Особенности взаимодействия кишечной палочки с

ÌÅÄÈÖÈÍÀ
ÓÄÊ 616.831+616.45+616.981.21
À. À. Àãàáàáîâà, Ë. À. Àâàêÿí, Í. À. Ìåëêèêÿí, Ì. À. Áàáàÿí
Îñîáåííîñòè âçàèìîäåéñòâèÿ êèøå÷íîé ïàëî÷êè ñ ýðèòðîöèòàìè,
âûäåëåííûìè ó áîëüíûõ îñòðûì ëåéêîçîì¤
(Ïðåäñòàâëåíî àêàäåìèêîì Ê.Ã Êàðàãåçÿíîì 2/IV 2009)
Êëþ÷åâûå ñëîâà:
ìèêðîîðãàíèçì, ýðèòðîöèò, îñòðûé ëåéêîç, ýëåêòðîííàÿ
ìèêðîñêîïèÿ
Ýøåðèõèè – îáëèãàòíûå ïðåäñòàâèòåëè ìèêðîôëîðû ÷åëîâåêà. Òèïè÷íûì áèîòîïîì äëÿ ýòèõ áàêòåðèé ÿâëÿþòñÿ òîëñòûé êèøå÷íèê è èëåîöåêàëüíàÿ îáëàñòü ïîäâçäîøíîé êèøêè, ãäå îíè ïðåáûâàþò â ïîñòîÿííîì
âçàèìîäåéñòâèè ñ äðóãèìè èíäèãåííûìè ìèêðîîðãàíèçìàìè, ôîðìèðóÿ â
ñîâîêóïíîñòè äèíàìè÷åñêóþ ñèñòåìó – ìèêðîáèîöåíîç êèøå÷íèêà. Ïîÿâëåíèå E. coli â èíûõ îðãàíàõ ðàñöåíèâàåòñÿ êàê ïðèçíàê êèøå÷íîãî
äèñáàêòåðèîçà èëè ñèìïòîì âíåêèøå÷íûõ ýøåðèõèîçîâ [1].
Îäíàêî ñî ñòîðîíû äðóãèõ îðãàíîâ è ñèñòåì îðãàíèçìà ñóùåñòâóåò ðÿä
ìåõàíèçìîâ, ïðåïÿòñòâóþùèõ ðàñïðîñòðàíåíèþ âîçáóäèòåëåé è ãåíåðàëèçàöèè èíôåêöèè. Äåãðàäàöèÿ ìèêðîîðãàíèçìîâ, ïðîíèêøèõ ÷åðåç êèøå÷íûé
áàðüåð, ïðîèñõîäèò â ëèìôîóçëàõ áðûæåéêè, ïå÷åíî÷íûõ ôàãîöèòàõ, ýíäîòåëèîöèòàõ, êóïôåðîâñêèõ êëåòêàõ, ãåïàòîöèòàõ. Äàëüíåéøóþ çàùèòó
îñóùåñòâëÿþò áàêòåðèöèäíûå ñèñòåìû êðîâè âêëþ÷àÿ êëåòî÷íûå è ãóìîðàëüíûå ôàêòîðû àíòèáàêòåðèàëüíîãî è àíòèýíäîòîêñèíîâîãî èììóíèòåòà, à
òàêæå ýêñêðåòîðíûå ñèñòåìû ïî÷åê è æåë÷åâûâîäÿùèõ ïóòåé.
Íóæíî îòìåòèòü, ÷òî ñîñòîÿíèå ìàêðîîðãàíèçìà íàêëàäûâàåò îïðåäåëåííûé îòïå÷àòîê íà õàðàêòåð ôîðìèðóþùèõñÿ áàêòåðèàëüíî-õîçÿèííûõ
âçàèìîäåéñòâèé è, íà íàø âçãëÿä, ñèìáèîòè÷åñêàÿ ïîëèâàëåíòíîñòü E. coli â
ïåðâóþ î÷åðåäü îáóñëîâëåíà âûðàæåííûì ôåíîòèïè÷åñêèì ïîëèìîðôèçìîì
äàííûõ áàêòåðèé ïî êîìïëåêñó áèîëîãè÷åñêèõ õàðàêòåðèñòèê.
