Система BD FACSMicroCount для ускоренного

Перспективные решения для ускоренного
микробиологического анализа нестерильных и
стерильных продуктов на фармацевтическом
производстве
Сергей Кадулин, специалист по продукции для микробиологии,
компания ГалаХим, Pharmtech 2015 г.
Промышленная микробиология Becton
Dickinson & Company
 Определение микробиологической чистоты
нестерильных продуктов.
 Тестирование на специфические
микроорганизмы.
 Контроль стерильности лекарственных средств.
 Мониторинг окружающей среды помещений.
 Проверка производственной линии .
Продукты BD для промышленной
микробиологии
•
•
•
•
•
Продукты Difco™ и BBL™для
традиционной микробиологии:
Сухие и готовые питательные среды.
Стерильные тампоны (свабы).
Тест-системы для идентификации.
Контрольные штаммы микроорганизмов.
Реагенты.
Автоматизация и ускорение
микробиологического анализа:
BD FACSMicroCount™
BD BACTEC™ FX
Значение автоматизированных ускоренных
технологий микробиологической оценки на
производстве

Корректность анализа – Соответствие требованиям GMP. Прямая корреляция с
традиционными методами микробиологического анализа.
 Качество производственного процесса – Более ранняя оценка микробной
контаминации способствует боле раннему вмешательству в производственный процесс для
устранения нарушений и снижения риска выхода некачественной продукции.
 Удобство – Одновременный анализ множества образцов.
 Снижение материальных и трудозатрат – Автоматическое выполнение операций –
экономия времени персонала.
 Экономия средств – Снижает затраты на запасы и хранение сырья и продукции.
 Экономия времени – сокращение времени поступления производимых продуктов на
продажу.
Ускоренные технологии микробиологической оценки
на фармацевтическом производстве
Традиционные
методы
Выпуск продукции: 9 - 20 дней/34 дня
Разработка/
упаковка
1-2 дня
Микробиологический
контроль 3-7 дней
Коррекция
технологии
1-2 дня
Разработка/
упаковка
1-2 дня
Выпуск продукции: 5-8 дней/15 дней
Обогащение 24 часа
Ускоренные
методы
Коррекция
Разработка/
технологии
упаковка 1-2
1-2 дня
дня
Микробиологический
контроль 5 минут
Обогащение 24 часа
Разработка/
упаковка 1-2
дня
Микробиологический контроль не
стерильной продукции 5 минут/
стерильных жидких средств 7 дней.
Микробиологический контроль не
стерильной продукции 3-7 дней/
стерильной продукции 14 дней.
Регулирующие документы об альтернативных методах
микробиологического контроля
USP <1223>, Валидация альтернативных микробиологических методов
Ph EUR 5.1.6, Альтернативные методы контроля микробиологического качества
PDA Technical Report #33, оценка, валидация и внедрение Альтернативных и Ускоренных
микробиологических методов
Ваш альтернативный метод
должен быть подтвержден как «равный» или «лучше»
по отношению к традиционным методам
Промышленная микробиология Becton
Dickinson & Company
 Определение микробиологической
чистоты нестерильных продуктов.
 Мониторинг окружающей среды
помещений.
BD FACSMicroCount™
Ускоренный
микробиологический
анализ
Технология BD FACSMicroCount™для
ускоренного микробиологического анализа
Быстрая проверка
очищенной/производственной воды
и смывов за 5 минут.
Прямой подсчёт микроорганизмов в
биореакторах и образцах чистых
культур в течение 5 минут.
Оценка микробной контаминации сырья,
промежуточного и конечного продукта в
течение 24 часов.
Высокая производительность и
надёжность результатов благодаря
автоматизации аналитического процесса.
BD FACSMicroCount™
Мечение микроорганизмов
Краситель нуклеиновых кислот,
проникающий в мембрану
живых клеток
Гаситель флуоресценции,
не проникающий в
мембрану живых клеток
(BRAG3)
Частица
Живая клетка
Мертвая или поврежденная
клетка
BD FACSMicroCount™ Оптическая система
Детектор
светорассеяния
Меченный
микроорганизм
Сигнал
светорассеяния
Детектор
флуоресценции
Флуоресцентный
сигнал
Оптические
фильтры
Сфокусированный
лазерный луч V-формы
длиной волны
возбуждения 639 нм
Отображение различных типов микроорганизмов
по различной позиции на точковой диаграмме
Отрицательный контроль
Pseudomonas aeruginosa
2
Зона 1 = Плесени
Зона 2 = Бактерии
Aspergillus brasiliensis
Зона 3 = Дрожжи
Candida albicans
3
1
BD FACSMicroCount™ Оценка воды после инокуляции
Pseudomonas aeruginosa
Фильтрованная DI H2O
Зона1 = 0 подсчётов/мл
~101 КОЕ/мл
~103 КОЕ/мл
~102 КОЕ/мл
75 подсчётов /мл
810 подсчётов/мл
8 527 подсчётов/мл
~104 КОЕ/мл
91744 подсчетов/мл
Образец
BD FACSMicroCount™
подсчётов/мл
Чашечный метод
BD FACSMicroCount
Чашечный метод
КОЕ/мл
log10 подсчётов/мл
log10 подсчётов КОЕ/мл
Фильтрованная DI H2O (фон)
0
0
--
--
~101 Ps. aeruginosa
75
87
1,86
1,94
~102 Ps. aeruginosa
810
645
2,91
2,81
~103 Ps. aeruginosa
8527
7350
3,93
3,87
~104 Ps. aeruginosa
91 744
80 500
4,96
4,91
BD FACSMicroCount™ Выполнение анализа
ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦА
ЗАГРУЗКА ОБРАЗЦОВ В СИСТЕМУ BD FACSMicroCount
BD FACSMicroCount™ Подготовка образцов для
определения микробиологической чистоты
Анализ на FACSMicroCount «прошёл»/«не
прошёл», относительно базового уровня,
определяемого валиадацией метода
• Протокол минимизирует количество
анализируемого образца и увеличивает
чувствительность анализа
• Обнаружение 1 КОЕ в 1 мл образца
• Высокая стабильность реагентов (10 суток
при комнатной температуре)
• Производительность 20 образцов в час
Технологические особенности
BD FACSMicroCount™





