012246

012246
Эта заявка претендует на приоритет предварительной заявки на патент US Application Serial No.
60/670580, поданной 12 апреля 2005 г., полное содержание которого настоящим включено путем отсылки в этот документ.
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение в целом имеет отношение к способу лечения, профилактики или снижения
риска развития разрушения кости или остеопороза; и, в особенности, оно имеет отношение к способу
введения наружной водно-спиртовой гелевой композиции для лечения или профилактики разрушения
кости или остеопороза.
Уровень техники
Остеопороз - это серьезная общественная проблема, касающаяся как здоровья мужчин, так и здоровья женщин. Частота переломов позвоночника в возрасте старше 50 лет высока как у мужчин, так и у
женщин. Jackson S.A., et al., Osteoporosis Int., 11:680-7 (2000); O'Neill T.W., et al., J. Bone Miner. Res.,
11:1010-8 (1996). Хотя частота переломов бедра наполовину ниже у мужчин, чем у женщин, Mussoline
M.E., et al., J. Bone Miner. Res. 13: 918-24 (1998); Kellie S.E., et al., Ann J. Public Health, 80:326-8 (1990),
смертность после перелома бедра в два раза выше у мужчин, чем у женщин. Kanis J.A., et al., Bone,
32:468-73 (2003). Остеопороз характеризируется разрушением кости и повреждением трабекулярной архитектуры. Правильно сомкнутые пластинки становятся решетчатыми и, в конце концов, превращаются
в палочки, а затем эти палочки утрачивают связь друг с другом, что приводит к снижению прочности и
увеличивает тенденцию к переломам. Parfitt A.M., Bone, 13:541-7 (1992); Parfitt A.M., et al., J. Clin. Invest,
72:1396-409 (1983).
Тяжелый гипогонадизм - это хорошо документированная причина остеопороза, как у мужчин, так и
у женщин. Мужчины, страдающие тяжелым гипогонадизмом по причине гипофизарных или тестикулярных заболеваний, по сравнению в эугонадальными мужчинами имеют сниженную минеральную плотность кости (BMD), а также разрушенную архитектуру трабекул. Katznelson L., et al., J. Clin. Endocrinol.
Metab., 4358-4365 (1996); Devogelaer J.P., et al., Maturitas:17-23; Benito M., et al., J. Clin Endocrinol. Metab.,
85:2670-7(2000).
Тестостерон, главный циркулирующий андроген у мужчин, синтезируется из холестерина. Приблизительно 500 миллионов клеток Лейдига в семенниках секретируют более чем 95% из 6-7 мг тестостерона, секретируемого в день. Два гормона, образующиеся в гипофизе, лютеинизирующий гормон («LH») и
фолликулостимулирующий гормон («FSH»), необходимы для развития и поддержания тестикулярной
функции и негативно регулируют продукцию тестостерона. Циркулирующий тестостерон метаболизирует до разнообразных 17-кетостероидов двумя различными путями. Тестостерон метаболизирует до дигидротестостерона («DHT») с помощью фермента 5α-редуктазы или до эстрадиола («Е2») с помощью
ферментного комплекса ароматазы.
Тестостерон циркулирует в крови, будучи на 98% связанным с белками. У мужчин, приблизительно
на 40% тестостерон связан с высокоаффинным связывающим половые гормоны глобулином («SHBG»).
Остальные 60% слабо связаны с альбумином. Таким образом, определение тестостерона доступно для
клинических лабораторий. Термин «свободный» тестостерон в том виде, в котором он употребляется в
этом документе, обозначает фракцию такого тестостерона в крови, который не связан с белком. Термин
«общий тестостерон» или «тестостерон» в том виде, в котором он применяется в этом документе, обозначает свободный тестостерон плюс связанный с белком тестостерон. Термин «биодоступный тестостерон» в том виде, в котором он употребляется в этом документе, обозначает тестостерон, связанный не с
SHBG, и включает тестостерон, слабо связанный с альбумином.
В табл. Медицинского центра Университета Калифорнии в Лос-Анжелесе (UCLA-Harbor Medical
Center), приведенной ниже, суммированы концентрации гормонов у нормальных взрослых мужчин:
Таблица 1
Уровни гормонов у нормальных мужчин
Существует значительный разброс во времени полужизни тестостерона, сообщаемый в литературе,
который находится в диапазоне от 10 до 100 мин. Тем не менее, исследователи пришли к соглашению,
что циркулирующий тестостерон имеет суточные колебания у нормального молодого мужчины. Максимальные уровни достигаются приблизительно от 6:00 до 8:00 утра, затем эти уровни снижаются в тече-1-
012246
ние дня. Характерные профили имеют максимальный уровень тестостерона, равный 720 нг/дл, и минимальный уровень, равный 430 нг/дл. Однако физиологический смысл этого суточного цикла, если он и
существует, не ясен.
Мужской гипогонадизм возникает в результате различных патофизиологических условий, в которых концентрация тестостерона снижается ниже нормального уровня. Условия, при которых происходит
снижение функции половых желез, иногда связаны с количеством физиологических изменений, таких
как снижение полового влечения, импотенция, снижение массы тела, снижение плотности кости, пониженное настроение и снижение энергетических уровней.
Исследователи обычно подразделяют гипогонадизм на три типа. Первичный гипогонадизм включает тестикулярное расстройство, связанное с врожденной или приобретенной анорхидией, XYY синдромом, с XX набором у мужчин, синдромом Нунан, гонадной дисгенезией, опухолью клеток Лейдига, неопущенными яичками, варикоцеле, синдромом «только клетки Сертоли», крипторхидизмом, двусторонним скручиванием, синдромом исчезающего семенника, орхиэктомией, синдромом Клайнфелтера, химиотерапией, токсическими повреждениями алкоголем или тяжелыми металлами и общими заболеваниями (почечная недостаточность, цирроз печени, диабет, дистрофическая миотония). Пациенты с первичным гипогонадизмом демонстрируют неповрежденный механизм обратной связи, в котором низкие
концентрации сывороточного тестостерона связаны с высокими концентрациями FSH и LH. Однако
вследствие тестикулярных или других нарушений, высокие концентрации LH не эффективны в стимуляции продукции тестостерона.
Вторичный гипогонадизм включает идиопатический дефицит гонадотропина или рилизинг-фактора
LH. Этот тип гипогонадизма включает синдром Каллмана, синдром Прадера-Лабхарта-Вилли, синдром
Лоренса-Муна-Бидля, гипофизарную недостаточность/аденому, синдром Пасквалини, гемохроматоз,
гиперпролактинемию или гипофизароно-гипоталамические повреждения, возникшие в результате опухоли, травмы, облучения или ожирения. Поскольку у пациентов с вторичным гипогонадизмом не обнаруживается интактная обратная связь, сниженные концентрации тестостерона не связаны с увеличением
уровня LH или FSH. Таким образом, эти мужчины имеют низкий уровень сывороточного тестостерона,
но их гонадотропин находится в диапазоне от нормального до низкого.
В-третьих, гипогонадизм может быть возрастным явлением. Средний сывороточный тестостерон
медленно, но неуклонно падает у мужчин после приблизительно от 20 до 30 лет. По оценкам исследователей это падение происходит со скоростью 1-2% в год. Единовременное обследование у мужчин показало, что в среднем уровень тестостерона в возрасте около 80 лет равен приблизительно 75% от этого
уровня в возрасте 30 лет. Поскольку концентрация SHBG с возрастом у мужчин увеличивается, падение
биодоступного и свободного тестостерона выражено даже сильнее, чем падение общего тестостерона. По
оценкам исследователей приблизительно 50% мужчин в возрасте между 50 и 70 годами имеют уровни
биодоступного тестостерона, меньшие, чем нижний предел нормы. К тому же, у стариков циркадные
ритмы концентрации тестостерона часто становятся молчащими, ослабленными или полностью утрачиваются. Основная проблема при старении возникает с гипоталамо-гипофизарной единицей. Например,
исследователи обнаружили, что при старении, уровни LH не увеличиваются, несмотря на низкие уровни
тестостерона. Независимо от причины, этот невылеченный дефицит тестостерона у пожилых мужчин
может приводить к разнообразным физиологическим изменениям, включающим сексуальные расстройства, снижение либидо, потерю мышечной массы, снижение плотности костей, депрессивное состояние и
снижение когнитивной функции. Общим результатом является старческий гипогонадизм или то, что
обычно называют «мужской менопаузой». Сегодня, гипогонадизм - это наиболее распространенный тип
дефицита гормонов у мужчин, поражающий каждого 5-го из 1000. В настоящее время, по оценкам, только пять процентов из 4-5 миллионов обследованных американцев-мужчин всех возрастов, страдающих
гипогонадизмом, регулярно получают тестостерон-заместительную терапию.
К тому же, большинство веществ, применяемых для лечения остеопороза, таких как эстроген и
бисфосфонотаты, являются не достаточно эффективными. Эти агенты, возможно, за исключением рекомбинантного человеческого паратиреоидного гормона 1-34 (rhPTH, терипаратида), замедляют резорбцию кости, но не улучшают связанность ее элементов. Vedi S., et al., Bone, 19:69-72 (1996); Borah B., et
al., Bone, 34:736-46 (2004). Лечение 32 постклимактерических женщин с помощью rhPTH в течение в
среднем 19 месяцев значительно увеличило связанность их трабекул, по сравнению с этим параметром у
19 женщин, получавших плацебо. Jiang Y., et al., J. Bone Miner. Res., 18:1932-41 (2003). Несмотря на физиологическое замещение тестостерона у гипогонадальных мужчин и женщин, лечение с помощью
rhPTH является фармакологическим и включает введение гормона женщинам, у которых нет дефицита
по этому гормону.