¤
ýë. âàðèàíò
2 5 0
Áàêòåðèöèäíûå ñâîéñòâà êðîâè è äðóãèõ áèîëîãè÷åñêèõ æèäêîñòåé
îðãàíèçìà èãðàþò âàæíóþ ðîëü â çàùèòå îðãàíèçìà îò èíôåêöèè. Îíè
îáóñëîâëåíû êàê èììóííûìè, òàê è íåèììóííûìè ìåõàíèçìàìè. Ê ïåðâûì
îòíîñèòñÿ áàêòåðèîëèòè÷åñêèé ýôôåêò àíòèòåë è êîìïëåìåíòà, êî âòîðûì –
ðàçëè÷íûå áàêòåðèöèäíûå áåëêè (ïðîòåèíû, óâåëè÷èâàþùèå ïåðìåàáèëèçàöèþ áàêòåðèé, ëèçîöèì, ëàêòîôåðèí è äð.) è àíòèáàêòåðèàëüíûå ïåïòèäû
(äåôåêñèíû, êàòåëëèöèäèíû) [2]. Ñïîñîáíîñòü îðãàíèçìà óáèâàòü áàêòåðèè
ÿâëÿåòñÿ âàæíûì ïîêàçàòåëåì â îöåíêå èììóííîãî ñòàòóñà ÷åëîâåêà â íîðìå
è ïðè ïàòîëîãèè. Îñëàáëåíèå áàêòåðèöèäíîñòè ñûâîðîòêè ñïîñîáñòâóåò
ïîâûøåíèþ ÷óâñòâèòåëüíîñòè ê èíôåêöèÿì.
Öåëü íàñòîÿùåãî èññëåäîâàíèÿ – îöåíèòü ðîëü áàêòåðèé â ðàçâèòèè
îïóõîëåâûõ ïðîöåññîâ è èçó÷èòü ñòðóêòóðíûå èçìåíåíèÿ, ïðîèñõîäÿùèå ñ
ýðèòðîöèòàìè, âûäåëåííûìè ó áîëüíûõ îñòðûì ëåéêîçîì.
Ìàòåðèàëîì äëÿ èññëåäîâàíèé ïîñëóæèëè êëèíè÷åñêèå øòàììû E.
coli, âûäåëåíèå è èäåíòèôèêàöèþ êîòîðûõ ïðîâîäèëè îáùåïðèíÿòûìè
êëàññè÷åñêèìè ìåòîäàìè [3].
Ýðèòðîöèòû ïîëó÷àëè ó áîëüíûõ ñ îñòðûì ëåéêîçîì. Íà îïðåäåëåííóþ
÷àñòü ýðèòðîöèòàðíîãî îñàäêà in vitro äîáàâëÿëè âçâåñü êèøå÷íîé ïàëî÷êè, à
íà äðóãóþ ÷àñòü – ôèçèîëîãè÷åñêèé ðàñòâîð (êîíòðîëü).
Ïîñëå 2-÷àñîâîé èíêóáàöèè âçâåñè öåíòðèôóãèðîâàëè, ïîëó÷åííûå
îñàäêè îáðàáàòûâàëè ïî îáùåïðèíÿòîé â ýëåêòðîííîé ìèêðîñêîïèè ìåòîäèêå
[4], ôèêñèðîâàëè 2.5% ðàñòâîðîì ãëþòàðàëüäåãèäà, ïðèãîòîâëåííûì íà 0.1 Ì
ôîñôàòíîì áóôåðå ñ pH 7.2-7.4, äåôèêñèðîâàëè 1% ðàñòâîðîì OSO4 íà òîì
æå áóôåðå.
Ãîòîâûå ýïîí-àðàëäèòîâûå áëîêè ðåçàëè íà àâñòðèéñêîì óëüòðàòîìå
ôèðìû ”Reichert - Guhg”. Ïðîñìîòð è ñúåìêó óëüòðàòîíêèõ êîíòðàñòèðîâàííûõ ñðåçîâ ïðîâîäèëè ïðè ïîìîùè ýëåêòðîííîãî ìèêðîñêîïà BS - 613 ôèðìû
”Tesla”.
