влияние полимерных субстратов на биосинтез ферментов

Êàäèìàëèåâ Ä.À., Ðåâèí Â.Â., Àòûêÿí Í.À.
ÂËÈßÍÈÅ ÏÎËÈÌÅÐÍÛÕ ÑÓÁÑÒÐÀÒΠÍÀ ÁÈÎÑÈÍÒÅÇ ÔÅÐÌÅÍÒÎÂ
ËÈÃÍÎËÈÒÈ×ÅÑÊÎÃÎ ÊÎÌÏËÅÊÑÀ ÃÐÈÁÎÌ P.TIGRINUS
Èññëåäîâàíî âëèÿíèå ïîëèìåðíûõ ñóáñòðàòîâ íà ïðîöåññ áèîñèíòåçà ôåðìåíòîâ ëèãíîëèòè÷åñêîãî
êîìïëåêñà ãðèáîì P.tigrinus BKM F-3616D ïðè ãëóáèííîì êóëüòèâèðîâàíèè. Ïîêàçàíî, ÷òî âíåñåíèå
öåëëîëèãíèíà â ñðåäó ñíèæàåò àêòèâíîñòü ôåðìåíòîâ ëèãíîëèòè÷åñêîãî êîìïëåêñà. Áåðåçîâûå îïèëêè
â êîíöåíòðàöèè 2% ïîâûøàþò Mn-ïåðîêñèäàçíóþ è ãëþêîçîîêñèäàçíóþ, à â êîíöåíòðàöèè 5% ëàêêàçíóþ è ïåðîêñèäàçíóþ àêòèâíîñòè.
Ââåäåíèå
 íàñòîÿùåå âðåìÿ áàçèäèàëüíûå ãðèáû ïðèâëåêàþò âíèìàíèå ìíîãèõ èññëåäîâàòåëåé. Îñîáîå ìåñòî ñðåäè íèõ çàíèìàþò ãðèáû «áåëîé ãíèëè» èç-çà
ñïîñîáíîñòè ðàçðóøàòü ëèãíèí è åãî ïðîèçâîäíûå.
 ëèòåðàòóðå èìåþòñÿ äàííûå î òîì, ÷òî ýòè ãðèáû
ìîæíî èñïîëüçîâàòü äëÿ îòáåëèâàíèÿ áóìàãè, ïîëó÷åíèÿ ôåðìåíòîâ è äðóãèõ áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûõ
âåùåñòâ, áèîêîíâåðñèè ëèãíèíñîäåðæàùèõ îòõîäîâ
(7, 12). Åùå îäíèì ïåðñïåêòèâíûì íàïðàâëåíèåì ÿâëÿåòñÿ èñïîëüçîâàíèÿ ãðèáîâ áåëîé ãíèëè â ïðîèçâîäñòâå ýêîëîãè÷åñêè áåçîïàñíûõ êîìïîçèöèîííûõ
ìàòåðèàëîâ. Â ðåçóëüòàòå ïðåäûäóùèõ èññëåäîâàíèé
íàìè áûëî ïîêàçàíî, ÷òî ãðèá P. tigrinus BKM F3616D îáëàäàåò âûñîêîé ëèãíîëèòè÷åñêîé àêòèâíîñòüþ è ïðîäóöèðóåò êîìïëåêñ ôåðìåíòî⠖ ïåðîêñèäàçó ðàñòèòåëüíîãî òèïà, íåñêîëüêî èçîôîðì ëàêêàçû, Mn-ïåðîêñèäàçó è ãëþêîçîîêñèäàçó (1). Öåëåíàïðàâëåííàÿ ìîäèôèêàöèÿ îòõîäîâ äðåâåñèíû ýòèì
ãðèáîì ïîçâîëÿåò ïîëó÷èòü ïëàñòèêè áåç ïðèìåíåíèÿ òîêñè÷íûõ ñâÿçóþùèõ (2, 4). Äëèòåëüíîñòü îáðàáîòêè îòõîäîâ ãðèáîì çàíèìàåò íåñêîëüêî ñóòîê è
çàâèñèò îò ìíîãèõ ôàêòîðîâ è ïðåæäå âñåãî îò ëèãíîëèòè÷åñêîé àêòèâíîñòè. Ïîâûøåíèå àêòèâíîñòè
ãðèáà ïîçâîëèëî áû ñîêðàòèòü ïðîäîëæèòåëüíîñòü
áèîìîäèôèêàöèè è ñíèçèòü ñåáåñòîèìîñòü ïëèò. Îäíèì èç íàèáîëåå ïðîñòûõ ïóòåé ðåøåíèÿ ýòîé ïðîáëåìû ÿâëÿåòñÿ ïðèìåíåíèå èíäóêòîðîâ, â êà÷åñòâå
êîòîðûõ ìîãóò âûñòóïàòü ïîëèìåðíûå ñóáñòðàòû.
