Адено Стик (респираторный)

28 Pierre Köenig St., Talpiot Industrial Area
P.O.B 53231 Jerusalem 91531 ISRAEL
Phone: 972-2-6781861; Fax : 972-2-6781852
e-mail: [email protected]
www.novamed.co.il
Адено Стик (респираторный)
ЭКСПРЕСС-ТЕСТ ДЛЯ КАЧЕСТВЕННОГО ОДНОЭТАПНОГО ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИГЕНОВ АДЕНОВИРУСА
В РЕСПИРАТОРНЫХ ОБРАЗЦАХ ЧЕЛОВЕКА
Кат. № R-5188.
ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ
НАЗНАЧЕНИЕ
АденоСтик (респираторный) - иммунохроматографическая тест-система
для экспресс-диагностики аденовирусной инфекции у человека в мазках из
зева, соскобах со слизистой носоглотки, носоглоточных аспиратах и
назальных смывах.
5. Тестовые полоски должны быть утилизированы с использованием
соответствующего контейнера после использования. Тестовые полоски,
подставка, пробирки должны быть стерилизованы.
6. Не проводить исследование, используя компоненты наборов разных
серий.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ
Аденовирус - ДНК-содержащий вирус рода Mastadenovirus семейства
Adenoviridae, впервые были выделены Rowe Huebner и Gilmore в 1953 году
при операции на миндалинах и аденоидах детей. Морфологически
аденовирусы представляют собой безоболочечные икосаэдрические
структуры диаметром 80 нм.
Аденовирусная инфекция отличается широким спектром клинических
проявлений, вызывает у людей поражения респираторного (острый
фарингит, фарингоконъюнктивальная лихорадка, пневмония, острые
респираторные синдромы) и желудочно-кишечного трактов (гастроэнтерит,
в основном, у детей), а также глаз (эпидемический кератоконъюнктивит,
фарингоконъюнктивальная лихорадка, неспецифический фолликулярный
конъюнктивит). В настоящее время известно о 57 человеческих серотипах,
различающихся с помощью серологических методик и анализа ДНК и
ответственных за 5-10% острых респираторных вирусных инфекций у
детей и большей заболеваемости среди взрослого населения.
ХРАНЕНИЕ
АденоСтик (респираторный)
производства компании Novamed Ltd.,
Израиль необходимо хранить при температуре 2-30оС в течение всего срока
годности. Не замораживать! До использования тестовая полоска должна
находиться в неповрежденной индивидуальной упаковке. Срок годности
набора указан на упаковке.
ПРИНЦИП
АденоСтик (респираторный)
производства компании Novamed Ltd.,
Израиль представляет собой полоску нитроцеллюлозной мембраны с
фиксированными на ней в области добавления пробы моноклональными
мышинными антителами к к аденовирусу человека, конъюгированными с
окрашенными частичками латекса. В области тестового окошка также
зафиксированы моноклональные антитела к аденовирусу человека.
Поликлональные антимышинные антитела зафиксированы в контрольной
зоне полоски. Аденовирус человека содержащийся в пробе, реагирует со
специфическими меченными моноклональными антителами, формируя
комплекс антиген-антитело, который мигрирует по мембране, образуя
синюю цветную линию в тестовой зоне мембраны, что оценивается как
положительный результат. Непрореагировавший конъюгат мигрирует
далее к контрольной зоне, где
захватывается поликлональными
антимышинными антителами, формируя зеленую линию в контрольной
зоне мембраны. Kонтрольная линия появляется всегда. Наличие
контрольной линии подтверждает корректность результатов теста
(правильный объем пробы, необходимый темп миграции, требуемое
качество реагентов).
КОМПЛЕКТАЦИЯ НАБОРА
В состав набора АденоСтик (респираторный) входит:
25 полосок АденоСтик (респираторный), упакованных в индивидуальные
алюминиевые пакеты;
25 пластиковых тестовых одноразовых пробирок установленных в
пластиковый штатив;
1 бутылочкa-капельницa, содержащая 15 мл буфера В для разведения
пробы.;
1 инструкция к применению.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
1. Не допускается использование набора и его компонентов после
истечения срока годности.
2. Набор предназначен только для использования in vitro в целях
лабораторной диагностики.
3. Тестовая полоска должна находиться в индивидуальном алюминиевом
пакете вплоть до проведения анализа.
4. Исследование
проб
регламентируется
правилами
работы
с
инфекционными агентами. Все образцы, контрольные растворы,
реагенты должны рассматриваться как потенциально опасные вещества и
обрабатываться как потенциально содержащие инфекционные агенты.
Избегать попадания компонентов набора в глаза, избегать контакта с
поврежденными кожными покровами, слизистыми.