Таким образом, существует необходимость в области техники, предназначенной для разработки
безопасного и эффективного терапевтического способа лечения, профилактики или снижения риска развития нарушений в кости, состояний или заболеваний, таких как, например, разрушение кости или остеопороз.
Раскрытие изобретения
Настоящее изобретение имеет отношение к трансдермальной водно-спиртовой гелевой композиции
-2-
012246
тестостерона и к способу лечения, профилактики или снижения риска развития разрушения кости. Настоящее изобретение также имеет отношение к способу лечения, профилактики или снижения риска развития остеопороза.
Краткое описание чертежей
Фиг. 1 - представляет собой чертеж, показывающий концентрации сывороточного тестостерона и
эстрадиола у десяти гипогонадальных мужчин после 24-месячного лечения трансдермально наносимым
тестостероном;
фиг. 2 - чертеж, показывающий изменения в одном из основных составляющих параметров микроизображения магнитного резонанса, отношение величины поверхности к кривой дистальной части берцовой кости у десяти гипогонадальных мужчин после 24-месячного лечения трансдермально наносимым
тестостероном;
фиг. 2а - чертеж, показывающий изменения в одном из основных составляющих параметров микроизображения магнитного резонанса, индексе топической эрозии дистальной части берцовой кости у десяти гипогонадальных мужчин после 24-месячного лечения трансдермально наносимым тестостероном;
фиг. 3а - изображение поперечного среза большой берцовой кости гипогонадального субъекта перед лечением тестостероном;
фиг. 3b - изображение поперечного среза большой берцовой кости гипогонадального субъекта после 24-месячного лечения тестостероном;
фиг. 3с - полученное с высоким разрешением изображение проекции поверхности большой берцовой кости гипогонадального субъекта перед лечением тестостероном. Изображение проекции поверхности брали из окружности на фиг. 3а;
фиг. 3d - полученное с высоким разрешением изображение проекции поверхности большой берцовой кости гипогонадального субъекта после 24-месячного лечения тестостероном. Изображение проекции поверхности брали из окружности на фиг. 3b;
фиг. 4 - чертеж, показывающий распространенность гипогонадизма в группах пациентов, распределенных по возрасту.
Осуществление изобретения
Поскольку настоящее изобретение может быть воплощено во множество разных форм, в этом документе будут обсуждаться несколько специфических воплощений, и надо понимать, что настоящее раскрытие предполагает только объяснение с помощью примеров принципов изобретения и не ставит своей
целью ограничить изобретение воплощениями, приведенными в качестве иллюстраций. Там, где изобретение проиллюстрировано в этом документе отдельными ссылками на тестостерон, это надо понимать
так, что любой другой стероид, образующийся на разных этапах синтеза тестостерона, может, если это
желаемо, замещать тестостерон в целом или частично в способах, наборах, сочетаниях и композициях,
описанных в этом документе.
Настоящее изобретение имеет отношение к способу профилактики, улучшения или лечения нарушений в кости, состояний или заболеваний, таких как, например, разрушение кости, включающее, например, разрушение трабекулярной архитектуры или остеопороз. В одном из воплощений настоящее
изобретение направлено на способ трансдермального введения тестостерона в составе водно-спиртового
геля. Гель включает один или более низших спиртов, таких как этанол или изопропанол; усиливающее
проницаемость вещество; загуститель (также известный как желирующее вещество) и воду. Дополнительно настоящее изобретение может необязательно включать соли, смягчающие вещества, стабилизаторы, антибактериальные вещества, ароматизаторы и пропеленты.
Настоящее изобретение также включает наборы, способы, комбинации и фармацевтические композиции для лечения, профилактики, обращения, остановки или замедления прогрессирования разрушения
кости, состояний или заболеваний, таких как, например, разрушение кости или остеопороз у субъекта, с
того момента, как это стало клинически очевидным фактом, или для лечения симптомов, связанных с
разрушением кости или имеющих отношение к разрушению кости таких как, например, разрушением
трабекулярной архитектуры или остеопороз. Субъект может также иметь диагноз разрушение кости, состояние или заболевание, такое как, например, разрушение кости или остеопороз во время введения лекарства или иметь риск развития разрушения кости или остеопороза.
Термин «производное» обозначает соединение, которое получается из другого соединения с похожей структурой путем замены в заместителе одного атома, молекулы или группы другой. Например,
атом водорода соединения может быть замещен алкилом, ацилом, аминогруппой и т.д., что приведет к
образованию производного этого соединения.
Так, как было применено в этом документе, термин «низший спирт», один или в сочетании, обозначает спиртовую группу с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащий от 1 до около 6 атомов
углерода. В одном из воплощений низший спирт содержит от 1 до около 4 атомов углерода, а в другом
воплощении низший спирт содержит от 2 до около 3 атомов углерода. Примеры таких спиртовых групп
включают метанол, этанол, н-пропанол, изопропанол, н-бутанол, изобутанол, втор-бутанол и третбутанол.
Так, как было применено в этом документе, термин «низший алкил», один или в сочетании, обозна-3-
012246
чает алкильный радикал с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащий от 1 до около 6 атомов углерода. В одном из воплощений низший алкил содержит от 1 до около 4 атомов углерода. Примеры таких радикалов включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил и третбутил. Выражение «вещество, усиливающее проницаемость» обозначает вещество, которое ускоряет
доставку лекарства через кожу. Эти вещества, также обозначаемые как вещество, ускоряющее действие,
вещество, усиливающее действие, и вещество, стимулирующее абсорбцию, и все вместе обозначаемые в
этом документе как «усиливающие вещества». Этот класс веществ включает вещества с разнотипными
механизмами действия, включая те, что обладают функцией улучшать такие свойства лекарств, как растворимость и способность диффундировать, и те, которые улучшают чрезкожную абсорбцию путем изменения способности рогового слоя эпидермиса удерживать влагу, и те, что смягчают кожу, улучшают
кожную проницаемость, действуя как помощники для проницаемости, или как вещества, открывающие
волосяные фолликулы, или те, что изменяют статус кожи, функционирующей как пограничный слой.
Усиливающее проницаемость вещество настоящего изобретения - это функциональное производное
жирной кислоты, которое включает изостерические модификации жирных кислот или не кислотные производные карбоксильных функциональных групп жирных кислот или их изостерических модификаций.
В одном из воплощений функциональное производное жирной кислоты является ненасыщенной алифатической кислотой, у которой СООН-группа замещена ее функциональным производным, таким как
спирты, высокомолекулярные спирты, амиды и их замещенные производные. Термин «жирная кислота»
означает жирную кислоту, которая имеет от четырех (4) до двадцати четырех (24) атомов углерода.
Композицию применяют в «фармакологически эффективном количестве». Это означает, что концентрация вводимого лекарства такова, что в композиции оно действует на терапевтическом уровне лекарства, поставляемого в рамках понятия, что лекарство применено. Такая доставка лекарства зависит от
количества переменных, включающих период времени, в течение которого применяли индивидуальную
дозировку, скорость истечения лекарства из композиции, например тестостерона из геля, поверхность
области, на которую производят нанесение и т.д. Для тестостерона, например, необходимое количество
тестостерона может быть определено экспериментально, на основании скорости тока тестостерона через
гель и через кожу, при применении в присутствии или без усиливающих веществ.
Термин «пролекарство» обозначает лекарство или соединение, в котором фармакологическое действие (действующее лечебное вещество) возникает в результате превращения в метаболических процессах в организме. Под пролекарствами обычно подразумевают предшественников лекарств, таких, что
после введения субъекту и соответствующей абсорбции превращаются в активную или более активную
субстанцию в ходе некоторых процессов, таких как метаболический процесс. Другие продукты, возникающие в процессе этих превращений, легко разрушаются в организме. Пролекарства обычно имеют
химическую группу, присутствующую в пролекарстве, которая делает его менее активным и/или придает
лекарству растворимость или какие-нибудь другие свойства. Как только эта группа отщепляется от пролекарства, образуется более активное лекарство. Пролекарства могут быть созданы в виде обратимых
производных лекарств и использованы в качестве модификаторов для усиления транспорта лекарства к
сайт-специфическим тканям. Разработка пролекарств в настоящее время включает увеличение эффективности водорастворимости терапевтического компонента с целью достижения мест, где вода является
основным растворителем. Например, Fedorak, et al., Am. J. Physiol, 269:6210-218 (1995) описали дексаметазон-бета-D-глюкуронид. McLoed, et al., Gastroenterol., 106:405-413 (1994) описали дексаметазонсукцинат декстраны. Hochhaus, et al. Biomed. Chrom. 6:283-286 (1992), описали дексаметазон-21сульфобензоат натрия и дексаметазон-21-изоникотинат. Дополнительно, J. Larsen and H. Bundgaard [Int.
J. Pharmaceutics, 37, 87 (1987)] оценили N-ацилсульфонамиды в качестве потенциальных производных
пролекарств. J. Larsen et al. [Int. J. Pharmaceutics, 47, 103 (1988)] оценили N-ацилсульфонамиды в качестве потенциальных производных пролекарств. Пролекарства также описаны, например, в Sinkula et al., J.
Pharm. Sci., 64:181-210 (1975). Другие не ограничивающие примеры «пролекарств», которые могут быть
применены в комбинациях и способах настоящего изобретения включают парекоксиб (пропанамид, (N[[4-(5-метил-3-фенил-4-изаоксозолил)фенил]сульфонил) и MAG-камптотецин.
В одном из воплощений настоящее изобретение приводит к способу чрескожного введения тестостерона в водно-спиртовом геле. Гель включает один или более низших спиртов, таких как этанол или
изопропанол; усиливающее проницаемость вещество; загуститель (также известный как желирующее
вещество) и воду. В одном из воплощений гель дополнительно включает вещество, высвобождающее
гидроксид, такое как, например, гидроксид натрия. Дополнительно настоящее изобретение может необязательно включать соли, смягчающие вещества, стабилизаторы, антибактериальные вещества, ароматизаторы и пропеленты.