Öåëüþ ðàáîòû áûëî ïîäáîð èíäóêòîðîâ äëÿ ïîâûøåíèÿ ëèãíîëèòè÷åñêîé àêòèâíîñòè ãðèáà
P.tigrinus.
Ìåòîäû èññëåäîâàíèÿ
Ãðèá ïèëîëèñòíèê òèãðîâûé – P. (L.) tigrinus áûë
âûäåëåí íà êàôåäðå áèîòåõíîëîãèè Ìîðäîâñêîãî ãîñóäàðñòâåííîãî óíèâåðñèòåòà èìåíè Í.Ï. Îãàðåâà èç
ñóõèõ ïëîäîâûõ òåë, ðàñòóùèõ íà áåðåçîâîì âàëåæíèêå â îêðåñòíîñòÿõ Ñàðàíñêà, è äåïîíèðîâàí â ÂÊÌ
ÐÀÍ êàê øòàìì BKM F-3616 D (5).
Èíîêóëÿò P. tigrinus âûðàùèâàëè íà ñðåäå ×àïåêà-Äîêñà, ñîäåðæàùåé 20 ã/ë êóêóðóçíîãî ýêñòðàêòà
(ïî ñóõèì âåùåñòâàì). Ãðèá ñî ñêîøåííîãî ñóñëîàãàðà âûñåâàëè â æèäêóþ ïèòàòåëüíóþ ñðåäó. Êóñî÷åê çàðîñøåãî àãàðà âíîñèëè â êîíè÷åñêèå êîëáû Ýð-
134
ÂÅÑÒÍÈÊ ÎÃÓ 5`2003
ëåíìåéåðà îáúåìîì 500 ìë ñ 100 ìë ïèòàòåëüíîé ñðåäû è âûðàùèâàëè 4 ñóò. ïðè 260 íà êðóãîâûõ êà÷àëêàõ (235 îá/ìèí). Èíîêóëÿò îáúåìîì 5 ìë âíîñèëè â
ýêñïåðèìåíòàëüíûå ïèòàòåëüíûå ñðåäû.
Ïðè èçó÷åíèè âëèÿíèÿ ñîîòíîøåíèÿ àçîòà è óãëåðîäà íà ëèãíîëèòè÷åñêóþ àêòèâíîñòü ãðèá êóëüòèâèðîâàëè íà æèäêîé ïèòàòåëüíîé ñðåäå ñëåäóþùåãî ñîñòàâà (íà 1 ë): ãëþêîçà – 3 ã; KH2PO4 – 1 ã;
NàH2PO4 – 0,26 ã; MgSO4·7H2O – 0,5 ã; (NH4)2SO4 –
0,317 ã; ÑuSO4 · 5H2O – 0,5 ìã; ÑaCl2 ·2H2O – 74 ìã;
ZnSO4 ·7H2O – 6 ìã; FeSO4 ·7H2O – 5 ìã; MnSO4 ·5
H2O – 5 ìã; ÑîCl2 ·6 H2O – 1 ìã; (9).  ñðåäàõ âàðüèðîâàëè êîíöåíòðàöèþ ïîëèìåðíûõ ñóáñòðàòîâ öåëëîëèãíèíà è áåðåçîâûõ îïèëîê îò 0,5 äî 5%. Êóëüòóðó ãðèáà âûðàùèâàëè ãëóáèííûì ñïîñîáîì ïðè òåìïåðàòóðå 260Ñ â êîíè÷åñêèõ êîëáàõ Ýðëåíìåéåðà
îáúåìîì 500 ìë ñî 100 ìë ïèòàòåëüíîé ñðåäû â òå÷åíèå 12 ñóò. íà êðóãîâûõ êà÷àëêàõ ñî ñêîðîñòüþ 235
îá/ìèí. Â ïðîöåññå êóëüòèâèðîâàíèÿ êàæäûå äâà äíÿ
îòáèðàëè ïðîáû. Ïðîáû öåíòðèôóãèðîâàëè ïðè 6000
îá/ìèí 10 ìèí.  ñóïåðíàòàíòå îïðåäåëÿëè àêòèâíîñòü ïåðîêñèäàçû, ëàêêàçû è Mn-ïåðîêñèäàçû – ïî
