Идентификация нового пандемического вируса гриппа A/H1N1

Идентификация нового
пандемического вируса
гриппа A/H1N1(sw2009)
методом полимеразной
цепной реакции (ПЦР)
АНАЛИТИЧЕСКИЕ
ХАРАКТЕРИСТИКИ
Эффективность работы наборов
«АмплиСенс® Influenza virus A/BFL» и «АмплиСенс® Influenza virus
A/Н1-swine» показана на штамме
А/California/04/2009.
ОБЩАЯ ИНФОРМАЦИЯ
В соответствии с Методическими указаниями Роспотребнадзора и рекомендациями
ВОЗ в отношении лабораторной диагностики нового пандемического гриппа А/H1N1
(sw2009) молекулярная диагностика является предпочтительным методом выявления
вирусов, подобных штамму A/California/4/2009.
РЕКОМЕНДУЕМЫЙ АЛГОРИТМ ИССЛЕДОВАНИЙ
Проведение исследований при подозрении на пандемический грипп А/H1N1(sw2009) с
использованием наборов реагентов производства ФГУН «ЦНИИЭ Роспотребнадзора»
рекомендуется проводить в два этапа.
Этап №1: Исследование биологического материала на присутствие вирусов гриппа А
и В с помощью набора реагентов «АмплиСенс® Influenza virus A/B-FL». При получении
положительного результата по обнаружению вируса гриппа А на первом этапе, образцы
кДНК, в которых была обнаружена РНК Influenza virus A, исследуются далее.
Этап №2: Для лабораторного подтверждения случая заболевания пандемическим
гриппом нового варианта А/H1N1(sw2009), (подобных штамму A/California/4/2009)
следует использовать набор реагентов «АмплиСенс® Influenza virus А/H1-swine-FL»,
предназначенный для идентификации вируса гриппа свиней А/H1-swine методом
полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией.
10 x титровка кДНК
штамма А/California/04/2009
Набор реагентов «АмплиСенс®
Influenza virus A/Н1-swine» обнаруживает НА тип 1 свиного
происхождения и не дает
перекрестных
реакций
со
штаммами и изолятами A/H1N1,
вызывающими сезонный грипп.
Набор реагентов рекомендуется использовать для анализа образцов кДНК, в которых
была обнаружена РНК Influenza virus A в процессе исследования клинического
материала или культур вирусов с набором реагентов «АмплиСенс® Influenza virus A/BFL» или «АмплиСенс® Influenza virus A/H5N1-FL».
С целью сокращения времени анализа допустима одновременная постановка тестов
«АмплиСенс® Influenza virus A/B-FL» и «АмплиСенс® Influenza virus А/H1-swine-FL».
При получении отрицательных результатов после второго этапа исследования,
для проведения дальнейшего типирования следует использовать набор реагентов
«АмплиСенс® Influenza virus A-тип-FL» предназначенный для идентификации вирусов
гриппа А, вызывающих сезонный грипп человека H1N1 и H3N2. Если образец не
типируется по одной из мишеней (HA или NA), то материал считается подозрительным
на содержание нового антигенного варианта вируса гриппа А, и должен направляться в
референс-лабораторию для дальнейшего исследования.
При диагностике гриппа во время ежегодного эпидемического подъема (при
отсутствии подозрений на A/H1N1(sw2009) или птиц) после обнаружения гриппа А с
набором реагентов «АмплиСенс® Influenza virus A/B-FL» целесообразно использовать
набор реагентов «АмплиСенс® Influenza virus A-тип-FL». Если образец не типируется по
одной из мишеней (HA или NA), то материал считается подозрительным на содержание
нового антигенного варианта вируса гриппа А и требует дальнейшего исследования в
референс-лаборатории.
Возможности диагностики гриппа с помощью наборов
реагентов производства ФГУН «ЦНИИЭ Роспотребнадзора»
Тестирование штаммов
сезонного гриппа
Набор реагентов «АмплиСенс®
Influenza
virus
A-тип-FL»
обнаруживает
РНК
вируса
гриппа А и идентифицирует
субтип H1N1 вирусов гриппа
по гемагглютинину и нейраминидазе
в
суспензии
с
инфекционной активностью 0,03
lgTCID50/мл, идентифицирует
субтип H3N2 в суспензии с
инфекционной
активностью
0,02 lgTCID50/мл.
