñêèé àêòèâàòîð ÏÃ, êîòîðûé òàêæå äàâíî èñïîëüçóåòñÿ â ìåäèöèíñêîé ïðàêòèêå â êà÷åñòâå òðîìáîëèòèêà. Åå
âûäåëÿþò èç ìî÷è ÷åëîâåêà, èç êóëüòóðû ïî÷å÷íûõ êëåòîê ýìáðèîíà ÷åëîâåêà, à òàêæå ìåòîäàìè
ãåííîé èíæåíåðèè [26, 27]. Óñòàíîâëåí ìåõàíèçì
àêòèâàöèè Glu-ÏÃ ñ ïîìîùüþ ÓÊ [28]. Íà ïåðâîé ñòàäèè àêòèâàòîð êàòàëèçèðóåò ðàñùåïëåíèå
ñâÿçè Arg561-Val562 â ìîëåêóëå ïðîôåðìåíòà è îáðàçóåòñÿ Glu-ÏÌ. Çàòåì ñëåäóåò ïðåâðàùåíèå GluÏÌ â Lys-ÏÌ â ðåçóëüòàòå îòùåïëåíèÿ NÍ2êîíöåâîãî ïåïòèäà. ÓÊ íå îáëàäàåò ñïåöèôè÷åñêèì ñðîäñòâîì ê ôèáðèíó [29–31]. Åñëè ôèáðèíîâûé ñãóñòîê îáðàçîâàòü â ïðèñóòñòâèè ÓÊ, òî
èç íåãî ýêñòðàãèðóåòñÿ ëèøü 6% àêòèâíîñòè àêòèâàòîðà. Ïðèñóòñòâèå ôèáðèíîãåíà èëè ôèáðèíà óâåëè÷èâàåò àêòèâàòîðíóþ àêòèâíîñòü ÓÊ. Ïðè
ýòîì íè ôèáðèíîãåí, íè ôèáðèí íå âëèÿþò íà
àêòèâíîñòü è ñïåöèôè÷íîñòü ÓÊ èëè íà àêòèâíîñòü ÏÌ. Ñëåäîâàòåëüíî, óñêîðåíèå àêòèâàöèè
Glu-Ïà ñëåäóåò îòíåñòè íà ñ÷åò êîíôîðìàöèîííûõ èçìåíåíèé, ïðîèñõîäÿùèõ ïðè åãî âçàèìîäåéñòâèè ñ ôèáðèíîãåíîì èëè ôèáðèíîì. Èìåííî
ïîýòîìó Lys-Ïà àêòèâèðóåòñÿ ñ áîëüøåé ñêîðîñòüþ ïî ñðàâíåíèþ ñ íàòèâíûì ÏÃ, à íàëè÷èå
èëè îòñóòñòâèå ôèáðèíà íå âëèÿåò íà àêòèâàöèþ
ýòîé ôîðìû ÏÃ. Ïîêàçàíî, ÷òî ïðåäïîëàãàåìûå
êîíôîðìàöèîííûå èçìåíåíèÿ â ìîëåêóëå GluÏÃ ïðè åãî àêòèâàöèè ÓÊ â ïðèñóòñòâèè ëèçèíà
ïðèâîäÿò ê óâåëè÷åíèþ ñðîäñòâà àêòèâàòîðà ê
ïðîôåðìåíòó â 10 ðàç [32]. ÓÊ ñåêðåòèðóåòñÿ â
êðîâîòîê â âèäå ïðîôåðìåíòà ïðîóðîêèíàçû (ÏÓ).
Ïðè ðàñùåïëåíèè ÏÌ ñâÿçè Lys158-Ile159 â åãî
ìîëåêóëå ïðîèñõîäèò îáðàçîâàíèå àêòèâíîãî äâóõöåïî÷å÷íîãî àêòèâàòîðà, êîòîðûé â êðîâîòîêå íåîáðàòèìî èíãèáèðóåòñÿ èíãèáèòîðîì àêòèâàòîðà
ïëàçìèíîãåíà-1 (ÈÀÏ-1). Ýòî âûñîêîìîëåêóëÿðíàÿ ôîðìà ÓÊ. Â äàëüíåéøåì ïðè ðàñùåïëåíèè
ñâÿçè Lys135-Lys136 ïîä âîçäåéñòâèåì ÏÌ ïðîèñõîäèò îáðàçîâàíèå äâóõöåïî÷å÷íîé íèçêîìîëåêóëÿðíîé ôîðìû ÓÊ. Îíà òàêæå èíãèáèðóåòñÿ
ÈÀÏ-1.
 êëèíè÷åñêîé ïðàêòèêå èñïîëüçóþò îáå
26
ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3
Ë. Ä. ÒÀÐÀÍ
ôîðìû ÓÊ [33]. Íåñìîòðÿ íà çíà÷èòåëüíîå ñíèæåíèå ñìåðòíîñòè ïðè èñïîëüçîâàíèè ÓÊ ïðè
îñòðîì èíôàðêòå ìèîêàðäà (ñðàâíèìî ñ äåéñòâèåì ÑÊ) è îòñóòñòâèåì àíòèãåííîñòè, â ýòîì ñëó÷àå âûÿâëåíû òå æå îñëîæíåíèÿ, ÷òî è ïðè ââåäåíèè ÑÊ.
Òêàíåâîé àêòèâàòîð ïëàçìèíîãåíà (ÒÀÏ)
òàêæå ÿâëÿåòñÿ ôèçèîëîãè÷åñêèì ÀÏ, êîòîðûé
îòëè÷àåòñÿ îò ÓÊ áèîõèìè÷åñêèìè è èììóíîõèìè÷åñêèìè ñâîéñòâàìè è, ïðåæäå âñåãî, áîëüøåé
ýôôåêòèâíîñòüþ àêòèâàöèè ïðîôåðìåíòà íà ôèáðèíîâîì ñãóñòêå [34]. Ýòîò òèï àêòèâàòîðà îáíàðóæåí â ïëàçìå, ðàçëè÷íûõ òêàíÿõ îðãàíèçìà
÷åëîâåêà è æèâîòíûõ, â ðàñòâîðàõ ïîñëå ïåðôóçèè ñîñóäîâ íèæíèõ êîíå÷íîñòåé òðóïîâ [35–
37]. ÒÀÏ ñåêðåòèðóåòñÿ ýíäîòåëèàëüíûìè êëåòêàìè â êðîâîòîê â âèäå îäíîöåïî÷å÷íîãî ãëèêîïðîòåèíà ñ Ìm 70 êÄà. Ìîëåêóëà íàòèâíîãî
àêòèâàòîðà ñîñòîèò èç íåñêîëüêèõ äîìåíîâ, êîòîðûì ïðèñóùè ðàçëè÷íûå ôóíêöèè [38]. Ïàëüöåîáðàçíûé äîìåí îòâåòñòâåíåí çà ñâÿçûâàíèå ñ
ôèáðîíåêòèíîì, ýòîò æå äîìåí è äîìåí, ñîîòâåòñòâóþùèé êðèíãëó 2, îòâåòñòâåííû çà ñâÿçûâàíèÿ ñ ôèáðèíîì [39, 40]; äîìåí, ãîìîëîãè÷íûé ýïèäåðìàëüíîìó ôàêòîðó ðîñòà – çà ðåöåïòîðíîå ñâÿçûâàíèå ñ êëåòêàìè ïå÷åíè è óñêîðåííûé êëèðåíñ, à äîìåí, ñîîòâåòñòâóþùèé êðèíãëó 1, ñóùåñòâåíåí äëÿ ñâÿçûâàíèÿ ñ ðåöåïòîðàìè
ýíäîòåëèàëüíûõ êëåòîê. Ýòè äîìåíû ðàñïîëîæåíû â NH2-êîíöåâîé ÷àñòè ìîëåêóëû. Ñ-êîíöåâàÿ
÷àñòü ñîäåðæèò ïîòåíöèàëüíûé ïðîòåàçíûé äîìåí, êîòîðûé ïîñëå îãðàíè÷åííîãî ïðîòåîëèçà
ÏÌ è ðàñùåïëåíèÿ ïåïòèäíîé ñâÿçè Arg275-Ile276
ïðåâðàùàåòñÿ â êàòàëèòè÷åñêèé äîìåí äâóõöåïî÷å÷íîé ôîðìû àêòèâàòîðà, ñîäåðæàùèé â ñâîåé
ïîñëåäîâàòåëüíîñòè ó÷àñòîê ñâÿçûâàíèÿ ñ ÈÀÏ-1.
Ýòî ñîîòâåòñòâóåò ïðåâðàùåíèþ îäíîöåïî÷å÷íîé
ôîðìû àêòèâàòîðà, êîòîðûé â íîðìå ïðàêòè÷åñêè íå àêòèâåí, â äâóõöåïî÷å÷íóþ.  ïðèñóòñòâèè
ôèáðèíà (èëè òðîìáà) îáå ôîðìû ÒÀÏ ñî ñõîäíîé ýôôåêòèâíîñòüþ êàòàëèçèðóþò ïðåâðàùåíèå
Ïà â ÏÌ [41]. Äëÿ êëèíè÷åñêèõ öåëåé èñïîëüçóåòñÿ ïðåèìóùåñòâåííî îäíîöåïî÷å÷íàÿ ôîðìà
ðåêîìáèíàíòíîãî àêòèâàòîðà, èìåþùàÿ êîììåð÷åñêîå íàçâàíèå “àêòèâàçà” èëè “àëüòåïëàçà”.
Òåõíîëîãèÿ ðåêîìáèíàíòíûõ ÄÍÊ ïîçâîëèëà
îðãàíèçîâàòü øèðîêîìàñøòàáíîå ïðîèçâîäñòâî
ÒÀÏ.
Îáùåïðèíÿòîé òî÷êîé çðåíèÿ íà ìåõàíèçì
àêòèâàöèè ÏÃ â ïðèñóòñòâèè ôèáðèíà ýòèì òèïîì àêòèâàòîðà ÿâëÿåòñÿ ïðåäñòàâëåíèå î ñâÿçûâàíèè ìîëåêóëû ÒÀÏ ñ ïîâåðõíîñòüþ ñãóñòêà è
ïîñëåäóþùèì ïðèñîåäèíåíèåì ìîëåêóëû ÏÃ ñ
îáðàçîâàíèåì òðîéíîãî öèêëè÷åñêîãî êîìïëåêñà
[42]. Êèíåòè÷åñêèìè èññëåäîâàíèÿìè in vitro
áûëî óñòàíîâëåíî, ÷òî ýôôåêòèâíîñòü àêòèâàöèè
Glu-Ïà è Lys-Ïà â ïðèñóòñòâèè ôèáðèíà óâåëè÷èâàåòñÿ â 700 è 1000 ðàç ñîîòâåòñòâåííî ïî
ñðàâíåíèþ ñ àêòèâàöèåé â òåõ æå óñëîâèÿõ, íî â
îòñóòñòâèå ôèáðèíà â ðåçóëüòàòå ñíèæåíèÿ Êm. Â
äàëüíåéøèõ èññëåäîâàíèÿõ [43] â óñëîâèÿõ, èñêëþ÷àþùèõ ãèäðîëèç ôèáðèíà, áûëî ïîêàçàíî,
÷òî ýôôåêòèâíîñòü àêòèâàöèè îáåèõ ôîðì ÏÃ
îïðåäåëÿåòñÿ ãëàâíûì îáðàçîì ñòàáèëüíîñòüþ
òðîéíîãî öèêëè÷åñêîãî êîìïëåêñà. Óñòàíîâëåíî,
÷òî â õîäå àêòèâàöèè ÏÃ ÒÀÏ íà ôèáðèíîâîì
ñãóñòêå ïîñëåäîâàòåëüíî îáðàçóþòñÿ äâà àêòèâàòîðíûõ êîìïëåêñà, ñîîòâåòñòâóþùèõ äâóì ôàçàì
àêòèâàöèè [44]: ïåðâîé – ñ îòíîñèòåëüíî ñëàáîé
ýôôåêòèâíîñòüþ àêòèâàöèè [45, 46] è âòîðîé,
ñâÿçàííîé ñ ÷àñòè÷íûì ãèäðîëèçîì îáðàçóþùèìñÿ ÏÌ ôèáðèíîâîãî ñãóñòêà è âûñâîáîæäåíèåì
Ñ-êîíöåâûõ ëèçèíîâûõ îñòàòêîâ. Äîïîëíèòåëüíîå ñâÿçûâàíèå ïî ýòèì îñòàòêàì Glu-Ïà â èçìåíåííîé êîíôîðìàöèè îáåñïå÷èâàåò áóëüøåå
ñðîäñòâî ÒÀÏ ê ïðîôåðìåíòó è, ñëåäîâàòåëüíî,
áóëüøóþ ýôôåêòèâíîñòü àêòèâàöèè [47–49].