îêèñëåíèþ ABTS (»ICN», USA) (9). Íà÷àëüíóþ ñêîðîñòü ðåàêöèè èçìåðÿëè íà ñïåêòðîôîòîìåòðå ÑÔ46 («Ëîìî», Ðîññèÿ). Çà åäèíèöó àêòèâíîñòè ïðèíèìàëè êîëè÷åñòâî ôåðìåíòà, êàòàëèçèðóþùåå îêèñëåíèå 1 ìêì ñóáñòðàòà â òå÷åíèå 1 ìèí. ïðè îïòèìàëüíûõ óñëîâèÿõ. Òàêæå îïðåäåëÿëè êîíöåíòðàöèþ áåëêà ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêè ïî ìåòîäó Áðåäôîðä, èñïîëüçóÿ â êà÷åñòâå ñòàíäàðòà áû÷èé ñûâîðîòî÷íûé
àëüáóìèí («BDH biochemicals», England) (8).
Ðåàêòèâû. Â ðàáîòå èñïîëüçîâàíû ðåàêòèâû 2,2/
-àçèíî-áèñ(3-ýòèë-áåíçòèàçîëèí-6-ñóëüôîíàò) àììîíèÿ (ÀÁÒÑ) – «ICN» (USA), áû÷èé ñûâîðîòî÷íûé
àëüáóìèí – «BDH biochemicals» (England). Îñòàëüíûå ðåàêòèâû – îòå÷åñòâåííîãî ïðîèçâîäñòâà ìàðêè
õ. ÷., ÷. ä. à. è ÷.
Ðåçóëüòàòû è èõ îáñóæäåíèå
Ââåäåíèå öåëëîëèãíèíà â êóëüòóðàëüíûå ñðåäû
îêàçàëî íåáëàãîïðèÿòíîå äåéñòâèå íà ñèíòåç ëèãíîëèòè÷åñêèõ ôåðìåíòîâ ãðèáîì Panus tigrinus. Ñèíòåç Ìn-ïåðîêñèäàçû íà ñðåäàõ ñ âàðüèðîâàíèåì êîíöåíòðàöèè öåëëîëèãíèíà áûë â 2,5 ðàçà íèæå, ÷åì â
êîíòðîëüíîé ñðåäå (ðèñ. 1). Ïðè ýòîì íà ñðåäå ñ ìàê-
Êàäèìàëèåâ Ä.À. è äð.
Âëèÿíèå ïîëèìåðíûõ ñóáñòàòîâ íà áèîñèíòåç ôåðìåíòîâ...
ñèìàëüíûì ñîäåðæàíèåì öåëëîëèãíèíà – 5% àêòèâíîñòü íå äåòåêòèðîâàëàñü. Àíàëîãè÷íàÿ êàðòèíà íàáëþäàëàñü è ïðè èçó÷åíèè âëèÿíèÿ öåëëîëèãíèíà íà
ñèíòåç ïåðîêñèäàçû è ëàêêàçû ãðèáîì. Êàê îáùàÿ,
òàê è óäåëüíàÿ àêòèâíîñòü (ðèñ. 2) áûëà âûøå íà ñðåäå áåç öåëëîëèãíèíà, à ïðè ìàêñèìàëüíîì ñîäåðæàíèè åãî ïåðîêñèäàçà äåòåêòèðîâàëàñü íà íèçêîì óðîâíå, à ëàêêàçà íå îïðåäåëÿëàñü. Íåáëàãîïðèÿòíîå âîçäåéñòâèå ââåäåíèÿ öåëëîëèãíèíà â ïèòàòåëüíûå ñðåäû íà áèîñèíòåç ïåðîêñèäàç è ëàêêàçû ãðèáîì, âåðîÿòíî, îáóñëîâëåíî íàëè÷èåì èíãèáèðóþùèõ âåùåñòâ,
íàïðèìåð îñòàòêîâ ôóðôóðîëà, ïåðåõîäÿùèõ â êóëüòóðàëüíóþ ñðåäó èç öåëëîëèãíèíà. Îäíàêî ââåäåíèå
öåëëîëèãíèíà â ñðåäû äëÿ êóëüòèâèðîâàíèÿ ñòèìóëèðîâàëî áèîñèíòåç ãëþêîçîîêñèäàçû ãðèáîì. Ìàêñèìàëüíûé óðîâåíü áèîñèíòåçà ãëþêîçîîêñèäàçû íàáëþäàëñÿ íà ñðåäå, ñîäåðæàùåé 1% öåëëîëèãíèíà,
÷òî ñâÿçàíî ñ íàëè÷èåì äîïîëíèòåëüíîãî èñòî÷íèêà
óãëåðîäà – öåëëþëîçû, ïðè ãèäðîëèçå êîòîðîé îáðàçóþòñÿ áîëüøèå êîëè÷åñòâà ãëþêîçû – ñóáñòðàòà ãëþêîçîîêñèäàçû.