Вещества класса стероидов, образующиеся на разных этапах синтеза тестостерона, полезные в способах и композициях настоящего изобретения, включают стероиды, возникающие при анаболизме или
катаболизме тестостерона. В широкой особенности изобретения, активные ингредиенты, примененные в
настоящем изобретении, могут включать анаболические стероиды, такие как андроизоксазол, андростенедион, боластерон, клостебол, этилестренол, формилдиенолон, 4-гидрокси-19-нортестостерон, метенолон, метилтриенолон, нандролон, оксиместерон, квинболон, стенболон, тренболон; андрогенные стерои-4-
012246
ды, такие как болденон, дигидроэпиандростерон, флуоксиместерон, местанолон, местеролон, метандростенолон, 17-α-метилтестостерон, эфир 17-α-метилтестостерон-3-циклопентиленола, норетандролон,
норметандрон, оксандролон, оксиметолон, прастерон, станлолон, дигидротестостерон, тестостерон; и
прогестагены, такие как анагестон, хлормадинона ацетат, делмадинона ацетат, демегестон, диметистерон, дигидрогестерон, этинилстренол, этистерон, этинодиол, этинодиола диацетат, фторгестона ацетат,
гестоден, гестонорона капроат, галопрогестерон, 17-гидрокси-16-метиленпрогестерон, 17-α-гидроксипрогестерон, 17-α-гидроксипрогестерона капроат, медрогестон, медроксипрогестерон, мегестрола ацетат, меленгестрол, норэтиндрон, норэтиндрона ацетат, норэтинодрел, норгестерон, норгестимат, норгестрел, норгестриенон, 19-норпрогестерон, норвинистерон, пнтагестерон, прененолон, прогестерон, промегестон, квингестрон и тренгестрон; и все соли, эфиры, амиды, энантиомеры, изомеры, таутомеры, пролекарства и производные этих соединений. (Частично основано на списке, предоставляемом в The Merck
Index, Merck & Co. Rahway, N.J. (1998)). Комбинации вышеуказанных стероидов могут быть применены
в способах, наборах, комбинациях и композициях, описанных в этом документе.
Изомеры и таутомеры описанных соединений и их фармацевтически приемлемые соли также включены в способы и фармацевтические композиции настоящего изобретения. Иллюстративные фармацевтически приемлемые соли получают из муравьиной, уксусной, пропионовой, янтарной, гликолевой, глюконовой, молочной, яблочной, виннокаменной, лимонной, аскорбиновой, глюкуроновой, малеиновой,
фумаровой, пировиноградной, аспарагиновой, глутаминовой, бензойной, антраниловой, мезиловой, стеариновой, салициловой, п-гидробензойной, фенилуксусной, миндальной, эмбоновой (памоевой), метансульфо-, этансульфо-, бензолсульфо-, пантотеновой, толуолсульфо-, 2-гидроксиэтансульфо-, сульфаниловой, циклогексиламиносульфо-, алгеновой, β-гидроксимасляной, галактаровой и галактуроновой кислот.
Неограничивающие примеры веществ, усиливающих проницаемость, включают С8-С22 жирные кислоты, такие как изостеариновая кислота, каприловая кислота и олеиновая кислота; С8-С22 жирные спирты, такие как олеиловый спирт и лауриловый спирт; низшие алкиловые сложные эфиры С8-С22 жирных
кислот, такие как этилолеат, изопропилмиристат, бутилстеарат и метиллаурат; ди(низшие)алкиловые
сложные эфиры С8-С22 жирных дикислот, такие как диизопропиладипат; моноглицериды С8-С22 жирных
кислот, таких как глицерилмонолаурат; эфир тетрагидрофурфурилового спирта и полиэтиленгликоля;
полиэтиленгликоль, пропиленгликоль; 2-(2-этоксиэтокси)этанол; монометиловый эфир диэтиленгликоля;
алкилариловые эфиры полиэтиленоксида; монометиловые эфиры полиэтиленоксида; диметиловые эфиры полиэтиленоксида; диметилсульфоксид; глицерин; этилацетат; ацетоуксусный эфир; Nалкилпирролидон; и терпены.
Загустители или желирующие вещества, применяемые в этом документе, включают анионные полимеры, такие как полиакриловая кислота (CARBOPOL® B.F. Goodrich Specialty Polymers and Chemicals
Division of Cleveland, Ohio), карбоксиполиметилен, карбоксиметилцеллюлозу и им подобные, включая
производные полимеров Carbopol®, такие как Carbopol® Ultrez 10, Carbopol® 940, Carbopol® 941, Carbopol® 954, Carbopol® 980, Carbopol® 981, Carbopol® ETD 2001, Carbopol® EZ-2, Carbopol® EZ-3 и
другие полимеры, тажие как полимерные эмульгирующие вещества Pemulen® и поликарбофилы
Noveon®. Дополнительные загустители, усиливающие вещества и вспомогательные вещества могут в
целом быть найти в Remington's The Science and Practice of Pharmacy, Meade Publishing Co., United States
Pharmacopeia/National Formulary.
В одном из воплощений композиция настоящего изобретения доставляет примерно от 0,5 мг до
примерно 250 мг тестостерона или его эквивалента на единичную дозу. В другом воплощении настоящего изобретения композиция настоящего изобретения доставляет примерно от 5 до примерно 150 мг тестостерона или его эквивалента на единичную дозу. В еще одном воплощении настоящего изобретения
композиция настоящего изобретения доставляет примерно от 25 до примерно 100 мг тестостерона или
его эквивалента на единичную дозу. В другом воплощении настоящего изобретения композиция настоящего изобретения доставляет примерно от 50 до примерно 100 мг тестостерона или его эквивалента на
единичную дозу. В еще одном воплощении настоящего изобретения композиция настоящего изобретения доставляет примерно 100 мг тестостерона или его эквивалента на единичную дозу. Таким образом,
например, тестостероновый гель, мазь, крем или пластырь, приготовленный для применения один раз в
день, может содержать около 25 мг, или около 50 мг, или около 75 мг, или около 100 мг тестостерона.
В одном из воплощений композиция является гелем, мазью, кремом или пластырем и включает тестостерон, вещество, усиливающее проницаемость, такое как изопропилмиристат, загуститель, такой как
Carbopol, низший спирт, такой как этанол или изопропанол, и воду. В другом воплощении композиция
является гелем, мазью, кремом или пластырем и включает следующие вещества в примерном процентном соотношении.
-5-
012246
Таблица 2
Состав композиции, содержащей тестостерон
В одном из воплощений в 100 г композиции гель, мазь, крем или пластырь может содержать от около 0,01 до около 15 г тестостерона, от около 0,01 до около 50 г вещества, усиливающего проницаемость,
от около 0,1 до около 50 г желирующего вещества и от около 30 до около 98 г низшего алкоголя. В другом воплощении в 100 г композиции гель, мазь, крем или пластырь может содержать от около 0,1 до 10 г
тестостерона, около от 0,1 до около 5 г вещества, усиливающего проницаемость, от около 0,1 до около 5
г желирующего вещества, от около 45 до около 90 г низшего алкоголя и воду для соблюдения баланса.
В одном из воплощений композиция является гелем, мазью, кремом или пластырем, который дополнительно включает гидроксид натрия или триэтаноламин, или гидроксид калия, или их сочетание, в
количестве достаточном, таком, как это известно в этой области техники, для того, чтобы способствовать
желирующему веществу в формировании геля. В одном из воплощений применяли раствор гидроксида
натрия, такой как, например, раствор 0,1 N гидроксида натрия, раствор 0,2 N гидроксида натрия, раствор
0,5 N гидроксида натрия, раствор 1,0 N гидроксида натрия, раствор 1,5 N гидроксида натрия, раствор 2,0
N гидроксида натрия или любой другой подходящий раствор, поставляющий достаточное количество
гидроксида натрия в композицию. В одном из воплощений композиция включает от около 1 до около
10% 0,1 N гидроксида натрия.
В другом воплощении фармацевтическая композиция включает от около 0,5 до около 10% тестостерона; от около 30 до около 98% спирта, например этанола или изопропанола; от около 0,1 до около
5% изопропилмиристата и от около 0,1 до около 5% желирующего вещества и воду для соблюдения баланса. Процентное содержание выражено как вес соединений к весу композиции. В одном из воплощений композиция включает от около 1 до около 10%-ного 0,1 N гидроксида натрия.