Îáðàçóþùèéñÿ íà ïåðâîé ñòàäèè ÏÌ êàòàëèçèðóåò ïðåâðàùåíèå Glu-Ïà â Lys-Ïà è îäíîöåïî÷å÷íîé ôîðìû àêòèâàòîðà â äâóõöåïî÷å÷íóþ [50,
51]. Ïåðâàÿ ôàçà àêòèâàöèè íà÷èíàåòñÿ ïîñëå
îòùåïëåíèÿ ôèáðèíîïåïòèäîâ À îò ôèáðèíîãåíà è îáðàçîâàíèåì ïðîòîôèáðèëë, âòîðàÿ – ïîñëå íà÷àëüíîé äåãðàäàöèè ïîëèìåðíîãî ôèáðèíà
îáðàçóþùèìñÿ ÏÌ [52]. Íà ïåðâîé ñòàäèè îáðàçîâàíèå àêòèâàòîðíîãî êîìïëåêñà ïðîèñõîäèò, ïîâèäèìîìó, ñ ó÷àñòèåì αÑ-äîìåíîâ, òàê êàê, ñ îäíîé ñòîðîíû, ïîêàçàíî, ÷òî αÑ-äîìåíû àôôèííî ñâÿçûâàþò è Ïà è ÒÀÏ, à, ñ äðóãîé ñòîðîíû,
÷àñòè÷íîå îòùåïëåíèå ýòèõ äîìåíîâ ïðèâîäèò ê
ïåðåõîäó ðåàêöèè âî âòîðóþ ñòàäèþ [53]. Íà âòîðîé ñòàäèè àêòèâàòîðíûé êîìïëåêñ îáðàçóåòñÿ íà
ìåæäîìåííûõ ñóïåðñïèðàëèçîâàííûõ ó÷àñòêàõ,
ïðèëåãàþùèõ ê DÅD-òðèàäå [54].
×òî êàñàåòñÿ ðåçóëüòàòîâ áèîìåäèöèíñêèõ è
êëèíè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé ïî ïðèìåíåíèþ ðåêîìáèíàíòíîãî ÒÀÏ â êà÷åñòâå òðîìáîëèòè÷åñêîãî ïðåïàðàòà, òî ñ ñîæàëåíèåì ïðèøëîñü êîíñòàòèðîâàòü, ÷òî õàðàêòåð è âåëè÷èíà îñëîæíåíèé ïîñëå ââåäåíèÿ òðîìáîëèòèêà áûëà ñðàâíèìà â ýòîì ñëó÷àå ñ ðåçóëüòàòàìè, ïîëó÷åííûìè
ïðè èñïîëüçîâàíèè ÑÊ è ÓÊ [33]. È ýòî ïðè
ãîðàçäî áîëåå âûñîêîé ñòîèìîñòè ëå÷åíèÿ. Îñíîâíàÿ ïðè÷èíà íàáëþäàåìûõ îñëîæíåíèé â ýòîì
ñëó÷àå îáúÿñíÿåòñÿ, ïî-âèäèìîìó, íåîáõîäèìîñòüþ ââåäåíèÿ çíà÷èòåëüíûõ äîç ÒÀÏ (50–
100 ìã), ïðåæäå âñåãî â ñâÿçè c íåçíà÷èòåëüíûì
âðåìåíåì ïðåáûâàíèÿ åãî â êðîâîòîêå (3–4 ìèí).
Ýòî îáúÿñíÿþò íåîáðàòèìûì èíãèáèðîâàíèåì àêòèâàòîðà ÈÀÏ-1 [24]. Íåîáõîäèìî èìåòü â ââèäó, ÷òî ýêñïðåññèÿ ìÐÍÊ àíòèãåíà ÈÀÏ-1 ïîâûøåíà â ýíäîòåëèàëüíûõ êëåòêàõ àòåðîñêëåðî-
ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3
27
ÎÃËßÄÈ
òè÷åñêèõ êîðîíàðíûõ àðòåðèé [55]. Òî åñòü ñíèæåíèå ôèáðèíîëèòè÷åñêîé àêòèâíîñòè ïðè êîðîíàðíîé áîëåçíè ñâÿçàíî ñ ïîâûøåíèåì óðîâíÿ
ÈÀÏ-1, êîòîðûé êîððåëèðóåò ñ óâåëè÷åíèåì êîíöåíòðàöèè òðèãëèöåðèäîâ, èíèöèèðóþùèõ ñåêðåöèþ èíãèáèòîðà [56].
Ìîæíî ïðåäïîëîæèòü, ÷òî íåîáõîäèìîñòü
ââåäåíèÿ çíà÷èòåëüíûõ êîëè÷åñòâ ÒÀÏ ïðè òðîìáîëèòè÷åñêîé òåðàïèè îáóñëîâëåíà òàêæå ñíèæåíèåì ýôôåêòèâíîñòè àêòèâàöèè Ïà ïîä äåéñòâèåì
ÒÀÏ ïðè ïàòîëîãèè.
Ýôôåêòèâíîñòü àêòèâàöèè, âåðîÿòíî, ñíèæàåòñÿ, ïðåæäå âñåãî, â ðåçóëüòàòå èíãèáèðîâàíèÿ ýòîãî ïðîöåññà èíãèáèòîðîì ôèáðèíîëèçà
àêòèâèðóåìûì òðîìáèíîì (ÒÀÈÔ), àêòèâíàÿ
ôîðìà êîòîðîãî (ÒÀÈÔà) êàòàëèçèðóåò îòùåïëåíèå Ñ-êîíöåâûõ ëèçèíîâûõ îñòàòêîâ ôèáðèíà,
âàæíûõ íà âòîðîé, íàèáîëåå ýôôåêòèâíîé ñòàäèè àêòèâàöèè Ïà ýòèì òèïîì àêòèâàòîðà [47–
49]. Èçâåñòíî, ÷òî ïðè îáðàçîâàíèè ôèáðèíîâîãî ñãóñòêà â ïëàçìå íàáëþäàåòñÿ óâåëè÷åíèå êîíöåíòðàöèè ÒÀÈÔà. À ïðè ïðîâåäåíèè òðîìáîëèòè÷åñêîé òåðàïèè ÒÀÏ ñ ïðåäâàðèòåëüíûì ââåäåíèåì èíãèáèòîðà ÒÀÈÔà îáíàðóæåíî çíà÷èòåëüíîå óñèëåíèå ëèçèñà òðîìáà èëè óìåíüøåíèå êîëè÷åñòâà ÒÀÏ, íåîáõîäèìîãî äëÿ äîñòèæåíèÿ ìàêñèìàëüíîé ôèáðèíîëèòè÷åñêîé àêòèâíîñòè [57].
 îïûòàõ in vitro ïîêàçàíî òàêæå [58, 59],
÷òî êîâàëåíòíàÿ ìîäèôèêàöèÿ ôèáðèíîâîãî ñãóñòêà ôàêòîðîì XIIIà, òî åñòü ïðîøèâêà ñãóñòêà
ïî χ− è α-öåïÿì è êîâàëåíòíîå âêëþ÷åíèå â ñãóñòîê ôèáðîíåêòèíà (ìîäåëèðîâàíèå ñèòóàöèè, âîçíèêàþùåé in vivo ïðè ïàòîëîãèè) çíà÷èòåëüíî
ñíèæàåò ýôôåêòèâíîñòü àêòèâàöèè Ïà ýòèì òèïîì àêòèâàòîðà (áîëåå ÷åì íà ïîðÿäîê) ãëàâíûì
îáðàçîì çà ñ÷åò óâåëè÷åíèÿ Êm ðåàêöèè [60]. Ýòî
ñâèäåòåëüñòâóåò î òîì, ÷òî, âåðîÿòíî, ïðè òðîìáîëèòè÷åñêîé òåðàïèè ñ ïðèìåíåíèåì ÒÀÏ íåîáõîäèìîñòü ââåäåíèÿ åãî â íåïîìåðíî áîëüøèõ
êîëè÷åñòâàõ îáóñëîâëåíà åùå è äåôèöèòîì ñâîáîäíîãî ÏÃ, òàê êàê èçâåñòíî, ÷òî ïðèìåðíî 65%
ÏÃ ïëàçìû íàõîäèòñÿ â êîìïëåêñå ñ äðóãèìè áåëêàìè [1]. Ïîýòîìó â íîðìå òîëüêî 5% ÏÃ ñïîñîáíî ñâÿçûâàòüñÿ ñ ôèáðèíîì è àêòèâèðîâàòüñÿ
ÒÀÏ, à ïðè ïàòîëîãèè âîçíèêàåò äåôèöèò ñâîáîäíîãî ÏÃ èç-çà ñíèæåíèÿ Êm ðåàêöèè àêòèâàöèè. Â ýêñïåðèìåíòàõ íà æèâîòíûõ â âåíó ìîðñêèì ñâèíêàì ââîäèëè òðîìá, îáðàçîâàííûé in
vitro è ìå÷åííûé ôëóîðåñöåèíèçîòèîöèàíàòîì [1].
