Серомониторинг и диагностика вирусов актинидии и лимонника

ДИАГНОСТИКА И ПРОГНОЗЫ
УДК 634.11:631.53
Серомониторинг
и диагностика вирусов
актинидии и лимонника
Е.А. ТУТЬ,
младший научный сотрудник
Всероссийского селекционно)
технологического института
садоводства и питомниководства
М.Т. УПАДЫШЕВ,
заведующий отделом
защиты растений
В настоящее время заметно воз#
рос интерес к новым интродуциро#
ванным ягодным культурам – акти#
нидии и лимоннику китайскому.
Вместе с тем вопросы фитосанитар#
ного состояния этих культур, в том
числе зараженности вирусными бо#
лезнями, изучены крайне недоста#
точно.
Учитывая опасность распростра#
нения вирусов и среди традицион#
ных садовых культур, необходимы
серомониторинг и определение ви#
дового состава этих патогенов на
лимоннике и актинидии.
Нами обследованы коллекцион#
ные насаждения актинидии (женс#
кие и мужские формы актинидии ко#
ломикта сортов Фея, Находка, Пав#
ловская, Вир#1 и актинидии полига#
ма сорта Перчик, отборная женская
форма № 2 актинидии аргута, женс#
кая форма актинидии джиральда) и
лимонника (сорта Садовый 1, Пер#
венец и отборная форма № 3) Мос#
ковского государственного универ#
ситета имени М.В. Ломоносова, Го#
сударственного ботанического сада
имени Н.В. Цицина и Московской
станции садоводства ВСТИСП
(п. Михнево). Образцы тестировали
сэндвич#вариантом ИФА на непови#
русы (мозаика резухи (ArMV), коль#
цевая пятнистость малины (RpRSV),
черная кольчатость томата (TBRV),
скручивание листьев черешни
(CLRV), кукумовирус огуречной мо#
заики (CMV), тобамовирус табачной
Таблица 1
Процент зараженных вирусами
растений актинидии коломикта
(средние данные за 2004–2006 гг.,
Москва и Московская область)
Вирус
CMV
PDV
ToMV
SLRSV
RpRSV
CLRV
ApMV
PNRSV
TBRV
МГУ
16,7
0
0
0
50
50
33,3
0
0
0
Насаждения
ГБС
МОС
33,3
16,7
50
50
33,3
0
0
0
16,7
0
100
16,7
66,7
33,3
50
50
16,7
0
33,3
0
мозаики (ToMV), иларвирусы (моза#
ика яблони (ApMV), карликовость
сливы (PDV), некротическая кольце#
вая пятнистость косточковых
(PNRSV) и садвавирус латентной
кольцевой пятнистости земляники
(SLRSV).
В варианте тестировали по 6–
7 образцов, каждый образец в 2 по#
вторностях.
Изучаемые вирусы были выявле#
ны практически во всех обследован#
ных насаждениях, но частота их
встречаемости существенно разли#
чалась (табл. 1). Наиболее распро#
страненными на актинидии коло#
микта в МГУ и МОС оказались
RpRSV, в ГБС – PDV. Вирус CMV по
частоте встречаемости на актини#
дии коломикта в среднем по трем
обследованным насаждениям нахо#
дился на втором месте после CLRV.
Вирусы SLRSV и PNRSV встречались
редко, вирус ToMV не обнаружен.
Мониторинг вирусов на трех видах
актинидии и одном виде лимонника
в МОС показал, что на актинидии
присутствуют все виды вирусов за
исключением вируса табачной мо#
заики (табл. 2).
Наибольшая частота встречае#
мости вирусов отмечена на актини#
дии полигама: по ряду вирусов она
достигла 80 %. В среднем по трем
видам актинидии чаще других диаг#
ностировали CLRV, ArMV и PNRSV.
Низкий процент зараженности рас#
тений актинидии был характерен для
RpRSV и TBRV. Промежуточное по#
ложение по процентной доле зара#
женных растений занимали SLRSV и
PDV.
На лимоннике китайском выявле#
ны все изученные нами вирусы. Наи#
большее число растений лимонника
было заражено CLRV, RpRSV и
PNRSV.
Большое значение для корректной
диагностики вирусов методом ИФА
имеют вид образца, отбираемого
для анализа, и срок тестирования.
Отбирали и тестировали почки,
листья, бутоны и кору.
Использование почек, коры побе#
Таблица 2
Процент зараженных вирусами растений актинидии и лимонника
(средние данные за 2004–2006 гг.)
Вирус
CMV
PDV
ToMV
SLRSV
RpRSV
CLRV
ArMV
PNRSV
TBRV
коломикта
16,7
33,3
0
16,7
100
66,7
50
50
0
0
аргута
0
20
20
0
20
20
0
20
20
0
40
40
0
Актинидия
полигама
80
80
40
40
0
60
60
0
80
80
80
80
80
80
40
40
среднее по трем видам
34,1
29,3
0
28,5
16,7
46,3
35,9
41,9
17
17
Лимонник
китайский
10
10
10
10
20
20
30
30
30
30
40
40
40
40
30
30
10
10
49
ДИАГНОСТИКА И ПРОГНОЗЫ
Таблица 3
Зависимость числа случаев выявления
вирусов от вида образца (%)
(10.06.2004 г.)