В еще одном воплощении фармацевтическая композиция включает тестостерон в водно-спиртовом
геле. Тестостерон может присутствовать в концентрации примерно 0,1, примерно 0,2, примерно 0,3,
примерно 0,4, примерно 0,5, примерно 0,6, примерно 0,7, примерно 0,8, примерно 0,9, примерно 1, примерно 1,1, примерно 1,2, примерно 1,3, примерно 1,4, примерно 1,5, примерно 1,6, примерно 1,7, примерно 1,8, примерно 1,9, примерно 2, примерно 2,1, примерно 2,2, примерно 2,3, примерно 2,4, примерно
2,5, примерно 2,6, примерно 2,7, примерно 2,8, примерно 2,9, примерно 3, примерно 3,1, примерно 3,2,
примерно 3,3, примерно 3,4, примерно 3,5, примерно 3,6, примерно 3,7, примерно 3,8, примерно 3,9,
примерно 4, примерно 4,1, примерно 4,2, примерно 4,3, примерно 4,4, примерно 4,5, примерно 4,6, примерно 4,7, примерно 4,8, примерно 4,9, примерно 5, примерно 5,1, примерно 5,2, примерно 5,3, примерно
5,4, примерно 5,5, примерно 5,6, примерно 5,7, примерно 5,8, примерно 5,9, примерно 6, примерно 6,1,
примерно 6,2, примерно 6,3, примерно 6,4, примерно 6,5, примерно 6,6, примерно 6,7, примерно 6,8,
примерно 6,9, примерно 7, примерно 7,1, примерно 7,2, примерно 7,3, примерно 7,4, примерно 7,5, примерно 7,6, примерно 7,7, примерно 7,8, примерно 7,9, примерно 8, примерно 8,1, примерно 8,2, примерно
8,3, примерно 8,4, примерно 8,5, примерно 8,6, примерно 8,7, примерно 8,8, примерно 8,9, примерно 9,
примерно 9,1, примерно 9,2, примерно 9,3, примерно 9,4, примерно 9,5, примерно 9,6, примерно 9,7,
примерно 9,8, примерно 9,9, примерно 10, примерно 10,1, примерно 10,2, примерно 10,3, примерно 10,4,
примерно 10,5, примерно 10,6, примерно 10,7, примерно 10,8, примерно 10,9, примерно 11, примерно
11,1, примерно 11,2, примерно 11,3, примерно 11,4, примерно 11,5, примерно 11,6, примерно 11,7, примерно 11,8, примерно 11,9, примерно 12, примерно 12,1, примерно 12,2, примерно 12,3, примерно 12,4,
примерно 12,5, примерно 12,6, примерно 12,7, примерно 12,8, примерно 12,9, примерно 13, примерно
13,1, примерно 13,2, примерно 13,3, примерно 13,4, примерно 13,5, примерно 13,6, примерно 13,7, примерно 13,8, примерно 13,9, примерно 14, примерно 14,1, примерно 14,2, примерно 14,3, примерно 14,4,
примерно 14,5, примерно 14,6, примерно 14,7, примерно 14,8, примерно 14,9 или примерно 15 мас.% по
отношению к массе композиции. Вещество, усиливающее проницаемость, в этом воплощении может
включать изопропилмиристат, который может присутствовать в концентрации примерно 0,5, примерно
0,65, примерно 0,75, примерно 0,85, примерно 0,95, примерно 1, примерно 2, примерно 3, примерно 4 или
примерно 5 мас.% по отношению к массе композиции. Фармацевтическая композиция также включает
С1-С4 спирты, присутствующие в концентрации примерно 70, примерно 71, примерно 71,4, примерно
71,8, примерно 72, примерно 72,3, примерно 72,5, примерно 72,7, примерно 73, примерно 73,5, примерно
74, примерно 74,5, примерно 75 или примерно 75 мас.% по отношению к массе композиции. Дополнительно фармацевтическая композиция включает полиакриловую кислоту и/или карбоксиметилцеллюлозу, в качестве желирующего вещества. В одном из воплощений желирующее вещество является полиак-6-
012246
риловой кислотой, присутствующей в концентрации примерно 1 мас.% по отношению к массе композиции.
Один из таких гелей, содержащий тестостерон, только недавно созданный правопреемником этой
заявки Unimed Pharmaceuticals, Inc., Marietta, Georgia, под торговой маркой AndroGel®, доступен в Соединенных Штатах. В одном из воплощений гель включает следующие вещества в примерных количествах.
Таблица 3
Композиция AndroGel®
* Соответствует 67 г этанола
Специалисту в этой области техники ясно, что компоненты этой рецептуры могут меняться в количестве, оставаясь в рамках сущности и объема настоящего изобретения. Например, композиция может
содержать от около 0,1 до около 10,0 г тестостерона, от около 0,1 до около 5,0 г CARBOPOL, от около
0,1 до около 5,0 г изопропилмиристата и от около 30,0 до около 98,0 г этанола.
В еще одном воплощении композиция включает тестостерон в количестве большем, чем 0,01%, а
вещество, усиливающее проницаемость, в количестве большем, чем примерно 0,1%, загуститель в количестве большем, чем около 0,1%, и низшего спирта в количество большем, чем около 30% мас./мас. от
массы композиции.
Гель натирали или помещали на область кожи субъекта и позволяли ему высохнуть. Иллюстративно, гель натирали на участок кожи, например на верхнюю внешнюю часть бедра и/или на боковую поверхность таза и бедра один раз в день. После нанесения субъект (он или она) мыл руки. Нанесение геля
приводило к увеличению уровня тестостерона, имевшего желаемый фармакокинетический профиль, и
было эффективно при лечении или предупреждении разрушения кости или остеопороза, симптомов, связанных с разрушением кости или имеющих отношение к разрушению кости или остеопороза у субъекта.
Таким образом, композиция была полезна для лечения ряда заболеваний кости, состояний или болезней
как у мужчин, так и у женщин.
В одном из воплощений в настоящем изобретении применяется упаковка, имеющая полиэтиленовую выстилку, совместимую с компонентами геля, содержащего тестостерон, как описано ниже. Упаковка может вмещать единичную дозу или многократную дозу.
В другом воплощении способы и композиции включают композицию, которая распределяется из
жесткого содержащего множество доз контейнера (например, оборудованного ручной помпой), имеющего, например, более просторную упаковку из фольги с композицией внутри контейнера. Такая более просторная упаковка может также содержать полиэтиленовую выстилку, такую как было описано выше. В
одном из воплощений содержащий множество доз контейнер включает безвоздушную помпу, который
включает полиэтиленовый мешочек внутри контейнера со встроенной помпой. В одном из воплощений
полиэтиленовый мешочек содержит 44 или 88 г продукта. В одном из воплощений помпа заправляется
перед применением таким, например, образом, чтобы было можно нажать три раза и выбросить гель. В
одном из воплощений помпа содержит достаточно продукта для того, чтобы заполнить и подать несколько точных доз. В одном из воплощений каждое полное нажатие на помпу поставляет 1,25 г геля,
содержащего тестостерон. В этом воплощении доза в 3,75 г геля потребует 3 нажатий помпы. Доза в 5 г
геля потребует 4 нажатий помпы. Доза в 7,5 г геля потребует 6 нажатий помпы. Доза в 10 г геля потребует 8 нажатий помпы и т.д. Конечно, каждое нажатие помпы может поставлять любое количество геля,
содержащего тестостерон, подходящее для поставки желаемой дозы.
В патентах US Patent № 6503894, U.S. Published Patent Applications, 2002/0183296, 2003/0022877,
2003/0050292, 2003/0139384, 2003/0232072, 2004/0002482, 2004/0092494 и в U.S. Patent Applications Ser.
Nos. 09/703,753, 10/787071, 10/825540, 10/828678, 10/829618, 10/867435, 10/924421 и 10/925421, приведенных в этом документе во всей их отсылки, было приведен и обсужден тот факт, что трансдермальное
нанесение мужчинам, страдающим гипогонадизмом, тестостерона с использованием AndroGel® может
приводит к улучшению уровней тестостерона, настроения, либидо и сексуальной жизни. Как раскрыто в
этом документе, в настоящее время обнаружено, что AndroGel® может быть также применен для лечения или предупреждения заболеваний кости, состояний или болезней, таких как, например, разрушения
кости или остеопороза.
Способы и композиции настоящего изобретения обеспечивают лучший выбор возможностей для
-7-
012246
лечения, профилактики, обращения, задержки или замедления прогрессирования разрушением кости,
такого как, например, разрушение трабекулярной архитектуры или остеопороз у субъекта, например у
мужчины, по сравнению с теми возможностями, которые доступны в настоящее время.
В одном из воплощений фармацевтическую композицию настоящего изобретения наносили один,
два или три раза в день или столько раз, сколько было необходимо для достижения желаемого терапевтического эффекта. В другом воплощении композицию настоящего изобретения наносили один, два или
три раза в день, но через день. В другом воплощении композицию настоящего изобретения наносили
один, два или три раза в день, но один раз в неделю, два раза в неделю или один раз в месяц.
Помимо того, что настоящее изобретение полезно для лечения людей, оно также полезно в области
ветеринарии для лечения млекопитающих, рептилий, птиц, экзотических животных и домашних животных, включая млекопитающих, грызунов и им подобных. В одном из воплощений млекопитающие
включают приматов, например человека, обезьяну, или лемура, лошадь, собаку, свинью или кошку. В
другом воплощении грызуны включают крысу, мышь, белку или морскую свинку.
В одном из воплощений настоящего изобретения способ обеспечивает лечение, профилактику или
снижение риска развития заболеваний кости, состояний или болезней, таких как, например, разрушения
кости или остеопороза у субъекта, который в этом нуждается, что означает субъекта, для которого установлен диагноз либо находящегося в группе риска развития заболеваний кости, состояния или болезни,
таких как, например, разрушение кости или остеопороз. Способ включает введение фармакологически
эффективного количество композиции на область кожи субъекта для доставки тестостерона в сыворотку
крови субъекта. Композиция включает от около 0,01 до около 15% (мас./мас.) тестостерона; от около 0,01
до около 50% (мас./мас.) вещества, улучшающего проницаемость; от около 0,01 до около 50% (мас./мас.)
желирующего вещества; от около 30 до около 98% (мас./мас.) низшего алкоголя и воду для баланса.
Эта композиция способна освобождать стероид после нанесения композиции на кожу со скоростью
и продолжительностью, при которых согласно одному из воплощений настоящего изобретения доставляется по меньшей мере 10 мкг в день стероида в сыворотку крови субъекта.
В другом воплощении настоящего изобретения композиция способна освобождать тестостерон после нанесения композиции на кожу субъекта со скоростью и продолжительностью, при которых достигается концентрация циркулирующего в сыворотке тестостерона, более чем 400 нг на дл сыворотки в течение периода времени, начинающегося от примерно 2 ч после введения и заканчивающегося примерно
через 24 ч после введения.