Ïàðàìåòðû ôèáðèíîëèçà îïðåäåëÿëè ïðè ââåäåíèè ïðîçàçèíà (àãåíòà, âûçûâàþùåãî ñåêðåöèþ
ÒÀÏ) è ÏÃ. Ðàçíèöó â óâåëè÷åíèè ôèáðèíîëèòè÷åñêîé àêòèâíîñòè è ïðîëîíãèðîâàííîñòè äåéñòâèÿ ìåæäó îïûòàìè ñ ïîñëåäîâàòåëüíûì ââåäåíèåì Ïà è ïðîçàçèíà, èëè òîëüêî ïðîçàçèíà
óñòàíàâëèâàëè ïî íàðàñòàíèþ ôèáðèíîëèòè÷åñêîé àêòèâíîñòè â ýóãëîáóëèíîâîé ôðàêöèè è ïî
óâåëè÷åíèþ êîëè÷åñòâà ïðîäóêòîâ äåãðàäàöèè
ôèáðèíà â îáðàçöàõ êðîâè. Ïðè ýòîì óðîâåíü
àêòèâíîñòè ÏÌ, ñîäåðæàíèå ôèáðèíîãåíà è ïðîäóêòîâ äåãðàäàöèè ôèáðèíîãåíà ñâèäåòåëüñòâîâàëè îá îòñóòñòâèè ñèñòåìíûõ îñëîæíåíèé ïðè
îäíîâðåìåííîì ââåäåíèè ëèáåðàòîðà è ÏÃ. Â ýòîì
ñëó÷àå áûë òàêæå îòìå÷åí ýôôåêò ïðîëîíãèðîâàííîãî äåéñòâèÿ òðîìáîëèòèêà (äî 120 ìèí). Òàêèì îáðàçîì, åñòü îñíîâàíèÿ ïîëàãàòü, ÷òî ââåäåíèå äîïîëíèòåëüíûõ êîëè÷åñòâ Ïà ïðè òåðàïèè ÒÀÏ ïîçâîëèò óìåíüøèòü êîíöåíòðàöèþ ââîäèìîãî àêòèâàòîðà è òåì ñàìûì ñíèçèòü ñèñòåìíûå îñëîæíåíèÿ è, âîçìîæíî, äîáèòüñÿ ïðîëîíãèðîâàíèÿ åãî äåéñòâèÿ.
Ñëåäóåò îòìåòèòü òàêæå, ÷òî ââåäåíèå áîëüøèõ äîç ÒÀÏ ïîëíîñòüþ èíãèáèðóåò ïðîôèáðèíîëèòè÷åñêóþ ôóíêöèþ àêòèâèðîâàííîãî ïðîòåèíà Ñ (Ñà), âûòåñíÿÿ åãî èç êîìïëåêñà ñ ÈÀÏÃ-1
[61–63].
Íåñêîëüêî ïîçæå ÷åì ÒÀÏ áèîìåäèöèíñêèì è êëèíè÷åñêèì èññëåäîâàíèÿì ïîäâåðãëàñü
ïðîóðîêèíàçà (ÏÓ) – ôèçèîëîãè÷åñêèé àêòèâàòîð Ïà óðîêèíàçíîãî òèïà, îáëàäàþùèé âûñîêèì ñðîäñòâîì ê ÷àñòè÷íî äåãðàäèðîâàííîìó
ôèáðèíó. Â êëèíèêå ïðè îñòðîì èíôàðêòå ìèîêàðäà èñïîëüçóþò åå ðåêîìáèíàíòíóþ ôîðìó ïîä
íàçâàíèåì ñàðóïëàçà [33]. ÏÓ ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé ãëèêîïðîòåèí ñ Ìm 55 êÄà. Ðàñùåïëåíèå ÏÌ
ïåïòèäíîé ñâÿçè Lys158-Ile159 â ìîëåêóëå ÏÓ ïðèâîäèò ê ïðåâðàùåíèþ åå â ÓÊ, êîòîðàÿ ðåàãèðóåò ñ ïðîòåàçíûìè èíãèáèòîðàìè ïëàçìû è ýíçèìàòè÷åñêè áîëåå àêòèâíà.  íîðìå êàòàëèòè÷åñêàÿ àêòèâíîñòü ÏÓ ñîñòàâëÿåò 0,4–6% îò àêòèâíîñòè ÓÊ. Ïðîôåðìåíò ìîæíî âûäåëèòü èç ìî÷è
÷åëîâåêà [64], èç êóëüòóðû êëåòîê ðàçëè÷íûõ òèïîâ [65], à òàêæå èç ïëàçìû, ãäå åå êîíöåíòðàöèÿ ñîñòàâëÿåò 5 íã â 1 ìë [66]. ÏÓ ëèøü ñëàáî
ãèäðîëèçóåò íåáîëüøèå àìèäíûå ñóáñòðàòû è
ïðàêòè÷åñêè íå èíãèáèðóåòñÿ ñèíòåòè÷åñêèìè
èíãèáèòîðàìè è ïðîòåàçíûìè èíãèáèòîðàìè ïëàçìû, ÷òî ïîçâîëèëî îòíåñòè åå ê ïðîôåðìåíòó [67].
 îòëè÷èå îò ÒÀÏ è ÓÊ îíà ðåçèñòåíòíà ê íåîáðàòèìîìó èíãèáèðîâàíèþ ÈÀÏ-1 [24]. Ïðè èññëåäîâàíèè àêòèâàöèè Ïà ÏÓ in vitro áûëî óñòàíîâëåíî [68], ÷òî îíà îïèñûâàåòñÿ ïîñëåäîâàòåëüíîñòüþ òðåõ ðåàêöèé è ïîä÷èíÿåòñÿ êèíåòèêå ïî
óðàíåíèþ Ìèõàýëèñà-Ìåíòåí. Íà ïåðâîé ñòàäèè
ïðîèñõîäèò àêòèâàöèÿ Ïà äî ÏÌ ñ Êm 0,4 µÌ è
êðàò.. 0,02 ñåê-1 Âòîðàÿ ñòàäèÿ ñîîòâåòñòâóåò ïðåâðàùåíèþ ÏÓ ïîä äåéñòâèåì ÏÌ (îáðàçîâàâøåãîñÿ íà ïåðâîé ñòàäèè) â ÓÊ ñ Êm 3,3 ìêÌ è êðàò..
1,2 ñåê-1. È, íàêîíåö, òðåòüÿ ñòàäèÿ ñîîòâåòñòâóåò àêòèâàöèè ÏÃ ÓÊ, îáðàçîâàâøåéñÿ íà âòîðîé
ñòàäèè ñ Êm 50 ìêÌ è êêàò. 1,0 ñåê-1.  îïûòàõ in
28
ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3
Ë. Ä. ÒÀÐÀÍ
vitro óñòàíîâëåíî, ÷òî ïðåâðàùåíèå ÏÓ â ÓÊ ñîñòàâëÿåò âàæíûé íà÷àëüíûé ýòàï ðàñòâîðåíèÿ
ôèáðèíà, òàê êàê ôèáðèíîëèòè÷åñêàÿ àêòèâíîñòü
ÏÓ íà 2–3 ïîðÿäêà ïðåâîñõîäèò ýôôåêò ìóòàíòíîé íåãèäðîëèçóåìîé ÏÌ ôîðìû ÏÓ è â 2–5
ðàç ýôôåêòèâíåå ÓÊ â òåõ æå óñëîâèÿõ [69]. Òî
åñòü, â ïëàçìå â îòñóòñòâèå ôèáðèíà ÏÓ ñòàáèëüíà, íî â ïðèñóòñòâèè ôèáðèíîâîãî ñãóñòêà
ÏÓ, íî íå ÓÊ, èíäóöèðóåò ñïåöèôè÷åñêèé ëèçèñ ôèáðèíà. Èçâåñòíî [24], ÷òî ÈÀÏ-1 êîíêóðåíòíî èíãèáèðóåò ÏÓ â ïëàçìå, íî êàê òîëüêî
ïðîèñõîäèò âçàèìîäåéñòâèå ÏÓ â êîìïëåêñå ñ
Ïà íà ôèáðèíå – èíãèáèòîð îñâîáîæäàåòñÿ. Ñëåäóåò îòìåòèòü, ÷òî ìåõàíèçì ñïåöèôè÷åñêîé àêòèâàöèè Ïà ÏÓ íà ôèáðèíîâîì ñãóñòêå îêîí÷àòåëüíî íå óñòàíîâëåí, òàê êàê àêòèâàòîð íå îáëàäàåò íåïîñðåäñòâåííûì ñðîäñòâîì ê ôèáðèíó [70].
ÏÓ îáíàðóæèëà áîëåå âûñîêóþ ñïåöèôè÷åñêóþ
òðîìáîëèòè÷åñêóþ àêòèâíîñòü ïî ñðàâíåíèþ ñ
ÓÊ ïðè èññëåäîâàíèÿõ â ïðèñóòñòâèè ñãóñòêà ïëàçìû [71] è â ìîäåëüíûõ îïûòàõ íà æèâîòíûõ [72].
Íà èíòàêòíîì ôèáðèíå îíà îêàçàëàñü ñëàáûì àêòèâàòîðîì ÏÃ, íî â ðåçóëüòàòå ÷àñòè÷íîãî ãèäðîëèçà ôèáðèíà îáðàçóþùèìñÿ ÏÌ ÏÓ îáëàäàåò
àêòèâàòîðíûì ïîòåíöèàëîì ÒÀÏ ïî îòíîøåíèþ
ê Ïà [67]. Î÷åâèäíî, ÷àñòè÷íî äåãðàäèðîâàííûé
ôèáðèí ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé êîíòàêòíóþ ïîâåðõíîñòü, ñïîñîáíóþ ñòèìóëèðîâàòü àêòèâàöèþ ÏÓ
(äî 20–25% îò àêòèâíîñòè ÓÊ) äëÿ àêòèâàöèè
ÏÃ, ñâÿçàâøåãîñÿ ïî Ñ-êîíöåâûì îñòàòêàì ëèçèíà íà äåãðàäèðîâàííîì ôèáðèíå. Ïîêàçàíî, ÷òî
ôðàãìåíòû ìîëåêóëû ôèáðèíà ïðè èõ ñâÿçûâàíèè ñ Glu-ÏÃ çàìåòíî ñòèìóëèðóþò àêòèâàöèþ
ïðîôåðìåíòà ÏÓ â ðåçóëüòàòå êîíôîðìàöèîííûõ
ïðåîáðàçîâàíèé, ïðîèñõîäÿùèõ ïðè ñâÿçûâàíèè
ÏÃ [73]. Ýôôåêòèâíîñòü àêòèâàöèè Glu-ÏÃ ÏÓ
â ïðèñóòñòâèè ÷àñòè÷íî äåãðàäèðîâàííîãî ôèáðèíà áûëà ñðàâíèìà ñ òàêîâîé äëÿ ÓÊ â ðàñòâîðå
â îòñóòñòâèå ôèáðèíà. Ïðè ýòîì ôèáðèíîñïåöèôè÷íîñòü ÏÓ íå òðåáóåò ïðåâðàùåíèÿ ÏÓ â ÓÊ
èëè ïåðåõîäà Glu-ôîðìû Ïà â Lys-ôîðìó, à ÿâëÿåòñÿ, ïî-âèäèìîìó, ñëåäñòâèåì äîïîëíèòåëüíîãî ñâÿçûâàíèÿ Ïà ñ ÷àñòè÷íî äåãðàäèðîâàííûì ôèáðèíîì. Èìåííî ïîýòîìó ÏÓ ìîæíî ñ÷èòàòü ôóíêöèîíàëüíûì ôèçèîëîãè÷åñêèì àêòèâàòîðîì Ïà â ïëàçìå. Ðîëü æå íåçíà÷èòåëüíûõ êîëè÷åñòâ ÓÊ, îáíàðóæåííûõ â ïëàçìå â êîëè÷åñòâå 99 íã â 1 ìë (êàòàëèòè÷åñêàÿ ýôôåêòèâíîñòü êîòîðûõ çíà÷èòåëüíî âûøå ïî ñðàâíåíèþ
ñ ÏÓ â îòñóòñòâèå ôèáðèíà è ñòèìóëèðóåòñÿ ôèáðèíîì), çàêëþ÷àåòñÿ â èíäóöèðîâàíèè îáðàçîâàíèÿ ÏÌ, âûçûâàþùåãî ÷àñòè÷íûé ëèçèñ ôèáðèíîâîãî ñãóñòêà [74]. Ñïîñîáíîñòü ÏÓ ëèçèðîâàòü ôèáðèíîâûé ñãóñòîê, íå çàòðàãèâàÿ ïðè
ýòîì ôèáðèíîãåí, îïèñàíà â ëèòåðàòóðå [73].
