ÓÄÊ 566.264-31, 664.8.022 ÄÅÉÑÒÂÈÅ ÑÂÅÐÕÊÐÈÒÈ×ÅÑÊÎÃÎ ÑÎ2 ÍÀ ÊËÅÒÊÈ ÌÈÊÐÎÎÐÃÀÍÈÇÌΠÝÊÑÒÐÅÌÎÔÈËΠ1 À. Þ. Øàäðèí*, 1À. À. Ìóðçèí, 1À. Ñ. Äîðìèäîíîâà, 2À. Â. Ñóñëîâ, 2 È. Í. Ñóñëîâà, 2Á. Ô. ßðîâîé 1 Ðàäèåâûé èíñòèòóò èì. Â.Ã. Õëîïèíà, Ñ.-Ïåòåðáóðã, Ðîññèÿ Ïåòåðáóðãñêèé èíñòèòóò ÿäåðíîé ôèçèêè ÐÀÍ, Ãàò÷èíà, Ëåíèíãðàäñêàÿ îáë., Ðîññèÿ 2 *[email protected] Ïîñòóïèëà â ðåäàêöèþ 21.11.2008 ã. Èçó÷åíà êèíåòèêà èíàêòèâàöèè áàêòåðèé E. coli, D. radiodurance è êëåòîê íåñîâåðøåííûõ ãðèáîâ Candida albicans â ñðåäå ãàçîîáðàçíîãî è ñâåðõêðèòè÷åñêîãî äèîêñèäà óãëåðîäà. Ïîêàçàíà âîçìîæíîñòü ñíèæåíèÿ êîíöåíòðàöèè âûæèâøèõ êëåòîê ìèêðîîðãàíèçìîâ íà 57 ïîðÿäêîâ. Ê ë þ ÷ å â û å ñ ë î â à: èíàêòèâàöèÿ, ìèêðîîðãàíèçìû, Escherichia coli, Deinococcus radiodurance, Candida albicans, ñâåðõêðèòè÷åñêèé äèîêñèä óãëåðîäà. ÂÂÅÄÅÍÈÅ Èñïîëüçîâàíèå ÑÎ2 ïîä äàâëåíèåì ÿâëÿåòñÿ ïåðñïåêòèâíûì ìåòîäîì õîëîäíîé ïàñòåðèçàöèè è/èëè ñòåðèëèçàöèè æèäêèõ è òâåðäûõ ìàòåðèàëîâ, êîòîðûé ñïîñîáåí ïîëíîñòüþ èëè ÷àñòè÷íî çàìåíèòü øèðîêî èñïîëüçóåìóþ â íàñòîÿùåå âðåìÿ òåðìîîáðàáîòêó. Îáû÷íûå ìåòîäû èíàêòèâàöèè (èíàêòèâàöèÿ ÷àñòè÷íàÿ èëè ïîëíàÿ ïîòåðÿ áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûì âåùåñòâîì èëè àãåíòîì ñâîåé àêòèâíîñòè) áàêòåðèé ïðåäóñìàòðèâàþò èõ íàãðåâàíèå èëè âîçäåéñòâèå òîêñè÷íûìè õèìèêàòàìè. Ýòè ìåòîäû íå ïðèãîäíû äëÿ òåïëî÷óâñòâèòåëüíûõ ìàòåðèàëîâ, ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ è ôàðìàöåâòè÷åñêèõ ñðåäñòâ. Ïðèíöèïèàëüíûì ìîìåíòîì ÿâëÿåòñÿ ñîõðàíåíèå ñòåðèëèçóåìûì ìàòåðèàëîì ñâîèõ îñíîâíûõ ìåõàíè÷åñêèõ è ôèçèêî-õèìè÷åñêèõ ñâîéñòâ. Ìåòîäîì ñòåðèëèçàöèè, êîòîðûé îáåñïå÷èò è âûñîêóþ ýôôåêòèâíîñòü óíè÷òîæåíèÿ áîëåçíåòâîðíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ, è ñëàáîå âîçäåéñòâèå íà ñòåðèëèçóåìûé ìàòåðèàë, ìîæåò áûòü îáðàáîòêà ñâåðõêðèòè÷åñêèì ÑÎ2 (ÑÊ-CO2) ïðè òåìïåðàòóðàõ, íå âûçûâàþùèõ èçìåíåíèÿ ñâîéñòâ ñòåðèëèçóåìûõ ìàòåðèàëîâ [1].  