Опасность заключается в том, что иммуносенсибилизация

NON-D RH ANTIBODIES APPEARING AFTER
APHERESIS PLATELET TRANSFUSION:
STIMULATION BY RED CELLS OR MICROPARTICLES?

J.Kitazawa, K Nollet, H.Morioka, K.Tanaka, M.Inomata, Y.Kubuki et H. Ohto

VoxSanguinis
The International journal of Transfusion Medicine
 Number 4 MAY 2011
Иммуносенсибилизации антирезуснымиантиэритроцитарными антителами по-прежнему
весьма актуальная проблема в клинической
трансфузиологии, так как посттрансфузионные
реакции и осложнения могут носить тяжелые
клинические проявления и представлять опасность
для жизни больного
Опасность заключается в том, что иммуносенсибилизация
антиэритроцитарными антителами не имеет клинических
проявлений до контакта с антигеном:
1.Трансфузия компонентами крови, которые вызывают острые
или отсроченные гемолитические реакции;
2.Беременность: иммуносенсибилизация проявляется
гемолитической болезнью плода и новорожденного,
невынашиванием беременности;
3.Трансплантация органов и тканей: проявляется реакцией
отторжения немедленного или замедленного типа
Иммуносенсибилизация населения в России в среднем
составляет 0,22%, из которых женщин - 80,4% в основном
репродуктивного возраста, мужчин -19,5%
Иммуносенсибилизация антирезуснымиантиэритроцитарными антителами (С,с,Д,Е,е) считается
прерогативой эритроцитсодержащих компонентов крови,
однако настоящее исследование показывает, что
тромбоконцентрат, полученный аферезным путем, может
стать причиной образования антирезусных антиэритроцитарных антител у реципиентов.
Авторы статьи изучили истории болезни пациентов, которым были проведены
трансфузии тромбоцитов, и выявили 3 случая иммуносенсибилизации антирезусными антиэритроцитарными антителами
Пациент №1
Пациент№2
Пациент №3
71/Ж
57/Ж
73/М
Возраст/пол
Цель трансфузии
Хирургическое
кровотечение
ДS (аневризма аорты)
Тромбоцитопения
после химиотерапии
ДS рак легкого
Тромбоцитопения
миелодиспластитеский
синдром
Беременность
да
да
нет
Трансфузии в анам.
да
нет
нет
Трансфузии
PLT тромбоцитов
2 дозы от 2-х доноров
1 доза
4 дозы от 3-х доноров
Сопутствующие
трансфузии
Эр. масса, СЗП,
аутотрансфузия
нет
нет
Сроки выявления
Анти Rh антител
22 день
37 день
82 день
Выявленные
Анти Rh антитела
Анти С
Анти Е
Анти с и Е
Цель исследования:
Изучить и выявить причину иммуносенсибилиции
антирезусными - антиэритроцитарными
антителами у реципиентов после трансфузии
тромбоцитов, полученных аферезным путем
Задачи исследования:
1. Исследовать компоненты крови, полученные аферезным
путем,
лабораторно-диагностическими
методами
для
выявления дополнительных клеточных популяций и примесей в
тромбоконцентрате и свежезамороженной плазме.
2. Провести анализ полученных результатов и
выявить
причины
иммуносенсибилизации
антирезусными
антиэритроцитарными антителами у реципиентов после
трансфузии тромбоконцентратом, полученным аферезным
путем
3. Сравнить компоненты крови, полученные аферезным путем:
тромбоцитарный концентрат и свежезамороженная плазма, и
оценить степень риска иммуносенсибилизации для реципиентов
Материалы и методы
Для исследования использовали 50 образцов
тромбоконцентрата и 50 образцов
свежезамороженной плазмы от 100 доноров,
полученных аферезным путем, предоставленных
службой крови Красного Креста Японии. Во всех
образцах было исключено наличие антирезусныхантиэритроцитарных антител
Исследования проведены:
Методом проточной лазерной цитометрии на проточном
лазерном цитометре FACS Calibur using TruCOUNT (BD, Franklin