Ðåçóëüòàòû êëèíè÷åñêèõ èñïûòàíèé ñàðó-
ïëàçû (ðåêîìáèíàíòíîé ôîðìû ÏÓ) îáíàðóæèëè
íåîáõîäèìîñòü ââåäåíèÿ åå â çíà÷èòåëüíîì êîëè÷åñòâå, ÷òî, åñòåñòâåííî, ñêàçàëîñü íà ñòîèìîñòè ëå÷åíèÿ (áîëüøåé, ÷åì â ñëó÷àå èñïîëüçîâàíèÿ ÒÀÏ), à òàêæå íà âîçíèêàþùèõ ïîñëå òåðàïèè ýòèì òðîìáîëèòèêîì îñëîæíåíèé, ïðèñóùèõ
ðàíåå èñïîëüçóåìûì àêòèâàòîðàì ÏÃ [33]. Âðåìÿ
ïîëóâûâåäåíèÿ ÏÓ èç êðîâîòîêà òîæå îêàçàëîñü
íåçíà÷èòåëüíûì – 6–10 ìèí. Îäíîé èç ïðè÷èí
ñëåäóåò, î÷åâèäíî, ñ÷èòàòü èíãèáèðîâàíèå ïðîöåññà àêòèâàöèè Ïà ïîä äåéñòâèåì ÏÓ íà ÷àñòè÷íî äåãðàäèðîâàííîì ôèáðèíå ÒÀÈÔà è äåôèöèò ñâîáîäíîãî Ïà ïëàçìû. Ïîäòâåðæäåíèåì
ýòîãî ïðåäïîëîæåíèÿ ïîñëóæèëè îïûòû ïî îäíîâðåìåííîìó ââåäåíèþ ÏÓ è ÏÃ [75], ÷òî äàëî
âîçìîæíîñòü äîñòàâèòü àêòèâàòîð ê î÷àãó ïîðàæåíèÿ è âîñïîëíèòü äåôèöèò ÏÃ. Ýôôåêò ââåäåíèÿ Lys-Ïà (5% îò îáùåé êîíöåíòðàöèè Ïà â
ïëàçìå) â ñìåñè ñ ÏÓ îêàçàëñÿ âûøå, ÷åì ïðè
èñïîëüçîâàíèè ñìåñè Glu-ÏÃ ñ ÏÓ èëè ïðîñòî
ÏÓ. Ïðè ýòîì íå áûëî îòìå÷åíî ñêîëüêî-íèáóäü
çíà÷èòåëüíîãî ðàñõîäîâàíèÿ α2-àíòèïëàçìèíà, ÷òî
óêàçûâàëî íà ïðàêòè÷åñêè ïîëíîå îòñóòñòâèå àêòèâàöèè Ïà ïëàçìû â îòëè÷èå îò àíàëîãè÷íûõ
îïûòîâ ñ èñïîëüçîâàíèåì ÑÊ è ÓÊ.
Ñëåäóåò óïîìÿíóòü åùå î äâóõ òðîìáîëèòèêàõ, èñïîëüçóåìûõ â íàñòîÿùåå âðåìÿ â êëèíè÷åñêîé ïðàêòèêå. Îáà ïðåïàðàòà ïîëó÷åíû õèìè÷åñêîé ìîäèôèêàöèåé ÑÊ.
Ïîääåðæèâàòü çàìåòíóþ ôèáðèíîëèòè÷åñêóþ àêòèâíîñòü â êðîâîòîêå óäàëîñü ñ èñïîëüçîâàíèåì àöèëôåðìåíòîâ [76]. Òàê, àíèçèëèðîâàíèåì ïî àêòèâíîìó öåíòðó êîìïëåêñà ÏÃ-ÑÊ [77],
àêòèâíîñòü êîòîðîãî in vivo âîññòàíàâëèâàëàñü
áëàãîäàðÿ ìåäëåííîìó äåàöèëèðîâàíèþ, ïîëó÷åí
òðîìáîëèòè÷åñêèé ïðåïàðàò ïîä íàçâàíèåì àïñàê
(ýìèíàçà, àíèñòðåïëàçà). Â ìîäåëüíûõ îïûòàõ íà
æèâîòíûõ áûëî ïîêàçàíî, ÷òî òàêîé ïðåïàðàò ìîæåò îáåñïå÷èòü ìåíüøóþ ñòåïåíü äåãðàäàöèè ôèáðèíîãåíà ïî ñðàâíåíèþ ñ èñïîëüçîâàíèåì ÓÊ è
ÑÊ. Ïðè ýòîì óäàëîñü óâåëè÷èòü âðåìÿ ïîëóâûâåäåíèÿ àêòèâàòîðà èç êðîâîòîêà äî 50–90 ìèí
[33]. Òåì íå ìåíåå, îñòàåòñÿ óãðîçà âîçíèêíîâåíèÿ àëëåðãè÷åñêèõ ðåàêöèé, íàáëþäàþòñÿ ãåìîððàãè÷åñêèå îñëîæíåíèÿ, ÷àñòîòà ðåîêêëþçèè ñîñòàâëÿåò 10%, à öåíà ïðåïàðàòà ïðèìåðíî â òðè ðàçà
ïðåâûøàåò ñòîèìîñòü ÑÊ. ×àñòîòà äîñòèæåíèÿ
ðåïåðôóçèè íå îòëè÷àåòñÿ îò ñëó÷àåâ ïðèìåíåíèÿ óæå èñïîëüçóåìûõ òðîìáîëèòèêîâ.
 ðåçóëüòàòå ìîäèôèêàöèè ÑÊ ðàñòâîðèìûì
àëüäåãèäîäåêñòðàíîì ïîëó÷åí ïðåïàðàò ñòðåïòîäåêàçà [33]. Òàêèì îáðàçîì óäàëîñü äîáèòüñÿ ïðîëîíãèðîâàííîãî äåéñòâèÿ òðîìáîëèòèêà, òî åñòü
ñîõðàíåíèÿ âûñîêîãî óðîâíÿ ôèáðèíîëèòè÷åñêîé
àêòèâíîñòè (äî 80 ÷àñîâ) áåç ïîäàâëåíèÿ çâåíà
êîàãóëÿöèè. ×àñòîòà ðåîêêëþçèè ñîñòàâëÿåò â ñëó-
ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3
29
ÎÃËßÄÈ
÷àå èñïîëüçîâàíèÿ ýòîãî ïðåïàðàòà ëèøü 5%, ÷àñòîòà àëëåðãè÷åñêèõ îñëîæíåíèé – 2%, ÷àñòîòà
ðåïåðôóçèè íå îòëè÷àåòñÿ îò ñëó÷àåâ ïðèìåíåíèÿ âûøåíàçâàííûõ òðîìáîëèòèêîâ. Êðîìå òîãî,
íàáëþäàþòñÿ òàêæå ñëó÷àè ãåìîððàãè÷åñêèõ îñëîæíåíèé. Öåíà ïðåïàðàòà â äâà ðàçà ïðåâûøàåò
ñòîèìîñòü ÑÊ.
Òàêèì îáðàçîì, íåñìîòðÿ íà íàáëþäàåìûé
ïðîãðåññ â ðàçðàáîòêå òðîìáîëèòè÷åñêèõ ïðåïàðàòîâ íà îñíîâå ÀÏ, êîòîðûé çíà÷èòåëüíî ïîâûñèë ýôôåêòèâíîñòü òðîìáîëèòè÷åñêîé òåðàïèè,
ñ ñîæàëåíèåì ïðèõîäèòüñÿ êîíñòàòèðîâàòü, ÷òî
óñïåõè òðîìáîëèçèñà îêàçàëèñü íåïîëíûìè. Ïðèáëèçèòåëüíî â 30% ñëó÷àåâ íå óäàåòñÿ äîñòè÷ü
ïðîõîäèìîñòè ïîðàæåííîé àðòåðèè ïðè èíôàðêòå, à â ïîñëåäóþùèå ÷àñû è äíè (ïîñëå ââåäåíèÿ
âñåõ èñïîëüçóåìûõ òðîìáîëèòèêîâ) â íåêîòîðûõ
ñëó÷àÿõ íàáëþäàåòñÿ ðåîêêëþçèÿ ñîñóäà è ãåìîððàãè÷åñêèå îñëîæíåíèÿ. Ñëåäóåò îòìåòèòü òàêæå, ÷òî ïðèìåíåíèå íàèáîëåå ñîâðåìåííûõ òðîìáîëèòèêîâ, ïîëó÷åííûõ òåõíîëîãèåé ðåêîìáèíàíòíûõ ÄÍÊ (ÒÀÏ, ÏÓ), ïðè èõ âûñîêîé ñòîèìîñòè è çíà÷èòåëüíûõ ñðåäñòâàõ, çàòðà÷åííûõ íà
ïðîèçâîäñòâî è èñïûòàíèå, íå ïîêàçàëî ïðåèìóùåñòâ â äîñòèæåíèè ïî-íàñòîÿùåìó ýôôåêòèâíîãî òðîìáîëèçèñà [78]. Ñðàâíèòåëüíûå êëèíè÷åñêèå èñïûòàíèÿ ÏÓ ïðè îñòðîì èíôàðêòå ìèîêàðäà ïðîäåìîíñòðèðîâàëè, ÷òî îíà ïî ïîêàçàòåëþ ñìåðòíîñòè â òå÷åíèå 30 ñóòîê îò íà÷àëà ëå÷åíèÿ ïî êðàéíåé ìåðå ýêâèâàëåíòíà ÑÊ, à ïî
íà÷àëüíûì ïîêàçàòåëÿì òåðàïèè (â èíòåðâàëå
45 ìèí – 40 ÷àñîâ) îòìå÷àëîñü, ÷òî ÏÓ ýêâèâàëåíòíà ÒÀÏ. Òàêèå ñêðîìíûå ðåçóëüòàòû òðîìáîëèçèñà ïîçâîëèëè ñäåëàòü âûâîä, ÷òî äî ñèõ
ïîð èäåàëüíûé òðîìáîëèòèê íå íàéäåí è â ýòîé
îáëàñòè íàìåòèëñÿ çàìåòíûé êðèçèñ. Ýòî, åñòåñòâåííî, ñòèìóëèðîâàëî èññëåäîâàíèÿ ïî ðàçðàáîòêå
íîâûõ, áîëåå ñîâåðøåííûõ òðîìáîëèòè÷åñêèõ ïðåïàðàòîâ íà îñíîâå àêòèâàòîðîâ Ïà [78, 79].