Èíîå âëèÿíèå íà áèîñèíòåç ôåðìåíòîâ îêàçàëî
äîáàâëåíèå â ïèòàòåëüíûå ñðåäû ðàçëè÷íûõ êîíöåíòðàöèé áåðåçîâûõ îïèëîê. Ïðè íèçêèõ êîíöåíòðàöèÿõ ðàñòèòåëüíîãî ñóáñòðàòà (0,5 è 1%) óâåëè÷åíèÿ ïåðîêñèäàçíîé è ëàêêàçíîé àêòèâíîñòè â íàäîñàäî÷íîé
æèäêîñòè íå íàáëþäàëîñü (ðèñ. 3). Áîëåå âûñîêèå
êîíöåíòðàöèè áåðåçîâûõ îïèëîê âûçûâàëè óâåëè÷åíèå êàê ïåðîêñèäàçíîé, òàê è ëàêêàçíîé àêòèâíîñòè,
÷òî, âåðîÿòíî, ñâÿçàíî ñ èíäóêöèåé íèçêîìîëåêóëÿðíûìè ïðîäóêòàìè äåãðàäàöèè ëèãíèíà, íàïðèìåð, âåðàòðîâûì ñïèðòîì, îëèãî- è äèëèãíîëàìè è äð., îáðàçóþùèìèñÿ ïðè áèîäåãðàäàöèè ëèãíèíîâîãî êîìïîíåíòà îïèëîê ãðèáîì.
Âîïðîñ î ðîëè èíäóêòîðîâ â ïðîÿâëåíèå ëèãíîëèòè÷åñêîé àêòèâíîñòè ãðèáàìè äî êîíöà íå âûÿñíåí. Íåñìîòðÿ íà òî, ÷òî ëèãíîëèòè÷åñêàÿ àêòèâíîñòü
ãðèáîâ áåëîé ãíèëè íîñèò êîíñòèòóòèâíûé õàðàêòåð
è åå ïðîÿâëåíèå íå çàâèñèò îò íàëè÷èÿ ëèãíèíà èëè
åãî ïðîèçâîäíûõ, óðîâåíü àêòèâíîñòè, âêëþ÷àÿ òèòð
îòäåëüíûõ ôåðìåíòîâ, ìîæåò áûòü ïîâûøåí âíåñåíèåì ëèãíèíà èëè åãî àíàëîãîâ.  ëèòåðàòóðå èìåþòñÿ äîñòàòî÷íî ñâåäåíèé î òîì, ÷òî ââåäåíèå â ñðåäû âåðàòðîâîãî ñïèðòà (îí ÿâëÿåòñÿ îäíèì èç ìåòàáîëèòîâ ãðèáà è ïðîäóöèðóåòñÿ èì â ôàçó âòîðè÷íîãî ðîñòà) óâåëè÷èâàåò ëèãíèíàçíóþ àêòèâíîñòü (9,
13, 15). Ïðè ýòîì îí íå ñòîëüêî èíäóöèðóåò ñèíòåç,
ñêîëüêî, âåðîÿòíî, çàùèùàåò ôåðìåíò îò èíàêòèâàöèè (10). Äîáàâëåíèå âåðàòðîâîé êèñëîòû èëè íåôåíîëüíîãî β -Î-4 äèìåðà â ñðåäû êóëüòèâèðîâàíèÿ
ãðèáà Phlebia radiata òàêæå îêàçûâàëî ñòèìóëèðóþùèé ýôôåêò íà ñèíòåç âíåêëåòî÷íûõ ôåðìåíòîâ (14),