В другом воплощении настоящего изобретения композиция способна освобождать тестостерон после нанесения композиции на кожу субъекта со скоростью и продолжительностью, при которых достигается концентрация циркулирующего в сыворотке тестостерона между примерно 400 нг на дл до примерно 1050 нг на дл сыворотки.
В другом воплощении настоящего изобретения каждое нанесение на кожу субъекта 0,1 г композиции настоящего изобретения в день приводит к увеличению тестостерона в сыворотке субъекта по
меньшей мере примерно на 5 нг/дл.
В другом воплощении настоящего изобретения композиция настоящего изобретения обеспечивается субъекту для ежедневного введения в дозе от примерно 0,1 до примерно 10 г. Композиция настоящего
изобретения может быть обеспечена в любой подходящей дозе, такой как, например, от примерно 0,1 до
примерно 10 г, например примерно 0,1, примерно 0,44, примерно 0,88, примерно 1, примерно 1,32, примерно 1,5, примерно 1,75, примерно 2, примерно 2,25, примерно 2,5, примерно 2,75, примерно 3, примерно 3,5, примерно 3,75, примерно 4, примерно 4,25, примерно 4,5, примерно 4,75, примерно 5, примерно 5,25, примерно 5,5, примерно 5,75, примерно 6, примерно 6,25, примерно 6,5, примерно 6,75, примерно 7, примерно 7,25, примерно 7,5, примерно 7,75, примерно 8, примерно 8,25, примерно 8,5, примерно 8,75, примерно 9, примерно 9,25, примерно 9,5, примерно 9,75, примерно 10 г или в любой другой
подходящей дозе.
В одном из воплощений изобретения доза композиции настоящего изобретения 3,75 г содержит
37,5 мг тестостерона, доза композиции настоящего изобретения 5 г содержит 50 мг тестостерона, доза
композиции настоящего изобретения 7,5 г содержит 75 мг тестостерона, доза композиции настоящего
изобретения 10 г содержит 100 мг тестостерона.
В еще одном воплощении настоящего изобретения субъект, нуждающийся в лечении, имел уровень
общего тестостерона в сыворотке до первого нанесения композиции настоящего изобретения (до лечения) меньше чем 300 нг/дл.
В другом воплощении настоящего изобретения в котором по меньшей мере после примерно 30 дней
ежедневного введения композиции настоящего изобретения концентрация тестостерона в сыворотке у
субъекта была по меньшей мере от примерно 300 до примерно 1050 нг/дл, такая, например, как от примерно 400 до примерно 1050 нг/дл, от примерно 500 до примерно 1050 нг/дл, от примерно 600 до примерно 1050 нг/дл или от примерно 700 до примерно 1050 нг/дл.
В еще одном воплощении настоящего изобретения в котором после ежедневного введения композиции настоящего изобретения концентрация общего тестостерона у субъекта была выше, чем примерно
300 нг/дл. В одном из воплощений концентрация общего андрогена в сыворотке у субъекта была выше,
-8-
012246
чем примерно 400, примерно 500, примерно 600 или примерно 700 нг/дл. В одном из воплощений концентрацию общего тестостерона измеряли через 24 ч после введения. В одном из воплощений концентрацию общего тестостерона измеряли после 2 дней ежедневного введения, так же, например, как после
10, 20 или 30 дней.
В другом воплощении способов, наборов, комбинаций и нанесений настоящего изобретения композицию настоящего изобретения вводят субъекту один, два или три раза в день, по меньшей мере, в течение 7 дней. В одном из воплощений композицию вводят один раз в день.
В одном из воплощений настоящее изобретение обеспечивает способ лечения, профилактики или
снижения риска развития разрушения кости или остеопороза у субъекта, нуждающегося в этом, что означает субъекта, для которого установлен диагноз либо находящегося в группе риска развития разрушение кости или остеопороза, путем нанесения на субъекта некоторого количества композиции, включающей от примерно 0,5 до примерно 10% (мас./мас.) тестостерона; от примерно 0,1 до примерно 5%
(мас./мас.) вещества, улучшающего проницаемость; от примерно 0,1 от примерно 5% (мас./мас.) загустителя; от примерно 30 от примерно 98% (мас./мас.) низшего алкоголя; остальное вода.
Настоящее изобретение также обеспечивает способ лечения, профилактики или снижения риска
развития разрушения кости или остеопороза у субъекта, включающий нанесение на субъекта, нуждающегося в этом, эффективного количества фармацевтической композиции, включающей от примерно 0,1
до примерно 10% (мас./мас.) тестостерона; от примерно 0,1 до примерно 5% (мас./мас.) изопропилмиристата; от примерно 0,1 от примерно 5% (мас./мас.) загустителя; от примерно 30 до примерно 98%
(мас./мас.) низшего алкоголя и воду для баланса. В одном из воплощений загустителем служила полиакриловая кислота, такая как Carbopol®, или композиция дополнительно включала вещество, высвобождающее гидроксид, такое как гидроксид натрия. В одном из воплощений процентное содержание не достигло 100%, и в композицию дополнительно включили воду q.s. до 100%.
Достижение скоростей доставки к мишени у мужчин, демонстрируемых гелем, содержащим тестостерон, можно оценить по фармакокинетике геля, содержащего тестостерон. Величины средних концентраций (Cavg) в сыворотке у мужчин после нанесения варьирующих количеств геля на верхнюю часть
тела дано в табл., приведенной ниже.
Таблица 4
Средняя величина концентрации тестостерона в сыворотке у мужчин и коэффициент суточной доставки
после нанесения 1%-ного геля, содержащего тестостерон
а
Скорость метаболического клиренса суточного тестостерона=600 л/день
На основании результатов, полученных для мужчин, доза геля, содержащего тестостерон, равная
0,5 г, доставляет приблизительно 300 мкг тестостерона в день.
Настоящее изобретение дополнительно проиллюстрировано следующими примерами, которые, в
любом случае, не должны быть истолкованы как ограничивающие. Содержание всех процитированных в
этой заявке ссылок, таким образом, специально включено путем цитирования. Осуществление этого изобретения на практике будет осуществляться, если не указано иначе, с помощью традиционных для фармакологии и фармацевтики технологий, которые находятся в компетентности специалистов в этой области техники.
Примеры
Пример 1. Нанесение 1%-ного геля, содержащего тестостерон, лечит разрушение кости у гипогонадальных мужчин.
Этот пример показывает, что введение 1%-ного водно-спиртового геля, содержащего тестостерон,
снижает разрушение кости у гипогонадальных мужчин.
Схема исследования.
Десять мужчин с тяжелым гипогонадизмом, который ранее не подвергали лечению, в связи с известным заболеванием, включили в исследование. Субъекты имели сильно сниженные по сравнению с
нормой ранние утренние концентрации тестостерона в сыворотке по меньшей мере в двух случаях (среднее, 88 нг/дл [3,1 нмоль/л]), как следствие подтвержденной документально болезни гипофиза или гипоталамуса, и не получали лечения тестостероном, по меньшей мере, в течение 4 лет до регистрации в исследовании. Все десять субъектов имели вторичный гипогонадизм. У восьми была аденома гипоталамуса, у одного пинеалома и у одного синдром Калмана. У девяти гипогонадизм развился в зрелости. Десятый субъект, 46-летний пациент с синдромом Калмана, лечился энантатом тестостерона в возрасте от 15
до 25 лет, пока не остановил лечение. По оценкам период гипогонадизма был равен 2-30 годам (в среднем, 5 годам). Восемь субъектов никогда не лечились тестостероном. Из двух, получавших лечение, один
-9-
012246
не получал лечение в течение 4 лет, а другой в течение 20 лет, перед тем как вступить в исследование.
Средний возраст при вступлении был 51 год (диапазон 31-78 лет).
Десять подходящих эугонадальных мужчин были также привлечены к исследованию. От них требовалось иметь концентрацию тестостерона в крови >300 нг/дл (10,4 нмоль/л) рано утром в двух случаях
и нормальную минеральную плотность кости (BMD) позвоночника для их возраста (Z-оценка от +2 до
-2). Каждый эугонадальный субъект был точно подобран по расе и отличался по возрасту не более чем на
10 лет от гипогонадального субъекта. Средний возраст для эугонадальных субъектов при вступлении в
исследование был 54 года (диапазон 28-74 года).
Мужчины с диетой, при которой потребление кальция было выше чем 750 мг/день, как это было
определено с помощью периодической пищевой анкеты, или те, кто имел любое заболевание или принимал любое лечение, которое могло влиять на кости, или те, кто потреблял, более чем два алкогольных
напитка в день, были исключены.
Лечение.
Лекарственным препаратом, содержавшим тестостерон, с помощью которого проводили лечение
гипогонадальных мужчин, был AndroGel® (Unimed Pharmaceuticals, Inc., Marietta, Georgia), водноспиртовой гель, содержащий тестостерон. Начальная доза, которую субъекты самостоятельно вводили
себе раз в день, была равна 5 г Androgel (50 мг тестостерона). Измеряли концентрацию тестостерона в
сыворотке через 1, 3, 6, 12, 18 и 24 месяцев. Дозу AndroGel® увеличивали на 10 г в день для поддержания концентрации тестостерона в сыворотке в диапазоне, нормальном для эугонадальных мужчин (400900 нг/дл), в течение 24 месяцев исследования.
Эугонадальные субъекты не получали тестостерон или другое лечение, но у них во второй раз определили концентрацию тестостерона в сыворотке через 24 месяца.
Протокол исследования.
Все субъекты были оценены методом измерения поглощения рентгеновских лучей с двойной энергией (DXA) и магнитной резонансной микровизиографии (μMRI) в 0, 6, 12 и 24 месяца. Гипогонадальные
субъекты были также оценены на маркеры костного метаболизма в 0, 3 и 6 месяцев.