Âàæíûìè êðèòåðèÿìè äëÿ ðàçðàáîòêè è îòáîðà íîâûõ àêòèâàòîðîâ Ïà [80] ÿâëÿåòñÿ ïîâûøåíèå ñîáñòâåííîé êàòàëèòè÷åñêîé ýôôåêòèâíîñòè ÀÏ, ïîçâîëÿþùåé äîñòè÷ü ìàêñèìàëüíîé ñêîðîñòè ëèçèñà ôèáðèíîâîãî ñãóñòêà è ìèíèìàëüíîé ëàã-ôàçû ôèáðèíîëèçà, óâåëè÷åíèå ñðîäñòâà
ÀÏ ê òðîìáó, ÷òî ïðèâåäåò ê ëîêàëüíîìó îáðàçîâàíèþ ÏÌ â î÷àãå ïîðàæåíèÿ áåç àêòèâàöèè âñåé
ñèñòåìû ôèáðèíîëèçà è óâåëè÷åíèå âðåìåíè ïðåáûâàíèÿ òðîìáîëèòèêà â êðîâîòîêå ïðè äîïóñòèìûõ èììóíîëîãè÷åñêèõ è òîêñèêîëîãè÷åñêèõ
ïîêàçàòåëÿõ. Ýòî ïîçâîëèò ââîäèòü ïðåïàðàòû â
ìåíüøèõ äîçàõ ïðè ïðîäîëæèòåëüíîì ñîõðàíåíèè è äîñòàâêå ê òðîìáó ôèáðèíîëèòè÷åñêîãî
àãåíòà ñ ïîòåíöèàëîì, äîñòàòî÷íûì äëÿ ëèêâèäàöèè ïàòîëîãèè. (Âñå ýòè ïîëîæåíèÿ âåðíû è
àêòóàëüíû, îäíàêî, ñ òî÷êè çðåíèÿ àâòîðà, íå ó÷èòûâàþò ðåçóëüòàòû àíòèòðîìáîöèòàðíîé òåðàïèè,
î ÷åì áóäåò ñêàçàíî íèæå).
Ñ ýòèõ ïîçèöèé ïðåäñòàâëÿåò èíòåðåñ ñíà÷àëà îõàðàêòåðèçîâàòü îñíîâíûå íàïðàâëåíèÿ íàó÷íûõ áèîõèìè÷åñêèõ è áèîìåäèöèíñêèõ èññëåäîâàíèé, íàïðàâëåííûõ íà ðàçðàáîòêó è èñïûòàíèå íîâûõ ôîðì ÀÏ äëÿ èñïîëüçîâàíèÿ â òðîìáîëèòè÷åñêîé òåðàïèè.
 êà÷åñòâå îäíîãî èç íàïðàâëåíèé ïîèñêà
îòíîñèòåëüíî äåøåâûõ òðîìáîëèòèêîâ, îáëàäàþùèõ âûñîêîé êàòàëèòè÷åñêîé ýôôåêòèâíîñòüþ,
ñëåäóåò îòìåòèòü ñòàôèëîêèíàçó [81, 82]. Îíà
îáëàäàåò áîëüøåé êàòàëèòè÷åñêîé ýôôåêòèâíîñòüþ è ÿâëÿåòñÿ áîëåå ôèáðèíîñïåöèôè÷íûì
àãåíòîì ïî ñðàâíåíèþ ñ ÑÊ.
Ìóòàíòíûå ïðîèçâîäíûå íà îñíîâå ÒÀÏ [83]
è ÏÓ [84] ïðåäñòàâëÿþò ñîáîé ÀÏ íîâîãî ïîêîëåíèÿ.  êà÷åñòâå ïðèìåðà ìîæíî ïðèâåñòè ìóòàíòíîå ïðîèçâîäíîå ÒÀÏ, ïîëó÷èâøåå íàçâàíèå
ðåòåïëàçà [78]. Ýòî – íåãëèêîçèëèðîâàííàÿ ôîðìà ÒÀÏ, ó êîòîðîé óäàëåíû ïàëüöåîáðàçíûé äîìåí è äîìåí, ãîìîëîãè÷íûé ýïèäåðìàëüíîìó
ôàêòîðó ðîñòà, à òàêæå äîìåí, ñîîòâåòñòâóþùèé
êðèíãëó 1. Òàêàÿ ìîäèôèêàöèÿ îáåñïå÷èëà ïðîëîíãàöèþ äåéñòâèÿ è ïîâûøåííóþ êàòàëèòè÷åñêóþ ýôôåêòèâíîñòü ìóòàíòà ïðè àðòåðèàëüíîì
òðîìáîçå ó ñîáàê, ìåíüøåå èñòîùåíèå ãåìîñòàòè÷åñêèõ áåëêîâ ïëàçìû. Ïðîëîíãèðîâàííûé è
áûñòðîäåéñòâóþùèé ýôôåêò ðåòåïëàçû áûë ïîäòâåðæäåí ó ïàöèåíòîâ ñ îñòðûì èíôàðêòîì ìèîêàðäà ïîñëå äâîéíîãî áîëþñíîãî âíóòðèâåííîãî
ââåäåíèÿ.
Ñëåäóåò îòìåòèòü è äðóãèå íàïðàâëåíèÿ â
ïîëó÷åíèè ÀÏ íîâîãî ïîêîëåíèÿ: õèìè÷åñêîå
êîíúþãèðîâàíèå ÀÏ ñ àãåíòàìè, îáëàäàþùèìè
âûñîêèì ñðîäñòâîì ê ôèáðèíó [85], è ïîëó÷åíèå
ãèáðèäíûõ ìîëåêóë, òàê íàçûâàåìûõ õèìåð. Ñèíòåçèðîâàëè êîíúþãàò áèîñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë
59Ä8 è ÒÑL8 (àíòèòåëî ïðîòèâ ÒÀÏ, ñ Êdis. âçàèìîäåéñòâèÿ 5×10-9 Ì) êîâàëåíòíîé ñøèâêîé áèôóíêöèîíàëüíûì õèìè÷åñêèì ñîåäèíåíèåì [24].
Òàêîé êîíúþãàò ïîñëå ââåäåíèÿ êîíöåíòðèðóåò
òðîìáîëèòèê íà òðîìáå è ýòî ïîçâîëÿåò óâåëè÷èòü ýôôåêòèâíîñòü òðîìáîëèçèñà â 5 ðàç, ÷òî
ïîêàçàíî â îïûòàõ íà êðîëèêàõ. Ïðè ýòîì íå
îáíàðóæèëè çíà÷èòåëüíîãî ðàñõîäîâàíèÿ ôèáðèíîãåíà è α2-àíòèïëàçìèíà ïëàçìû. Ïîäîáíûå ðåçóëüòàòû ïîëó÷åíû äëÿ êîíúþãàòà ñ áèîñïåöèôè÷åñêèìè àíòèòåëàìè ê ôèáðèíó è ÓÊ. Íåîáõîäèìîñòü ñíèæåíèÿ èììóíîãåííîñòè òàêèõ ïðîèçâîäíûõ äèêòóåò ïðåèìóùåñòâåííîå êîíúþãèðîâàíèå íå ñàìèõ àíòèòåë, à èõ ôðàãìåíòîâ, áåç
ïîñòîÿííîé íàèáîëåå èììóíîãåííîé îáëàñòè.
Ïðèìåðîì õèìåð ìîæåò ñëóæèòü ãèáðèä, ïîëó÷åííûé êîâàëåíòíûì ïðèñîåäèíåíèåì ñóëüôãèäðèëüíîé ôîðìû NH2-êîíöåâîãî ó÷àñòêà òÿæåëîé öåïè Ïà (ÏÌ), îïðåäåëÿþùåé ñâÿçûâà-
30
ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3
Ë. Ä. ÒÀÐÀÍ
íèå ñ ôèáðèíîì, ñ Ñ-êîíöåâûì ó÷àñòêîì òÿæåëîé öåïè ÓÊ, ñîäåðæàùåé àêòèâíûé öåíòð [86].
Õèìåðíûé àêòèâàòîð îáëàäàåò áîëüøèì ñðîäñòâîì
ê ôèáðèíó ïî ñðàâíåíèþ ñ ÓÊ. Àêòèâàöèÿ ÏÃ
ãèáðèäîì ñòèìóëèðóåòñÿ ðàñòâîðèìûì ôèáðèíîì
â 10 ðàç áîëüøå ïî ñðàâíåíèþ ñ íàòèâíûì àêòèâàòîðîì. Àíàëîãè÷íàÿ õèìåðà ÀÏ ïîëó÷åíà íà
îñíîâå ÒÀÏ [87]. Òàêîé àêòèâàòîð îáëàäàåò áóëüøèì ñðîäñòâîì ê ôèáðèíó è áóëüøèì ôèáðèíîëèòè÷åñêèì ïîòåíöèàëîì ïî ñðàâíåíèþ ñ õèìåðîé íà îñíîâå ÓÊ.
Õèìè÷åñêàÿ ìîäèôèêàöèÿ ðåêîìáèíàíòíûõ
ìóòàíòíûõ èëè ãèáðèäíûõ ôîðì ÀÏ – åùå îäíî
íàïðàâëåíèå â ïîëó÷åíèè âûñîêîýôôåêòèâíûõ
òðîìáîëèòè÷åñêèõ àãåíòîâ.
Ñ öåëüþ óâåëè÷åíèÿ âðåìåíè ïîëóâûâåäåíèÿ ÏÓ èç êðîâîòîêà ñèíòåçèðîâàëè õèìè÷åñêèé
êîíúþãàò ðåêîìáèíàíòíîé íèçêîìîëåêóëÿðíîé
ôîðìû ÏÓ (ó íåå îòñóòñòâóåò äîìåí, ñîîòâåòñòâóþùèé ýïèäåðìàëüíîìó ôàêòîðó ðîñòà, è
êðèíãëîâûé äîìåí â ðåçóëüòàòå ðàñùåïëåíèÿ ñâÿçè Glu143-Leu144) è àëüáóìèíà [88]. Èçâåñòíî, ÷òî
óñïåøíîìó ëå÷åíèþ èíôàðêòà ìèîêàðäà ñ ïîìîùüþ ÏÓ ïðåïÿòñòâóåò íåçíà÷èòåëüíîå âðåìÿ ïðåáûâàíèÿ åå â êðîâîòîêå, ÷òî çàñòàâëÿåò èñïîëüçîâàòü äëÿ ëå÷åíèÿ çíà÷èòåëüíóþ äîçó. Ïðè ââåäåíèè ÏÓ â ëå÷åáíîé äîçå îíà íå îïðåäåëÿåòñÿ â
ïëàçìå áîëüíîãî óæå ÷åðåç 2 ÷àñà. À ïðè ââåäåíèè êîíúþãàòà (5,2 ìêã íà 1 ìë ïëàçìû) ÷åðåç
3 ÷àñà êîíöåíòðàöèÿ ÏÓ ñîñòàâëÿåò 0,9 ìêã/ìë.
Õèìè÷åñêàÿ ìîäèôèêàöèÿ îáðàòèìîãî àöèëèðîâàííîãî ïî àêòèâíîìó öåíòðó ôðàãìåíòà ìîëåêóëû ÒÀÏ (ïîñëåäîâàòåëüíîñòü àìèíîêèñëîò
262–527) è êîâàëåíòíàÿ ñøèâêà ñ ôðàãìåíòîì
NH2 – êîíöåâîé ïîñëåäîâàòåëüíîñòè Ïà (ïîñëåäîâàòåëüíîñòü àìèíîêèñëîò 1–544) ïðèâîäèò ê
100-êðàòíîìó óâåëè÷åíèþ âðåìåíè ïîëóâûâåäåíèÿ õèìåðíîãî êîíúþãèðîâàííîãî ïðîèçâîäíîãî
èç ïëàçìû è çíà÷èòåëüíîìó âîçðàñòàíèþ ýôôåêòèâíîñòè âåíîçíîãî òðîìáîëèçèñà [98].