Lakes, NJ, USA) по стандартным протоколам исследования с
двойной флуоресцентной окраской FITS и PЕ, с использованием
моноклональных антител СD 235а (гликоферрин А) –
эритроцитарный
гейт
и
СD
41а
(гликоферринIIb\IIIa)
тромбоцитарный гейт и поликлональные анти Rh(D)
антитела с Ig G (OrthoClinical Diagnostics,Tokyo)
Методом оптической микроскопии
Количественный контроль клеток крови производили на
автоматическом гематологическом анализаторе (Sysmex
Corporation,Tokyo,Japan)
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ:
Представленные образцы компонентов крови
(тромбоконцентрат
и
свежезамороженная
плазма) исследовали методом ПЛЦ, выделили
популяции клеток позитивных по СD 235а РЕ
(гликоферин
А),
отобрали
полученную
клеточную суспензию, анализировали методом
оптической микроскопии, впоследствии нанесли
поликлональные анти Rh(D) антитела и Ig G
(PE), для выявления Rh(D) положительных
антигенов на клетках крови, методом ПЛЦ
в представленных образцах компонентах крови
наряду с полноценными эритроцитами выявлено,
большое
количество
гемолизированных
эритроцитарных частиц (обломков) в размере от
0,4µм-0,8µм, несущих на своей поверхности Rhпозитивные антигены
Сравнительный анализ клеточного состава
образцов тромбоконцентрата и
свежезамороженной плазмы, заготовленных
аферезным путем
Аферезный тромбоконцентрат
(n-50)
RBC
RBC-derived
microparticle
Аферезная свежезамороженная плазма
(n-50)
PLT
RBC
RBC-derived
microparticle
Клеточный
сепаратор
( 106\bag)
( 106\bag)
( 1011\bag)
( 106\bag)
( 106\bag)
CCS
Haemoneties
7,5 3,6
210±135,9
2,3 0,2
4,3 3,1
14,0 6,9
TERUSYS-S
Terumo
5,2 3,4
232,3 116
2,5 0,2
1,2 1,6
22,3 9,3
Выявленное количество эритроцитов в тромбоконцентрате (5,27,5×106) и в СЗП (1,2-4.3×106) явилось допустимым по требованиям к
заготовки компонентов крови, и не может являться причиной
иммуносенсибилизации реципиента. А большое
количество
обнаруженных
гемолизированных
эритроцитарных
частиц
(обломков) именно в тромбоконцентрате (232×106), на которые
ранее не обращали внимание и не исследовали, очевидно, и является
причиной иммуносенсибилизации пациентов после трансфузии.
Обсуждение результатов
1.Потенциал иммуносенсибилизации зависит от количества
антигена и частоты его попадания в организм, при этом
происходит стимуляция гуморального звена иммунной
системы, которая отвечает выработкой антител, вызывая
иммуносенсибилизацию организма.
2. В данном исследование имели значения малые размеры и
большое количество эритроцитарных гемолизированных
частиц
(обломков),
которые
фагоцитируются
антигенпрезентирующими клетками, активируя иммунный
ответ через HLA рецепторы на лимфоцитах.
Таким
образом,
считают
авторы,
происходит
иммуносенсибилизация
организма
реципиента
гемолизированными обломками эритроцитов, несущих на
поверхности фенотипические антигены системы Rh
ВЫВОДЫ:
Выводы авторов статьи:
1
При трансфузии тромбоконцентрата, полученного
аферезным путем, должны учитывать не только группу
крови по системе АВО, но и фенотип, составляющий
систему резус.
2 Должен быть применен принцип, что донор полностью по
антигенному
составу
должен
соответствовать
реципиенту, для исключения риска иммуносенсибилизации
В условиях нашей страны этот принцип не может быть
применен полностью, так как недостаточное количество
доноров тромбоцитов, а также трудности и особенности
заготовки этого компонента приводят к его дефициту.
Поэтому мы рекомендуем тщательно взвешивать и
осознанно
подходить к назначению и применению
тромбоконцентрата в клинике.