äàííîé ðàáîòå áûëî èññëåäîâàíî äåéñòâèå îáðàáîòêè äèîêñèäîì óãëåðîäà íà âûæèâàåìîñòü êëåòîê íåñêîëüêèõ âèäîâ ìèêðîîðãàíèçìîâ-ýêñòðåìîôèëîâ. ÝÊÑÏÅÐÈÌÅÍÒÀËÜÍÀß ×ÀÑÒÜ Äëÿ ñòåðèëèçàöèè áûëè âûáðàíû ñëåäóþùèå ãðàìîòðèöàòåëüíûå áàêòåðèè: E. coli AB1157, D. radiodurance. Áàêòåðèè áûëè âûáðàíû èç-çà ñâîåé ðàñïðîñòðàíåííîñòè, èçó÷åííîñòè èëè íàëè÷èÿ ñâîéñòâ, êîòîðûå ïîçâîëÿþò ñ÷èòàòü èõ ýêñòðåìîôèëàìè. Òàê, D. radiodurance R1 îäèí èç íàèáîëåå ðåçèñòåíòíûõ èç èçâåñòíûõ ê äåéñòâèþ ðàäèàöèè øòàìì áàêòåðèé. Ïðèðîäíûé øòàìì íåñîâåðøåííûõ ãðèáîâ Candida albicans KII-29-2a îáëàäàåò óñòîé÷èâîñòüþ ê ñîëÿì íèêåëÿ, óðàíà «Ñâåðõêðèòè÷åñêèå Ôëþèäû: Òåîðèÿ è Ïðàêòèêà». Òîì 4. ¹ 2. 2009 29 À. Þ. Øàäðèí, À. À. Ìóðçèí, À. Ñ. Äîðìèäîíîâà, À. Â. Ñóñëîâ, È. Í. Ñóñëîâà, Á. Ô. ßðîâîé Ðèñ. 1. Óñòàíîâêà ñòåðèëèçàöèè â ÑÎ2: 1 áàëëîí ñî ñæèæåííûì ÑÎ 2; 2 íàñîñ âûñîêîãî äàâëåíèÿ ñ áëîêîì óïðàâëåíèÿ; 3, 4 âåíòèëè; 5 ÿ÷åéêà; 6 ñáîðíèê ýêñòðàêòà; ÂÎ âîäÿíîå îõëàæäåíèå öèëèíäðà íàñîñà (12 °Ñ); ÒÊ òåðìîñòàòèðóåìûé êîíòóð è öåçèÿ, òðèáóòèëôîñôàòó è òåìïåðàòóðå äî 42 °Ñ. Âî âñåõ ýêñïåðèìåíòàõ èñïîëüçîâàëèñü îáðàçöû ñ êîíöåíòðàöèåé ìèêðîîðãàíèçìîâ íå íèæå 107108 êëåòîê/ìë. Âûðàùèâàíèå áàêòåðèàëüíûõ êóëüòóð ïðîâîäèëè â ñðåäå Ëóðèà (LB-ñðåäà) ñîñòàâà: 0,5 % äðîææåâîãî ýêñòðàêòà + 1,0 % òðèïòîíà + 1,0 % NaCl â âîäå. Áàêòåðèè E. coli AB1157 âûðàùèâàëè â LB-ñðåäå ïðè 37 °Ñ â òå÷åíèå 1820 ÷àñîâ. Áàêòåðèè D. radiodurance R1 âûðàùèâàëè ïðè 37 °C â LB-ñðåäå, ðàçáàâëåííîé â 2 ðàçà. Ïðèðîäíûé øòàìì íåñîâåðøåííûõ ãðèáîâ Candida albicans KII-29-2a íàðàùèâàëè â æèäêîé âîäíîé ñðåäå ñ 1 % äðîææåâûì ýêñòðàêòîì è 2 % ãëþêîçîé. Íàðîùåííûå