à àíèñîâûé ñïèðò â 2,5 ðàçà óâåëè÷èâàë ñèíòåç Mnïåðîêñèäàçû ãðèáîì P. tigrinus 8/18 (3). Âîçìîæíî
òàêæå, ÷òî ïðèñóòñòâèå äîñòàòî÷íîãî êîëè÷åñòâà öåëëþëîçû, êîìåòàáîëèçèðóåìîãî ñóáñòðàòà, ýíåðãåòè÷åñêè îáåñïå÷èâàåò äîïîëíèòåëüíûé ñèíòåç ëèãíîëèòè÷åñêèõ ôåðìåíòîâ, îáðàçîâàíèå âîçìîæíûõ ýôôåêòîðîâ ëèãíîëèòè÷åñêîé ñèñòåìû, ìåäèàòîðîâ
ýëåêòðîííîãî òðàíñïîðòà è ïåðêèñè âîäîðîäà, íåîáõîäèìîé äëÿ ôóíêöèîíèðîâàíèÿ áîëüøèíñòâà ëèãíîëèòè÷åñêèõ ôåðìåíòîâ.
Íàèáîëåå âûñîêèå ïåðîêñèäàçíàÿ è ëàêêàçíàÿ àêòèâíîñòè íàáëþäàëèñü íà âîñüìûå ñóòêè êóëüòèâèðîâàíèÿ íà ñðåäå, ñîäåðæàùåé 5% áåðåçîâûõ îïèëîê.
Ñèíòåç Mn-ïåðîêñèäàçû óâåëè÷èëñÿ ïî÷òè â 5 ðàç ïðè
ðîñòå ãðèáà â ïðèñóòñòâèè 2% áåðåçîâûõ îïèëîê. Íà
ýòîé ñðåäå áûëà îòìå÷åíà è ìàêñèìàëüíàÿ óäåëüíàÿ
Mn-ïåðîêñèäàçíàÿ àêòèâíîñòü (ðèñ. 4), ò. å. ââåäåíèå
ëèãíîöåëëþëîçíîãî ñóáñòðàòà îêàçàëî ñòèìóëèðóþùåå äåéñòâèå èìåííî íà ñèíòåç ôåðìåíòà, à íå òîëüêî
óâåëè÷èëî îáùóþ àêòèâíîñòü êóëüòóðû. Áèîñèíòåç
ãëþêîçîîêñèäàçû òàêæå ïîâûñèëñÿ ïðè ââåäåíèè â
ñðåäó áåðåçîâûõ îïèëîê. Îïòèìàëüíûì âàðèàíòîì,
ñòèìóëèðóþùèì ñèíòåç äàííîãî ôåðìåíòà, áûëà ñðåäà, ñîäåðæàùàÿ 2% áåðåçîâûõ îïèëîê.
Ðàçëè÷èÿ â âåëè÷èíàõ îïòèìàëüíûõ êîíöåíòðàöèé áåðåçîâûõ îïèëîê, âåðîÿòíî, ìîãóò áûòü ñâÿçà-
2,5
45
Àêòèâíîñòü, åä/ìë
Àêòèâíîñòü, åä/ìë
40
2
1,5
1
35
30
25
20
15
10
0,5
5
0
0
êîíòðîëü
0,5
1
2
5
êîíòðîëü
Êîíöåíòðàöèÿ, %
ïåðîêñèäàçà
Ðèñóíîê 1.
Mn-ïåðîêñèäàçà
ëàêêàçà
0,5
1
2
5
Êîíöåíòðàöèÿ, %
ãëþêîçîîêñèäàçà
ïåðîêñèäàçà
Mn-ïåðîêñèäàçà
ëàêêàçà
ãëþêîçîîêñèäàçà
Ðèñóíîê 2.
