Геокчян Н. О. ЭКСТРАКЦИОННО

Ãåîê÷ÿí Í. Î.
ÝÊÑÒÐÀÊÖÈÎÍÍÎ-ÀÁÑÎÐÁÖÈÎÌÅÒÐÈ×ÅÑÊÎÅ ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈÅ
ÌÈÊÐÎÃÐÀÌÌÎÂÛÕ ÊÎËÈ×ÅÑÒ ÁÅÍÇÈËÏÅÍÈÖÈËËÈÍÀ ÒÈÀÇÈÍÎÂÛÌ
ÊÐÀÑÈÒÅËÅÌ ÌÅÒÈËÅÍÎÂÛÌ ÃÎËÓÁÛÌ
Îñíîâíîé êðàñèòåëü ìåòèëåíîâûé ãîëóáîé (òåòðàìåòèëòèîíèí) - ÌÃ ïðåäñòàâèòåëü òèàçèíîãî
ðÿäà. Êàê óæå îòìå÷àëîñü ðàííåå íàìè, ÷óâñòâèòåëüíûå è èçáèðàòåëüíûå ðåàêöèè îïðåäåëåíèÿ
àíòèáèîòèêîâ (îñîáåííî ìèêðîãðàììîâûõ êîëè÷åñòâ) ýêñòðàêöèîííî-àáñîðáöèîìåòðè÷åñêèìè
ìåòîäàìè îñíîâàíû íà âçàèìîäåéñòâèè ñ îðãàíè÷åñêèìè îñíîâíûìè êðàñèòåëÿìè, ñîäåðæàùèìè
ðàçëè÷íûå ãåòåðîàòîìû, íî è ýòè ðàáîòû ïðåäñòàâëåíû îãðàíè÷åííûì ÷èñëîì [1-5].
Ñ äðóãîé ñòîðîíû, èçâåñòíî, ÷òî îðãàíè÷åñêèå îñíîâàíèÿ, â ÷àñòíîñòè ñîäåðæàùèå îäíó èëè
íåñêîëüêî àìèíîãðóïï (òèàçèíîâûå), îðãàíè÷åñêèå îñíîâíûå êðàñèòåëè ìîãóò îáðàçîâûâàòü â
âîäíûõ ðàñòâîðàõ îíèåâûå êàòèîíû ÂÍ+, ñïîñîáíûå ñâÿçûâàòüñÿ ñ ðàçëè÷íûìè
íåîðãàíè÷åñêèìè ïðîñòûìè è êîìïëåêñíûìè
àíèîíàìè ñ îáðàçîâàíèåì ñîëåîáðàçíûõ
ñîåäèíåíèé, ðàñòâîðèìûõ â îðãàíè÷åñêûõ ðàñòâîðèòåëÿõ. Êàê óæå óñòàíîâëåíî íàìè ïðè
èñïîëüçîâàíèè ðàçëè÷íûõ ðåàãåíòîâ, êîòîðûå ñîäåðæàò â ñâîåé âíóòðåííåé ñòðóêòóðå
ðàçëè÷íûå ïî ñîäåðæàíèþ ãåòåðîàòîìû, à òåïåðü óæå àìèíî-ãðóïïû, ìîæíî èñïîëüçîâàòü äëÿ
îïðåäåëåíèÿ àêòèâíûõ êîìïîíåíòîâ â ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòàõ, ñîäåðæàùèõ â ñâîåé
âíóòðåííåé ñòðóêòóðå -ëàêòàìíîå êîëüöî, êîòîðîå õàðàêòåðíî äëÿ ãðóïïû ïåíèöèëëèíà. Êàê
óæå îòìå÷àëîñü íàìè, ýòî æå êîëüöî õàðàêòåðíî äëÿ ìîëåêóëû íåêîòîðûõ äðóãèõ ïðèðîäíûõ
àíòèáèîòèêîâ öåëîãî ðÿäà èõ ïîëóñèíòåòè÷åñêèõ ïðîèçâîäíûõ. Äàííûå ïðåïàðàòû ñòàëè
îáúåäèíÿòü â ãðóïïó -ëàêòàìíûõ àíòèáèîòèêîâ [6-11].