êóëüòóðû ðàñêàïûâàëè ïî ñòåðèëüíûì ìèêðîïðîáèðêàì ïî 200 ìêë, îñàæäàëè íà öåíòðèôóãå ïðè ñêîðîñòè 10 000 îá/ìèí â òå÷åíèå 5 ìèíóò. Îòáèðàëè íàäîñàäî÷íóþ æèäêîñòü, à ìèêðîïðîáèðêè ñ îñàæäåííûìè êëåòêàìè çàêëàäûâàëè â ñòåðèëüíûå êîíòåéíåðû, êîòîðûå ïîìåùàëè â ÿ÷åéêó âûñîêîãî äàâëåíèÿ ýêñïåðèìåíòàëüíîé óñòàíîâêè. Ñõåìû óñòàíîâêè ñòåðèëèçàöèè â ÑÎ2 è êîíòåéíåðà ñ ìèêðîïðîáèðêàìè ïðåäñòàâëåíû íà ðèñ. 1 è 2. ß÷åéêà áûëà ñäåëàíà èç íåðæàâåþùåé ñòàëè òàêèì îáðàçîì, ÷òîáû ìîæíî áûëî ïðîâîäèòü ïðîäîëæèòåëüíûå öèêëû íàáîðà è ñíèæåíèÿ äàâëåíèÿ è ïðè ýòîì áû íå ïðîèñõîäèëî óíîñà ñðåäû è çàãðÿçíåíèÿ ëèíèé âûñîêîãî äàâëåíèÿ çà ñ÷åò îáðàòíîé äèôôóçèè.  êàæäîì ýêñïåðèìåíòå â êîíòåéíåð ïîìåùàëè 4 ìèêðîïðîáèðêè, ñîäåðæàùèå ñâåæåâûðàùåííûå êëåòêè. Êîíòåéíåð óñòàíàâëèâàëè â ÿ÷åéêó, ïîñëåäíþþ ãåðìåòèçèðîâàëè è òåðìîñòàòèðîâàëè ïðè 34 °C. Ïîñëå ýòîãî ÿ÷åéêó çàïîëíÿëè äèîêñèäîì óãëåðîäà, ïðîïóñêàÿ ÑÎ2 ÷åðåç ïðåäâàðèòåëüíûé íàãðåâàòåëü. Îáðàáîòêó ïðîâîäèëè ïðè äàâëåíèè îò 2 äî 30 ÌÏà â òå÷åíèå 20 90 ìèíóò. Äëÿ òîãî ÷òîáû ñíèçèòü âëèÿíèå òåìïåðàòóðû íà àêòèâíîñòü ìèêðîîðãàíèçìîâ, òàê æå êàê è â ðàáîòå [2], âñå ýêñïåðèìåíòû áûëè âûïîëÐèñ. 2. Êîíòåéíåð äëÿ íåíû ïðè 34 °C ìèíèìàëüíî âîçìîæíîé òåìïåðàñòåðèëèçàöèîííîé ÿ÷åéêè 30 «Ñâåðõêðèòè÷åñêèå Ôëþèäû: Òåîðèÿ è Ïðàêòèêà». Òîì 4. ¹ 2. 2009 Äåéñòâèå ñâåðõêðèòè÷åñêîãî ÑÎ2 íà êëåòêè ìèêðîîðãàíèçìîâ è ýêñòðåìîôèëîâ òóðå äëÿ ÑÊ-ÑÎ2. Âûáðàííîå ìèíèìàëüíîå âðåìÿ îáðàáîòêè, ðàâíîå 20 ìèíóòàì, ñâÿçàíî ñ îñîáåííîñòÿìè êîíñòðóêöèè èñïîëüçóåìîé óñòàíîâêè. Ïîñëå îáðàáîòêè çà 5 7 ìèíóò ñòðàâëèâàëè äàâëåíèå è èçâëåêàëè îáðàçåö èç ÿ÷åéêè. Îáðàáîòàííûå è íåîáðàáîòàííûå (êîíòðîëüíûå) ìèêðîîðãàíèçìû âûðàùèâàëè íà ÷àøêàõ Ïåòðè ñ LB-àãàðîì äëÿ E. coli è D. radiodurance è íà òâåðäîé Ä-ñðåäå (1 % ïåïòîí, 0,5 % äðîææåâîé