Ïîëó÷åííûå äàííûå ïîêàçàëè, ÷òî ýðèòðîöèòû áîëüíûõ îñòðûì ëåéêîçîì
íàõîäÿòñÿ â ñîñòîÿíèè àíèçîöèòîçà è ïîéêèëîöèòîçà, èíîãäà íàáëþäàëèñü
ýðèòðîöèòû, óâåëè÷åííûå òðåõêðàòíî, ïðè ýòîì îíè ïðèîáðåòàëè ñàìûå
ðàçíîîáðàçíûå, ïðè÷óäëèâûå ôîðìû (ðèñóíîê, 1,4). Íà ñðåçàõ ìåæäó ýðèòðîöèòàìè âûÿâëÿëèñü ñêîïëåíèÿ E. coli, êîòîðûå íå äåëèëèñü è èìåëè îáû÷íóþ
ôîðìó è ñòðîåíèå (ðèñóíîê, 2). Ïðè áîëüøèõ óâåëè÷åíèÿõ áûëî âèäíî, ÷òî
èíîãäà áàêòåðèè ïðèáëèæàëèñü ê ýðèòðîöèòàì, áåç ïðèçíàêîâ àäãåçèè.
Íàáëþäàëèñü ýðèòðîöèòû, â ðàçíûõ ÷àñòÿõ êîòîðûõ îáíàðóæèâàëèñü
ìåëêèå, ñâåòëûå è êðóãëûå îáðàçîâàíèÿ. ×àñòü ýòèõ îáðàçîâàíèé ñ ðîâíûìè
êðàÿìè ðàñïîëàãàëàñü âíóòðè ýðèòðîöèòà, äðóãàÿ ÷àñòü ñ çàçóáðåííûìè
î÷åðòàíèÿìè ïîäõîäèëà áëèæå ê ïîâåðõíîñòè ýðèòðîöèòà (ðèñóíîê, 5).
2 5 1
Íåðîâíûå êðàÿ ñâåòëûõ îáðàçîâàíèé ñâèäåòåëüñòâîâàëè î ðàçðóøåíèè öèòîïëàçìàòè÷åñêîé ìåìáðàíû ýðèòðîöèòà (ðèñóíîê, 3). Âåðîÿòíî, ðàçðóøåíèå
ïðîèñõîäèëî â ðåçóëüòàòå âîçäåéñòâèÿ áàêòåðèé êèøå÷íîé ïàëî÷êè [4].
Öåíòðàëüíî ðàñïîëîæåííûå ïóçûðüêè èìåëè ðàçíûå ðàçìåðû è, âèäèìî,
îáðàçîâûâàëèñü ïîñëå ñîåäèíåíèÿ ïðèáëèæàþùèõñÿ îòðîñòêîâ èçìåíåííûõ
ýðèòðîöèòîâ (ðèñóíîê 4).
 ðåçóëüòàòå ïðîâåäåííûõ èññëåäîâàíèé ïîëó÷åíû äàííûå î ôóíêöèîíèðîâàíèè ñèñòåìû ”áàêòåðèÿ-ýðèòðîöèò” ñ ó÷åòîì óðîâíÿ ýêñïðåññèè
ñâîéñòâ ìèêðîîðãàíèçìîâ è âíóòðèýðèòðîöèòàðíîãî èõ âëèÿíèÿ. Óñòàíîâëåí
ôåíîìåí âíóòðèýðèòðîöèòàðíîãî âçàèìîäåéñòâèÿ áàêòåðèé. Â ïîëüçó ýòîãî
ïðåäïîëîæåíèÿ ñâèäåòåëüñòâóþò ðàçðóøåíèå öèòîïëàçìàòè÷åñêèõ ìåìáðàí
ýðèòðîöèòîâ è ïîÿâëåíèå â íèõ ïóçûðüêîâ ñ çàçóáðåííûìè êðàÿìè.
Âîçìîæíî, âçàèìîäåéñòâèå áàêòåðèé ñ ýðèòðîöèòàìè îñóùåñòâëÿåòñÿ
ïîñðåäñòâîì ôàêòîðîâ ïàòîãåííîñòè.
Îñîáîå ìåñòî â ðÿäó ôàêòîðîâ
ïàòîãåííîñòè çàíèìàþò âíåêëåòî÷íî ñåêðåòèðóåìûå ìîëåêóëû ñ ìåìáðàíîïîâðåæäàþùåé ñïîñîáíîñòüþ, ïîëó÷èâøèå îáùåå íàçâàíèå ”ãåìîëèçèíû”.