-ëàêòàìíîå êîëüöî
Íàñòîÿùåå èññëåäîâàíèå ÿâëÿåòñÿ ïðîäîëæåíèåì ðàçðàáîòêè íîâîãî ýêñòðàêöèîííîàáñîðáöèîìåòðè÷åñêîãî ìåòîäà îïðåäåëåíèÿ ìàëûõ êîëè÷åñòâ áåíçèëïåíèöèëëèíà îðãàíè÷åñêèì
îñíîâíûì êðàñèòåëåì òèàçèíîãî ðÿäà ìåòèëåíîâûì ãîëóáûì- ÌÃ, êîòîðûé äëÿ ýòîé öåëè íàìè
ïðèìåíÿåòñÿ âïåðâûå.
 äîñòóïíîé ëèòåðàòóðå ìû íå íàøëè àíàëîãè÷íîå ñîîáùåíèå.
Ôîðìóëà ðåãåíòà-êðàñèòåëÿ:
Ìåòèëåíîâûé ãîëóáîé, òåòðàìåòèëòèîíèí.
Ýêñïåðèìåíòàëüíàÿ ÷àñòü
Ìåòîäèêà èññëåäîâàíèÿ: Çàïàñíîé ðàñòâîð áåíçèëïåíèöèëëèíà (íàòðèåâàÿ ñîëü) ãîòîâèëè
ðàñâîðåíèåì òî÷íîé íàâåñêè ïðåïàðàòà ïðîèçâîäñòâî ôèðìû ÎÀÎ ,,Áèîñèíòåç’’ (Ðîññèÿ), â
äèñòèëëèðîâàííîé âîäå. Ðàáî÷èå ðàñòâîðû áåíçèëïåíèöèëëèíà-ÁÏÖ ãîòîâèëè åæåäíåâíî,
ñîîòâåòñòâóþùèì ðàçáàâëåíèåì çàïàñíîãî ðàñòâîðà. Âîäíûé ðàñòâîð ìåòèëåíîãî ãîëóáîãî ÌÃ
ãîòîâèëè ðàñòâîðåíèåì òî÷íîé íàâåñêè ðåàãåíòà – êðàñèòåëÿ ( êâàëèôèêàöèè ,, ÷.ä.à’’ ) â
äèñòèëëèðîâàííîé âîäå è îòôèëüòðîâûâàëè. Îðãàíè÷åñêèå ðàñòâîðèòåëè êâàëèôèêàöèè ,,÷.ä.à’’
è ,,õ.÷.” èñïîëüçîâàëèñü áåç äîïîëíèòåëüíîé î÷èñòêè. Îïòè÷åñêóþ ïëîòíîñòü (ÎÏ) èçìåðÿëè íà
ñïåêòðîôîòîìåòðå ÑÔ-16, pH- ðàñòâîðîâ – íà ïîòåíöèîìåòðå ËÏÓ-01 ñî ñòåêëÿííûì
ýëåêòðîäîì.