ýêñòðàêò, 2 % ãëþêîçà è 2 % àãàð) äëÿ Candida albicans. Êîëè÷åñòâî æèâûõ êëåòîê äî è ïîñëå ýêñïåðèìåíòà îïðåäåëÿëè ïîäñ÷åòîì äåëÿùèõñÿ êëåòîê. Ïî ðåçóëüòàòàì òðåõ èçìåðåíèé âûñ÷èòûâàëè ñðåäíåå çíà÷åíèå. Ýôôåêòèâíîñòü ñòåðèëèçàöèè ÑÊ è ãàçîîáðàçíûì ÑÎ2 îöåíèâàëè ïî ëîãàðèôìó îòíîøåíèÿ âûæèâøèõ êëåòîê (N ) ê èñõîäíîìó ÷èñëó êëåòîê (N 0). Îáðàáîòêà êëåòîê ïðîâîäèëàñü â îòñóòñòâèå êàêèõ-ëèáî îðãàíè÷åñêèõ ðàñòâîðèòåëåé, õèìèêàòîâ èëè γ-îáëó÷åíèÿ. ÐÅÇÓËÜÒÀÒÛ È ÎÁÑÓÆÄÅÍÈÅ Íà ðèñ. 3 ïðåäñòàâëåíû çàâèñèìîñòè èíàêòèâàöèè äëÿ âëàæíûõ êëåòîê E. coli è D. radiodurance îò äàâëåíèÿ ïðè îáðàáîòêå â òå÷åíèå 20 ìèíóò. Èíàêòèâàöèþ ñ÷èòàëè ïîëíîé, åñëè îáðàáîòàííàÿ êóëüòóðà íå îáðàçîâûâàëà êëîíîâ êëåòîê ïîñëå 48 ÷àñîâ ðîñòà íà òâåðäîé ïèòàòåëüíîé ñðåäå. Ëåãêî çàìåòèòü, ÷òî çà 20 ìèíóò ïðè òåìïåðàòóðå 34 °Ñ ïîëíàÿ èíàêòèâàöèÿ êëåòîê E. coli AB1157 ïðîèñõîäèëà ïðè äàâëåíèè 8 ÌÏà, à êëåòîê D. radiodurance ïðè äàâëåíèè 6 ÌÏà (ñì. ðèñ. 3). Ïîëó÷åííûå äàííûå ïîçâîëÿþò óòâåðæäàòü, ÷òî ïðè îáðàáîòêå ÑÊ-CO2 ïðè äàâëåíèè áîëüøå 7 ÌÏà êàê âëàæíûõ êëåòîê E. coli, òàê è D. radiodurance âðåìÿ ïîëíîé èõ èíàêòèâàöèè ñîñòàâëÿåò íå áîëåå 20 ìèíóò. Ýòî âðåìÿ ãîðàçäî ìåíüøå, ÷åì ïðè èíàêòèâàöèè ýòèõ áàêòåðèé ýòèëåí-îêñèäîì èëè γ-îáëó÷åíèåì, äëÿ ÷åãî òðåáóåòñÿ îáðàáîòêà â òå÷åíèå îò íåñêîëüêèõ ÷àñîâ äî ñóòîê, èëè ïðè ïàðîâîé àâòîêëàâíîé ñòåðèëèçàöèè, òðåáóþùåé òåìïåðàòóðû 120 °Ñ è âûøå. Îäíàêî ïðè îáðàáîòêå êëåòîê Candida albicans â ÑÊ-ÑÎ2 ïðè äàâëåíèè 8 ÌÏà â òå÷åíèå 20 ìèíóò óäàëîñü äîñòèãíóòü ñíèæåíèÿ êîëè÷åñòâà âûæèâøèõ êëåòîê ëèøü íà òðè ïîðÿäêà. Äëÿ òîãî ÷òîáû óâåëè÷èòü ñòåïåíü èíàêòèâàöèè êëåòîê Candida albicans, äàâëåíèå îáðàáîòêè ïîäíÿëè äî 30 ÌÏà (ðèñ. 4). Ðîñò äàâëåíèÿ îáðàáîòêè ïîëîæè- Ðèñ. 3. Çàâèñèìîñòü èíàêòèâàöèè âëàæíûõ êëåòîê îò äàâëåíèÿ CO2 ïðè òåìïåðàòóðå 34 °C: 1 E. coli AB1157; 2 D. radiodurance R1 Ðèñ. 4. Çàâèñèìîñòü èíàêòèâàöèè êëåòîê Candida albicans KII-29-2a îò âðåìåíè îáðàáîòêè ïðè òåìïåðàòóðå 34 °Ñ è äàâëåíèè ÑÎ2 30 ÌÏà «Ñâåðõêðèòè÷åñêèå Ôëþèäû: Òåîðèÿ è Ïðàêòèêà». Òîì 4. ¹ 2. 