Минеральная плотность кости.
Минеральная плотность кости (BMD) передне-заднего поясничного отдела позвоночника (L1-L4) и
правого бедра были определены методом DXA с помощью денситометров фирмы Hologic (Hologic, Inc.,
Bedford, MA), денситометр QDR-4500A применяли в течение первого года исследования и денситометр
Delphi А применяли в течение второго года исследования. Delphi А дает величины позвоночника на 1%
меньше, так что эти величины были умножены на 1,01. Полученные изображения одних и тех же субъектов можно было оценивать с помощью функции «сопоставления», имеющейся у прибора DXA. Коэффициенты вариаций для долгосрочной стабильности прибора, как было оценено с помощью ежедневных
измерений фантома, были <0,9%.
Маркеры метаболизма кости.
У субъектов, не принимавших пищу в течение ночи, были взят анализ крови и через 2 ч после этого
анализ мочи. Образцы сыворотки и мочи были заморожены при -70°С. Маркеры и методы исследования
были следующими: косте-специфическая щелочная фосфатаза (ВАР), иммунорадиометрическое исследование (Tandem-R Ostase, Beckman-Coulter, Inc., Fullerton, СА); остеопротегерин, твердофазный иммуноферментный анализ (American Laboratory Products Company, Windham, NH); интактный N-концевой
пропептид проколлагена типа I (PINP); радиоиммуноанализ (Orion Diagnostica UniQ, US, Inc. Fountain
Hills, AZ); поперечно-сшитый N-телопептид коллагена типа I (NTx); твердофазный иммуноферментный
анализ (Osteomark, Ostex International, Inc. Seattle, WA). Для каждого исследования все образцы были
измерены в одной серии опытов. Среднестатистические погрешности метода для этих анализов были все
<10%.
Тестостерон и эстрадиол.
Тестостерон сыворотки измеряли с помощью хемилюминесцентного ферментативного иммуноанализа (Immulite 2000, Diagnostic Products Corporation, Los Angeles, CA). Эстрадиол измеряли с помощью
сверхчувствительного иммунорадиометрического анализа (DSL, Webster, TX). Коэффициенты вариаций
внутри анализа и между анализами для этих измерений были все <10%.
Магнитная резонансная микровизиография (μMRI).
Магнитную резонансную микровизиографию (μMRI) дистальной части правой большой берцовой
кости проводили с применением сканера Signa 1.5 Tesla MR (GE Medical Systems, Milwaukee, WI) и изготовленной по заказу работающей только на прием радиочастотной поверхностной катушки с фазированной решеткой. Катушку помещали на переднюю сторону правой большой берцовой кости, край катушки
находился на расстоянии 1 см от места прикрепления к середине средней части лодыжки, и правая нога
была закреплена неподвижно. Двадцать восемь изображений было получено для того, чтобы получить
карту трабекулярной архитектуры. Song H.K., et al., Magn. Reson. Med., 41:947-53 (1999). Получаемый
размер вокселя был равен 137×137×410 мкм3. Данные обрабатывали при помощи изготовленной на заказ
программы, написанной на языке IDL (Interactive Data Language, Boulder, CO). Wehrli F.W., et al., J. Bore
- 10 -
012246
Miner. Res., 16:1520-31(2001). Данные были скорректированы на движение, отфильтрованы и подвергнуты преобразованиям Фурье. Чтобы удостовериться в том, что были проанализированы одинаковые объемы в каждой точке времени для каждого субъекта, изображения, относящиеся к 0, 6, 12 и 24 месяцам
исследования для каждого субъекта, были выровнены по интересующему объему с помощью идентификации сходных черт в трабекулах. После того как интересующий объем был выбран вручную для каждого подобранного среза с помощью отслеживания линий примерно в 1 мм из подкорковой границы на
передней половине дистального метафиза, были рассчитаны карты объемной доли кости. Расчет элемента трёхмерного изображения дал размер вокселя 69×69×103 мкм3. Hwang S.N., et al., Magn. Reson. Med.,
47 (2002). Цилиндрическая сердцевина, имеющая размер 6,85 мм в диаметре, была получена из центра
интересующего объема (фиг. 3).
Цифровой топологический анализ трабекулярной сетчатой структуры был выполнен на целостном
интересующем объеме. Gomberg B.R., et al., IEEE Trans. Med. Imaging, 19:166-74 (2000). Был определен
топологический класс каждого вокселя изображения, что дало в результате плотность вокселей поверхности, вокселей кривых и вокселей, являющихся частью взаимных сочленений. Топологический анализ
начинали с преобразования в двоичную форму трехмерных изображений, затем следовал этап скелетного
представления, на котором пластинчатые элементы трабекулярной сети были превращены в поверхности
и палочковидные элементы в кривые. Каждый воксель был затем классифицирован как связанный с поверхностью, кривой или сочленением между этими типами вокселей. Дополнительно к простым топологическим параметрам были рассчитаны два сложных параметра, которые оказались чувствительны к разрежению кости. Одним из этих сложных параметров было отношение поверхности к кривой, отношение
всех вокселей поверхности ко всем вокселям кривой. Чем выше было это отношение, тем более интактной была трабекулярная сеть, и наоборот. Вторым сложным параметром был топологический индекс
разрушения - отношение тех параметров, которые, как ожидается, будут увеличиваться при трабекулярном разрушении (граница кривой и внутренние воксели кривой, границы поверхности и профиля и воксели сочленений кривая-кривая) к тем, которые, как ожидается, будут уменьшаться (внутренние воксели поверхности и сочленения поверхность-поверхность). Чем ниже топологический индекс разрушения,
тем меньше степень, до которой трабекулярная сеть разрушена. Трабекулярную плотность определяли с
помощью независимой программы, основанной на принципе преобразования нечеткого расстояния. Saha
P.K., et al., IEEE Trans. Med. Imaging, 23:53-62 (2004).
Воспроизводимость параметров MR определяли путем расчетов коэффициентов вариации у восьми
эугонадальных субъектов, оценку которых проводили в 0 и 6 месяцев. Средние значения были равны
2,3% для BVF, 0,4% для трабекулярной плотности, 6,7% для отношения поверхность/кривая и 4,3% для
индекса разрушения.
Статистические методы.
Для всех параметров с помощью многомерного дисперсионного анализа были протестированы изменения от 0 до 24 месяцев, по схеме с повторным измерением одного фактора. Если изменения от 0 до
24 месяцев были достоверными, то с помощью теста Даннета проводили попарное сравнение для каждого момента измерения (6, 12 и 24 месяца) по сравнению с состоянием до лечения. Недостающие величины были оценены с помощью способа вынесения вперед последнего наблюдения. Частота ошибок типа I,
равная 0,05, была применена для определения статистической значимости. Для анализа применяли статистическую компьютерную программу SAS, версия 9.1 (SAS Institute, Inc., Сагу, NC).
Результаты.
Все типы гипогонадальных субъектов завершили 24-месячное исследование. Двое пропустили визит на шестом месяце. Один эугонадальный субъект не совершил визит на 24 месяце.
Концентрации сывороточного тестостерона и эстрадиола, поглощение кальция и индекс массы тела
(BMI).
Концентрация сывороточного тестостерона была заметно ниже нормы у гипогонадальных мужчин
до лечения (88±51 нг/дл [3,1±1,8 нмоль/л]), поразительно вырастала и становилась средней нормальной
после 3 месяцев лечения тестостероном (656±332 нг/дл [22,8±11,5 нмоль/л]) и оставалась нормальной в
течение 24 месяцев лечения (фиг. 1). Концентрация эстрадиола в сыворотке была равна 17±5 пг/мл
(62,4±18,4 пмоль/л) на базовой линии и возросла до 25±13 пг/мл (91,8±47,7 пмоль/л) после 3 месяцев лечения тестостероном и оставалась на этом уровне (фиг. 1).
Поглощение кальция оставалось нормальным у гипогонадальных субъектов в течение 24 месяцев
лечения тестостероном, 1175±248 мг/день (среднее±станд.откл.) на 0 месяце и 1066±375 мг/день на 24
месяце (Р=0,7). BMI также не изменилось и было равно 30,3±3,2 (среднее±станд.откл.) на 0 месяце и
30,8±2,1 на 24 месяце (Р=0,8).
Средняя концентрация сывороточного тестостерона была нормальной у эугонадальных субъектов в
начале исследования (522±126 нг/дл [18,1±4,4 нмоль/л]) и осталась нормальной в конце исследования
(423±101 нг/дл [14,7±3,5 нмоль/л]).
Минеральная плотность кости.
У десяти гипогонадальных субъектов минеральная плотность кости (BMD) достоверно увеличива- 11 -
012246
лась по передне-задней кости (7,4%; Р <0,001), всему бедру, вертелу бедренной кости, межвертельной
области в течение 24 месяцев лечения тестостероном (табл. 5).
Таблица 5
Минеральная плотность кости (BMD) по методу DXA (г/см2) до и после
24-месячного лечения тестостероном
1
Значения величины Р определяли с помощью многофакторного дисперсионного анализа, по
схеме с повторным измерением одного фактора, применяя данные из всех периодов наблюдения 0, 6, 12,
и 24 месяцев.
У эугонадальных мужчин BMD значительно не изменялся ни в одном из мест в течение 24 месяцев
наблюдения (табл. 6).
Таблица 6
Минеральная плотность кости (BMD) по методу DXA (г/см2)
у десяти эугонадальных субъектов после 24 месяцев
1
Значения величины Р определяли с помощью многофакторного дисперсионного анализа, по
схеме с повторным измерением одного фактора, применяя данные из всех четырех периодов наблюдения
0, 6, 12, и 24 месяцев.
Маркеры костного метаболизма.