Ïðåäâàðèòåëüíûìè îïûòàìè áûëî óñòàíîâëåíî, ÷òî íàòðèåâàÿ ñîëü áåíçèëïåíèöèëëèíà ñ
êàòèîíîì êðàñèòåëÿ ÌÃ îáðàçóåò èîííûé àññîöèàò ( ÈÀ) ãîëóáîãî öâåòà. Îïòèìàëüíûå óñëîâèÿ
îáðàçîâàíèÿ è ýêñòðàêöèè ÈÀ áûëè èññëåäîâàíû òàê: â êà÷åñòâå ðàñòâîðèòåëÿ èñïûòàíû
õëîðïðîèçâîäíûå íàñûùåííûõ óãëåâîäîðîâ, áåíçîë è åãî ãîìîëîãè, ñëîæíûå ýôèðû óêñóñíîé
êèñëîòû, à òàê æå èõ áèíàðíûå ñìåñû. Äëÿ èçâëå÷åíÿ îáðàçóþùåãîñÿ èîííîãî àññîöèàòà ÈÀ
íàèáîëåå ýôôåêòèâíûì ýêñòðàãåíòîì îêàçàëñÿ äèõëîðýòàí
(ÄÕÝ), êîòîðûé îáåñïå÷èâàåò
ìàêñèìàëüíîå èçâëå÷åíèå ÈÀ è ìèíèìàëüíîå èçâëå÷åíèå ,,õîëîñòîãî” îïûòà. Îáúåìíîå
ñîîòíîøåíèå âîäíîé è îðãàíè÷åñêèõ ôàç ñîñòîâëÿåò 2:1 (10ìë+5ìë). Áûëè ñíÿòû ñïåêòðû
ñâåòîïîãëîùåíèÿ äèõëîðýòàíîâûõ îðãàíè÷åñêèõ ýêñòðàêòîâ îáðàçóþùåãîñÿ ÈÀ è ,,õîëîñòûõ”, à
òàêæå âîäíûõ ðàñòâîðîâ êðàñèòåëÿ. Ïðè ñîïîñòàâëåíèè ñïåêòðîâ ïîãëîùåíèÿ âîäíûõ ðàñòâîðîâ
êðàñèòåëÿ ñî ñïåêòðàìè ïîãëîùåíèÿ ýêñòðàêòîâ ÈÀ è ,,õîëîñòîãî”, îò÷åòëèâî âèäíî, ÷òî â
îáðàçîâàíèè èîííûõ àññîöèàòîâ ïðèíèìàåò ó÷àñòèå îäíîïðîòîíèðîâàííàÿ ôîðìà êðàñèòåëÿ,
îäíîâðåìåííî óñòàíîâëåíî, ÷òî èç ðàññìîòðåííûõ ñïåêòðîâ ïîãëîùåíèÿ ÈÀ, ,,õîëîñòîãî” è
âîäíîãî ðàñòâîðà êðàñèòåëÿ, ñïåêòðû ïîãëîùåíèÿ ïðàêòè÷åñêè èäåíòè÷íû, à ïðîäóêòû
âçàèìîäåéñòâèÿ îáíàðóæèâàåòñÿ òîëüêî â îðãàíè÷åñêîé ôàçå. Âî âñåõ òðåõ ñëó÷àÿõ ìàêñèìóì
ñâåòîïîãëîùåíèÿ íàáëþäàåòñÿ ïðè îäíîé è òîé æå äëèíå âîëíû =675íì. Ïðè óñòàíîâëåíèè
îïòèìàëüíîé êèñëîòíîñòè âîäíîé ôàçû îïûòû ïðîâîäèëè â øèðîêîì èíòåðâàëå êèñëîòíîñòè
âîäíîé ôàçû îò pH=1.0-5.0 è 0.5 -1.0 ìîëü/ë ïî HCI, à òàê æå pH=5.7-5.8 ïî äèñòèëëèðîâàííîé
âîäå, ïðè êîòîðîì íàáëþäàåòñÿ ìàêñèìàëüíîå èçâëå÷åíèå îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè [ÎÏ] è çíà÷åíèå
ýêñòðàêòà ÈÀ.  äàëüíåéøåì, èñõîäÿ èç ïðàêòè÷åñêèõ öåëåé, ýêñòðàêöèþ ïðîâîäèëè ïðè pH=5.8
ïî äèñòèëëèðîâàííîé âîäå. Êîëè÷åñòâåííîå èçâëå÷åíèå ÈÀ â îðãàíè÷åñêóþ ôàçó èìååò ìåñòî
ïðè äîáàâëåíèè â âîäíóþ ôàçó 1.0-1.6ìë 0.1% ðàñòâîðà ÌÃ. ÁÏÖ ïðàêòè÷åñêè ïîëíîñòüþ
èçâëåêàåòñÿ îäíîêðàòíîé ýêñòðàêöèåé â ïðè îäíîìèíóòíîì âñòðÿõèâàíèè èç pH=5.8 ïî
äèñòèëëèðîâàííîé âîäû. Ñòåïåíü èçâëå÷åíèÿ (R) ñîñòàâëÿåò  98%, ÷òî áûëî îïðåäåëåíî
ìåòîäîì ïîâòîðíîãî ýêñòðàãèðîâàíèÿ. Îêðàøåííûå ýêñòðàêòû óñòîé÷èâû â òå÷åíèå 120 ìèíóò.