2009 31 À. Þ. Øàäðèí, À. À. Ìóðçèí, À. Ñ. Äîðìèäîíîâà, À. Â. Ñóñëîâ, È. Í. Ñóñëîâà, Á. Ô. ßðîâîé òåëüíî ñêàçàëñÿ íà ïîëíîòå ñòåðèëèçàöèè, íî íå ïîçâîëèë äîñòè÷ü â óñëîâèÿõ ýêñïåðèìåíòà ïîëíîé èíàêòèâàöèè êëåòîê Candida albicans. Ýòè êëåòêè îêàçàëèñü ÷ðåçâû÷àéíî óñòîé÷èâûìè ê îáðàáîòêå ÑÊ-ÑÎ 2, è äàæå ïðè óâåëè÷åíèè âðåìåíè îáðàáîòêè ñ 20 äî 90 ìèíóò (ïðè äàâëåíèè 30 ÌÏà) óäàëîñü äîñòè÷ü ëèøü âåëè÷èíû lg (N/N 0) = −6 (ðèñ. 4). Òàêèì îáðàçîì, ìîæíî ïðåäïîëîæèòü, ÷òî ïîòðåáóþòñÿ áîëåå âûñîêèå äàâëåíèÿ è áîëüøàÿ ïðîäîëæèòåëüíîñòü îáðàáîòêè â ÑÊ-ÑÎ2 äëÿ èíàêòèâàöèè ìèêðîîðãàíèçìîâ, óñòîé÷èâûõ ê ðàçëè÷íûì ôèçèêîõèìè÷åñêèì âîçäåéñòâèÿì. Ïî-âèäèìîìó, äëÿ êàæäîãî òèïà ìèêðîîðãàíèçìîâ îïðåäåëåíèå ïàðàìåòðîâ èíàêòèâàöèè (ìèíèìàëüíûå äàâëåíèå, òåìïåðàòóðà è âðåìÿ âûäåðæêè) íóæíî ïðîâîäèòü èíäèâèäóàëüíî. Ýòî ïðåäïîëîæåíèå õîðîøî ñîãëàñóåòñÿ ñ äîìèíèðóþùèì â ëèòåðàòóðå ìíåíèåì, ÷òî èíàêòèâàöèÿ ìèêðîîðãàíèçìîâ ÑÊ-CO2 â ïðèñóòñòâèè ìàëûõ êîëè÷åñòâ âîäû (â îñíîâíîì ýòî âíóòðèêëåòî÷íàÿ âîäà) ïðîèñõîäèò çà ñ÷åò ñïîñîáíîñòè ÑÎ2 ïðîíèêàòü ñêâîçü êëåòî÷íóþ ñòåíêó [3] è âçàèìîäåéñòâîâàòü ñ âíóòðèêëåòî÷íûìè ýëåìåíòàìè èëè ñïîñîáíîñòè ñâåðõêðèòè÷åñêîãî CO2 ðåçêî ïîâûøàòü êèñëîòíîñòü (äî çíà÷åíèé pH = 2,8) ðàâíîâåñíîé âîäíîé ôàçû çà ñ÷åò îáðàçîâàíèÿ óãîëüíîé êèñëîòû [4], êîòîðàÿ è ïðèâîäèò ê èíàêòèâàöèè êëåòêè [58]. Î÷åâèäíî, ÷òî â îáîèõ ñëó÷àÿõ âûæèâàåìîñòü ìèêðîîðãàíèçìîâ, óñòîé÷èâûõ ê õèìè÷åñêîìó âîçäåéñòâèþ, áóäåò âûøå, ÷åì ó äðóãèõ ìèêðîîðãàíèçìîâ. Íàðÿäó ñ ýòèìè ìåõàíèçìàìè èíàêòèâàöèè