Высокая пропускная способность
 20 образцов (качественная оценка)
 12 – 15 образцов (количественный подсчёт)
Единовременно позволяет загрузить 42 образца
Автоматизация
 Добавление реагентов
 Перемешивание образца
 Анализ
Распознавание типов микроорганизмов
 Бактерии
 Дрожжи
 Плесневые грибы
Получение результатов в виде:
 подсчёты/мл
 Тест пройден/не пройден
BD FACSMicroCount™ тестирования
контаминации. Типы образцов




Фильтруемые.
Не фильтруемые.
Твёрдые вещества.
Образцы с твёрдыми включениями и
красителями.
 Малые и большие объёмы.
BD FACSMicroCount™ Виды анализа
Прямой подсчёт (определение точного количества микроорганизмов как живых, так и
мертвых)

Мониторинг эффективности микробной ферментации.

Подсчёт контрольных штаммов микроорганизмов.

Проверка качества живых и ослабленных вакцин.
«Наличие»/«отсутствие» (оценка уровня микробной обсемененности)

Определение микробиологической чистоты в различных продуктах.

Анализ микробиологической чистоты очищенной воды.

Мониторинг внешней среды помещений (стены, приборы, персонал)
Промышленная микробиология Becton
Dickinson & Company
 Контроль стерильности жидких
лекарственных средств
Система BD BACTEC™
Новое поколение BD BACTEC™ для
автоматического и быстрого анализа на
стерильность жидких лекарственных
препаратов
BD BACTEC™ FX Автоматическая система контроля
стерильности жидких лекарственных средств
 Детекция контаминанта
– В течение 8 часов ( 90% случаев)
 Ускорение проверки партий
– Надежные отрицательные результаты за 7 дней (14 дн. > 7дн.)
 Стандартизация процесса
– Обеспечение качества - стандартизированные анализы
– Снижение человеческого фактора
 Снижение затрат на анализы в перспективе
Технология BD BACTEC™ FX
Уникальная технология BD BACTEC™ FX :
 Получение данных от флуоресцентных
сенсорных детекторов на всём протяжении
аналитического процесса
 Оптимизированный состав питательных сред
 Смола для нейтрализации антимикробных
компонентов (если присутствуют в образце)
 Управляющая базами данных электронная
система BD EpiCenter для оптимального сбора
выдачи результатов
BD BACTEC™ FX Наиболее чувствительная
флуоресцентная технология
 В следствие метаболической активности
микроорганизмов увеличивается. концентрация CO2 в
растворе.
 СО2 взаимодействует с флуоресцентным красителем
сенсора, расположенным на дне флакона.
 Светодиод активирует флуоресценцию сенсора,
уровень которой зависит от количества
образованного CO2. Фотодетектор измеряет уровень
флуоресценции.
 Позитивные данные с фотодетектора обрабатываются
с использованием специальных алгоритмов.
 Проводится оповещение о положительных случаях
анализа.
BACTEC™ FX Прямой посев
Образцы жидкого
лекарственного средства
вводится во флаконы с
питательной средой
Питательные среды BD BACTEC™ FX
 Питательные среды для аэробных или
анаэробных микроорганизмов.
 В состав могут входить не ионные
адсорбирующие и катионообменные
смолы, нейтрализующие активность
антимикробных компонентов в образцах.
 Не препятствуют окрашиванию по Граму.
 Наличие специальной упаковки для
работы в чистых помещениях.
BACTEC™ FX Рабочий процесс
ЗАГРУЗКА ОБРАЗЦОВ
ВЫГРУЗКА ОБРАЗЦОВ
BACTEC™ FX Наглядность рабочего
процесса
Индикаторы статуса флаконов
BD BACTEC™ FX Основные технические
характеристики
 2 секции в модуле (на 100 флаконов каждая)
 Возможность охлаждения до определённого заданного
значения температуры между 22,5°C и 32,5°C (± 2,5°C)
 Непрерывный контроль температуры
 Считыватель баркода
 Компьютер с сенсорным экраном
 Считывание показателей каждые 10 минут
BD BACTEC™ FX
Верхний модуль)
 Цветная световая передняя панель:
 Красный цвет = положительные результаты
BD BACTEC™ FX
Верхний и
нижний модуль
 Зелёный цвет = отрицательные результаты
Преимущества BD BACTEC™ FX
 Сокращение время анализа – быстрее реализуются партии
медикаментов: - продолжительность анализа с сокращается с 14 дней до
7 дней.
 Сокращение ручных операций – наблюдение за анализируемыми
образцами выполняет прибор.
 Гарантия качества анализов – стандартизированное считывание
результатов.
 Быстрое обнаружение позитивных результатов (контаминации).
 Снижение время отклика на случаи контаминации.
 Может быть использован для тестирования образцов готовой продукции
методом прямого посева.
Спасибо за внимание!
Группа компаний «ГалаХим»
123100, г. Москва,
2-я Звенигородская, д.12, стр.3.
Т./ф.: +7(495) 984-42-44, www.galachem.ru
Кадулин Сергей Геннадиевич
Моб. : +7(916)185-41-23
kadulin@galachem.ru