Ñëåäóåò îòìåòèòü, ÷òî ñëîæèâøååñÿ ïðåäñòàâëåíèå î òðèããåðíîé ðîëè ÒÀÏ (èç-çà íåçíà÷èòåëüíîãî âðåìåíè ïðåáûâàíèÿ â êðîâîòîêå ) â
àêòèâàöèè ÏÃ ïëàçìû íà ôèáðèíîâîì ñãóñòêå à,
âîçìîæíî, è ÓÊ (èç-çà íåçíà÷èòåëüíûõ êîëè÷åñòâ, ïðèñóòñòâóþùèõ â ïëàçìå) ïðèâåëî ê çàêëþ÷åíèþ î òîì, ÷òî äàëüíåéøåå ðàçâèòèå ôèáðèíîëèçèñà ñâÿçàíî ñ àêòèâàöèåé Ïà ïîä äåéñòâèåì ÏÓ, ñîðáèðóþùåéñÿ â êîìïëåêñå ñ Ïà íà
ñïåöèôè÷åñêèõ ó÷àñòêàõ, ïîÿâëÿþùèõñÿ íà äåãðàäèðîâàííîì ôèáðèíå. Òàêîå êîìïëåìåíòàðíîå
äåéñòâèå ÒÀÏ (èëè, âîçìîæíî, è ÓÊ) êàê òðèããåðà ôèáðèíîëèçà, è ÏÓ, êàê àãåíòà, ïîääåðæèâàþùåãî ôèáðèíîëèç, îáåñïå÷èâàåò ýôôåêòèâíîå ðàñòâîðåíèå ôèáðèíîâîãî ñãóñòêà. Ýòà ñõåìà
îäíîâðåìåííîãî äåéñòâèÿ àêòèâàòîðîâ áûëà àï-
ðîáèðîâàíà â êëèíèêàõ íà ïàöèåíòàõ ñ äèàãíîçîì îñòðûé èíôàðêò ìèîêàðäà. Îäíîâðåìåííîå
ââåäåíèå àêòèâàòîðîâ ÏÃ-ÓÊ ñ ÏÓ [80] èëè ÒÀÏ
ñ ÏÓ [78] ïîçâîëèëî äîñòè÷ü ðåêàíàëèçàöèè,
ñõîäíîé ñ ðåçóëüòàòàìè ìîíîòåðàïèè ïðè ñóùåñòâåííî ìåíüøèõ äîçàõ ââåäåíèÿ àêòèâàòîðîâ. Ýòî
äàëî âîçìîæíîñòü óäåøåâèòü ëå÷åíèå è ñíèçèòü
ïðîöåíò îñëîæíåíèé. Ïðè êîìáèíèðîâàííîì ââåäåíèè ÀÏ íàáëþäàåòñÿ ñíèæåíèå êîíöåíòðàöèè
êîìïëåêñà òðîìáèí–àíòèòðîìáèí III, ÷òî ñâèäåòåëüñòâóåò î ìåíüøåé âåðîÿòíîñòè ðåòðîìáîçà.
Êðîìå òîãî, íàáëþäàåòñÿ íåçíà÷èòåëüíîå ñíèæåíèå êîíöåíòðàöèè ôèáðèíîãåíà, α2-àíòèïëàçìèíà è Ïà â ïåðèîä ëå÷åíèÿ è ìàëûé ïðîìåæóòîê
âðåìåíè, íåîáõîäèìûé äëÿ âîññòàíîâëåíèÿ èõ
ñîäåðæàíèÿ â ïëàçìå, ÷òî ñâèäåòåëüñòâóåò î òðîìáîñïåöèôè÷íîñòè äåéñòâèÿ è ñíèæåíèè âîçìîæíûõ ãåìîððàãè÷åñêèõ îñëîæíåíèé.
Óäîâëåòâîðèòåëüíûå ðåçóëüòàòû ïîëó÷åíû
òàêæå â îïûòàõ íà ñîáàêàõ ïðè èñïîëüçîâàíèè
êîìáèíèðîâàííîé òåðàïèè ïðè ââåäåíèè ÒÀÏ è
êîíúþãàòà ÓÊ ñ ôèáðèíîãåíîì [90].  ýòîì ñëó÷àå ïîêàçàíî, ÷òî ââåäåíèå ÀÏ ñ êîìïëåìåíòàðíûì ìåõàíèçìîì äåéñòâèÿ è ôàðìàêîëîãè÷åñêè
ðàçëè÷èìûì ïðîôèëåì äîñòîâåðíî ñïîñîáñòâóåò
äîñòèæåíèþ ýôôåêòèâíîãî òðîìáîëèçèñà in vivo.
Òàêèì îáðàçîì, ïðè êëèíè÷åñêîì èñïîëüçîâàíèè òðîìáîëèòèêîâ íà îñíîâå ÀÏ, êîòîðîå
ïîçâîëèëî çíà÷èòåëüíî ñíèçèòü ïîêàçàòåëü ñìåðòíîñòè ïðè èíôàðêòå ìèîêàðäà, òåì íå ìåíåå îáíàðóæèåíî ðÿä èõ ñóùåñòâåííûõ íåäîñòàòêîâ.
Èçâåñòíî, ÷òî ïðèìåðíî â 30% ñëó÷àåâ ïðè
ââåäåíèè ñîâðåìåííûõ òðîìáîòè÷åñêèõ ñðåäñòâ
òàê è íå óäàåòñÿ âîññòàíîâèòü ïðîõîäèìîñòü ïîðàæåííîé êîðîíàðíîé àðòåðèè. Îäíà èç èçâåñòíûõ ïðè÷èí çàêëþ÷àåòñÿ â îáðàçîâàíèè in vivo
òðîìáîâ, îáîãàùåííûõ òðîìáîöèòàìè, îáëàäàþùèìè ðåçèñòåíòíîñòüþ ê ïðîòåîëèçó ÏÌ, íåçàâèñèìî îò òèïà èñïîëüçóåìîãî àêòèâàòîðà. Ñëåäóåò îòìåòèòü, ÷òî òðîìáîöèòû èãðàþò îïðåäåëÿþùóþ ðîëü â òðîìáîýìáîëè÷åñêèõ êàðäèîñîñóäèñòûõ çàáîëåâàíèÿõ [91], à èõ ñêîïëåíèå ìîæåò ñïîñîáñòâîâàòü ðåîêêëþçèè êîðîíàðíûõ àðòåðèé âñëåä çà óñïåøíîé òåðàïèåé ó ïàöèåíòîâ ñ
îñòðûì èíôàðêòîì ìèîêàðäà [92]. Èçâåñòíà òàêæå ñïîñîáíîñòü òðîìáîöèòîâ ñåêðåòèðîâàòü ÈÀÏ-1,
êîòîðûé ñíèæàåò ôèáðèíîëèòè÷åñêèé ïîòåíöèàë,
÷òî òàêæå ìîæåò ñïîñîáñòâîâàòü ðåîêêëþçèè [93].
Ââåäåíèå èíãèáèòîðîâ àãðåãàöèè òðîìáîöèòîâ èëè
ãèðóäèíà, èíãèáèðóþùåãî òðîìáèí íà ñãóñòêå äî
ââåäåíèÿ ÒÀÏ, ïðèâîäèò ê óâåëè÷åíèþ ñêîðîñòè
ðåïåðôóçèè è ïðåäîòâðàùåíèþ ðåîêêëþçèè [93].
Ïðåïàðàòû, èíãèáèðóþùèå àãðåãàöèþ òðîìáîöèòîâ (àñïèðèí, òèêëîïèäèí), ïîçâîëÿþò ñíèçèòü
íà 25–30% ðèñê èíôàðêòà ìèîêàðäà è ñìåðòíîñòè ó áîëüíûõ àòåðîñêëåðîçîì [94]. Ïåðñïåêòèâ-
ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3
31
ÎÃËßÄÈ
íûì íàïðàâëåíèåì àíòèòðîìáîöèòàðíîé òåðàïèè
ïðåäñòàâëÿåòñÿ ïðèìåíåíèå àíòàãîíèñòîâ IIb/IIIa –
ðåöåïòîðîâ, êàê ïðåïàðàòîâ, èíãèáèðóþùèõ êîíå÷íûé ýòàï àãðåãàöèè òðîìáîöèòîâ [94].
Êîìáèíèðîâàííîå ââåäåíèå àêòèâàòîðîâ
ïëàçìèíîãåíà – íàèáîëåå ñîâðåìåííàÿ òåíäåíöèÿ â òðîìáîëèòè÷åñêîé òåðàïèè – íå ïðåîäîëåâàåò òðîìáîöèòàðíûõ îñëîæíåíèé, à ëèøü ïîçâîëÿåò íåñêîëüêî ñíèçèòü êîëè÷åñòâî èñïîëüçóåìûõ òðîìáîëèòè÷åñêèõ àãåíòîâ, ÷òî óäåøåâëÿåò
ñòîèìîñòü ëå÷åíèÿ. Ñî÷åòàííàÿ òðîìáîëèòè÷åñêàÿ òåðàïèÿ, êðîìå òîãî, ëèøü ñíèæàåò, íî íå
ïðåîäîëåâàåò òàêèå îñëîæíåíèÿ, êàê ðåîêêëþçèÿ
êîðîíàðíûõ ñîñóäîâ è ãåìîððàãèè, êîòîðûå âîçíèêàþò èíîãäà âñëåä çà óñïåøíîé òðîìáîëèòè÷åñêîé òåðàïèåé.
Ïî ìíåíèþ àâòîðà, äàæå íàèáîëåå ñîâðåìåííûå, ïåðñïåêòèâíûå è îõàðàêòåðèçîâàííûå
âûøå íàïðàâëåíèÿ â ñîçäàíèè íîâûõ àêòèâàòîðîâ ÏÃ íå äàäóò ïîëîæèòåëüíûõ ðåçóëüòàòîâ áåç
ó÷åòà ýôôåêòà àãðåãàöèè òðîìáîöèòîâ è âûòåêàþùèõ èç ýòîãî ïîñëåäñòâèé. Òàêæå íåîáõîäèìî
ó÷èòûâàòü íàëè÷èå ñîðáèðîâàííîãî íà ôèáðèíîâîì ñãóñòêå òðîìáèíà, îñâîáîæäåíèå êîòîðîãî â
êðîâÿíîå ðóñëî ïîñëå óñïåøíîé òðîìáîëèòè÷åñêîé òåðàïèè ïðèâîäèò ê ðåîêêëþçèè ñîñóäà.