ìèêðîîðãàíèçìîâ â ñðåäå ñâåðõêðèòè÷åñêîãî ÑÎ2 â ëèòåðàòóðå ðàññìàòðèâàåòñÿ è òðåòèé âîçìîæíûé «âçðûâíîé» ìåõàíèçì. Ïðåäïîëàãàåòñÿ, ÷òî â ýòîì ñëó÷àå ïðîèñõîäÿò íàáóõàíèå è ðàçðûâû êëåòî÷íîé ìåìáðàíû ïîä âîçäåéñòâèåì äèîêñèäà óãëåðîäà âûñîêîãî äàâëåíèÿ è ïðè äåêîìïðåññèè, ïðèâîäÿùèå ê ãèáåëè êëåòîê [9]. ÂÛÂÎÄÛ Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû ïîêàçàëè, ÷òî ïðè îáðàáîòêå â ñðåäå ãàçîîáðàçíîãî è ñâåðõêðèòè÷åñêîãî äèîêñèäà óãëåðîäà êëåòîê áàêòåðèé ðàçëè÷íûõ âèäîâ E. coli è D. radiodurance íåîáõîäèìû ïðàêòè÷åñêè îäèíàêîâûå âðåìåíà, òåìïåðàòóðû è äàâëåíèÿ äëÿ ñíèæåíèÿ âûæèâàåìîñòè íà 6 ïîðÿäêîâ (lg N/N0 = −6) ïðè äàâëåíèè 6 7 ÌÏà, ò. å. íà ãðàíèöå ãàçîâîé è ñâåðõêðèòè÷åñêîé îáëàñòåé, â òî âðåìÿ êàê äëÿ íåñîâåðøåííûõ ãðèáîâ ðîäà Candida ïðè òîé æå òåìïåðàòóðå äëÿ äîñòèæåíèÿ òàêîé æå ñòåïåíè èíàêòèâàöèè íåîáõîäèìî óâåëè÷åíèå äàâëåíèÿ ïî÷òè â 4 ðàçà (äî 30 ÌÏà), ò. å. ïåðåõîä â ñâåðõêðèòè÷åñêóþ îáëàñòü. Ýòîò ôàêò ãîâîðèò î òîì, ÷òî â çàâèñèìîñòè îò ñîñòàâà ìèêðîôëîðû çàãðÿçíåíèÿ äëÿ ñòåðèëèçàöèè ìàòåðèàëîâ íåîáõîäèìî èñïîëüçîâàòü óñëîâèÿ, ïðè êîòîðûõ èíàêòèâèðóþòñÿ íàèáîëåå ðåçèñòåíòíûå ê îáðàáîòêå ÑÊ-CO2 âèäû ìèêðîîðãàíèçìîâ. Òî åñòü øèðîêîå èñïîëüçîâàíèå ñòåðèëèçàöèè â ñðåäå ñâåðõêðèòè÷åñêîãî èëè ãàçîîáðàçíîãî ÑÎ2 çàâèñèò ëèøü îò çíàíèÿ òåõ ïàðàìåòðîâ ïðîöåññà, êîòîðûå ïðèâîäÿò ê ïîëíîé èíàêòèâàöèè âñåé çàãðÿçíÿþùåé ìèêðîôëîðû. Ðàáîòà âûïîëíåíà ïðè ôèíàíñîâîé ïîääåðæêå Ìåæäóíàðîäíîãî íàó÷íî-òåõíîëîãè÷åñêîãî öåíòðà (ïðîåêò ÌÍÒÖ ¹ 3106). ÑÏÈÑÎÊ ËÈÒÅÐÀÒÓÐÛ 1. 32 Perrut M. 10th European Meeting on Supercritical Fluids. Strasbourg/Colmar, 1214 December, 2005. «Ñâåðõêðèòè÷åñêèå Ôëþèäû: Òåîðèÿ è Ïðàêòèêà». Òîì 4. ¹ 2. 