Тест H1N1 в наборе «АмплиСенс®
Influenza virus A-тип-FL» не дает
перекрестной реакции по гену
NA тип 1 с изолятами подобными
A/California/04/2009.
АмплиСенс® Influenza
virus А/H1-swine-FL
НАБОРЫ РЕАГЕНТОВ
Зарегистрированы
на территории РФ
РУ № ФСР 2009/05143
Наборы реагентов для амплификации и идентификации
кДНК вируса гриппа свиней А/Н1 методом полимеразной
цепной реакции
certified
Преимущества наборов реагентов АмплиСенс® Influenza virus А/H1-swine-FL
Обнаруживает ген НА тип 1 свиного происхождения и не дает перекрестных реакций со штаммами и изолятами гриппа А/Н1N1, вызывающего сезонный грипп.
Внутренний контроль позволяет контролировать все этапы анализа,
включая этап выделения РНК, обратной транскрипции и ПЦР.
Материал для исследования
Рекомендуемые наборы
для экстракции и обратной транскрипции
Вид исследуемого материала
РЕКОМЕНДУЕМОЕ ОБОРУДОВАНИЕ
Клинический материал: мазки из носоглотки и ротоглотки,
смывы из носоглотки и ротоглотки, мокрота (аспираты
из трахеи)
Муколизин для разжижения слизи, РИБО-сорб или
РИБО-преп, Реверта-L
Секционный материал: фрагменты легких и трахеи
РИБО-сорб, Реверта-L
Варианты наборов реагентов
Формат
Прибор для проведения
полимеразной цепной реакции
Rotor-Gene 6000, производства
Corbett Research, Австралия
Кат.
номер
Название
R-V55
(RG)
АмплиСенс®
Influenza
virus
А/H1swine-FL
R-V55
(iQ)
АмплиСенс®
Influenza
virus
А/H1swine-FL
R-V5550-R0,5FEP
АмплиСенс®
Influenza
virus
А/H1swine-FL
R-V5550-R0,2FEP
АмплиСенс®
Influenza
virus
А/H1swine-FL
Комплектация
Флуоресцентная
метка
Специальное
оборудование
55
Green/
FAM
Yellow/
JOE
Rotor-Gene
3000/6000
(Corbett
Research)
55
FAM/JOE
iQ iCycler, iQ5
(Bio-Rad)
55
FAM/HEX
ПЦР-детектор
AЛА-1/4
(BioSan),
Джин
(ДНК-технология)
55
FAM/HEX
ПЦР-детектор
AЛА-1/4
(BioSan)
Кол-во
тестов
Тип
— анализ в режиме реального времени (Real-time PCR) — FRT Fluorescence Real-Time detection
— анализ по «конечной точке» — FEP Fluorescence detection with End Point analysis
— набор реагентов для амплификации
— готовые ПЦР-пробирки с нижней реакционной смесью под слоем воска
Аналитические характеристики
Чувствительность
1х103 копий/мл
тестируемого образца
Россия, 119021, Москва
Олсуфьевский пер., д. 8, стр. 1
Тел.: +7 (495) 664 2884
Факс: +7 (495) 664 2884
www.interlabservice.ru
Специфичность
Специфичность оценивалась при тестировании панели образцов, содержащих штаммы гриппа А различных субтипов, гриппа
В, респираторно-синцитиального вируса, аденовируса, вируса
парагриппа (1-4 тип), клинического материала от пациентов с
острыми респираторными заболеваниями различной этиологии, от группы пациентов без признаков респираторной патологии, образцов аутопсийного материала, а также субпродуктов и
мяса домашних птиц. В рамках предложенной панели специфичность составила 100%.
Все случаи заболевания, вызванные высокопатогенным вирусом гриппа типа А/H1N1, выявленные на территории РФ, были подтверждены
с использованием наборов «АмплиСенс® Influenza virus А/H1-swine-FL».
520420
Анализатор автоматический
люминесцентный мультиканальный
АЛА 1/4, производства «SIA BioSan»,
Республика Латвия