Äèàïàçîí îïðåäåëÿåìîé êîíöåíòðàöèè áåíçèëïåíèöèëëèíà ñîñòàâëÿåò 4.2-400 ìêã ÁÏÖ / ìë
âîäíîé ôàçû. Êàæóùèéñÿ ìîëÿðíûé êîýôôèöåíò ñâåòîïîãëîùåíèÿ îðãàíè÷åñêèõ ýêñòðàêòîâ
ÈÀ áåíçèëïåíèöèëëèíà ñ ÌÃ  675=1400 (ë, ìîë-1, ñì-1). Ìîëüíîå ñîîòíîøåíèå ìåæäó àíèîíîì
ÁÏÖ è êàòèîíîì êðàñèòåëÿ ÌÃ â îáðàçóþùåìñÿ ÈÀ áûëî îïðåäåëåíî ìåòîäîì ïðÿìîé ëèíèè
Àñìóñà è îêàçàëîñü ðàâíûì 1:1. Ðåàêöèÿ âçàèìîäåéñòâèÿ è îáðàçîâàíèå ÈÀ åäåò ïî óðàâíåíèþ:
Áåíçèëïåíèöèëëèí-ÁÏÖ
ÁÏÖ-Na++ R+CI-= R+ ÁÏÖ-+ Na+ CIãäå RCI- ìîëåêóëà ìåòèëåíîãî ãîëóáîãî.
Òàêèì îáðàçîì, èñõîäÿ èç ýêñïåðèìåíòàëüíûõ äàííûõ óñòàíîâëåíî: òèàçèíîâûå êðàñèòåëè
îòëè÷àþòñÿ îò äðóãèõ êëàññîâ îñíîâíûõ êðàñèòåëåé òåì, ÷òî êàê âîäíûå ðàñòâîðû, òàê è
ýêñòðàêòû òèàçèíîâûõ êðàñèòåëåé î÷åíü óñòîé÷èâû âî âðåìåíè (2÷àñà). Îíè íå ðàçëàãàãàþòñÿ
äàæå ïðè äåéñòâèå äíåâíîãî ñâåòà, ÷òî ïðîÿâëÿåòñÿ íåèçìåííîñòüþ çíà÷åíèé ÎÏ
ñîîòâåòñòâóþùèõ ýêñòðàêòîâ âî âðåìåíè, ýòèì è îáåñïå÷èâàþò âîñïðîèçâîäèìûå ðåçóëüòàòû
îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè ýêñòðàêòîâ ÈÀ.
Ïîýòîìó â óñëîâèÿõ îáðàçîâàíèÿ ñîåäèíåíèé
ÈÀ ïðîâåðèëè ãîäíîñòü ïðåïàðàòà
áåíçèëïåíèöèëëèíà âî âðåìåíè.
Ïîëó÷åííûå äàííûå ïðèâåäåíû â òàáëèöå:
N
1
2
3
4
Íàòðèåâàÿ ñîëü áåíçèëïåíèöèëëèíà
Ãîäåí äî 1/2009
÷åðåç 1 ìåñÿö
÷åðåç 3 ìåñÿö
÷åðåç 4 ìåñÿö
Îïòè÷åñêàÿ ïëîòíîñòü Àñîåä/õîë.
