СИНТЕЗ ПОТЕНЦИАЛЬНО ИММУНОАКТИВНЫХ

ДОКЛАДЫ АКАДЕМИИ НАУК РЕСПУБЛИКИ ТАДЖИКИСТАН
2013, том 56, №6
БИООРГАНИЧЕСКАЯ ХИМИЯ
УДК 547.964
Б.М.Холназаров, Н.Д.Бунятян, А.Н.Шахматов, Г.М.Бобиев
СИНТЕЗ ПОТЕНЦИАЛЬНО ИММУНОАКТИВНЫХ ЛИЗИНСОДЕРЖАЩИХ
ПЕПТИДОВ
Таджикский государственный педагогический университет им. С.Айни
(Представлено академиком АН Республики Таджикистан К.Х.Хайдаровым 25.04.2013 г.)
Описан синтез лизинсодержащих тетрапептидов Н-Pro-Lys-Lys-Gly-OН и Н-Pro-Ala-LysVal-OН с использованием активированных (пентахлорфениловых) эфиров путем ступенчатого наращивания пептидной цепи, начиная с С-конца. Определение активности синтезированных пептидов
in vivо путѐм изучения антителообразования при совместном применении с противотейлериозной
вакциной в сравнении с тимогаром показало, что пептиды не обладают иммуностимулирующей активностью.
Ключевые слова: синтез – лизинсодержащие пептиды – активированные эфиры – иммуностимулирующая активность.
В последние годы низкомолекулярные пептиды занимают всѐ большее место среди лекарственных препаратов. Это объясняется тем, что они не являюися чужеродными для живого организма и
вследствие этого почти не вызывают побочных явлений. Известно, что биологическая активность
пептидов обуславливается активностью входящих в их состав аминокислот [1-3]. Одной из таких
аминокислот является лизин, входящий в состав активных центров многих белков и гормонов, например тимозина α1, тимопоэтина [4,5]. Поэтому можно предположить, что лизинсодержащие пептиды могут обладать иммуностимулирующей активностью.
Цель данной работы – синтез лизинсодержащих тетрапептидов Н-Pro-Lys-Lys-Gly-OН и НPro-Ala-Lys-Val-OН и оценка их иммуностимулирующей активности.
При синтезе некоторых низкомолекулярных иммуноактивных пептидов было показано, что
одним из эффективных методов их синтеза является ступенчатое наращивание пептидной цепи начиная с С-конца, с использованием активированных эфиров с соблюдением тактики максимальной защиты [6].
В качестве активированных были использованы пентахлорфениловые эфиры. Для защиты αаминогруппы в качестве временной защиты использовали трет-бутилоксикарбонильную группу, для
защиты α-аминогрупп N-концевого пролина использовали бензилоксикарбонильную группу. Эту же
группу использовали для блокирования ε-аминогруппы лизина. Для блокирования α-карбоксильных
групп С-концевых аминокислот использовали сложноэфирную
бензильную
группу.
Трет-
бутилоксикарбонильную группу на промежуточных стадиях синтеза удаляли действием 3.17 М раствором HCl в этилацетате в течение 30 мин. Бензилоксикарбонильную и бензильную группы снимали
Адрес для корреспонденции: Холназаров Баходур Махмадназарович. 734005, Республика Таджикистан,
г.Душанбе, ул. А.Каххарова, 111, ООО «Занд». E-mail: [email protected].
476
Биоорганическая химия
Б.М.Холназаров, Н.Д.Бунятян и др.
каталитическим гидрированием в присутствии 5%-ного палладия на активированном угле. Такой
выбор защитных групп позволил проводить окончательное деблокирование за одну стадию.
Схемы синтеза тетрапептидов Н-Pro-Lys-Lys-Gly-OН и Н-Pro-Ala-Lys-Val-OН приведены на
рисунке.
Pro
Lys
Lys
OPсp H
Z
Boc
Boc
Boc
OPсp
Z
Boc
Z
OPсp
H
Z
H
Pro
Gly
OBzl
OBzl
Z
Н
OBzl
Z
OBzl
Z
Z
OBzl
Z
Z
OBzl
Z
Z
OH
Ala
Lys
Boc
Boc
Val
OPсp H
Z
OBzl
OBzl
Z
OBzl
Z
OBzl
Z
OBzl
Z
Z
OBzl
H
Z
OH
Boc
OPсp
Н
Boc
Z
OPсp
H
Рис. 1. Схемы
синтеза
тетрапептидов
H-Pro-Ala-Lys-Val-OH
и H-Pro-Lys-Lys-Gly-OH
Рис.1.
Схемы синтеза
тетрапептидов
H-Pro-Ala-Lys-Val-OH.Н-Pro-Lys-LysGly-ОН.