Ìèêðîîðãàíèçìû, ñèíòåçèðóþùèå äàííûå ìîëåêóëû, îáëàäàþò ãåìîëèòè÷åñêîé àêòèâíîñòüþ, â ðåçóëüòàòå ÷åãî ïðîèñõîäèò ëèçèñ ýðèòðîöèòîâ ñ
ïîñëåäóþùèì îñâîáîæäåíèåì ãåìîãëîáèíà [5].
Äëÿ ðåàëèçàöèè è óñèëåíèÿ ïàòîãåííûõ ñâîéñòâ ìèêðîîðãàíèçìàì
íåîáõîäèìî îïðåäåëåííîå êîëè÷åñòâî æåëåçà, êîòîðîå îíè äîëæíû óòèëèçèðîâàòü â îðãàíèçìå õîçÿèíà ïðè ðàçâèòèè èíôåêöèîííîãî ïðîöåññà.
Ñîðáèðóÿ èç ñðåäû æåëåçî, áàêòåðèè ïðèîáðåòàþò ñïîñîáíîñòü ëó÷øå
ïðîòèâîñòîÿòü íåáëàãîïðèÿòíûì ôàêòîðàì, à òàêæå ïîëó÷àþò ïðåèìóùåñòâà
â êîíêóðåíòíîé áîðüáå [6].
Èíñòèòóò áèîõèìèè èì. Ã.Õ Áóíÿòÿíà ÍÀÍ ÐÀ
À. À. Àãàáàáîâà, Ë. À. Àâàêÿí, Í. À. Ìåëêèêÿí, Ì. À. Áàáàÿí
Îñîáåííîñòè âçàèìîäåéñòâèÿ êèøå÷íîé ïàëî÷êè ñ ýðèòðîöèòàìè,
âûäåëåííûìè ó áîëüíûõ îñòðûì ëåéêîçîì
Ïîëó÷åíû äàííûå î ôóíêöèîíèðîâàíèè ñèñòåìû ”áàêòåðèÿ-ýðèòðîöèò” ñ
ó÷åòîì óðîâíÿ ýêñïðåññèè ñâîéñòâ ìèêðîîðãàíèçìîâ è âíóòðèýðèòðîöèòàðíîãî èõ
âëèÿíèÿ.
Óñòàíîâëåí ôåíîìåí âíóòðèýðèòðîöèòàðíîãî âçàèìîäåéñòâèÿ áàêòåðèé.
 ïîëüçó ýòîãî ïðåäïîëîæåíèÿ ñâèäåòåëüñòâóþò ðàçðóøåíèå öèòîïëàçìàòè÷åñêèõ
ìåìáðàí ýðèòðîöèòîâ è ïîÿâëåíèå â íèõ ïóçûðüêîâ ñ çàçóáðåííûìè êðàÿìè.
Ïðèâåäåíû ñâåäåíèÿ î íåêîòîðûõ ìåõàíèçìàõ âçàèìîäåéñòâèÿ áàêòåðèé ñ
ýðèòðîöèòàìè – èñòî÷íèêàìè æåëåçà, à òàêæå ðàññìîòðåíû ìîðôîôóíêöèîíàëüíûå
èçìåíåíèÿ ýðèòðîöèòîâ ó ëþäåé, áîëüíûõ ëåéêîçîì.