Среднее содержание сывороточного N-концевого пропептида проколлагена типа I (PIMP) вырастало от базовой линии (41,4±18,1 мг/л) к 3 месяцу (71,3±32,1 мг/л; P=0,02) и затем уменьшалось от 3 к 6
месяцу (36,0±21,1 мг/л) лечения (P=0,01), но костно-специфическая щелочная фосфатаза (ВАР) не менялась. Сывороточный остеопротегерин слабо снижался по сравнению с базовым уровнем (4,72±1,28
пмоль/л) к 6 месяцу (4,29±0,82 пмоль/л), что было на границе достоверности (P=0,05), NTx в моче к 6
месяцу не изменился по сравнению с базовым уровнем.
Магнитная резонансная микровизиография (μMRI).
Оба параметра магнитной резонансной микровизиографии (μMRI), отражающие сохранность трабекулярной сети, значительно улучшились после того, как гипогонадальные субъекты прошли лечение
тестостероном в течение 24 месяцев. Отношение поверхности к кривой, т.е. отношение всех вокселей
поверхности (представляющих собой пластинки) ко всем вокселям кривых (представляющим собой палочки), увеличилось на 9% (Р=0,02; многофакторный дисперсионный анализ, схема с повторным измерением одного фактора, с последующим анализом с помощью теста Даннета) после 12 месяцев лечения
тестостероном и до 11,2% (Р=0,004) после 24 месяцев (фиг. 2, табл. 7).
- 12 -
012246
Таблица 7
Архитектурные параметры, полученные методом анализа магнитной резонансной микровизиографии
до и после 24 месяцев лечения тестостероном
1
Значения величины P определяли с помощью многофакторного дисперсионного анализа, по
схеме с повторным измерением одного фактора, применяя данные из всех четырех периодов наблюдения
0, 6, 12, и 24 месяцев.
Топологический индекс эрозии, отношение топологических параметров, которые при разрушении
трабекул как ожидалось, должен расти, к тем, которые как ожидалось, должны снижаться, снизился на
5,6% (Р=0,02) после 12 месяцев и на 7,5% (Р=0,004) после 24 месяцев лечения тестостероном (фиг. 2,
табл. 7). Средняя объемная доля кости (BVF), дробное заполнение вокселя костью, значительно вырастает на 5% от 0 до 24 месяца, и трабекулярная плотность достоверно вырастала, начиная с 6 месяца лечения, почти на 2% в ходе лечения (табл. 7).
Фиг. 3а, 3b, 3с и 3d показывают, что эта μMRI технология может идентифицировать ту же область
большой берцовой кости на 24 месяце лечения, что и до лечения. Верхние части рисунка показывают
одни и те же области поперечного сечения большой берцовой кости, изображения которых были получены на 0 и на 24 месяце у одного и того же объекта. Верхние части рисунка (фиг. 3с и 3d) показывают изображения проекций поверхности, взятые из областей, обозначенных окружностями на верхних частях
рисунка (фиг. 3а и 3b), у этого субъекта и иллюстрируют сходную архитектурные черты в обоих случаях.
Фиг. 3d также показывает более похожую на пластинку архитектуру после 24 месяцев лечения тестостероном, по сравнению с тем, что было до лечения у этого субъекта (фиг. 3с), который имел наибольшее
качественное улучшение в топологических параметрах среди 10 субъектов (отношение поверхности к
кривой увеличилось на 33% и топологический индекс эрозии снизился на 22%).
У эугонадальных субъектов ни один из параметров μMRI значительно не изменился с 0 до 24 месяца (табл. 8).
Таблица 8
Архитектурные параметры, полученные методом анализа микроизображений магнитного резонанса у
десяти эугонадальных субъектов после 24 месяцев лечения тестостероном
1
Значения величины Р определяли с помощью многофакторного дисперсионного анализа, по
схеме с повторным измерением одного фактора, применяя данные из всех четырех периодов наблюдения
0, 6, 12, и 24 месяцев.
Этот пример показывает, что лечение тестостероном гипогонадальных мужчин лечит разрушение
кости, включая разрушение архитектуры трабекул. Неожиданно, но магнитная резонансная микровизиография показала существенное увеличение в параметрах μMRI, отражающих трабекулярную архитектуру, отношении поверхности к кривой и индекс топологической эрозии. Эти параметры существенно
улучшились в большей степени, чем другие параметры μMRI, включая трабекулярную плотность и объ- 13 -
012246
емную фракцию кости, и в большей степени, чем минеральная плотность позвоночника и бедра.
Этот пример дополнительно демонстрирует то, что замещение тестостерона у гипогонадальных
мужчин не только задерживает резорбцию кости, но может также обращать разрушение кости, включая
разрушение трабекулярной архитектуры. Увеличение в отношении поверхности к кривой, которое является топологическим представлением отношения трабекулярных пластинок к палочкам, предполагает,
что замещение тестостероном частично восстанавливает трабекулярную связанность. Если бы тестостерон обладал только способностью замедлять резорбцию кости и позволял заполнять полости, возникшие
в результате резорбции кости, то можно ожидать увеличение в параметрах μMRI, характеризующих трабекулярную плотность, объемную фракцию кости, и можно было наблюдать увеличение в минеральной
плотности кости, но не в отношении поверхности к кривой или не в отношении топологического индекса
эрозии. Фактически, отношение поверхности к кривой и топологический индекс эрозии улучшаются в
большей степени, чем другие параметры. Важность улучшения в трабекулярной архитектуре заключается в том, что архитектура вносит вклад в прочность кости и в устойчивость к переломам независимо от
объема кости или плотности кости, как это было показано в некоторых опытах in vitro. Hwang S.N., et al.,
Med. Phys., 24:1255-61 (1997); Majumdar S., et al., Bone Miner. Res., 12:111-8 (1997); Gordon C.L., et al.,
Canad. Assoc. Radiol. J., 49:390-7 (1998); Odes Z.M., et al., Calcif. Tissue Int., 63:67-73 (1998); Ulrich D., et
al., Bone, 25:55-60 (1999).
Одно из ограничений исследования в этом примере заключается в том, что оценки трабекулярной
архитектуры, полученные методом μMRI, должны быть выполнены на суррогатном месте, на дистальной
части большеберцовой кости, пригодной для достижения разрешения, достаточного для того, чтобы различить индивидуальные трабекулы. Это место, тем не менее, обогащено трабекулами кости, которые
являются обычными местами остеопорозных переломов, таких как переломы позвоночника и бедра, и
также является грузоподъемным. Другим ограничением является отсутствие контрольной группы, получавшей плацебо, так как страдающие тяжелым гипогонадизмом мужчины не могут оставаться без лечения в течение 24 месяцев. Заметное улучшение в параметрах архитектуры, наблюдаемое у гипогонадальных мужчин, возможно, может быть не связано с изменениями в технике измерений, так как десять отобранных эугонадальных мужчин, которых одновременно наблюдали в течение 24 месяцев, не показали
никаких изменений. Улучшение в параметрах архитектуры также не может быть связано с изменениями
в поглощении кальция и BMI, которые были достаточно сходными в начале и в конце исследования.
Таким образом, этот пример показывает, что физиологическое замещение тестостерона не только
лечит разрушение кости путем увеличения количества костного материала, но также улучшает параметры трабекулярной архитектуры, связанные с прочностью кости.
Пример 2. Уровень распространения гипогонадизма среди мужчин в учреждениях первой медицинской помощи.
Этот пример показывает уровень распространения гипогонадизма среди мужчин в возрасте 45 лет,
которые посетили учреждения первой медицинской помощи, независимо от причины визита. Этот пример также оценивает связанную с возрастом распространенность гипогонадизма и связанных с ним признаков и симптомов, а также есть ли различая в распространенности гипогонадизма и описанных признаков и симптомов гипогонадизма у более молодых мужчин (45-64 года) и более старших (≥ 65 лет).
Методы.
Схема исследования. Исследование представляло собой перекрестное обследование для определения распространенности гипогонадизма у пациентов в возрасте по меньшей мере 45 лет, которых осматривали до полудня в учреждениях первой медицинской помощи в течение 2-недельного периода. Были
осуществлены контакты с практикующими врачами из 2650 случайно выбранных по всем Соединенным
Штатам учреждений по оказанию первой медицинской помощи. 130 таких учреждений отвечали требованиям, необходимым для участия. Мужчины, которых осмотрели во врачебных кабинетах участников
исследования между 8 утра и полуднем в течение 2 недель, независимо от причины обращения, пригласили принять участие в исследовании.
Критерии отбора включали: возраст 45 лет или старше, способность сдавать образцы крови, готовность участвовать, способностью читать, говорить и понимать английский язык. Критерии, по которым
исключали претендентов, включали не способность или нежелание подписать форму информированного
согласия.
Оценки. У все подходящих пациентов однократно взяли утреннюю кровь (между 8 утра и полуднем), в которой определили концентрацию общего тестостерона (ТТ), свободного тестостерона (FT),
биодоступного тестостерона (ВАТ) и глобулина, связывающего половой гормон (SHBG). Вес анализы
крови были проведены с помощью Esoterix Labs, Austin, TX.
Демографическая характеристика, история болезни, социальный анамнез и сопутствующее лечение
были накоплены для получения следующей информации: симптомы, связанные с гипогонадизмом, и сопутствующие состояния.
Статистический анализ. Первичный анализ был сфокусирован на описательной статистике и оценке
распространенности гипогонадизма, определяемой как ТТ <300 нг/дл. Оценка распространенности гипо- 14 -
012246
гонадизма (с 95% доверительным интервалом [CI]) была также получена для мужчин в возрасте <65 лет
по сравнению с мужчинами в возрасте ≥65 лет. Второе поисковое исследование было проведено для
оценки влияния демографического разнообразия и установления потенциальных факторов риска (таких
как возраст), связанных с гипогонадизмом. Расхождения и соответствующие 95% CI определяли для связанной с возрастом распространенности и для 10-летнего увеличения в возрасте.