Очистку промежуточных защищѐнных ди-, три- и тетрапептидов проводили стандартным методом путѐм промывания их этилацетатных растворов кислыми и основными реагентами. Выход
защищѐнных промежуточных пептидов на стадиях конденсации составлял 68.8-80.4%.
Таким образом, проведѐнный синтез ещѐ раз подтвердил тот факт, что одним из оптимальных
путей синтеза низкомолекулярных пептидов является использование тактики максимальной защиты
и ступенчатого наращивания пептидной цепи методом активированных эфиров, начиная с С-конца.
Активность синтезированных пептидов была изучена in vivo по усилению антителообразования при совместном применении с противотейлериозной вакциной в сравнении с тимогаром. Полученные результаты приведены в таблице.
Таблица
Иммунологическая активность синтезированных пептидов
Формула дипептида
H-Ile-Trp-OH (тимогар)
H-Tyr-Lys-Phe-Gly-OH
Н-Tyr-Tyr-Pro-Ser-NH2
H-Pro-Lys-Lys-Gly-OH
H-Pro-Ala-Lys-Val-OH
Титр противотейлерийных антител
1:1600
1:800
1:800
1:800
1:800
477
Иммунологическая активность
относительно тимогара
100,0
0
0
0
0
Доклады Академии наук Республики Таджикистан
2013, том 56, №6
Как показывают полученные результаты, наиболее активным оказался дипептид изолейцилтриптофан (тимогар), вследствие чего он является наиболее перспективным для разработки на его
основе иммуностимулирующих лекарственных препаратов.
Поступило 26.04.2013 г.
Л И Т Е РАТ У РА
1. Белокрылов Г.А., Попова О.Я., Сорочинская Е.И. – Бюлл. эксперим. биол. мед., 1999, т. 127, № 6,
с. 674-676.
2. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., Малинин В.В. Пептидные тимомиметики. – СПб.: Наука, 2000,
158 с.
3. Шатаева Л.К., Хавинсон В.Х., Ряднова И.Ю. Пептидная саморегуляция живых систем (факты и
гипотезы). – СПб.: Наука, 2003, 222 с.
4. Abiko T., Onodera I., Sekino H. – Chem. Pharm. Bull., 1980, v.28, № 8, pр.2507-2511.
5. Denes L., Szende B., Ember J., Hajos G., Szporny L., Rill A., Nyeki O., Schon J., Kisfaludy L. – Иммунология, 1986, №3, с. 13-19.
6. Бобиев Г.М. Бунятян Н.Д., Саядян Х.С., Саповский М.М. Иммуноактивные пептиды и их координационные соединения в медицине.  М.: Издательский дом «Русский врач», 2009, 228 с.
Б.М.Холназаров, Н.Д.Бунятян, А.Н.Шахматов, Ѓ.М.Бобиев
СИНТЕЗИ ПЕПТИДЊОИ ЛИЗИНДОРИ ФАЪОЛНОКИИ МАСУНИИ
ИМКОНПАЗИРДОШТА
Донишгоњи давлатии омўзгории Тољикистон ба номи С.Айнї
Синтези тетрапептидњои лизиндори Н-Pro-Lys-Lys-Gly-OН ва Н-Pro-Ala-Lys-Val-OН бо
усули эфирњои фаъолкардашуда (пентахлорфенилї) бо роњи аз С-охир сар карда, зина ба зина
дароз кардани занљири пептидї тавсиф карда мешавад. Муайянкунии фаъолияти пептидњои
синтез кардашуда in vivo бо роњи тадќиќи зиддиљисмњосилкунї њангоми истифодаи якљояи онњо
бо ваксинаи зиддитейлериозї нисбат ба тимогар нишон дод, ки пептидњои мазкур аз назари
масунї фаъол нестанд.
Калимањои калидї: синтез – пептидњои лизиндор – эфирњои фаъол кардашуда – фаъолнокии ба
ангузиш оварандаи масуният.
B.M.Kholnazarov, N.D.Buniatian, A.N.Shakhmatov, G.M.Bobiev
THE SYNTHESIS OF THE POTENTIAL IMMUNOACTIVE
LYSINE-CONTAINING PEPTIDES
S.Ainy Tajik State Pedagogical University
The synthesis of lysine-containing tetrapeptides Н-Pro-Lys-Lys-Gly-OН и Н-Pro-Ala-Lys-Val-OН
by the method of activated (pentachlorophenyl) esters by stepwise increase of peptide chain from C-end are
describe The study of activity of synthesised peptides in vivo on intension of formation of aniybodies at co-
478
Биоорганическая химия
Б.М.Холназаров, Н.Д.Бунятян и др.
operative use with antitheileriosis vaccine in comparison with thymogar showed that peptides has not immynostimulating activity.
Key words: synthesis – lysine-containing peptides – activated esters – immynostimulating activity.
479