2 5 2
². ². ²Õ³µ³µáí³, È. ². ²í³·Û³Ý, Ü. ². Ø»ÉÏÇÏÛ³Ý, Ø. ². ´³µ³Û³Ý
²ÕÇù³ÛÇÝ óáõåÇÏÇ ÷á˳½¹»óáõÃÛ³Ý ³é³ÝÓݳѳïÏáõÃÛáõÝÝ»ñÁ ëáõñ É»ÛÏá½áí
ÑÇí³Ý¹Ý»ñÇó ëï³ó³Í ¿ñÇÃñáóÇïÝ»ñÇ Ñ»ï
γï³ñí³Í ѻﳽáïáõÃÛáõÝÝ»ñÇ ³ñ¹ÛáõÝùáõÙ ëï³óí»É »Ý ïíÛ³ÉÝ»ñ ”µ³Ïï»ñdz¿ñÇÃñáóÇï” Ñ³Ù³Ï³ñ·Ç ·áñÍáõÝ»áõÃÛ³Ý Ù³ëÇÝ‘ ѳßíÇ ³éÝ»Éáí ÙÇÏñáûñ·³ÝǽÙÝ»ñÇ Ñ³ïÏáõÃÛáõÝÝ»ñÇ ¿ùëåñ»ëdzÛÇ Ù³Ï³ñ¹³ÏÁ »õ Ý»ñ¿ñÇÃñáóÇï³ÛÇÝ ³½¹»óáõÃÛáõÝÁ: ê³ÑÙ³Ýí³Í ¿
µ³Ïï»ñdzݻñÇ Ý»ñ¿ñÇÃñáóÇï³ÛÇÝ ÷á˳½¹»óáõÃÛ³Ý ý»ÝáÙ»ÝÁ. ³Ûë »Ýó¹ñáõÃÛ³Ý û·ïÇÝ
¿ ËáëáõÙ ¿ñÇÃñáóÇïÝ»ñÇ µçç³Ã³Õ³ÝÃÝ»ñÇ ù³Ûù³ÛÙ³Ý ÷³ëïÁ »õ Ýñ³Ýó Ù»ç ù³éóíáñ
ͳÛñ»ñáí åÕåç³ÏÝ»ñÇ ³é³ç³óáõÙÁ:
гñÏ ¿ Ýß»É, áñ Ù»ñ ÏáÕÙÇó µ»ñí³Í »Ý ï»Õ»ÏáõÃÛáõÝÝ»ñ µ³Ïï»ñdzݻñÇ »í ¿ñÇÃñáóÇïÝ»ñÇ (»ñϳÃÇ ³ÕµÛáõñÝ»ñ) ÷á˳½¹»óáõÃÛ³Ý áñáß Ù»Ë³ÝǽÙÝ»ñÇ Ù³ëÇÝ, ÇÝãå»ë
ݳ»õ Ñݳñ³íáñáõÃÛáõÝ ¿ ÁÝÓ»éí»É áõëáõÙݳëÇñ»Éáõ ëáõñ É»ÛÏá½áí ÑÇí³Ý¹Ý»ñÇ ¿ñÇÃñáóÇïÝ»ñÇ
ÙáñýáýáõÝÏóÇáÝ³É ÷á÷áËáõÃÛáõÝÁ:
A. A. Aghababova, L. A. Avakyan, N. A. Melkikyan, M. A. Babayan
Principles of Interaction of E. coli with Erythrocytes in Acute Leucosis
According to the investigations it was received the data concerning the functioning
of the system ”bacterium-erythrocyte”, taking into account the level of expression of the
properties of microorganisms and their influence on the erythrocytes. During the investigation the phenomenen of intraerythrocyte location of bacteria as well as the destroying
of the membranes and changing the form of erythrocytes was established. We give the
information about some mechanisms of the interaction of bacteria and erythrocytes. There
also were observed the morphofunctional changes of erythrocytes of patients with acute
leucosis.
Ëèòåðàòóðà
1. Âîåâîäèí Ä. À., Ðîçàíîâà Ã. Í., Ñòåíèíà Ì. À. - ÆÌÝÈ. 2005. N 2. Ñ. 69-92.
2. Ìàâçþòîâ À. Ð., Áîíäàðåíêî Â. Ì. - ÆÌÝÈ. 2007. N 1. Ñ. 89-97.
3. Ìåòîäè÷åñêèå óêàçàíèÿ ïî ìèêðîáèîëîãè÷åñêîé äèàãíîñòèêå çàáîëåâàíèé,
âûçâàííûõ ýíòåðîáàêòåðèÿìè. Ì. 1984.
4. Áðþçîâà Â. È., Áîðîâÿãèí Â. À. è äð. - Ýëåêòðîííî-ìèêðîñêîïè÷åñêèå ìåòîäû èññëåäîâàíèÿ áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòîâ. Ì. Èçä-âî ÀÍ ÑÑÑÐ. 1963.
5. Áóõàðèí Î Â., Ñòàäíèêîâ À. À., Óñâÿöîâ Á. ß. - ÆÌÝÈ. 2006. N 4. Ñ. 25-28.
6. Áóäèõèíà À. Ñ., Ìèõàéëîâà Í. À., Áèòêîâà Å. Å., Õâàòîâ Â. Á. - ÆÌÝÈ. 2007.
N 2. Ñ. 53-57.
2 5 3