ÂÅÑÒÍÈÊ ÎÃÓ 5`2003
135
Åñòåñòâåííûå íàóêè
8
Àêòèâíîñòü, åä/ìë
Àêòèâíîñòü, åä/ìë
8
4
4
0
0
êîíòðîëü
0,5
1
2
5
êîíòðîëü
Mn-ïåðîêñèäàçà
ëàêêàçà
1
2
5
Êîíöåíòðàöèÿ, %
Êîíöåíòðàöèÿ, %
ïåðîêñèäàçà
0,5
ãëþêîçîîêñèäàçà
ïåðîêñèäàçà
Mn-ïåðîêñèäàçà
ëàêêàçà
ãëþêîçîîêñèäàçà
Ðèñóíîê 3.
Ðèñóíîê 4.
íû ñ òåì, ÷òî ÷óâñòâèòåëüíîñòü îòäåëüíûõ ôåðìåíòîâ ê îáðàçóþùèìñÿ ïðîäóêòàì äåãðàäàöèè ïîëèìåðà çàâèñèò êàê îò êîëè÷åñòâà ýòèõ ïðîäóêòîâ, òàê è
îò õèìè÷åñêîé ñòðóêòóðû. Íàïðèìåð, èññëåäîâàíèå
ñóáñòðàòíîé ñïåöèôè÷íîñòè ëàêêàçû ïî îòíîøåíèþ
ê ìåòîêñèôåíîëüíûì ñîåäèíåíèÿì, â òîì ÷èñëå ê âàíèëèíîâîìó ñïèðòó, î-âàíèëèíó – ïðîäóêòàì áèîäåãðàäàöèè áåðåçû, ïîêàçàëî ñóùåñòâåííûå ðàçëè÷èÿ â
çíà÷åíèÿõ êèíåòè÷åñêèõ êîíñòàíò (15).
Òàêèì îáðàçîì, äîáàâëåíèå áåðåçîâûõ îïèëîê â
ñðåäó ïîâûøàåò ëèãíîëèòè÷åñêóþ àêòèâíîñòü ãðèáà
P. tigrinus è äàåò âîçìîæíîñòü ðåãóëèðîâàòü ñèíòåç
ôåðìåíòîâ. Óðîâåíü áèîñèíòåçà îòäåëüíûõ ôåðìåíòîâ ëèãíîëèòè÷åñêîãî êîìïëåêñà ãðèáà çàâèñèò îò êîëè÷åñòâà âíåñåííîãî ïîëèìåðíîãî ñóáñòðàòà. Ìàêñèìàëüíàÿ Mn-ïåðîêñèäàçíàÿ è ãëþêîçîîêñèäàçíàÿ
àêòèâíîñòü íàáëþäàåòñÿ ïðè êîíöåíòðàöèè îïèëîê
2%, à ëàêêàçíàÿ è ïåðîêñèäàçíàÿ – 5%.
____________________________
Ñïèñîê èñïîëüçîâàííîé ëèòåðàòóðû:
1. Àòûêÿí Í.À., Ðåâèí Â.Â., Êàäèìàëèåâ Ä.À., Ëàôóòêèíà Ò.Ò. Èçó÷åíèå ðîëè ôåðìåíòîâ ëèãíîëèòè÷åñêîãî êîìïëåêñà ãðèáà P.tigrinus
BKM F-3616 D â áèîìîäèôèêàöèè äðåâåñíûõ îòõîäîâ./Èíòåãðàöèÿ ôóíäàìåíòàëüíîé íàóêè è âûñøåãî ëåñîòåõíè÷åñêîãî îáðàçîâàíèÿ ïî ïðîáëåìàì óñêîðåííîãî âîñïðîèçâîäñòâà, èñïîëüçîâàíèÿ è ìîäèôèêàöèè äðåâåñèíû: Ìàò-ëû Ìåæäóí. Íàó÷íî-ïðàêò. Êîíô
(13-16 èþíÿ 2000 ã.)-Âîðîíåæ, Âîðîíåæ.ãîñ.ëåñîòåõí.àêàä., 2000 ã.-Ñ.109-113.
2. Êàäèìàëèåâ Ä.À., Ðåâèí Â.Â., Øóòîâà Â.Â. Âëèÿíèå ïðåññîâàíèÿ íà ñâîéñòâà ëèãíèíà äðåâåñèíû ñîñíû, îáðàáîòàííîé ãðèáîì
P.tigrinus//Õèìèÿ ðàñò.ñûðüÿ., 2001.-¹3.-Ñ.111-118.