2009 Äåéñòâèå ñâåðõêðèòè÷åñêîãî ÑÎ2 íà êëåòêè ìèêðîîðãàíèçìîâ è ýêñòðåìîôèëîâ 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. Debs-Louka E., Louka N., Abraham G., Chabot V., Allaf K. Applied and Environmental Microbiology. 1999. Vol. 65. No. 2. P. 626. Konig C., Ruffieux K., Wintermantel E., Blasser J. J. Biomed. Mater. Res. Appl. Biomat. 1997. Vol. 38. P. 115. Toews K., Shroll R., Wal C., Smart N. Anal. Chem. 1995. Vol. 67. P. 4040. Dillow A.K., Dehghani F., Hrkach J.S., Foster N.R., Langer R. Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1999. Vol. 96. P. 10344. Ballestra J.L. Cuq Lebensmittel-Wissenschaft und Technoogie. 1998. Vol. 31. No. 1. P. 84. Watanabe T., Furukawa S., Kawarai T., Wachi M., Ogihara H., Yamasaki M. Biosci. Biotechnol. Biochem. 2007. Vol. 71. No. 10. P. 2522. Gui F., Wang Z., Wu J., Chen F., Liao X., Hu X. Eur. Food. Res. Technol. 2006. Vol. 222. P. 105. Ñóñëîâ À.Â., Ñóñëîâà È.Í., ßðîâîé Á.Ô., Øàäðèí À.Þ., Ìóðçèí À.À., Ñàïîæíèêîâà Í.Â., Ëóìïîâ À.À., Äîðìèäîíîâà À.Ñ. ÑÊÔ-ÒÏ. 2008. Ò. 3. ¹ 3. Ñ. 3. EFFECT OF SUPERCRITICAL CO2 ON EXTREMOPHILE CELLS 1 A. Yu. Shadrin, 1A. A. Murzin, 1A. S. Dormidonova, 2A. V. Suslov, 2 I. N. Suslova, 2B. F. Yarovoy 1 Khlopin Radium Institute, St. Petersburg, Russia St. Petersburg Institute of Nuclear Physics, Russian Academy of Sciences, Gatchina, Leningrad region, Russia 2 The kinetics of inactivation of E. coli and D. radiodurance bacteria and imperfect fungi Candida albicans was studied in compressed and supercritical carbon dioxide. The possibility of decreasing concentration of the survived cells by 57 orders of magnitude was demonstrated. K e y w o r d s: inactivation, microorganisms, Escherichia coli, Deinococcus radiodurance, Candida albicans, supercritical CO2. «Ñâåðõêðèòè÷åñêèå Ôëþèäû: Òåîðèÿ è Ïðàêòèêà». Òîì 4. ¹ 2. 2009