ПЕРОКСИДАЗЫ КАК МАРКЕРЫ УСТОЙЧИВОСТИ РАСТЕНИЙ К ПАТОГЕНАМ Минова А.Л., Кабачевская Е.М., Ляхнович Г.В., Волотовский И.Д. Институт биофизики и клеточной инженерии НАНБ, Минск, Беларусь, [email protected] На протяжении всей жизни растения подвергаются действию различных стрессовых факторов, в том числе биотической природы (действие фитопатогенов, фитофагов и т.п.). В связи с этим, одной из важнейших проблем физиологии растений является изучение механизмов их устойчивости к действию неблагоприятных факторов окружающей среды. Особый интерес исследователей вызывают пероксидазы – ферменты класса оксидоредуктаз, катализирующие с помощью H2O2 окисление различных неорганических и органических веществ. В живой клетке пероксидазы играют ключевую роль в поддержании молекул в восстановленном состоянии, что является одним из основных условий для нормального существования живых организмов. Пероксидазы принадлежат к числу индуцибельных ферментов, под влиянием самых разнообразных воздействий либо меняется набор их изоформ, либо повышается активность уже присутствующих молекулярных форм [1]. В литературе имеются данные об изменении активности пероксидаз у растений, пораженных патогенными микроорганизмами. Взаимодействуя с клеткой растения-хозяина, патоген индуцирует в ней целую цепь реакций. Повышение окислительного обмена и активности пероксидазы – результат действия лишь одного из звеньев сложной цепи процессов, изучение которых представляет интерес для выявления устойчивости растения к негативному воздействию. В последние годы появляются работы, в которых авторы предлагают использовать различные ферменты, в том числе пероксидазы, как диагностический признак для оценки степени устойчивости растений к действию стрессовых факторов [2]. В данной работе были проведены эксперименты по определению различия в уровне пероксидазной активности в сортах томата, огурца и моркови, отличающихся по устойчивости к фитофторозу, пероноспорозу и альтернариозу, соответственно. Семена растений и шкалы устойчиво- 128 Активность, нмоль/мг белка в мин сти были любезно предоставлены РУП «Институт овощеводства». Активность пероксидаз определялась гваяколовым методом. 0.10 Сорт (балл восприимчивости): Верасень (3); Вяселка (4); Зарница (4); Свитанок (5); Коралл (6); Янус (6) 0.09 0.08 0.07 0.06 0.05 0.04 0.03 0.02 0.01 0.00 120 Рисунок 1 – Базовый уровень пероксидазной активности в листьях огурца Анализ значений базового уровня пероксидазной активности в листьях 27-дневных растений огурца показал наличие положительной корреляции между устойчивостью и ферментативной активностью (Рис.1). Коэффициент корреляции равен 0,86. Более высокий уровень активности пероксидаз наблюдался также и в листьях устойчивых сортов моркови (Рис.2). Коэффициент корреляции в данном случае составил 0,88. Однако четкого различия между устойчивостью к фитофторозу сортов томата и пероксидазной активностью в листьях данных растений обнаружено не было (Рис.3). Вероятно, к определенным заболеваниям у растений различных видов развивается иммунитет со свойственным ему спектром защитных молекул. Исходя из полученных нами данных, можно полагать, что в случае с растениями огурца и моркови пероксидазы являются маркерами устойчивости к пероноспорозу и альтернариозу, соответственно. Таким образом, полученные в работе результаты могут представлять интерес для селекции. Определение пероксидазной активности может служить основой для оценки устойчивости растений к патогенам еще на ранних стадиях развития растений, что может ускорить селекционный процесс, позволяя осуществлять раннюю выбраковку неустойчивых к патогенам растений. 129 Активность, нмоль/мг белка в мин Сорт (балл восприимчивости): Красный великан - 1,0 Шантане - 1,7 Московская зимняя - 3,0 Королева осени - 3,7 Лосиноостровская - 3,7 Павлинка - 4,0 Лявониха - 4,3 204/96 2007 - 4,3 Карлена - 5,0 Амстердамская - 6,3 0.045 0.040 0.035 0.030 0.025 0.020 0.015 0.010 0.005 0.000 abs Рисунок 2 – Базовый уровень пероксидазной активности в листьях моркови 0.035 Сорт (балл восприимчивости): Ottawa-30 (1); Л1 (2); Л2 (2); Вилина (3); Пралеска (4); Превосходный (5); Доходный (6) Активность, нмоль/мг в мин 0.030 0.025 0.020 0.015 0.010 0.005 0.000 1 Рисунок 3 – Базовый уровень пероксидазной активности в листьях томата Литература 1. Андреева, В.А. Фермент пероксидаза: участие в защитном механизме растений / В.А. Андреева. – Москва : Наука, 1988. – 128 с. 2. Multiple molecular forms of peroxidases and esterases among Nicotiana species and amphiploids / H.H. Smith [et al.] // Plant Physiol. – 1976. – Vol. 57, № 6. – P. 203–212. 130