3. Ìÿñîåäîâà Í.Ì. Âëèÿíèå óñëîâèé êóëüòèâèðîâàíèÿ íà ëèãíîëèòè÷åñêóþ àêòèâíîñòü ãðèáà Phanerochoate chrysosporium è Panus
tigrinus.//Äèñ.íà ñîèñê.ó÷.ñòåïåíè êàíä.áèîë.íàóê, Ïóùèíî, 1997.-132ñ.
4. Ðåâèí Â.Â., Êàäèìàëèåâ Ä.À., Øóòîâà Â.Â., Ñàìóèëîâ Â.Ä. Ìîäèôèêàöèÿ ëèãíèíà äðåâåñèíû ãðèáîì Panus tigrinus.//Ïðèêë.áèîõèì. è ìèêðîá.,2002.-¹38.-Â.5.-Ñ.450-453.
5. Ðåâèí Â.Â., Ïðûòêîâà Ò.Í., Ëèÿñüêèíà Å.Â., ×åðêàñîâ Â.Ä., Ñîëîìàòîâ Â.È. Ñâèäåòåëüñòâî î äåïîíèðîâàíèè ìèêðîîðãàíèçìà Panus
(Lentinus) tigrinus (Bulliard:Fries) Fries,317. Ðåãèñòðàöèîííûé íîìåð BKM F-3616D ïðèñâîåí 5 ìàðòà 1998ã.
6. Ñìèðíîâ Ñ.À., Êîðîëåâà Î.Â., Ãàâðèëîâà Â.Ï., Áåëîâà À.Á., Êëÿ÷êî Í.Ë. Ëàêêàçû áàçèäèàëüíûõ ãðèáîâ: ôèçèêî-õèìè÷åñêèå õàðàêòåðèñòèêè è ñóáñòðàòíàÿ ñïåöèôè÷íîñòü ïî îòíîøåíèþ ê ìåòîêñèôèëüíûì ñîåäèíåíèÿì.//Áèîõèìèÿ., 2001.-Ò.66.-Â.7.-Ñ.952-958.
7. Ýëèñàøâèëè Â.È. Áèîêîíâåðñèÿ ðàñòèòåëüíîãî ñûðüÿ âûñøèìè áàçèäèîìèöåòàìè.//Ìèêîë. è ôèòîïàòîë., 1993.-Ò.27.-Â.6.-Ñ.83-92.
8. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantites of protein utilizing the principle of protein-drye
binding.//Anal.Biochem.,1976.-V.72.-P.248-254.
9. Cancel A.M., Orth A.B., Tien M. Lignin and veratryl alcohol are not inducers of the lignolytic system of Phanerochoate chrysosporium.//
Appl.Environ.Microbiol.,1993.-V.59.-¹9.-P.2909-2913.
10. Eggert C., Temp U., Eriksson K.E. The lignolytic system of the white-rot fungus Pycnoporus cinnabarinus: Purification and characterization
of laccase.//Appl.Environ.Microbiol.,1996.-V.62.-¹4.-P.1151-1158.
11. Faison B.D., Kirk T.k., Farrell R.L. Role of veratryl alcohol in regulating ligninase activity in Phanerochaete chrysosporium.//
Appl.Environ.Microbiol.,1986.-V.52.-P.251-254.
12. Jie I., Guanying W. Antitumor polysaccharides from a chinese mushroom, «Juhuagmo», the fruiting body of Pleurotus citrinopillatus.//
Biosci.Biotechnol and Biochem.,1994.-V.58.-¹7.-P.1195-1201.
13. Kirk T.K., Croan S., Tien M., Murtagh K.-E., Farrell R.L. Production of multiple ligninases by Phanerochaete chrysosporiun: effect of
selected growth conditions and use of mutant strain.//Enzyme Microb.Technol.,1986.-V.8.-P.27-32.
14. Niku-Paavola M.-L., Karhunen E., Kantelinen A., Viikari L., Lundel T., Hatakke A. The effect of culture conditions on the production of
lignin modifyling enzymes by the white-rot fungus Phlebia radiate.//J.Biotech.,1990.-V.13.-P.211-221.
15. Tonon F., Odier E. Influence of veratryl alcohol and hydrogen peroxide on ligninase activity and ligninase production by Phanerochaete
chrysosporium.//Appl.Environ.Microbiol.,1988.-V.54.-P.466-472.
136
ÂÅÑÒÍÈÊ ÎÃÓ 5`2003