Èçâåñòíî, ÷òî êðîâîòå÷åíèÿ, ñîïðîâîæäàþùèå òðîìáîëèòè÷åñêóþ òåðàïèþ ïðè èñïîëüçîâàíèè ÑÊ è ÓÊ â ïðîöåññå ëå÷åíèÿ èíôàðêòà
ìèîêàðäà, îáúÿñíÿþòñÿ íåîáõîäèìîñòüþ ââîäèòü
èõ â çíà÷èòåëüíûõ êîëè÷åñòâàõ èç-çà îòñóòñòâèÿ
ó ýòèõ àãåíòîâ òðîìáîñïåöèôè÷íîñòè äåéñòâèÿ è
íåçíà÷èòåëüíîãî âðåìåíè ïðåáûâàíèÿ â êðîâîòîêå. Ñ òî÷êè çðåíèÿ àâòîðà, êðîâîòå÷åíèÿ, âîçíèêàþùèå ïðè èñïîëüçîâàíèè ôèçèîëîãè÷åñêèõ
è íàèáîëåå ñïåöèôè÷íûõ ê òðîìáó àêòèâàòîðîâ
ïëàçìèíîãåíà (ÒÀÏ è ÏÓ), òàêæå îáúÿñíÿþòñÿ
íåîáõîäèìîñòüþ ââåäåíèÿ èõ â çíà÷èòåëüíûõ
äîçàõ ïî ñðàâíåíèþ ñ ôèçèîëîãè÷åñêèìè êîíöåíòðàöèÿìè. Ýòî äîêàçûâàåò àêòóàëüíîñòü ïîëó÷åíèÿ ìîäèôèöèðîâàííûõ ôîðì ôèçèîëîãè÷åñêèõ àêòèâàòîðîâ ÏÃ, îáëàäàþùèõ áîëåå âûñîêèì ñðîäñòâîì ê òðîìáó è âûñîêîé êàòàëèòè÷åñêîé ýôôåêòèâíîñòüþ àêòèâàöèè, ÷òî ïîçâîëèò óâåëè÷èòü ôèáðèíîëèòè÷åñêèé ïîòåíöèàë.
Èçâåñòíî, ÷òî íåîáõîäèìîñòü ââåäåíèÿ áîëüøèõ äîç ÀÏ îáóñëîâëåíà íåçíà÷èòåëüíûì âðåìåíåì ïîëóæèçíè àêòèâàòîðîâ â ïëàçìå.  ñëó÷àå òåðàïèè ÒÀÏ íåçíà÷èòåëüíîå âðåìÿ ïîëóâûâåäåíèÿ åãî èç êðîâîòîêà ñâÿçûâàþò ñ íåîáðàòèìûì èíãèáèðîâàíèåì ÈÀÏÃ-1.
Îäíàêî íàðÿäó ñ ýòèì îáúÿñíåíèåì, ïî ïðåäïîëîæåíèþ àâòîðà, ñóùåñòâåííûì ÿâëÿåòñÿ ñíèæåíèå ýôôåêòèâíîñòè àêòèâàöèè ÏÃ ñ ïîìîùüþ
ÒÀÏ ïðè ïàòîëîãèè, îáóñëîâëåííîå íåñêîëüêè-
ìè ïðè÷èíàìè.
Çíà÷èòåëüíûé âêëàä â èíãèáèðîâàíèå ïðîöåññà àêòèâàöèè Ïà ïîä äåéñòâèåì ÒÀÏ ïðè èíôàðêòå ìèîêàðäà âíîñèò ÒÀÈÔ, êîòîðûé àêòèâèðóåòñÿ âñëåä çà îáðàçîâàíèåì òðîìáà. Îí êàòàëèçèðóåò îòùåïëåíèå Ñ-êîíöåâûõ îñòàòêîâ ëèçèíà, îáðàçóþùèõñÿ íà ôèáðèíå ïî ìåðå ïðîòåîëèçà åãî ÏÌ, èãðàþùèõ ñóùåñòâåííóþ ðîëü íà
âòîðîé íàèáîëåå ýôôåêòèâíîé ñòàäèè àêòèâàöèè
ÏÃ ýòèì òèïîì àêòèâàòîðà.
Êðîìå òîãî, â îïûòàõ in vitro ïîêàçàíî çíà÷èòåëüíîå ñíèæåíèå ýôôåêòèâíîñòè àêòèâàöèè
Ïà ÒÀÏ (â ñëó÷àå ïðîøèòîãî ïî α- è γ-öåïÿì
ôèáðèíà è ïðè âêëþ÷åíèè â òàêîé ñãóñòîê ôèáðîíåêòèíà) çà ñ÷åò óâåëè÷åíèÿ Êm ðåàêöèè áîëåå ÷åì
íà ïîðÿäîê, ÷òî â ñî÷åòàíèè ñ îïûòàìè íà æèâîòíûõ ïîçâîëÿåò ïðåäïîëîæèòü íåäîñòàòî÷íîñòü ñâîáîäíîãî Ïà ïëàçìû äëÿ äîñòèæåíèÿ ìàêñèìàëüíîé ñêîðîñòè àêòèâàöèè ÒÀÏ ïðè ïàòîëîãèè.
Åñòü îñíîâàíèÿ ïîëàãàòü, ÷òî íåîáõîäèìîñòü
èñïîëüçîâàíèÿ çíà÷èòåëüíûõ êîëè÷åñòâ ÒÀÏ ïðè
òðîìáîëèòè÷åñêîé òåðàïèè îáúÿñíÿåòñÿ òàêæå
íåéòðàëèçàöèåé ïðîôèáðèíîëèòè÷åñêîé ôóíêöèè
ÀÏÑ, ÷òî ñíèæàåò ôèáðèíîëèòè÷åñêèé ïîòåíöèàë.
 ñëó÷àå òåðàïèè ñ ïðèìåíåíèåì ÏÓ, ôèçèîëîãè÷åñêîãî è ôèáðèíîñïåöèôè÷íîãî àêòèâàòîðà ïëàçìèíîãåíà, èíãèáèðîâàíèå àêòèâàöèè
ÈÀÏÃ-1 íîñèò îáðàòèìûé õàðàêòåð è íå âëèÿåò
íà åå ýôôåêòèâíîñòü. Íà íàø âçãëÿä, îïðåäåëÿþùàÿ ðîëü â èíãèáèðîâàíèè àêòèâàöèè ÏÃ ýòèì
òèïîì àêòèâàòîðà íà ôèáðèíîâîì ñãóñòêå ïðèíàäëåæèò ÒÀÈÔà, êîíöåíòðàöèÿ êîòîðîãî ïðè
ïàòîëîãèè âîçðàñòàåò. Ýòîò èíãèáèòîð çíà÷èòåëüíî ñíèæàåò ýôôåêòèâíîñòü àêòèâàöèè Ïà íà âòîðîé, îïðåäåëÿþùåé ñòàäèè àêòèâàöèè åãî íà äåãðàäèðîâàííîì ôèáðèíå, ãäå ÏÓ in vivo îòâîäèòñÿ îñíîâíàÿ ðîëü. Êàê ñëåäñòâèå âîçíèêàåò íåäîñòàòîê êîëè÷åñòâà ÏÃ, òðåáóåìîãî äëÿ äîñòèæåíèÿ ìàêñèìàëüíîé ñêîðîñòè àêòèâàöèè. Âîçìîæíî, ñóùåñòâóþò è äðóãèå ïðè÷èíû, îáúÿñíÿþùèå íåîáõîäèìîñòü ââåäåíèÿ çíà÷èòåëüíûõ äîç
ýòîãî òðîìáîëèòèêà.
Íà îñíîâàíèè äàííûõ ëèòåðàòóðû è ÷èñòî
òåîðåòè÷åñêèõ ïðåäïîëîæåíèé, àâòîð ïðèøåë ê
çàêëþ÷åíèþ, ÷òî êîìáèíèðîâàííàÿ òåðàïèÿ, îñíîâàííàÿ íà ñîâðåìåííûõ ïðåäñòàâëåíèÿõ î òðèããåðíîì ìåõàíèçìå àêòèâàöèè Ïà in vivo, äîëæíà
ðàçâèâàòüñÿ ïî ëèíèè óñëîæíåíèÿ. Íåîáõîäèìî
ó÷èòûâàòü âûøåïåðå÷èñëåííûå îòðèöàòåëüíûå
ôàêòîðû è èñïîëüçîâàòü ñóùåñòâóþùèå íàïðàâëåíèÿ â ðàçðàáîòêå ñîâðåìåííûõ òðîìáîëèòè÷åñêèõ àãåíòîâ íîâîãî ïîêîëåíèÿ. Áåç ñîìíåíèÿ,
î÷åíü âàæíî òàêæå îáðàòèòü âíèìàíèå íà ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèé è ïðåäëîæåíèé ïî àíòèòðîìáîöèòàðíîé òåðàïèè.
32
ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3
Ë. Ä. ÒÀÐÀÍ
THROMBOLYSIS: ACHIEVEMENTS,
PROBLEMS, PROSPECTS
1. Êóäèíîâ Ñ. À. // Óêð. á³îõ³ì. æóðí. 2000. 72,
¹ 4–5. Ñ. 90–98.
2. Sutherland J. E., Persky V. W., Brody J. A. // J.
Amer. Med. Assoc. 1990. 264, N 11. P. 3178–
3184.
3. Violand B. N., Castellino F. J. // J. Biol.
Chem.1976. 252, N 13. P. 3906–3912.
4. Rickli E. F., Otawsky W. J. // Biochim. Biophys.
Acta. 1971. 250, N 2. 447–451.
5. Robbins K., Summaria L., Heich B. A. // J. Biol.
Chem. 1967. 242, N 10. P. 2333–2342.
6.Wilcox R. J., Olsson C. J., Shent F. M. // Lancet.
1988. 2, N 2. Ð. 545–544.
7. Iwamoto M. // Thromb. Diath. Haemorrh. 1975.
33, N 2. Ð. 577–585.
8. Walen P., Kok. P., Renby N. // J. Biol. Chem.
1977. 47, N 1. Ð. 117–128.
9. Davidson D. J., Higgins D. N., Castellino F. J.
// Biochemistry. 1990. 29, N 8. Ð. 3585–3590.
10. Anderson H. V., Willerson J. T. // J. New. Engl.
Med. 1993. 69, N 2. Ð. 703–709.
11. Collen D., Lijnen H. R. // Blood. 1991. 78, N 7.
Ð. 3114–3124.
12. Brokway W. J., Castellino F. J. // Biochemistry.
1974. 13, N 5 Ð.2063–2068.
13. Hiaogiang W., Xinli L., Jeffrey L. A. // Science.
1998. 281, N 4. Ð. 1662–1668.
14. Wulf W. J., Mertz E. F. // Canad. J. Biochem.,
1969. 47, N 2. Ð. 929–935.
15. Davies M. C., Englert M. E., Renzo E. C. // J.
Biol. Chem. 1964. 239, N 8. Ð. 2615–2623.
16. Raidy K., Markus C. // Biochem. Biophys. Res.
Communs. 1973. 51, N 2. Ð. 672–633.
17. Mc Clintock D. K., Englert M. E., Dsiobkowaki G.,
Shederker E. H. // Biochemistry. 1974. 13, N 26.
Ð. 5334–5338.
18. Robbins K. C., Summaria L., Haich B. A. // J.
Biol. Chem. 1967. 242, N 10. Ð. 2333–2342.
19. Boxrud P. D., Fay W. P., Bock P. E. // Ibid.
2000. 275, N 24. Ð. 14579–14589.
20. Wang S., Rul G. L., Hedstrom L. // Eur. J.
Biochem. 2000. 267, N 8. Ð. 3994–4001.
21. Boxrud D. B., Bock P. E. // Biochemistry. 2000.
45, N 27. Ð. 13974–13981.
22. Lei–Tong L., Huung A., Reed G. L. // Ibid. 39,
N 11. Ð. 4740–4745.
23. Boxrud P. D., Ingrid M. A., Fay W. P., Bock P. E.
// J. Biol. Chem. 2001. 276, N 45. Ð. 26034–
26089.
24. Haber E., Quertermous T., Matsueda G. R.,
Marschal S. R. // Science. 1989. 243, N 1. Ð. 51–
56.
25. Ëàøêóí Â. Â. / Àâòîð. äèñ. êàí. ìåä. íàóê ,
Çàïîðîæüå. 2000. Èçä-âî Ãîñóä. ìåä. óí-ò.