0.435
0.378
0.23
0.10
ÁÏÖ -1000000 ÅÄ (0.5988ã.) 100 / 20 / 100 / 2ìë
1ìë- 0.1% ÌÃ , =675íì, â=0.5ñì, pH=5.8
Êàôåäðà àíàëèòè÷åñêîé õèìèè ÅÃÓ.
Ëèòåðàòóðà
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
Ãåîê÷ÿí Í.Î. // Âåñòíèê õèðóðãèè Àðìåíèè èìåíè Ã.Ñ.Òàìàçÿíà 2007, N 4 (61), ñòð.113118.
Ãåîê÷ÿí Í.Î., Ìèêàåëÿí Äæ. À., Ì.Ã. Àðóòþíÿí, Ì.Æ. Ãåã÷ÿí // Â ñá.òåçèñû äîêëàäîâ
ïåðâîé íàó÷íîé êîíôåðåíöèè Àðìÿíñêîãî õèìè÷åñêîãî îáùåñòâà// Àêòóàëüíûå ïðîáëåìû
õèìè÷åñêîé íàóêè Àðìåíèè, Åðåâàí 2008, 17-18 èþëÿ, ñòð.58.
Ãåîê÷ÿí Í.Î., Åãèàçàðÿí À.À. // Âåñòíèê õèðóðãèè Àðìåíèè èìåíè Ã.Ñ.Òàìàçÿíà 2009,, N
1(66), ñòð.30-37
Ãåîê÷ÿí Í.Î. // Âåñòíèê õèðóðãèè Àðìåíèè èìåíè Ã.Ñ.Òàìàçÿíà 2009, N 3 (68), ñòð.78-83.
Ãåîê÷ÿí Í.Î., Ìèêàåëÿí Äæ. À.
 ñáîðíèêå Òåçèñû äîêëàäîâ íàó÷íîé êîíôåðåíöèè, ïîñâÿùåííàÿ – 90ëåòèþ ÅÃÓ, Åðåâàí,
2009,14-17àïðåëÿ, ñòð.29.
Àáäóëëèí È.Ì. ,, Àíòèáèîòèêè â êëèíè÷åñêîé ïðàêòèêå’’, Ñàëàìàò, 1997
Íàâàøèí Ï.Ñ., ,, Àíòèôóãàëüíàÿ õèìîòåðàïèÿ’’ / 1998
Ñïðàâî÷íèê Âèäàëü, ,,Ëåêàðñòâåííûå ïðåïàðàòû â Ðîññèè’’,
,,Àíòèáèîòèêè è
õèìèîòåðàïèÿ” Ìîñêâà, Àñòðàôàðìñåðâèñ 2000, ñòð.1536.
ßêîâëåâ Ñ.Â., ßêîâëåâ Â.Ï. ,,Êðàòêèé ñïðàâî÷íèê ïî àíàëèòè÷åñêîé õèìèîòåðàïèè ’’, Ì.,
Ìåäèöèíà,1998.
Ôîìèíà È. Ï., ,,Êîìáèíèðîâàííûå ïðåïàðàòû áåòà-ëàêòàìàç è ïîëèñèíòåòè÷åñêèõ
ïåíèöèëëèíîâ’’, Àíòèáèîòèêè è õèìèîòåðàïèÿ 1997, ñòð. 29-32
Íûñ Ï.Ñ., Êóðî÷êèíà Â. Á., Ñêëÿðåíêî À. Â., Âåéíáåðã Ò. À. ,,Áåòà-ëàêòàìíûå ñîåäèíåíèÿ.
“Âçàèìîñâÿçü ñòðóêòóðû è áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè’’ / Àíòèáèîòèêè è õèìèîòåðàïèÿ 2000,
ñòð. 36-42.