ОТБОР, ХРАНЕНИЕ И ПОДГОТОВКА ПРОБ.
Для получения достоверных результатов рекомендуется исследовать
материал не более через 7-10 дней после появления первых симптомов
болезни. Для сбора и транспортировки образцов рекомендуется
использовать стерильные коммерческие зонды-тампоны без и с
транспортными средами или буферами предназначенными для
транспортировки образцов подозрительных на вирусную инфекцию. Для
проверки качества используемой транспортной среды необходимо
тестировать среду с положительным и отрицательным контролем по
наличию или отсутствию искомого антигена или микроорганизма. При
этом должны быть получены соответствующие ожидаемым результаты.
Для адекватной детекции аденовируса особое значение имеет правильный
отбор проб. Образцы не центрифугируют во избежание потери клеточного
материала.
1. Соскобы со слизистой носоглотки.
Отбор материала со слизистой носа производят стерильным сухим
коммерческим зондом-тампоном (дакрон, полиэстер). При этом тампон
оставляют в полости носа на несколько секунд для абсорбции материала,
осторожно поворачивают тампон вокруг оси и извлекают из полости.
Использование отдельного тампона для каждой ноздри позволит увеличить
количество отбираемого материала. Тампон помещают в пробирку с 1-2 мл
стерильного PBS или с транспортной средой (транспортный коллектор).
Перед исследованием жидкость в пробирке перемешивают тампоном, после
чего вынимают тампон, тщательно удалив остатки жидкости.
Непосредственно перед проведением теста жидкость в пробирке повторно
перемешивают встряхиванием.
2. Мазок из зева.
Соскоб материала с области миндалин и задней поверхности зева
производится стерильным коммерческим зондом-тампоном (дакрон,
полиэстер), смоченным в стерильном PBS или физиологическом растворе,
после чего тампон помещают в пробирку с 1-2 мл транспортной среды для
вирусов и переламывают аппликатор тампона. Перед исследованием
жидкость в пробирке перемешивают встряхиванием.
3.Носоглоточные аспираты.
Аспирировать носоглоточные секреты через катетер (№8 Fr), соединенный с
контейнером-сборником и источником вакуума. Стерильный катетер
вводят в ноздрю параллельно небу. Медленно вынимая катетер, несколько
раз нажать на клапан для осуществления вакуумной аспирации, Процедуру
проводят отдельно для каждой ноздри до получения 0,2-0,8 мл секрета,
который затем переносят в пробирку с 1-2 мл транспортной среды для
вирусов. Перед исследованием жидкость в пробирке перемешивают
встряхиванием.
4.Назальные смывы.
2-3 мл стерильного PBS вливают в ноздрю пациенту, находящемуся в
положении с запрокинутой головой. Затем наклоняют голову, собирая
жидкость в стерильный флакон, содержащий PBS или транспортную среду
для вирусов. Не рекомендуется отбирать избыточный объем жидкости во
избежание снижения чувствительности теста.
Экстракция пробы.
Экстракции подвергают носоглоточные аспираты, носоглоточные соскобы,
назальные смывы, соскобы со слизистой глотки (мазки из зева). В тестовую
пластиковую пробирку для проведения теста вносят 250 мкл образца и 3
капли (150 мкл) муколитического агента. Перемешивают на вортексе.
Инкубируют в течение 5 мин при комнатной температуре. Переносят 0,5 мл
полученной пробы в пробирку с готовым буфером для ее разведения.
Транспортировка образцов
Образцы должны храниться при температуре 2-8°С. Не рекомендуется
замораживать образцы до окончания 48-часового периода после отбора
пробы. Используется быстрая заморозка пробы на ледяной бане с ацетоном
или спиртом, хранение замороженных образцов производится при
температуре -20оС. Избегать медленного замораживания путем помещения
образцов в морозильную камеру на -20оС, т.к. это может повлиять на
структуру исследуемого антигена аденовируса. Повторное замораживание
и размораживание материала нежелательно.
ТЕХНИКА ВЫПОЛНЕНИЯ АНАЛИЗА.
Перед проведением анализа тест-полоску, образец и контрольные растворы
довести до комнатной температуры (20-30 оС).
Исследование проб назальных смывов или носоглоточных аспиратов
(см. рисунок 1)
Внести образец (300 мкл) Добавить 3 капли буфера B и размешать
B
Вставить полоску
Ждать 10 мин.
SAMPLE
1. Использовать отдельную тестовую пробирку для исследования каждой
пробы. Внести в тестовую пробирку 300 мкл пробы назальных смывов или
носоглоточных аспиратов. Добавить 3 капли (150 мкл) буфера В для
разведения пробы и тщательно размешайте.