26. Ong E. B., Jonson A. J., Scheellman G. //
Biochim. Biophys. Acta. 1976. 429, N 1. Ð. 252–
257.
27. Âåðåìååíêî Ê. Í., Êèçèì À. È. // Âîïðîñû
ìåä. õèìèè. 1984. 30, ¹ 1. Ð. 13–22.
28. Binder B. R., Beckmann R., Jorg M. // Thrombos.
and Haemost. 1987. 46, N 1. Ð. 12–20.
29. Thorsen S., Glas-Glenwalt P., Astrup P. //
Thrombos. Diathes. Haemorrh. 1989. 261, N 1.
Ð. 313–324.
30. Fears R. // Biochem. J. 1989. 261, N 1. Ð. 313–324.
31. Maksimenko A. V., Torchilin V. P. // Thrombos.
Res. 1985. 38, N 1 Ð. 289–295.
32. Peltz B., Hardt T. A., Mangel W. V. //
Biochemistry. 1982. 21, N 13. Ð. 2798–2804.
33. Ìàêñèìåíêî À. Â. // Ìîëåêóë. áèîë. 1995. 29,
¹ 1. Ñ. 36–60.
34. Mattsson C., Nyberg- Frrhenius V., Wallen P. //
Thrombos. Res. 1981. 21, N 2. Ð. 535–545.
35. Cole E. R., Bachmann F. W. // J. Biol. Chem.
1977. 252, N 8. Ð. 3729–3757.
36. Rijken D. C., Wijn Gaards M., Zaal De Long //
Biochim. Biophys. Acta. 1979. 580, N 1. Ð. 140–
153.
37. Aasted B. // Ibid. 1980. 621, N 1. Ð. 241–254.
ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3
33
L. D. Taran
Palladin Institute of Biochemistry, National Academy
of Sciences of Ukraine, Kyiv;
e-mail: taran48@yandex.ru
Summary
Data on the mechanism of plasminogen activation by streptokinase, tissue and urokinase-type
plasminogen activators (PAs) is reviewed. The regulatory role of fibrin in plasminogen activation involving its direct interaction with tissue-type PA and
indirect interaction with streptokinase and urokinasetype PAs is demonstrated. Information on the current PAs use in thrombolytic therapy is also presented. The complications arising with administration of such thrombolytic agents are analyzed and
the causes of complications are supposed. Recent
information on the development of new PAs is also
reviewed. The results of studies of PA mutant derivatives synthesized by recombinant DNA techniques
as well as chimeric (hybrid) forms of PAs and their
chemically synthesized conjugates are presented. The
trend in search for PAs is analyzed. A new direction
in the study of PAs for combined plasminogen activation and further development of the methods of
thrombolytic therapy is outlined.
K e y w o r d s: plasminogen activators, recombinant forms, chemical conjugates, chimeric forms,
fibrinolytic activity, thrombolysis.
ÎÃËßÄÈ
38. Pennica D., Holmes W. E., Kohr W., Harkins R. N.
// Nature. 1983. N 1301. Ð. 214–221.
39. Nechein M. E., Fredenburgh J. C., Larsen J. R.
// J. Biol. Chem. 1990. 265, N 23. Ð. 21541–
21548.
40. Anton J. G., Horreverents A. J. G. , Smilde A. et
al. // Ibid. 1994. 269, N 16. Ð. 12639–12644.
41. Rijken D. C., Heylayerts M. S., Collen D. //
Ibid. 1982. 257, N 25. Ð. 2920–2925.
42. Heylayerts M. S., Rieken D. C., Lienen H. R.,
Collen D. // Ibid. N 7. Ð. 2912–2916.
43. Horreverents A. J. G., Pannekock H., Nesheim M. E.
// Ibid. 1997. 272, N 5. Ð. 2183–2191.
44. Norman B., Wallen P., Ranby M. // Eur. J.
Biochem. 1985. 149, N 1. Ð. 93–200.
45. Rijken D. C., Hoylayerts M. S., Collen D. // J.
Biol. Chem. 1982. 257, N 9. Ð. 2920–2925.
46. Òàðàí Ë. Ä., Ìàêîãîíåíêî Å. Ì., Íàçàðåíêî Í. À., Êóäèíîâ Ñ. À. // Áèîõèìèÿ. 1986.
51, ¹ 8. Ñ. 1256–1261.
47. Ìàêîãîíåíêî Å. Ì., Êèðïà Ñ. À., Ëóãîâñêîé Ý. Â.,
Íàçàðåíêî Í. À. // Òàì æå. 1987. 52, ¹ 9.
Ð. 1746–1752.
48. Fredenburg J. C., Nesheim M. E. // J. Biol.
Chem. 1992. 267, N 22. Ð. 26150–26156.
49. Suenson E., Lut Zen J., Thorsen S. // Eur. J.
Biochem. 1984. 140, N 1. Ð. 513–522.
50. Horreverents A. J. G., Pannekock H., Nesheim M. J.
// J. Biol. Chem. 1997 272, N 5. Ð. 2176–
2182.
51. Suenson E., Thorsen S. // Bochemistry. 1988.
27, N 4. Ð. 2435–2443.
52. Suenson E., Bjerrum P., Holm et al. // J. Biol.
Chem.1990. 265, N 25. Ð. 22228–22237.
53. Lloud D. A., Cederholm-Williams S. A., Shorp A. A.
// Thrombos. and Haemost. 1981. 46, N 1.
Ð. 163–169.
54. Äðóæèíà Í. Í., Ìàêîãîíåíêî Å. Ì., ßêîâëåâ Ñ. À.
// Äîêëàäû ÀÍ ÑÑÑÐ. 1993. Ñåð. Â, ¹ 1.
Ñ. 151–154.
55. Grancha S., Estelles A., Falko C., Chiraella M.
// Fibrinolys. and Proteol. 1998. 12, N 1. Ñ. 53–60.
56. Eruksin P., Hamsten A. // Fatty Acids. 1997. 57,
N 1. Ð. 516–520.
57. Redetz A., Nicolini F. A., Malycky J. L., Topol F. J.
// Circulation. 1996. 93, N 3. Ð. 1328–1330.
58. Refino C. J., Schmitt D., Pater C., Eaton D. //
Fibrinolys. and Proteol. 1998 12, N 1. Ð. 29–
31.
59. Nagashima M., Werner M., Zhad L., Light D. R.
// Thromb. Res. 2000. 98, N 1. Ð. 337–342.
60. Druzhina N. N., Yakovlev S. A., Makogonenko E. M. // Thrombos. and Haemost. 1995. 73,
N 3. Ð. 1130–1136.
61. Rezaie A. R. // J. Biol. Chem. 2001. 276, N 21.
Ð. 15567–15570.
62. Fay W. P., Ower W. J. // Biochemistry. 1989.
28, N 13. Ð. 5773–5778.
63. Fouw N. J., Noverkate F., Bertina R. N. et al. //
Blood. 1986. 67, N 4. Ð. 1189–1192.
64. Husocin S. S., Gurevitch V., Lipinsky B. //
Thrombos. and Haemost. 1981. 46, N 1. Ð. 11–16.
65. Wun T. C., Ossiwsky L., Reish E. // J. Biol.
Chem. 1982. 257, N 15. Ð. 7262–7268.
66. Wun T. C., Schleuning W. D., Reich E. // Ibid.
1982. 257, N 7. Ð. 3276–3283.
67. Fleury V., Lijnen H. R., Angles-Cano E. // Ibid.
1993. 268, N 19. Ð. 18554–18559.
68. Collen D., Zamarron C., Lijnen H. R. // Ibid.
1986. 261, N 4. Ð. 1259–1266.
69. Suclly M. F., Ellis V., Watakike G., Kakkar V. V.
// Arch. biochem. biophys. 1989. 268, N 1.
Ð. 434–446.
70. Pannel A., Angles Comno E., Gurevich V. //
Thrombos. and Haemost. 1990. 64, N 1. Ð. 556–
558.
71. Lijnen H. R., Wreedi K., Demorsin T., Collen D.
// Ibid. 1984 52, N 1. Ð. 31–32.
72. Gurevich V., Pannel R., Louice S., Kelliy P. //
J. Clin. Invest. 1984. 73, N 4. Ð. 1731–1739.
73. Liu J. N., Curevich V. // Biochemistry. 1992.
31, N 13. Ð. 6311–6317.
74. Dederk P. J., Lijnen H. R., Verstreken M. et al.
// Blood. 1990. 75, N 4. Ð. 1794–1800.
75. Badylak S. F., Voytik S. L., Henkin J., Burke S. L.
// Thrombos. Res. 1991 62, N 1. Ð. 115–126.
76. Smith R. A. J., Dupe P. J., English P. D. //
Nature. 1981. 290, N 1. Ð. 505–508.
77. Dupe R. J., English P.D., Smith R. A. J. et al. //
Thrombos. and Haemost. 1984. 51, N 1. Ð. 248–
253.
78. Ìàêñèìåíêî À. Â. // Áèîîðãàí. õèìèÿ. 1999.
25, ¹ 8. Ð. 563–571.
79. Tebbe U., Michels R., Adse Y. J. et al. // J.
Amer. Coll. Cardiol. 1998. 31, N 1. Ð. 487–
493.
80. Pinder G., Kolhler M., Sen S. et al. // Thrombos.
Res. 1991 62, N 1. Ð.115–162.
81. Lijnen H. R., Collen D. // J. Biol. Chem. 1993.
268. Ð. 8284–8289.
82. Lijnen H. R., Hoef B. V., De Cock F. // Ibid.
1991. 266, N 14. Ð. 11826–11832.
83. Short R. // Brit. J. Cardiol. 1996. 3, N 1. Ð. 89–93.
84. Liu J. N., Tang W., Sun Z. Y et. al. //
Biochemistry. 1996. 35, N 16. Ð. 14070–14076
85. Phaneuf M. D., Ozakic K., Johnstone M. T. et
al. // Thrombos. and Haemost. 1994. 71, N 1.
Ð. 481–487.
86. Robbins K. C., Tanaka G. // Biochemistry. 1986.
25, N 8. Ð. 3603–3611.
87. Robbins K. C., Borewisha A. J. // Ibid. 1987.
261, N 10. Ð. 4661–4668.
34
ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3
Ë. Ä. ÒÀÐÀÍ
88. Breton J., Pezzi N., Molirari L. // Eur. J.
Biochem. 1995. 235, N 1. Ð. 563–569.
89. Robinson J. H., Browne M. J., Carey J. E. et al.
// Thrombos. Res. 1992. 86, N 2. Ð. 548–552.
90. Ìàêñèìåíêî À. Â. // Õèì. ôàðìàöåâò. æóðí.
1998. 32, ¹1. Ñ. 37–40.1994. 71, N 1. Ð. 481–
487.
91. Jang J. K., Gold H. R., Ziskind A. A. et al. //
Circulation. 1989. 79, N 2. Ð. 920–928.
92. Dewerchin M., Lijnen H. R., Stassen J. M., et al.
// Blood. 1991. 78, N 3. Ð. 1005–1018.
93. Topol E. J. // Circulation. 1998. 97, N 1. Ð. 211–
218.
94. Äîáðîâîëüñêàÿ À. Á., Òèòàåâà Å. Â. // Áèîõèìèÿ. 2002. 67, ¹ 1. Ñ. 116–126.
Ïîëó÷åíî 28.07.2003
ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2004, ò. 76, ¹ 3
35