Результаты.
В табл. 9 представлены характеристики пациентов, стратифицированных по возрасту.
Таблица 9
Характеристики пациентов, стратифицированных по возрасту
BMI=индекс массы тела; ВР=кровяное давление; SD=стандартное отклонение.
а
Данные по пациентам не были доступны для одного мужчины в возрасте <65 лет и для 2
мужчин в возрасте >65 лет.
*Для пациентов в возрасте <65 лет, не было информации по BMI для 33 гипогонадальных
пациентов и для 56 эугонадальных пациентов. Для пациентов в возрасте >65 лет, не было
информации по BMI для 28 гипогонадальных пациентов и для 24 эугонадальных пациентов.
*Для пациентов в возрасте <65 лет не было информации по ВР для 1 эугонадального
пациента
Как показано в табл. 10, из 2162 зарегистрированных в этом исследовании пациентов с уровнями
тестостерона, которые возможно было оценить, 836 были гипогонадальными, что грубо показывает распространенность, равную 38,7%.
Таблица 10
Распространенность гипогонадизма по возрастам
Было обследовано больше гипогонадальных пациентов в возрасте <64. Распространенность гипогонадизма была выше у мужчин в возрасте >65 лет (42,1%), чем у мужчин в возрасте 45-64 года (36,9%).
Вероятность гипогонадизма у мужчин в возрасте >65 лет была в 1,24 раза выше (95% CI, 1,03-1,49), чем
мужчины в возрасте 45-65 лет. Шанс иметь гипогонадизм становился в 1,17 раз более вероятным (95%
CI, 1.08-1.27) с каждым 10-летним увеличением в возрасте. К тому же при стратификации по общему
тестостерону свободный тестостерон и биодоступный тестостерон были значительно снижены у гипогонадальных мужчин по сравнению с эугонадальными мужчинами.
В табл. 11 представлена распространенность признаков и симптомов гипогонадизма у пациентов,
стратифицированных по возрасту.
- 15 -
012246
Таблица 11
Признаки и симптомы гипогонадизма
*Р<0,015 были получены в результате анализа данных с помощью критерия хи-квадрат по
исследованным гипогонадальным мужчинам по сравнению с эугонадальными мужчинами.
a
Результаты по признакам и симптомам не были доступны для 1 мужчины в возрасте <65 и
для 2 мужчин в возрасте >65 лет.
Как показано в табл. 11, у большинства гипогонадальных пациентов в возрасте >65 лет было зарегистрировано снижение в способности/частоте половой активности (Р <0,001), снижение полового влечения/либидо (Р <0,001) и физическое истощение/потеря жизненного тонуса по сравнению с эугонадальными мужчинами того же возрастного диапазона (Р=0,015). Большинство гипогонадальных мужчин в
возрасте >65 лет часто испытывали ухудшение самочувствия в общем смысле, по сравнению с эугонадальными мужчинами в возрасте >65 лет (Р=0,005) (табл. 11).
Табл. 12 показывает частоту встречаемости гипогонадальных симптомов у пациентов, разделенных
по возрасту.
Таблица 12
Частота встречаемости гипогонадальных симптомов и возраст
Результаты по признакам/симптомам не были доступны для 1 мужчины в возрасте <65 и для 2 мужчин в возрасте >65 лет.
Частота встречаемости общих признаков и симптомов была сходной между гипогонадальными и
эугонадальными мужчинами по всем возрастным группам. Более высокий процент мужчин, которые были моложе (<65 лет), по сравнению с более старыми мужчинами показал отсутствие признаков и симптомов гипогонадизма (табл. 12).
Заключение.
Этот пример показывает, что среди пациентов, обращавшихся в учреждения первой медицинской
помощи, 42,1% мужчин в возрасте >65 лет имели низкую концентрацию общего тестостерона по сравнению с 38,7% для всех мужчин, принимавших участие в исследовании, в возрасте по меньше мере 45 лет.
Этот пример также показывает, что у более высокого процента мужчин, которые были моложе (<65 лет),
по сравнению с более старыми мужчинами (>65 лет), не было признаков или симптомов гипогонадизма.
- 16 -
012246
Вся процитированная литература и ссылки на патенты настоящим включены в этот документ путем
отсылки. Хотя изобретение описано относительно специфических воплощений и примеров, следует понимать, что возможны другие воплощения, использующие концепцию настоящего изобретения, без отклонения от объема изобретения. Настоящее изобретение определено заявленными элементами и любыми или всеми модификациями, изменениями или эквивалентами, попадающими в рамки подлинной сущности и объема принципов, лежащих в его основе.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Способ лечения, профилактики или снижения риска развития разрушения кости или остеопороза
у нуждающегося в этом субъекта, включающий нанесение некоторого количества водно-спиртовой гелевой фармацевтической композиции на участок кожи субъекта, которая доставляет терапевтически эффективное количество стероида, образующегося в пути синтеза тестостерона, в сыворотку крови субъекта, где композиция включает:
a) от примерно 0,1 до примерно 10% (мас./мас.) тестостерона или его соли, эфира, амида, энантиомера, изомера, таутомера или производного;
b) от примерно 0,1 до примерно 5% (мас./мас.) вещества, улучшающего проницаемость;
c) от примерно 0,1 до примерно 5% (мас./мас.) загустителя;
e) от примерно 45 до примерно 98% (мас./мас.) низшего спирта и
f) очищенную воду;
где композиция способна высвобождать стероид после нанесения композиции на кожу со скоростью и
продолжительностью, при которых в сыворотку крови субъекта доставляется по меньшей мере 10 мкг
стероида в день; и процентное содержание выражено как отношение массы к общей массе композиции.
2. Способ по п.1, где стероид, образующийся в пути синтеза тестостерона, включает примерно 1%
тестостерона или его соли, эфира, амида, энантиомера, изомера, таутомера или производного.
3. Способ по п.2, где вещество, улучшающее проницаемость включает от примерно 0,1 до примерно
5% С8-С22 жирной кислоты, С8-С22 жирного спирта, низшего алкинового сложного эфира С8-С22 жирной
кислоты, ди(низшего) алкилового сложного эфира С8-С22 дикислоты, моноглицерида С8-С22 жирной кислоты, эфира тетрагидрофурфурилового спирта и полиэтиленгликоля, полиэтиленгликоля, пропиленгликоля, 2-(2-этоксиэтокси)этанола, монометилового эфира диэтиленгликоля, алкиларилового эфира полиэтиленоксида, монометилового эфира полиэтиленоксида, диметилового эфира полиэтиленоксида, диметилсульфоксида, глицерина, этилацетата, ацетоуксусного эфира, N-алкилпирролидона, терпена или их
комбинации.
4. Способ по п.3, где веществом, улучшающим проницаемость, является изопропилмиристат.
5. Способ по п.2, где загуститель включает от примерно 0,1 до примерно 5% полиакриловой кислоты.
6. Способ по п.2, где низший спирт включает от примерно 45 до примерно 90% этанола или изопропанола.
7. Способ по п.2, где водно-спиртовая гелевая фармацевтическая композиция включает
a) примерно 1% (мас./мас.) тестостерона;
b) примерно 0,9% (мас./мас.) CARBOPOL®;
c) примерно 0,5% (мас./мас.) изопропилмиристата;
e) примерно 67% (мас./мас.) этанола и
f) очищенную воду.
8. Способ по п.2, где композиция способна высвобождать тестостерон после нанесения композиции
на кожу со скоростью и продолжительностью, при которых достигается концентрация циркулирующего
в сыворотке тестостерона выше чем примерно 400 нг тестостерона на дл сыворотки в течение промежутка времени, начинающегося примерно через 2 ч после введения и заканчивающегося примерно через 24 ч
после введения.
9. Способ по п.8, где концентрация тестостерона в сыворотке поддерживается на уровне от примерно 400 нг тестостерона на дл сыворотки до примерно 1050 нг тестостерона на дл сыворотки.
10. Способ по п.2, где каждое нанесение композиции на кожу в количестве примерно 0,1 г в день
приводит к увеличению концентрации сывороточного тестостерона у субъекта по меньшей мере на примерно 5 нг/дл.
11. Способ по п.2, где композиция предназначена субъекту для суточного введения в дозе от примерно 0,1 до примерно 10 г.
12. Способ по п.2, где количество композиции составляет дозу 5 г, доставляющую в кожу примерно
50 мг тестостерона.
13. Способ по п.2, где количество композиции составляет дозу 7,5 г, доставляющую в кожу примерно 75 мг тестостерона.
14. Способ по п.2, где количество композиции составляет дозу 10 г, доставляющую в кожу примерно 100 мг тестостерона.
- 17 -
012246
15. Способ по п.2, где композицию предоставляют субъекту в одной или нескольких упаковках.
16. Способ по п.15, где упаковка содержит полиэтиленовую прокладку между композицией и внутренней поверхностью упаковки.
17. Способ по п.2, где концентрация общего тестостерона в сыворотке у субъекта перед лечением
составляет менее чем примерно 300 нг/дл.
18. Способ по п.17, где после по меньшей мере 30 дней ежедневного введения концентрация тестостерона в сыворотке у субъекта составляет по меньшей мере от примерно 300 до примерно 1050 нг/дл.
19. Способ по п.2, где композицию вводят один, два или три раза в сутки в течение по меньшей мере примерно 7 дней.
Фиг. 1
Фиг. 2А
Фиг. 2В
- 18 -
012246
Фиг. 3А
Фиг. 3В
Фиг. 3С
- 19 -
012246
Фиг. 3D
Фиг. 4
Евразийская патентная организация, ЕАПВ
Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
- 20 -