2. Вытащить полоску из упаковки. Маркировать ее инициалами или
идентификационным номером обследуемого.
3. Вставить полоску вертикально в пробирку с разведенной пробой
(стрелками вниз).
4. Результат анализа учитывают через 10 мин.
пробами. При отсутствии соответствующего результата с контрольной
пробой набор считают непригодным к применению.
ОГРАНИЧЕНИЯ
1. Результаты теста в высокой степени зависят от условий сбора и
транспортировки образцов.
2. Данный тест распознает все серотипы аденовируса человека.
3. Результаты теста зависят от количества антигена в клиническом образце
и могут не кореллировать с результатами, полученными при
исследовании клеточных культур.
4. При использовании транспортных сред для вирусов рекомендуется
проводить валидацию свойств транспортной среды с использованием
тестовых образцов.
5. Отрицательный результат теста не исключает возможность
аденовирусной инфекции в отдельных случаях по причине низкой
концентрации вирусных антигенов (стадия инфекции, неправильные
пробоподготовка и хранение материала).
6. Для постановки корректного диагноза необходимо обязательно
сопоставление результатов теста с прочей клинической информацией.
ОЖИДАЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ
Образцы, полученные от здоровых индивидуумов, отрицательны на
наличие аденовируса. Симптоматика аденовирусной инфекции у
некоторых инфицированных индивидуумов может быть неярко
выраженной, образцы, полученные от таких пациентов, могут давать
отрицательный результат. Частота выявления положительных результатов
может варьировать в зависимости от условий отбора, транспортировки,
образца, стадии заболевания, распространенности аденовирусной
инфекции в данном географическом регионе.
ХАРАКТЕРНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ТЕСТА.
А. Клиническое сравнение
АденоСтик (респираторный) производства компании Novamed Ltd.,
Израиль показал высокую специфичность (>99%) и чувствительность
(>99%) при сравнительном исследовании образцов с помощью
коммерческого метода иммунофлюоресценции производства компании
Remel, США.
Исследование проб мазков из зева (см. рисунок 2)
B
Внести 15 капель буфера В
Выбросить зонд-тампон
Ввести зонд-томпон
Вставить полоску
Ждать 10 мин.
1.Использовать отдельную тестовую пробирку для исследования каждой
пробы (зонда-тампона). Внести в тестовую пробирку 15 капель (500 мкл)
буфера В для разведения пробы.
2.Ввести исследуемый зонд-томпон, тщательно смешать образец с
содержимым пробирки. Извлечь зонд-тампон из пробирки предварительно
отжимая содержимое тампона нажатием и вращением о внутренние стенки
пробирки. Выбросить использованный зонд-тампон.
Б. Перекрестные реакции.
АденоСтик (респираторный) производства компании Novamed Ltd.,
Израиль не дает неспецифических перекрестных реакций с такими
распространенными возбудителями острых респираторных вирусных
инфекций человека как респираторный синитициальный вирус и вирусы
гриппа A&B.
B. Уровень определения
Положительный образец с заведомо известной концентрацией гексона
вириона аденовируса был разведен с помощью буферного раствора и его
серийные разведения были протестированы на наличие данного антигена.
АденоСтик (респираторный) производства компании Novamed Ltd.,
Израиль показал положительный результат уже при концентрации данного
антигена в 4.68 нг/мл при исследовании в пределах 0-150 нг/мл.
УТВЕРЖДАЮ
Генеральный директор ООО «ГЕМ»
3. Вытащить полоску из упаковки. Маркировать ее инициалами или
идентификационным номером обследуемого.
4. Вставить полоску вертикально в пробирку с разведенной пробой
(стрелками вниз).
«17» сентября 2010 г.
5. Результат анализа учитывают через 10 мин.
Представительство в РФ:
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
POSITIVE
NEGATIVE
________________С.А. Гольдберг
INVALID
Отрицательный результат
Проявляется зеленой полосой в контрольной зоне C.
Положительный результат
Проявляется синей полосой в тестовой зоне T и зеленой полосой в
контрольной зоне.
Сомнительный результат
При отсутствии видимой зеленой полосы в контрольной зоне C результаты
анализа оценивают как сомнительные. Тест проводят повторно.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Каждый тест имеет встроенный процедурный контроль. Процедура
проведения теста может считаться корректной при появлении контрольной
линии в зоне С мембраны.
Перед началом работы каждую новую серию набора необходимо
тестировать с заведомо отрицательной и положительной контрольными
ООО «ГЕМ» г. Москва, Новый Зыковский пр
д. 4А.
+7 (495) 787-04-32
www.hemltd.ru
IFU-AdenoStick Resp-R-5188c-HEM-russ.-v.02-19.06.12