Вирус Листья
ApMV
71,4
PDV
71,4
PNRSV
42,9
ToMV
57,2
CMV
71,4
CLRV
71,4
TBRV
71,4
RpRSV
71,4
SLRSV
71,4
ArMV
57,2
Почки Kора Бутоны
14,3
14,3
50,0
0,0
0,0
0,0
28,6
42,9
0,0
57,2
14,3
0,0
28,6
14,3
0,0
28,6
14,3
25,0
28,6
14,3
0,0
28,6
28,6
50,0
42,9
14,3
25,0
14,3
14,3
0,0
гов и бутонов не показало их пре#
имуществ по сравнению с листьями
(табл. 3). Только некоторые виды
вирусов хорошо выявлялись в коре
и бутонах. Так, иларвирус некроти#
ческой кольцевой пятнистости кос#
точковых (PNRSV) и неповирус
кольцевой пятнистости малины
(RpRSV) наряду с листьями диагно#
стировались приблизительно на
том же уровне в коре побегов, илар#
вирус мозаики яблони (ApMV) – в
бутонах.
Большинство изученных вирусов
(ApMV, CMV, CLRV, PDV, SLRSV, RpRSV
и TBRV) встречались на актинидии
при тестировании в фазе интенсив#
ного роста побегов (у 71 % тест#об#
разцов). Позже (фаза налива плодов)
у этих же растений отмечали лишь
единичные случаи заражения акти#
нидии коломикты иларвирусом
PNRSV и неповирусом ArMV, актини#
дии аргуты – неповирусами CLRV,
TBRV и ArMV, актинидии джиральда –
иларвирусами CLRV, TBRV и ArMV.
Визуальные симптомы вирусных за#
болеваний на листьях отсутствовали,
поэтому для проверки растений на
наличие вирусов требовались другие
методы диагностики.
При тестировании листьев, почек,
коры лимонника в фазе налива пло#
дов (третья декада июля) достовер#
ное заражение вирусами не выявле#
но, лишь у одного образца в листьях
и почках отмечено вероятное нали#
чие иларвируса PNRSV. Возможно,
отсутствие вирусов в поздний срок
50
тестирования связано с сезонным
снижением их концентрации в орга#
нах растений ниже порога чувстви#
тельности ИФА.
Таким образом, наиболее пред#
почтительными образцами для ИФА
были листья, взятые в ранние сро#
ки.
Наши наблюдения показали, что
на листьях актинидии коломикта
встречаются нетипичные признаки –
деформация листовой пластины,
пятна разной формы и окраски, не
связанные с пестролистностью, ха#
рактерной для актинидии. Тестиро#
вание выявило, что, как правило, в
листьях с признаками морщини#
стости диагностировалось большее
число вирусов и в более высокой
концентрации, чем в нормальных.
При диагностике вирусных болез#
ней на актинидии аргута в условиях
открытого грунта выявлена неравно#
мерность распределения вирусов в
листьях. В листьях с признаками
хлороза их было обычно больше,
чем в зеленых. Например, в хлоро#
тичном листе актинидии обнаружен
PNRSV, тогда как в зеленом листе
данный вирус отсутствовал.
У разных растений одного и того
же сорта обнаруживали разные ви#
русы. Например, одно растение ак#
тинидии аргута сорта Золотая коса
было заражено вирусом CLRV, дру#
гое – RpRSV.
Перед началом цветения лист ак#
тинидии начинает менять окраску с
зеленой на пеструю – с розовыми,
малиновыми, белыми и зелеными
оттенками, вероятно, для дополни#
тельного привлечения опылителей.
Пестролистность – генетическое
изменение, однако у актинидии по#
лигама выявлена определенная за#
висимость распределения вируса в
листьях от цвета листа и сорта (фор#
мы, клона). Так, в серебристо#белой
части листа обнаружено 4 вируса
(2 иларвируса PDV и PNRSV, 1 сад#
вавирус SLRSV и 1 неповирус ArMV),
тогда как в зеленой эти вирусы от#
сутствовали. В зелено#белом листе
диагностировали 4 вируса (CLRV,
RpRSV, SLRSV и ArMV), а в зеленом
листе с округлыми светлыми пятна#
ми – 1 (ArMV).
Анализ показал, что наиболее вы#
сокое содержание хлорофилла было
в зеленом листе (9,2 мг/1 г сырой
массы), минимальное – в бело#зеле#
ном с площадью белой зоны около
50 % (6,4 мг/1 г), разница – 44 %.
Лист с признаками начального побе#
ления, затрагивающего 10–15 %
площади листовой пластинки, со#
держал на 24 % меньше хлорофил#
ла, чем зеленый. Смена зеленого
пигмента красным приводила к сни#
жению содержания хлорофилла на
30 %.
Во всех случаях, когда окраска ли#
стьев менялась с зеленой на белую
или красную, содержание хлоро#
филла значительно падало, что мо#
жет отражаться на активности фото#
синтетической системы, а также
влиять на миграцию и локализацию
вирусов.
Неравномерность распределения
большинства изученных вирусов
как по срокам тестирования, так и
по растению в целом и отдельным
его частям следует учитывать при
отборе образцов для ИФА. Для ус#
пешной диагностики вирусов в пе#
стрых листьях лучше составлять
сборный образец из частей листа
разной окраски.
В связи с тем, что журнал распро9
страняется во всех государствах
СНГ и Балтии, где установлены раз9
ные регламенты применения хими9
ческих и биологических средств за9
щиты растений, необходимо при вы9
боре того или иного препарата све9
ряться с Государственным каталогом
пестицидов и агрохимикатов, разре9
шенных к применению в данной
стране.